检索结果-内蒙古大学图书馆

工业微生物 2014年第4期44卷 39-45页

作者：徐凯唐传红王天娇杨炎唐庆九刘艳芳张劲松国家食用菌工程技术研究中心农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌加工技术研发分中心上海市农业遗传育种重点实验室上海市农业科学院食用菌研究所上海201403 南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室江苏南京210095

旨在探讨灵芝原生质体单核体间遗传多态性，为育种材料的筛选提供分子水平依据。采用原生质体单核化获得灵芝Ganoderma lueidum36株单核体，从筛选出的12组SRAP引物，13条ISSR引物和13条RAPD引物对供试菌株的多态性综合分析结果显示，... 详细信息

旨在探讨灵芝原生质体单核体间遗传多态性，为育种材料的筛选提供分子水平依据。采用原生质体单核化获得灵芝Ganoderma lueidum36株单核体，从筛选出的12组SRAP引物，13条ISSR引物和13条RAPD引物对供试菌株的多态性综合分析结果显示，共扩增出320个条带，其中265条表现出多态性，多态位点百分率为82．81％；根据扩增结果采用软件NTsys2．10e计算菌株间的遗传相似系数（GS值）并进行聚类分析，37个菌株间GS值的变化范围为0．3741—0．9852；130—29、130．33和130-53等7株相同交配型单核体聚为一类，其余29株单核体与出发菌株G0130聚为一类，但并非严格按照交配型聚类，且单核体表现出发菌株全部或部分带型，同时也表现其所不具有的带型。研究表明，SRAP、ISSR和RAPD标记可以用于灵芝单核体多态性研究，并可为交配型鉴定提供参考，这将为育种材料的筛选提供帮助，减少育种工作量和风险。

关键词：灵芝单核体分子标记育种

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乙草胺降解菌Sphingomonas ***-6的分离鉴定及其代谢途径的初步研究

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中国农业科技导报 2013年第5期15卷 67-74页

作者：陈青姚利王成红邓诗凯褚翠伟何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从生产乙草胺的农药厂排污口污泥中分离到一株乙草胺降解菌,命名为DC-6。根据形态特征、生理生化特性以及16S rDNA系统发育分析,初步鉴定其为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)。该菌能够降解甲草胺、乙草胺和丁草胺,而对于异丙甲草胺... 详细信息

从生产乙草胺的农药厂排污口污泥中分离到一株乙草胺降解菌,命名为DC-6。根据形态特征、生理生化特性以及16S rDNA系统发育分析,初步鉴定其为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)。该菌能够降解甲草胺、乙草胺和丁草胺,而对于异丙甲草胺、丙草胺和异丙草胺却没有任何降解效果,48 h对丁草胺、乙草胺和甲草胺的降解率分别为76.7%、93.6%和98.6%,对甲草胺的降解效率最高,而对丁草胺的降解效率最低,表明侧链烷基长短影响着该类除草剂的降解速率,随着侧链基团碳原子的增加以及支链的增多降解效率呈下降的趋势。通过气相色谱-质谱鉴定了该菌降解乙草胺的代谢产物并分析了乙草胺的代谢途径,发现乙草胺首先N-脱烷基形成2-氯-N-(2-乙基-6-甲基苯基)乙酰胺(CMEPA),然后水解生成苯胺衍生物2-乙基-6-甲基苯胺(MEA),MEA能够进一步完全降解。但苯胺类化合物降解途径中的关键酶苯胺双加氧酶没有参与MEA降解代谢,表明菌株DC-6对MEA的降解不同于已报道苯胺降解途径。

关键词：乙草胺鞘胺醇单胞菌属 N-脱烷基代谢途径

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Rhodococcus sp.T3-1菌株降解乙草胺的特性

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中国环境科学 2013年第10期33卷 1785-1790页

作者：侯颖王飞董维亮崔中利河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室江苏南京210095 江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045

以乙草胺为唯一碳源，通过摇瓶培养研究了Rhodococcus sp.T3—1对乙草胺的降解特性．结果表明，菌株T3—1降解乙草胺的最适温度为37℃，且其在pH值6～10的范围内对100mg／L乙草胺的降解率均在96％曲7％之间．该菌株在接种量为5％条件下... 详细信息

