检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2009年第8期29卷 955-958,972页

作者：洪伟彬姜平王先炜李玉峰唐波王兴龙南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

用D-氨基葡萄糖处理PK-15细胞,将PCV2-SH分离株增殖传代至第50代,测定病毒滴度TCID50均为10-6.25/mL。将第20代和第50代病毒液分别灭活乳化制成灭活疫苗,进行猪体免疫保护试验。结果显示,这2个不同代次的病毒制成的疫苗都能刺激机体产... 详细信息

用D-氨基葡萄糖处理PK-15细胞,将PCV2-SH分离株增殖传代至第50代,测定病毒滴度TCID50均为10-6.25/mL。将第20代和第50代病毒液分别灭活乳化制成灭活疫苗,进行猪体免疫保护试验。结果显示,这2个不同代次的病毒制成的疫苗都能刺激机体产生较高水平的ELISA抗体,攻毒后2个免疫组的猪均没有明显的临床症状,相对日增重相似,同时病理变化和病毒血症程度明显减轻。结果表明,PCV2-SH株具有稳定的免疫原性,并可以提供有效的免疫保护作用。

关键词：猪圆环病毒2型SH-株免疫原性稳定性

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米非司酮的抗伪狂犬病毒作用及其与氢醌的协同效应

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南京农业大学学报 2023年第2期46卷 316-323页

作者：李紫彤赵晨遥朱慧欣蓝培如王先炜南京农业大学动物医学院/农业农村部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

[目的]本试验探究药物米非司酮的抗伪狂犬病毒(PRV)作用及其与另一种抗伪狂犬病毒药物氢醌的协同作用,为抗PRV药物的研究和临床应用奠定基础。[方法]用Western blot和qPCR等方法检测米非司酮及其与氢醌联用在体外对伪狂犬病毒复制的影... 详细信息

[目的]本试验探究药物米非司酮的抗伪狂犬病毒(PRV)作用及其与另一种抗伪狂犬病毒药物氢醌的协同作用,为抗PRV药物的研究和临床应用奠定基础。[方法]用Western blot和qPCR等方法检测米非司酮及其与氢醌联用在体外对伪狂犬病毒复制的影响及其影响的作用阶段,再通过小鼠攻毒保护试验进一步确认其抗病毒作用及与氢醌联用的协同作用。[结果]15μmol·L^(-1)米非司酮具有抗病毒作用,且随着浓度升高而增强,此作用发生于伪狂犬病毒复制早期。体内、体外试验结果表明,米非司酮(体内5μmol·L^(-1)、体外40 mg·kg^(-1))单独或与氢醌(体内5μmol·L^(-1)、体外50 mg·kg^(-1))联用均具有抗病毒作用,与氢醌具有协同抗病毒作用,同时能减轻单独用药对肝脏的损伤。[结论]米非司酮在病毒复制早期发挥抗病毒作用,与氢醌的联用具有更好的抗病毒效果,既减轻氢醌对肝脏的损伤,又弥补米非司酮药效上的不足。

关键词：猪伪狂犬病毒米非司酮抗病毒氢醌协同效应

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用绿色荧光蛋白标记的细菌研究鱼体吸收颗粒抗原的部位

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水产学报 2000年第5期24卷 472-475页

作者：陈营陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室!江苏南京210095

用绿色荧光蛋白标记的嗜水气单胞菌 4332株 (Ah4332 GFP)菌液高渗浸泡和直接浸泡异育银鲫 ,研究鱼体对颗粒抗原的吸收。经两种方法处理的鱼 ,在整个实验过程中显示 ,鱼鳃的标记菌检出量均高于皮肤和肠道中的标记菌 ,证实鳃是抗原吸收的... 详细信息

