检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学通报 2004年第2期31卷 138-143页

作者：傅国平崔中利吴旭平徐玮李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

有机磷毒剂在农业生产和战争中的应用广泛 ,其生物解毒受到理论和应用研究方面的重视。有机磷水解酶在有机磷毒剂的生物降解中具有重要的作用 ,目前在有机磷水解酶的蛋白质晶体结构、酶促反应机制等方面的研究取得了较大的进展。文中对... 详细信息

有机磷毒剂在农业生产和战争中的应用广泛 ,其生物解毒受到理论和应用研究方面的重视。有机磷水解酶在有机磷毒剂的生物降解中具有重要的作用 ,目前在有机磷水解酶的蛋白质晶体结构、酶促反应机制等方面的研究取得了较大的进展。文中对有机磷水解酶在酶学、高级结构、催化机制、定向进化及其应用等方面的研究进行了综述。

关键词：有机磷毒剂有机磷水解酶高级结构催化机制定向进化

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阿特拉津降解菌BTAH1的分离与鉴定

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中国环境科学 2004年第6期24卷 738-742页

作者：胡江代先祝李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从除草剂污染的土壤中,驯化分离得到1株能够以阿特拉津为唯一碳源氮源生长的革兰氏阳性细菌BTAH1,该菌株能够在126h内完全降解1000mg/L的阿特拉津.通过生理生化鉴定,结合16S rDNA聚类分析,将该菌株鉴定为微小杆菌属(Exiguobacterium sp... 详细信息

从除草剂污染的土壤中,驯化分离得到1株能够以阿特拉津为唯一碳源氮源生长的革兰氏阳性细菌BTAH1,该菌株能够在126h内完全降解1000mg/L的阿特拉津.通过生理生化鉴定,结合16S rDNA聚类分析,将该菌株鉴定为微小杆菌属(Exiguobacterium sp.).外加碳源不会促进该菌株对阿特拉津的降解,该菌株的最适降解温度为25～30℃,最适降解pH值在7～9之间.该菌株具有2个大质粒,pBTAH11和pBTAH12,大小分别为20kb和100kb,基因定位发现有2个参与阿特拉津降解的基因位于其中一个较小的质粒(pBTAH11)上.

关键词：阿特拉津生物降解微小杆菌属降解基因定位

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甲基对硫磷水解酶的重组表达及其纯化和性质研究

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微生物学报 2004年第3期44卷 356-360页

作者：傅国平崔中利徐玮吴旭平李顺鹏南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

用PCR方法获得甲基对硫磷水解酶编码基因 ,构建了重组表达质粒pET2 9a_mpd ,将其转化至EscherichiacoliBL2 1 (DE3)中 ,经IPTG诱导表达 ,得到C 末端含有 6个寡聚组氨酸的甲基对硫磷水解酶 ,用Ni NTA亲和层析纯化得到具有活性的甲基对硫... 详细信息

用PCR方法获得甲基对硫磷水解酶编码基因 ,构建了重组表达质粒pET2 9a_mpd ,将其转化至EscherichiacoliBL2 1 (DE3)中 ,经IPTG诱导表达 ,得到C 末端含有 6个寡聚组氨酸的甲基对硫磷水解酶 ,用Ni NTA亲和层析纯化得到具有活性的甲基对硫磷水解酶。测定了环境因素对酶活性的影响及酶动力学参数。甲基对硫磷水解酶水解甲基对硫磷时 ,最适pH8 6～ 8 8,最佳反应温度 1 5℃ ;Mn2 + 、Zn2 + 、Cu2 + 可使酶活性增加 1 5 %～ 2 0 % ,Ca2 + 、Mg2 + 微弱地促进酶的作用 ,Ni2 + 对酶活性几乎无影响 ;1mmol LEDTA·Na2 + 几乎不影响酶的活性 ,而 1 0mmol LEDTA·Na2 + 对甲基对硫磷水解酶有较强的抑制作用。甲基对硫磷水解酶水解乙基对硫磷时 ,最适pH8 6。 2 5℃时 ,该酶对甲基对硫磷的米氏常数Km 为 (6 8 6± 5 1 ) μmol L ,kcat为 (4 5± 6 )S- 1 ;对乙基对硫磷的米氏常数Km 为 (5 9 5± 6 0 )μmol L ,kcat为 (8± 1 )S- 1 。kcat Km

关键词：甲基对硫磷水解酶基因表达 Ni-NTA亲和层析酶活性

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农药污染土壤的微生物修复研究进展

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土壤 2004年第6期36卷 577-583页

作者：李顺鹏蒋建东南京农业大学农业部农业环微生物工程重点开放实验室南京210095

本文介绍了土壤中农药污染的现状与危害,总结了土壤农药污染的微生物修复的历史背景、研究现状,重点介绍了降解农药的微生物与农药污染土壤微生物修复的研究进展,并总结了国内外微生物修复的产业化现状,对土壤农药污染微生物修复进行了... 详细信息

