检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2010年第8期37卷 1194-1199页

作者：赵方圆范宁杰陈一楠李顺鹏黄星南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从牛羊粪堆肥中筛选出一株纤维素降解菌Aspergillus ***1,主要研究了液体发酵培养基中碳源、氮源、培养温度、起始pH、通气量以及接种菌龄对菌株YN1的羧甲基纤维素酶活(CMC酶活)及滤纸酶活的影响。研究结果表明,在优化条件下,该菌的CMC... 详细信息

从牛羊粪堆肥中筛选出一株纤维素降解菌Aspergillus ***1,主要研究了液体发酵培养基中碳源、氮源、培养温度、起始pH、通气量以及接种菌龄对菌株YN1的羧甲基纤维素酶活(CMC酶活)及滤纸酶活的影响。研究结果表明,在优化条件下,该菌的CMC酶活、滤纸酶活在培养第3天分别达到0.53U/mL和0.15U/mL。在酶学特性研究中,菌株YN1的CMC酶的最适反应温度为70°C,最适反应pH4.0(酶促反应为30min)。用不同温度处理1h或不同pH处理2h,YN1的CMC酶在30°C?50°C或pH3.0?4.0之间仍可保持80%以上的酶活性,对热及酸表现出较高的稳定性。

关键词： Aspergillus sp. 纤维素酶活发酵条件优化酶学特性

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沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶在大肠杆菌中的表达、纯化及其生化鉴定

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南京农业大学学报 2010年第4期33卷 81-86页

作者：齐立辉郑新艳冉婷婷徐朗莱王伟武南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

为深入了解沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶的生化特性及功能,将该酶基因克隆到表达载体中,转入大肠杆菌中诱导表达,表达产物经monomeric avidin-Sepharose亲和层析分离纯化,获得了纯的沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶。结果表明:纯化后的草酰乙酸脱羧酶... 详细信息

为深入了解沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶的生化特性及功能,将该酶基因克隆到表达载体中,转入大肠杆菌中诱导表达,表达产物经monomeric avidin-Sepharose亲和层析分离纯化,获得了纯的沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶。结果表明:纯化后的草酰乙酸脱羧酶经SDS-PAGE检测,呈现3条蛋白谱带,相对分子质量分别为65×103、46×103、8.8×103左右;该酶不耐高温,50℃温浴1h后活力几乎完全丧失;其最适pH为6.0左右;1mmol·L-1Zn2+、0.5mmol·L-1草酸和20mmol·L-1丙酮酸几乎完全抑制该酶的活力,10～20mmol·L-1NaCl对该酶有明显激活作用,但200～500mmol·L-1的NaCl对该酶却有明显抑制作用。

关键词：草酰乙酸脱羧酶 Na+泵酶纯化生化特性

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纤维素高效降解菌YN1的筛选及其降解特性

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微生物学通报 2010年第4期37卷 496-502页

作者：赵方圆范宁杰朱建春李顺鹏黄星南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

为了获得降解天然纤维素的微生物菌株,并用于农田秸秆腐熟及竹林地稻壳促腐。从牛羊粪堆肥中筛选出一株纤维素降解菌YN1,对其进行了形态和系统发育分析;测定了YN1的液、固体发酵酶活;进行了YN1对纤维素的失重测定;对YN1在纤维素表面上... 详细信息

为了获得降解天然纤维素的微生物菌株,并用于农田秸秆腐熟及竹林地稻壳促腐。从牛羊粪堆肥中筛选出一株纤维素降解菌YN1,对其进行了形态和系统发育分析;测定了YN1的液、固体发酵酶活;进行了YN1对纤维素的失重测定;对YN1在纤维素表面上的定殖及其对纤维素的降解进行了电镜观察。经菌株形态分析和ITS基因序列分析,将YN1鉴定为曲霉(Aspergillussp.);在YN1菌株的液体发酵培养第3天,内切酶、外切酶、β-糖苷酶和总纤维素酶活性都达到最大值,分别为95.7、14.6、20.5和26.6U/mL,固体发酵培养第5d各酶活均达到峰值,依次为1192.2、100.6、136.9和210.7U/g;在失重测定中,YN1在7d内可降解41.87%的秸秆,31.59%的稻壳;在扫描电镜下可明显观察到YN1对滤纸、秸秆和稻壳的降解。YN1可有效降解天然纤维素,对农田秸秆腐熟及竹林地稻壳促腐具有较好的应用前景。

关键词：纤维素降解菌 Aspergillus sp. YN1 纤维素酶活

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变形菌视紫红质十年的回顾与展望

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生物物理学报 2010年第11期26卷 1036-1046页

作者：王宁兰艳黎王伟武南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

变形菌视紫红质(proteorhodopsin,PR)是一类吸光色素膜蛋白,它是由7个跨膜ɑ-螺旋(A～G)组成的视蛋白(opsins)与色素视黄醛(retinal)通过共价键结合而形成。PR广泛存在于海洋和淡水水域的微生物中,是一种质子泵型的视紫红质,可在光的驱... 详细信息