用绿色荧光蛋白标记的嗜水气单胞菌 4332株 (Ah4332 GFP)菌液高渗浸泡和直接浸泡异育银鲫 ,研究鱼体对颗粒抗原的吸收。经两种方法处理的鱼 ,在整个实验过程中显示 ,鱼鳃的标记菌检出量均高于皮肤和肠道中的标记菌 ,证实鳃是抗原吸收的主要部位。另外 ,鱼体经高渗处理 ,鳃和皮肤可检出的标记菌明显增加。在肠道中 ,除浸泡 6 0min外 ,浸泡 10min、30min及 12 0min的细菌检出量也明显增加。显示高渗可促进抗原的吸收

关键词：抗原吸收绿色荧光蛋白嗜水气单胞菌异育银鲫

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犬瘟热病毒南京分离株的生物学特性鉴定

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中国兽医学报 2000年第3期20卷 231-234页

作者：陈培富郭爱珍陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

从南京地区临床诊断疑似为犬瘟热的病犬脑组织分离到 1株病毒 ,经鉴定为犬瘟热病毒 ( CDV) ,命名为 CDV-NJ1 5,对其培养特性、细胞毒力、血凝活性、抗原性、结构多肽和对犬的致病性进行了研究。结果表明 ,除 Vero外 ,CDV-NJ1 5还能在 M... 详细信息

从南京地区临床诊断疑似为犬瘟热的病犬脑组织分离到 1株病毒 ,经鉴定为犬瘟热病毒 ( CDV) ,命名为 CDV-NJ1 5,对其培养特性、细胞毒力、血凝活性、抗原性、结构多肽和对犬的致病性进行了研究。结果表明 ,除 Vero外 ,CDV-NJ1 5还能在 MDCK、BHK-2 1、FE、DJRK、HEp-2等细胞系有限增殖 ,产生的 CPE特征与 Vero细胞类似 ,但不能在 PK1 5细胞系增殖。在 Vero细胞的 TCID5 0 和空斑形成单位分别为 1 0 - 5 .0 /m L和2 .4× 1 0 5 PFU/m L。参考株 CDV-Onderspoort的培养特性和细胞毒力基本与之相似 ;交叉中和试验表明 ,二者之间具有交叉反应和相同的抗原性 ;二者的结构多肽 NP蛋白和 F蛋白用特异性单克隆抗体免疫转印技术分析 ,未显示差异。动物回归试验表明 ,CDV-NJ1 5对犬表现出弱致病力。以上结果提示 ,该分离株是一持续性感染的弱毒株。

关键词：犬瘟热病毒分离株生物学特性致病力

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对虾白斑综合征病毒在螯虾动物模型的感染特性

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水产学报 2001年第1期25卷 47-51页

作者：朱建中陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室!江苏南京210095

应用克氏原螯虾作为动物模型研究对虾白斑综合征病毒 (WSSV)的感染增殖特性 ,涉及感染温度、感染途径、继发感染、半数致死量 (LD50 )、免疫保护及保存期等。结果显示 ,2 2～ 2 5℃时 ,接种WSSV的螯虾一般于 2～7d内死亡 ,温度升高对病... 详细信息

应用克氏原螯虾作为动物模型研究对虾白斑综合征病毒 (WSSV)的感染增殖特性 ,涉及感染温度、感染途径、继发感染、半数致死量 (LD50 )、免疫保护及保存期等。结果显示 ,2 2～ 2 5℃时 ,接种WSSV的螯虾一般于 2～7d内死亡 ,温度升高对病毒增殖影响不显著 ,30～ 32℃时 ,平均死亡时间 2～ 6d ,温度降低对病毒增殖影响较显著 ,15～ 19℃时 ,接种螯虾平均 2～ 10d内死亡 ,8～ 10℃时 ,平均死亡时间 3～ 13d。感染途径分别用腹节肌肉、腹节皮下注射及口服 ,均能使螯虾感染发病 ,而浸泡方式不能使螯虾发病。细菌分离和细菌定量结果表明 ,寄生于螯虾心脏、肝胰腺内的阴沟肠杆菌在感染后期大量增殖 ,菌量分别是正常螯虾的 2 5和 30倍 ,形成继发感染。用螯虾测定WSSV的LD50 为 10 -6.5·mL-1种毒液。将病毒 5 6℃ ,30min灭活后免疫螯虾 ,不能使螯虾形成免疫保护。WSSV匀浆液 - 30℃冻存 1年后失活 ,而 - 30℃冻存于螯虾体内WSSV保存 1年后仍有活力