以乙草胺为唯一碳源，通过摇瓶培养研究了Rhodococcus sp.T3—1对乙草胺的降解特性．结果表明，菌株T3—1降解乙草胺的最适温度为37℃，且其在pH值6～10的范围内对100mg／L乙草胺的降解率均在96％曲7％之间．该菌株在接种量为5％条件下，14h内可将200mg／L的乙草胺降解95.5％：乙草胺的降解速率与乙草胺初始浓度呈负相关，与菌株T3—1的初始接种量呈正相关．菌株T3-1还可以降解丁草胺，但不能降解丙草胺、异丙草胺和毗草胺．

关键词：乙草胺红球菌属降解特性

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Hyphomicrobium ***-1菌株修复甲胺磷乙酰甲胺磷和水胺硫磷污染土壤的实验研究

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农业环境科学学报 2013年第1期32卷 81-87页

作者：王莉凌琪伍昌年李顺鹏蒋建东王敏安徽建筑工业学院环境与能源工程系合肥230022 南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在实验室条件下,评估了菌株Hyphomicrobium ***-1对甲胺磷、乙酰甲胺磷和水胺硫磷污染土壤的修复能力。革兰氏阴性菌MAP-1在土壤中能很好的定殖,以1×107CFU·g-1soil的浓度接种于土壤,15d后菌株浓度仅下降了1个数量级。土壤非... 详细信息

在实验室条件下,评估了菌株Hyphomicrobium ***-1对甲胺磷、乙酰甲胺磷和水胺硫磷污染土壤的修复能力。革兰氏阴性菌MAP-1在土壤中能很好的定殖,以1×107CFU·g-1soil的浓度接种于土壤,15d后菌株浓度仅下降了1个数量级。土壤非灭菌状态下,30℃pH6.8,接种量为1×107CFU·g-1soil时,9d内可分别将土壤100mg·kg-1甲胺磷、100mg·kg-1乙酰甲胺磷完全降解,13d内将50mg·kg-1水胺硫磷完全降解。添加甲醇和加大接种量能促进土壤中三种有机磷农药降解,土壤是否处于淹水状态对其降解影响不大。在20～30℃之间,土壤中三种农药有比较好的去除效果。土壤投加菌株MAP-1,第10d可使100mg·kg-1甲胺磷和100mg·kg-1乙酰甲胺磷抑制的土壤脱氢酶、蔗糖酶和脲酶活性恢复至施农药前水平,对50mg·kg-1水胺硫磷抑制的这三种土壤酶活性也有较大的恢复作用。可见将菌株MAP-1应用于降低甲胺磷、乙酰甲胺磷和水胺硫磷对土壤的潜在风险是可接受的。

关键词： Hyphomicrobium sp MAP-1 甲胺磷乙酰甲胺磷水胺硫磷土壤生物修复

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精噁唑禾草灵降解菌株Acinetobacter sp.T-1的分离鉴定及降解特性研究

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农业环境科学学报 2013年第5期32卷 979-985页

作者：董维亮侯颖陶健曹慧崔中利南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室南京210095 河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003

从长期受精噁唑禾草灵污染的土壤中分离筛选得到了精噁唑禾草灵降解菌T-1,根据生理生化特性和16S rRNA同源性序列分析,将其鉴定为不动杆菌属（Acinetobacter sp.）。菌株T-1能够以精噁唑禾草灵为唯一碳源进行生长,在5 d内对50 mg.L-1精... 详细信息

从长期受精噁唑禾草灵污染的土壤中分离筛选得到了精噁唑禾草灵降解菌T-1,根据生理生化特性和16S rRNA同源性序列分析,将其鉴定为不动杆菌属（Acinetobacter sp.）。菌株T-1能够以精噁唑禾草灵为唯一碳源进行生长,在5 d内对50 mg.L-1精噁唑禾草灵的降解率可达95%以上。T-1降解精噁唑禾草灵的最适温度为37℃,而其在pH5~11的范围内对50 mg.L-1精噁唑禾草灵的降解率均可以达到85%以上。经LC-MS鉴定Acinetobacter sp.T-1降解精噁唑禾草灵的主要产物为精噁唑禾草灵酸,表明菌株T-1对精噁唑禾草灵的降解是通过断裂其酯键形成精噁唑禾草灵酸和乙醇实现的。