本文介绍了土壤中农药污染的现状与危害,总结了土壤农药污染的微生物修复的历史背景、研究现状,重点介绍了降解农药的微生物与农药污染土壤微生物修复的研究进展,并总结了国内外微生物修复的产业化现状,对土壤农药污染微生物修复进行了预测和展望,指出了需要进一步研究的领域。

关键词：微生物修复农药污染土壤研究进展

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一株耐盐苯酚降解酵母菌的分离及降解特性研究

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土壤学报 2004年第5期41卷 756-760页

作者：顾立锋何健张瑞福李顺鹏南京农业大学农业部环境微生物重点开放实验室南京210095

从化工厂污泥中分离到一株酵母菌 ,初步鉴定为德氏酵母属 (Debaryomycessp ) ,命名为Gb。该菌株可以在 0～ 2 0 %Na2 SO4环境中生长 ,并能以苯酚为唯一碳源和能源。其苯酚降解最适浓度为 1 0 0 0mgL-1 ,最适Na2 SO4浓度为 5 %,最适pH和... 详细信息

从化工厂污泥中分离到一株酵母菌 ,初步鉴定为德氏酵母属 (Debaryomycessp ) ,命名为Gb。该菌株可以在 0～ 2 0 %Na2 SO4环境中生长 ,并能以苯酚为唯一碳源和能源。其苯酚降解最适浓度为 1 0 0 0mgL-1 ,最适Na2 SO4浓度为 5 %,最适pH和温度分别为 5 5和 30℃ ,在 2 5 0ml三角瓶中最适装液量为 1 0 0ml。当Na2 SO4盐浓度为 5 %、苯酚浓度为 1 0 0 0mgL-1 时 ,最适条件下培养 3天即能降解 95 %的苯酚。本文还对其耐盐机理进行了初步研究 ,发现细胞内海藻糖含量随外界盐浓度增加而增加 ,表明Debaryomycessp 在高盐条件下能以海藻糖作为渗透调节物质。

关键词：耐盐苯酚降解酵母菌菌株分离降解特性

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有机磷农药对韭菜虫害的防治效果及农药的微生物降解

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应用生态学报 2004年第8期15卷 1459-1462页

作者：蒋建东曹慧张瑞福张明星李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

采用 3 0 0kg(a.i)·hm-2 辛硫磷和 2 6 3kg(a.i)·hm-2 甲基对硫磷来防治韭菜蓟马 ,3d后与不施农药的对照相比 ,虫口减退率分别达到 98 2 8%和 98 39% ;2 0d后虫口减退率分别达到 89 94 %和94 0 4 % .用浓度分别为 15 0 0、... 详细信息

采用 3 0 0kg(a.i)·hm-2 辛硫磷和 2 6 3kg(a.i)·hm-2 甲基对硫磷来防治韭菜蓟马 ,3d后与不施农药的对照相比 ,虫口减退率分别达到 98 2 8%和 98 39% ;2 0d后虫口减退率分别达到 89 94 %和94 0 4 % .用浓度分别为 15 0 0、18 0 0和 2 1 0 0kg(a .i)·hm-2 的辛硫磷来防治韭蛆 ,3d后与不施农药的对照相比 ,虫口减退率分别达到了 80 77%、93 10 %和 96 98% ;35d后虫口减退率分别达到了 92 4 4 %、95 0 5 %和 96 81% .施用降解菌剂对防治蓟马和韭蛆没有不良影响 ,但可显著降低韭菜中的农药含量 .蓟马施药防治后 3d喷施 4 5 0 0L·hm-2 的降解菌剂 ,3d后与不施菌对照相比 ,辛硫磷和甲基对硫磷的降解率分别为 99 5 2 %和 98 83% ;2 0d后韭菜 (苔 )中农药含量均检测不出 .韭蛆施药防治后 3d灌施 75 0 0L·hm-2 降解菌剂 ,35d后不同辛硫磷施用量的降解率分别为 10 0 %、10 0 %和 99 6 9% .

关键词：蓟马韭蛆防治辛硫磷甲基对硫磷生物降解降解菌剂

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甲基对硫磷降解菌GFP标记菌株的构建

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应用与环境生物学报 2004年第6期10卷 778-781页

作者：邱珊莲崔中利樊奔戴青华李顺鹏南京农业大学农业部环境微生物重点开放实验室南京210095

用Sau3AⅠ酶切甲基对硫磷降解菌DLL 1总DNA ,与BamHⅠ酶切的启动子探针载体 pRobe -GFP酶连 ,转化E .coliDH5α ,在选择性平板LB(Ampr)上从大约 1× 10 4个菌落筛选到 5 0个含启动子片断的阳性克隆 .挑选其中一个阳性克隆 ,将启动... 详细信息