变形菌视紫红质(proteorhodopsin,PR)是一类吸光色素膜蛋白,它是由7个跨膜ɑ-螺旋(A～G)组成的视蛋白(opsins)与色素视黄醛(retinal)通过共价键结合而形成。PR广泛存在于海洋和淡水水域的微生物中,是一种质子泵型的视紫红质,可在光的驱动下将质子从细胞质泵到胞质间隙,从而在细胞内外产生质子梯度,形成的化学势能被用于合成ATP、物质的跨膜运输以及驱动鞭毛运动等方面。据估算含PR的细菌在海洋水域中约占总细菌的13%,而每个含PR的细胞中的PR分子数约为2.5×104个。对PR功能的研究表明PR具有增强其宿主菌抵抗外界不良环境的能力;而对于PR三维结构的研究对PR的作用机理及其功能的研究将有更进一步的推动作用。

关键词：变形菌视紫红质质子泵光循环生理功能

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不同生态区土壤溶磷微生物的分布特征及影响因子

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生态与农村环境学报 2010年第5期26卷 448-453页

作者：易艳梅黄为一长沙环境保护职业技术学院湖南长沙410004 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

研究了盐渍区、重金属污染区和磷矿区土壤中溶磷微生物的数量、组成及与部分土壤化学因子的关系。结果表明,溶磷微生物在不同生态区土壤中的分布各不相同,磷矿区土壤中溶磷微生物数量和种群丰度普遍高于重金属污染区和盐渍区,但优势种... 详细信息

研究了盐渍区、重金属污染区和磷矿区土壤中溶磷微生物的数量、组成及与部分土壤化学因子的关系。结果表明,溶磷微生物在不同生态区土壤中的分布各不相同,磷矿区土壤中溶磷微生物数量和种群丰度普遍高于重金属污染区和盐渍区,但优势种属间数量差异不明显。重金属污染土壤中溶磷细菌比例较高,但种群单一,主要以巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)为优势种,重金属污染区溶磷细菌比例与土壤重金属综合污染指数呈显著正相关(P<0.01),溶磷细菌丰度与有机质含量呈显著正相关(P<0.05)。盐渍土中溶磷细菌比例小,优势种群为巨大芽孢杆菌、假单胞杆菌属(Pseudomonassp.)和黄单胞杆菌属(Flavobacteriumsp.),其数量和种群丰度分别与有机质和有效磷含量呈显著相关关系(P<0.05)。

关键词：溶磷微生物土壤生态类型分布盐渍区重金属污染区磷矿区

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高温碱性果胶酶产生菌的筛选及部分酶学特性研究

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食品工业科技 2010年第10期31卷 235-238页

作者：刘连成陆正清江苏食品职业技术学院生物工程系江苏淮安223003 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从高温堆肥中分离到一株高产碱性果胶酶的菌株DG-3,经形态、生理生化及16SrDNA序列分析将其鉴定为Bacillus licheniformis DG-3,对DG-3菌株所产碱性果胶酶的初步研究表明,该酶适宜温度范围60～70℃,适宜pH为9.8～10.5。温度稳定性实验表... 详细信息

从高温堆肥中分离到一株高产碱性果胶酶的菌株DG-3,经形态、生理生化及16SrDNA序列分析将其鉴定为Bacillus licheniformis DG-3,对DG-3菌株所产碱性果胶酶的初步研究表明,该酶适宜温度范围60～70℃,适宜pH为9.8～10.5。温度稳定性实验表明,碱性果胶酶具有较高的耐热性;6mmol/L的Ca2+对碱性果胶酶具有显著的激活作用。在最适作用条件下,发酵液中碱性果胶酶的酶活达42U/mL,在国内尚未见报道。

关键词： Bacillus licheniformis DG-3 碱性果胶酶酶学性质

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杏鲍菇栽培工厂的空气洁净度评估及微生物群落变化规律调查

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食用菌学报 2010年第4期17卷 34-39页

作者：林娓娓吴晓金郭倩赵明文王瑞娟周峰南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传育种重点实验室上海201106

通过尘埃粒子计数器测定杏鲍菇工厂不同净化区域中不同粒径的尘埃粒子数量,并根据洁净度等级国际标准和国家标准分析空气洁净度级别;采用平皿沉降法测定空气中微生物数量。统计2009年工厂生产期3~9月,所有栽培种从接种至搔菌阶段的污染... 详细信息

通过尘埃粒子计数器测定杏鲍菇工厂不同净化区域中不同粒径的尘埃粒子数量,并根据洁净度等级国际标准和国家标准分析空气洁净度级别;采用平皿沉降法测定空气中微生物数量。统计2009年工厂生产期3~9月,所有栽培种从接种至搔菌阶段的污染瓶数按接种月份统计,并与该统计月份的微生物数量比较。结果表明,杏鲍菇工厂栽培区各净化区域在检测期间空气洁净度均较高,尘埃粒子数量、霉菌数量均与高度、温度呈正相关;细菌数量、霉菌数量与尘埃粒子数呈显著正相关。高温季节,霉菌、细菌数量增加,此时生产污染率也达最高值,故认为生产污染率与微生物群落变化相关,高温时,需加大降温、除尘、消毒等措施的力度,方可降低微生物数量,减少污染率,该厂污染率在8‰以下,其洁净度可作为生产参考值。