关键词：精噁唑禾草灵降解 Acinetobactersp

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二月兰(Orychophragmus violaceus)中植原体的初步研究

二月兰(Orychophragmus violaceus)中植原体的初步研究

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第五届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会

作者：王庆璨廖一烈沈晨冬于汉寿南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

【目的】了解植原体病害在南京的发病情况以及相应植物植原体的初步分类地位,为进一步研究植原体与其宿主之间的相互作用提供信息。【方法】通过采集江苏南京地区的23种疑似感染植原体的植物材料,从韧皮部筛管部位提取总DNA作为模板,应... 详细信息

【目的】了解植原体病害在南京的发病情况以及相应植物植原体的初步分类地位,为进一步研究植原体与其宿主之间的相互作用提供信息。【方法】通过采集江苏南京地区的23种疑似感染植原体的植物材料,从韧皮部筛管部位提取总DNA作为模板,应用植原体的两对通用引物进行巢式PCR扩增其16S rDNA片段,测序后运用MEGA5软件根据其16S rDNA序列采用邻接法构建系统发育树进行分类鉴定。【结果】通过对采集的植物材料进行分子检测,仅在二月兰(Orychophragmus violaceus)植物中检测到植原体的存在,经系统发育学分析表明该植原体与枣疯病植原体(CandidatusPhytoplasma ziziphi)聚为一枝,自展值为61%。【结论】检测到二月兰植物中含有植原体,该植原体与引起枣疯病的植原体亲缘关系较近,均属于16SrV组。有关该植原体的其它特性及其对宿主植物二月兰的影响正在研究中。

关键词：植原体二月兰(Orychophragmus violaceus) 检测分类

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蜜蜂螺原体细胞骨架相关基因MreB的生物信息学分析及克隆表达

蜜蜂螺原体细胞骨架相关基因MreB的生物信息学分析及克隆表达

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2013年中国微生物学会学术年会

作者：周丹霞于汉寿南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

[目的]克隆螺原体细胞骨架相关基因,分析基因所编码蛋白的理化性质,实现其在大肠杆菌中的异源表达.[方法]通过在线工具对MreB所编码的蛋白质的理化性质等进行预测,并利用PCR的方法,获得Spiroplasma melliferum CH-1细胞骨架相关基因MreB...

[目的]克隆螺原体细胞骨架相关基因,分析基因所编码蛋白的理化性质,实现其在大肠杆菌中的异源表达.[方法]通过在线工具对MreB所编码的蛋白质的理化性质等进行预测,并利用PCR的方法,获得Spiroplasma melliferum CH-1细胞骨架相关基因MreB1～5,以pET-28a(+)为表达载体,在大肠杆菌BL21 (DE3)中诱导表达,并利用目的蛋白带有6个组氨酸标签的特点,过镍柱纯化蛋白.

关键词：

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蜜蜂螺原体几丁质酶序列生物信息学分析

蜜蜂螺原体几丁质酶序列生物信息学分析

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2013年中国微生物学会学术年会

作者：危蓉萍俞徐斌周丹霞于汉寿南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

[目的]对螺原体几丁质酶氨基酸序列进行生物信息学分析为几丁质酶基因的克隆、表达特性研究及其功能分析提供理论参考.[方法]根据蜜蜂螺原体Spiroplasma melliferumCH-1基因组测序草图和功能基因注释,利用NCBI中的Blastp,clustalX1.81,M...

[目的]对螺原体几丁质酶氨基酸序列进行生物信息学分析为几丁质酶基因的克隆、表达特性研究及其功能分析提供理论参考.[方法]根据蜜蜂螺原体Spiroplasma melliferumCH-1基因组测序草图和功能基因注释,利用NCBI中的Blastp,clustalX1.81,MEGA4.0,PDBviewer,以及若干在线网站(,,等),预测螺原体CH-1致病相关因子几丁质酶的空间结构以及功能域.