用Sau3AⅠ酶切甲基对硫磷降解菌DLL 1总DNA ,与BamHⅠ酶切的启动子探针载体 pRobe -GFP酶连 ,转化E .coliDH5α ,在选择性平板LB(Ampr)上从大约 1× 10 4个菌落筛选到 5 0个含启动子片断的阳性克隆 .挑选其中一个阳性克隆 ,将启动子片断克隆到pIJ2 92 5和 pBBR -MCS2上构建成重组质粒 pIJGFP和广宿主标记载体pB BRGFP .然后将 pIJGFP载体上的启动子片断克隆到广宿主载体 pTR10 2上 ,获得第二个广宿主标记载体pTRGFP .将pTRGFP和pBBRGFP通过三亲接合分别标记于DLL 1得到两株标记菌 ,即DLLTR和DLLBR .通过激光共聚焦显微镜观察和软件Lasersharpversion 3.2分析发现 pTRGFP在E .coli中表达很强而在DLL 1中表达很弱 ,而 pBBRGFP正好相反 .图 5表 2参

关键词：甲基对硫磷降解菌启动子标记载体标记菌 GFP

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甲基对硫磷长期污染对土壤微生物的生态效应

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农村生态环境 2004年第4期20卷 48-50页

作者：张瑞福崔中利何健黄婷婷李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

研究了有机磷农药甲基对硫磷长期污染对土壤微生物的影响,结果表明:污染土壤中细菌、放线菌、真菌数量变化不大,自生固氮菌和反硝化细菌数量减少,氨化细菌、亚硝化细菌、硝化细菌数量有所增加;与对照土壤相比,污染土壤呼吸作用下降29.9... 详细信息

研究了有机磷农药甲基对硫磷长期污染对土壤微生物的影响,结果表明:污染土壤中细菌、放线菌、真菌数量变化不大,自生固氮菌和反硝化细菌数量减少,氨化细菌、亚硝化细菌、硝化细菌数量有所增加;与对照土壤相比,污染土壤呼吸作用下降29.93%,而氨化作用和硝化作用则增强。1g对照土壤(以干土计)中微生物总DNA提取量为(13.01±1.91)μg,污染土壤中则为(12.23±1.36)μg。

关键词：甲基对硫磷长期污染土壤微生物生态效应

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中度嗜盐菌Halomonas ***-1的渗透调节

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微生物学通报 2004年第5期31卷 71-75页

作者：洪青张国顺张忠辉何健李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

Halomonassp BYS 1是一株从活性污泥中分离的中度嗜盐菌 ,它能在 0 1～ 2 6mol LNaCl的以苯乙酸为唯一碳源的基础培养基中生长。BYS 1在不同NaCl条件下生长时 ,胞内的Na+含量基本不发生变化 ;它主要通过积累K+、谷氨酸和甜菜碱来调节... 详细信息

Halomonassp BYS 1是一株从活性污泥中分离的中度嗜盐菌 ,它能在 0 1～ 2 6mol LNaCl的以苯乙酸为唯一碳源的基础培养基中生长。BYS 1在不同NaCl条件下生长时 ,胞内的Na+含量基本不发生变化 ;它主要通过积累K+、谷氨酸和甜菜碱来调节胞内外的渗透压平衡。当培养基中的NaCl浓度从 0 1mol L上升到 2 0mol L时 ,其胞内的K+、谷氨酸和甜菜碱分别提高了 1 9、 2 4和 1 3 6倍。

关键词：中度嗜盐菌渗透调节 K^+ 谷氨酸甜菜碱

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一株特耐酸酵母R1的分离及其耐酸机理研究

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微生物学报 2004年第5期44卷 631-635页

作者：张国顺洪青刘智张晓舟李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从江西某铜矿的污泥中分离到一株特耐酸酵母菌R1(Rhodotorulasp .) ,能在pH值 1 5～ 6 0的范围内生长 ,最适生长pH为 3 0 ,属于嗜酸菌 ,初步鉴定为红酵母属 (Rhodotorulasp .)。R1在不同培养基中的耐酸能力基本相同。pH冲击实验显示 ,R... 详细信息

从江西某铜矿的污泥中分离到一株特耐酸酵母菌R1(Rhodotorulasp .) ,能在pH值 1 5～ 6 0的范围内生长 ,最适生长pH为 3 0 ,属于嗜酸菌 ,初步鉴定为红酵母属 (Rhodotorulasp .)。R1在不同培养基中的耐酸能力基本相同。pH冲击实验显示 ,R1通过泵出H+ 吸收K+ 来维持胞内pH的稳定 ,表明膜H+ _ATPase和K+ 在R1耐酸中发挥作用。R1细胞膜的H+ _ATPase活性与R1生长的pH呈负相关。通过PCR克隆了R1的H+ _ATPase基因 (pma) ,并进行了测序 ,序列比较显示该基因的保守性很高。

关键词：嗜酸菌耐酸机理 K^+ H^+-ATPase

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