关键词：净化区域尘埃粒子霉菌细菌微生物

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转基因香石竹中F3’5’H基因的克隆、表达和免疫学鉴定

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植物生理学通讯 2010年第2期46卷 108-112页

作者：白蓝贾军伟孙建萍李鹏赵明文潘爱虎上海市农业科学院生物技术研究所上海市农业遗传育种重点实验室农业部转基因植物环境安全监督检验测试中心(上海)上海201106 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在研究转基因香石竹品系月之霓裳(Moonshade)、月之伊人(Moonlite)中外源基因F3’5’H的表达中,本文克隆了F3’5’H全长基因1.5kb,构建获得工程菌株Escherichia coli BL21(DE3)(+F3'5'H)。SDS-PAGE分析的结果显示,该菌株高效表... 详细信息

在研究转基因香石竹品系月之霓裳(Moonshade)、月之伊人(Moonlite)中外源基因F3’5’H的表达中,本文克隆了F3’5’H全长基因1.5kb,构建获得工程菌株Escherichia coli BL21(DE3)(+F3'5'H)。SDS-PAGE分析的结果显示,该菌株高效表达出F3’5’H重组蛋白,约占菌体总蛋白的30%。用经纯化的F3’5’H重组蛋白作为抗原,制备F3’5’H重组蛋白的抗血清,经ELISA免疫学分析表明,该抗血清的效价为1:25600。Western blot结果表明F3’5’H重组蛋白具有良好的IgG结合活性,且抗血清与转基因香石竹品系月之霓裳和月之伊人中的外源基因F3’5’H所表达的蛋白发生明显的抗原抗体反应。这样,月之霓裳和月之伊人用于评价转基因香石竹品系的环境安全性在我国也得到了验证。

关键词：转基因香石竹 F3’5’H 原核表达免疫学鉴定

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基于宏基因组学的转基因棉田土壤微生物功能多样性分析

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安徽农业科学 2010年第36期38卷 20559-20561,20599页

作者：马世宏高国庆刘标崔中利曹慧南京野生植物综合利用研究院江苏南京210042 南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 环境保护部南京环境科学研究所江苏南京210042

[目的]研究转基因棉田土壤微生物的功能多样性。[方法]采用直接法提取转基因棉根际土壤微生物总DNA,用限制性内切酶BamHI进行部分酶切,回收2.0～4.0 kb大小的片段插入到pUC19/BamHI脱磷载体上,转化到DH5α高效感受态细胞,构建宏基因组... 详细信息

[目的]研究转基因棉田土壤微生物的功能多样性。[方法]采用直接法提取转基因棉根际土壤微生物总DNA,用限制性内切酶BamHI进行部分酶切,回收2.0～4.0 kb大小的片段插入到pUC19/BamHI脱磷载体上,转化到DH5α高效感受态细胞,构建宏基因组文库。随机挑取10个克隆序列测序,并通过NCBI预测可能存在的开放式阅读框和进行序列比对分析。[结果]该文库的外源插入片段平均长度为2.4 kb,90%以上克隆都含有插入片段,10个序列中存在着多种功能的开放式阅读框,包括一些水解酶、脱氢酶、脂解酶、修饰酶、抗生素及与电子传递链相关的酶类。[结论]该研究可为研究转基因棉大面积野外种植以后的生态安全性提供参考。

关键词：转基因棉宏基因组文库未培养微生物

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假黄单胞菌菌株XY3降解甲基对硫磷特性的研究

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江苏农业科学 2010年第4期38卷 375-378页

作者：冯昭中梁波张隽孙珊陆鹏李顺鹏张云飞朱建春许育新南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 浙江省农业科学院环境资源与土壤肥料研究所浙江杭州310021

从某农药厂污水处理池的活性污泥中分离到1株能以甲基对硫磷(1605)为唯一碳源生长的细菌XY3。经生理生化试验和16S rRNA同源性分析,将该菌株鉴定为假黄单胞菌(Pseudoxanthom onas sp.)。XY3在12 h时对100 mg/L甲基对硫磷的降解率为99%。... 详细信息

从某农药厂污水处理池的活性污泥中分离到1株能以甲基对硫磷(1605)为唯一碳源生长的细菌XY3。经生理生化试验和16S rRNA同源性分析,将该菌株鉴定为假黄单胞菌(Pseudoxanthom onas sp.)。XY3在12 h时对100 mg/L甲基对硫磷的降解率为99%。XY3降解甲基对硫磷的最适pH值为7.0,最适温度为30℃,降解速率与初始接种量呈正相关,降解能力随通气量的减少而递减。XY3对其他一些有机磷农药如辛硫磷、倍硫磷、杀螟硫磷、三唑磷、毒死蜱等也有较好的降解能力。

关键词：甲基对硫磷对硝基苯酚生物降解假黄单胞菌降解条件

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