关键词：

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灵芝中基于内源ura3基因的多基因沉默系统的建立及其应用

灵芝中基于内源ura3基因的多基因沉默系统的建立及其应用

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中国菌物学会第四届全国药用真菌学术研讨会

作者：穆大帅师亮任昂李梦娇吴凤礼姜爱良赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

灵芝是一种重要的药用真菌，然而由于近几年缺乏有效的反向遗传体系研究，灵芝的分子遗传相关研究进展相对缓慢.该研究建立了一种更加简便快捷的灵芝电穿孔转基因方法，利用灵芝内源乳清酸核苷-5'-单磷酸脱羧酶基因(ura3)作为反向... 详细信息

灵芝是一种重要的药用真菌，然而由于近几年缺乏有效的反向遗传体系研究，灵芝的分子遗传相关研究进展相对缓慢.该研究建立了一种更加简便快捷的灵芝电穿孔转基因方法，利用灵芝内源乳清酸核苷-5'-单磷酸脱羧酶基因(ura3)作为反向筛选标记，构建4种沉默载体(颈环结构沉默载体，正向沉默载体，反向沉默载体以及正反双向启动子沉默载体)，并基于此转基因方法实现了对灵芝内源基因的沉默.通过系统比对以上4种沉默方法，发现4种沉默方法都不同程度地下调了ura3基因的表达，其中双向启动子沉默不仅载体构建方便并且能够获得最高的沉默效率(达到81.9％).利用这种双向启动子沉默载体以及ura3的反向筛选特性，建立了灵芝的共沉默体系，发现共沉默下基因转录的下调有一定的相关性，提高了基因沉默的筛选效率.该反向遗传体系的建立有助于深入研究灵芝中单基因或多基因的功能，推动灵芝等大型担子菌的分子遗传研究进展.

关键词：灵芝基因沉默共沉默电击转化

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茉莉酸甲酯对灵芝三萜生物合成的影响及其灵芝应答基因的差异表达

茉莉酸甲酯对灵芝三萜生物合成的影响及其灵芝应答基因的差异表达

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中国菌物学会第四届全国药用真菌学术研讨会

作者：任昂李梦娇师亮穆大帅姜爱良韩琴赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,灵芝三萜含量的多少是衡量灵芝质量高低的重要指标.经研究发现茉莉酸甲酯能显著提高灵芝三萜含量并上调灵芝三萜生物合成途径中的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶、法尼酯焦磷酸合成酶和羊毛甾醇合... 详细信息

灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,灵芝三萜含量的多少是衡量灵芝质量高低的重要指标.经研究发现茉莉酸甲酯能显著提高灵芝三萜含量并上调灵芝三萜生物合成途径中的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶、法尼酯焦磷酸合成酶和羊毛甾醇合成酶等基因的表达.通过在灵芝中建立的cDNA-AFLP体系,采用64对引物组合对灵芝的转录组进行分析.64对引物组合共产生3 910个TDFs.茉莉酸甲酯不同诱导条件下约有919个TDFs的表达谱发生了变化,占表达谱的23.5％,其中上调表达的有703个,下调表达的有216个.选择458个TDFs进行回收、TA克隆、测序后,获得390个高质量的TDFs片段.通过蛋白数据库同源性检索,并对蛋白功能进行GO分类,结果表明：390个高质量的TDFs中,BlastX比对后没有显著匹配的序列占77.1％.在有匹配蛋白的序列中,与碳代谢及能量相关的基因为最大一组,占35.2％,转录调控类及信号传导类基因分别占14.3％和11.0％.通过荧光定量PCR技术考察了茉莉酸甲酯对20个基因转录水平的影响,与cDNA-AFLP分析的结果相一致.并通过灵芝基因过量表达技术和基因沉默技术对筛选到的相关基因进行沉默和过量表达,研究筛选到的基因在灵芝三萜生物合成与调控中的作用,获得大量参与灵芝三萜生物合成与调控的候选基因,进一步阐明了茉莉酸甲酯诱导下灵芝基因表达的变化图.

关键词：灵芝茉莉酸甲酯均匀设计 cDNA-AFLP分析过量表达基因沉默

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