关键词：克氏原螯虾白斑综合征病毒感染温度感染途径

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猪Toll样受体3、7和8基因的克隆与序列分析

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中国预防兽医学报 2010年第9期32卷 727-730页

作者：张莉莉白娟王先炜李玉峰王兴龙姜平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

为了对猪Toll样受体(TLR)3、7和8基因进行克隆与序列分析,本实验从猪肺泡巨噬细胞(PAM)中,利用RT-PCR方法分片段扩增猪TLR3、7、8基因,并克隆于pMD18-T载体中。根据测序结果分析,猪TLR3、7和8基因的ORF分别为2718bp、3153bp和3087bp,并... 详细信息

为了对猪Toll样受体(TLR)3、7和8基因进行克隆与序列分析,本实验从猪肺泡巨噬细胞(PAM)中,利用RT-PCR方法分片段扩增猪TLR3、7、8基因,并克隆于pMD18-T载体中。根据测序结果分析,猪TLR3、7和8基因的ORF分别为2718bp、3153bp和3087bp,并分别编码906、1051和1029个氨基酸。同源性分析结果显示,它们与GenBank中登录的猪TLR的相应序列同源性达99%以上;与牛、马、羊和人的同源性较高,与鼠的同源性次之,与鸡的同源性最低,其蛋白分子结构预测表明猪TLR3、7、8均为跨膜蛋白。

关键词：猪 TLR 克隆序列分析

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猪链球菌9型国内分离株毒力基因的检测及小鼠免疫试验

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中国兽医科学 2008年第2期38卷 97-100页

作者：修福晓陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

通过检测7株猪链球菌9型(SS9)国内分离株的毒力基因,比对7株SS9荚膜合成基因cps9j的300 bp碱基序列,以及进行7株SS9对小鼠的毒力试验和免疫保护试验,初步探讨了国内SS9的毒力特性。结果显示,7株SS9均缺失胞外因子(epf)和溶血素(sly)基因... 详细信息

通过检测7株猪链球菌9型(SS9)国内分离株的毒力基因,比对7株SS9荚膜合成基因cps9j的300 bp碱基序列,以及进行7株SS9对小鼠的毒力试验和免疫保护试验,初步探讨了国内SS9的毒力特性。结果显示,7株SS9均缺失胞外因子(epf)和溶血素(sly)基因,溶菌酶释放蛋白基因(mrp)存在于GZ0665和GD0606株,orf2仅存于GZ0665株;病猪脑脊液分离株GZ0665与从健康猪扁桃体分离的6株SS9的cps9j同源性低;在7株SS9分离株和SS2分离株HA9801中,只有GZ0665和GD0606株能致死小鼠;用灭活的GZ0665菌株免疫的小鼠对同源菌株GZ0665及GD0606株攻击的保护率均为100%(10/10),用灭活的GD0606和未灭活的GD0627菌株免疫的小鼠对GD0606株攻击的保护率分别为80%(8/10)和50%(5/10),而对GZ0665株攻击的保护率分别为60%(6/10)和30%(3/10)。证实,SS9病猪脑脊液分离株的毒力基因有别于SS9健康猪扁桃体分离株和SS2。表明,小鼠可以用来区分SS9病猪脑脊液分离株与健康猪扁桃体分离株的致病力。

关键词：猪链球菌9型毒力基因 cps9j基因小鼠

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细菌CpG-DNA对犬免疫增强效果的研究

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中国兽医科技 2001年第12期31卷 6-8页

作者：郭爱珍唐泰山陆承平南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

以犬瘟热病毒为模式病毒 ,将CpG DNA与铝胶、蜂胶 2种对照佐剂分别与犬瘟热病毒灭活疫苗配合 ,给犬接种疫苗前后用微量中和试验抽查血清中和抗体效价 ,根据抗体效价高低判断佐剂的免疫增强效果。结果表明 ,3种佐剂疫苗均能诱导产生特异... 详细信息

以犬瘟热病毒为模式病毒 ,将CpG DNA与铝胶、蜂胶 2种对照佐剂分别与犬瘟热病毒灭活疫苗配合 ,给犬接种疫苗前后用微量中和试验抽查血清中和抗体效价 ,根据抗体效价高低判断佐剂的免疫增强效果。结果表明 ,3种佐剂疫苗均能诱导产生特异性抗体 ,但组间抗体效价有显著差异 (P <0 .0 1 ) ,CpG DNA的免疫增强作用明显高于其它 2种佐剂 ,CpG DNA所诱导的抗体效价较蜂胶佐剂高 5倍 ,较铝胶佐剂高 7倍。

关键词： CpG-DNA 免疫增强剂犬瘟热病毒免疫增强效果

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实时荧光定量PCR检测猪源Mx1方法的建立及应用

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南京农业大学学报 2013年第1期36卷 92-96页

作者：张小敏周斌何丹妮庞然赵津陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

根据GenBank中的猪源抗病毒蛋白Mx1基因(poMx1)序列设计1对特异性引物,从Mx1基因全长片段中扩增和克隆了特异性的115 bp核苷酸片段。测序鉴定正确后将重组质粒进行定量并10倍倍比稀释作为扩增模板,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法... 详细信息

根据GenBank中的猪源抗病毒蛋白Mx1基因(poMx1)序列设计1对特异性引物,从Mx1基因全长片段中扩增和克隆了特异性的115 bp核苷酸片段。测序鉴定正确后将重组质粒进行定量并10倍倍比稀释作为扩增模板,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法,建立Mx1的标准曲线及回归方程。结果显示:该标准曲线的回归方程为Y=-2.986 3 lg X+38.239 3(R2=0.998 5),灵敏度为1×102μL-1;应用该方法对猪瘟兔化弱毒苗接种猪肾细胞(PK-15)后产生的poMx1 mRNA进行定量分析,发现病毒感染细胞4 h后,poMx1的表达量最高(P<0.01),然后随着时间的增加而缓慢减少。结论:建立的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法可以检测poMx1 mRNA的表达水平。

关键词：猪源Mx1 实时荧光定量PCR 标准曲线

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新城疫病毒F_(48)E_9株病毒F基因表达盒的火鸡疱疹病毒转移质粒载体构建

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中国兽医科技 2001年第8期31卷 5-8页

作者：张雪莲魏荣陈溥言南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

将新城疫病毒 (NDV)F4 8E9株融合蛋白 (F)基因 170 0bp克隆到真核表达载体 pcDNA3 中 ,构建成表达F基因的载体 pc3F。然后将包含F基因及其上游的细胞巨化病毒启动子和增强子的 3 80 0bpDNA片段再克隆入包含火鸡疱疹病毒 (HVT)非必须片... 详细信息

将新城疫病毒 (NDV)F4 8E9株融合蛋白 (F)基因 170 0bp克隆到真核表达载体 pcDNA3 中 ,构建成表达F基因的载体 pc3F。然后将包含F基因及其上游的细胞巨化病毒启动子和增强子的 3 80 0bpDNA片段再克隆入包含火鸡疱疹病毒 (HVT)非必须片段载体 pTK2 B中 ,构建成功含有F基因表达盒的HVT转移质粒载体 pTK3 F。经限制性内切酶酶切分析 ,F基因表达盒的插入方向与pTK2 B中TK基因转录方向一致。

关键词：新城疫病毒 F基因基因表达盒火鸡疱疹病毒转移质粒载体

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