检索结果-内蒙古大学图书馆

运输应激对猪脾脏IL-2、IL-6和IL-10 mRNAs表达的影响及其调控机制

中国农业科学 2010年第3期43卷 578-584页

作者：吕琼霞张书霞赵茹茜南京农业大学动物医学院南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室

【目的】探讨不同时间运输应激对猪脾脏中IL-2mRNA、IL-6mRNA、IL-10mRNA及其IL-2RmRNA、IL-6RmRNA表达的影响,并探讨P38MAPK-NF-κB信号途径对其表达的调控作用。【方法】将19头体重50kg左右的猪随机分为4组,分别进行0、1、2和4h公路运... 详细信息

【目的】探讨不同时间运输应激对猪脾脏中IL-2mRNA、IL-6mRNA、IL-10mRNA及其IL-2RmRNA、IL-6RmRNA表达的影响,并探讨P38MAPK-NF-κB信号途径对其表达的调控作用。【方法】将19头体重50kg左右的猪随机分为4组,分别进行0、1、2和4h公路运输,运输结束后立即扑杀取脾脏,液氮保存,用荧光定量PCR的方法对3种细胞因子及其IL-2RmRNA、IL-6RmRNA进行定量;另用ELISA方法检测试验猪脾脏组织匀浆液中P38MAPK含量的动态变化;激光扫描共聚焦显微镜观察NF-κB运输前后在脾脏细胞中的分布。【结果】经1、2和4h的运输应激后,脾脏中IL-10、IL-6及IL-6RmRNA的表达发生了显著的变化,P38MAPK变化不明显,NF-κB在脾脏中的表达是先上升,随后稍微下降,到4h时又升高并高于其它3个组;且NF-κB的入核率也呈现同样的变化趋势。【结论】运输应激可引起猪脾脏IL-6mRNA、IL-10mRNA和IL-6RmRNA表达的显著变化,且存在时效性;相关性分析表明,在所检测的3种细胞因子中,脾脏主要对运输过程中IL-6水平起重要的调节作用,结合细胞因子表达调控的信号机制表明,NF-κB可能对运输过程中猪脾脏相关细胞因子变化起重要的调控作用。

关键词：猪运输应激免疫功能 P38MAPK NF-κB

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二脒那秦通过内源性激活ACE2抑制AngⅡ-TGF-β1通路缓解小鼠肺纤维化

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畜牧兽医学报 2023年第6期54卷 2631-2640页

作者：曹西月纪晓霞张崇昊张亚峰陈雨涛张源淑南京农业大学动物医学院/农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

本试验通过博来霉素诱导建立小鼠肺纤维化损伤模型,探究二脒那秦(diminazene aceturate,DIZE)内源性激活血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)对小鼠肺纤维化发生发展的缓解作用。将24只雄性ICR小鼠随机均分为对照... 详细信息

本试验通过博来霉素诱导建立小鼠肺纤维化损伤模型,探究二脒那秦(diminazene aceturate,DIZE)内源性激活血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)对小鼠肺纤维化发生发展的缓解作用。将24只雄性ICR小鼠随机均分为对照组(CON组)、模型组(MOD组)和二脒那秦处理组(DIZE组)。除CON组外,其余2组小鼠一次性气管内注射博来霉素(5 mg·kg^(-1))建立肺纤维化损伤模型。造模1 d后,DIZE组小鼠给予DIZE[15 mg·(kg·d)^(-1)]灌胃处理,CON组和MOD组小鼠同等剂量灌胃生理盐水。连续灌胃28 d,采血后,处死所有小鼠,取肺组织,进行如下试验:(1)肺组织称重,计算小鼠肺系数;HE和Masson染色观察肺病理组织学变化;碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸的含量;(2)间接ELISA法检测血清中AngⅡ和Ang 1-7含量;(3)RT-qPCR及Western blot法检测肺组织中纤维化相关因子基因和蛋白等的表达水平。结果表明:(1)与CON组相比,MOD组小鼠肺系数及羟脯氨酸含量极显著或显著升高(P<0.01&P<0.05);肺组织出现明显病理变化,主要表现肺泡塌陷,炎性细胞浸润,肺泡间隔充血、增厚,有大量胶原纤维沉积。经DIZE处理后肺系数及羟脯氨酸含量显著或极显著降低(P<0.05&P<0.01);肺纤维化程度明显减轻;(2)与CON组相比,MOD组小鼠肺组织中ACE2蛋白表达下调,血清中AngⅡ含量极显著升高(P<0.01),Ang 1-7含量极显著降低(P<0.01);DIZE处理逆转了以上变化;(3)与CON组相比,MOD组小鼠肺组织中Col1a1和Col3a1基因表达极显著上调(P<0.01),α-SMA及TGF-β1基因和蛋白表达均极显著上调(P<0.01),上皮细胞的特征蛋白E-cadherin蛋白表达极显著下调(P<0.01);与MOD组相比,DIZE组缓解了以上变化。一次性气管内注射博来霉素,28 d后可成功诱导小鼠肺纤维化损伤,高水平的AngⅡ可能协同TGF-β1参与了小鼠的肺纤维化;DIZE可能通过内源性激活ACE2,降低AngⅡ的高水平,对小鼠的肺纤维化具有一定的缓解作用。

关键词：小鼠二脒那秦血管紧张素转化酶2 AngⅡ-TGF-β1通路肺纤维化

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二脒那秦内源性激活血管紧张素转化酶2对细胞脂质沉积的抑制效应及其机制

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畜牧兽医学报 2022年第8期53卷 2729-2738页

作者：曹西月付亚丽谢娜娜张亚峰张源淑南京农业大学动物医学院/农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

旨在通过诱导3T3-L1前脂肪细胞转分化为3T3-L1脂肪细胞,探讨二脒那秦(DIZE)内源性激活血管紧张素转化酶2(ACE 2)对细胞脂质沉积的抑制效应及机制。对3T3-L1前脂肪细胞转分化,将分化成功的3T3-L1脂肪细胞分为对照组、DIZE组(12.5、25μmo... 详细信息

旨在通过诱导3T3-L1前脂肪细胞转分化为3T3-L1脂肪细胞,探讨二脒那秦(DIZE)内源性激活血管紧张素转化酶2(ACE 2)对细胞脂质沉积的抑制效应及机制。对3T3-L1前脂肪细胞转分化,将分化成功的3T3-L1脂肪细胞分为对照组、DIZE组(12.5、25μmol·L^(-1)处理),siACE2组和siACE2+DIZE组(siACE2干扰后+25μmol·L^(-1)DIZE),作用48h,取上清和细胞进行试验:1)测定细胞上清中三酰甘油和葡萄糖含量;2)油红O染色细胞,并进行定量分析;3)Western blot检测细胞内ACE2和脂肪酸合成关键酶或因子FAS、ACC和SREBP-1c及葡萄糖转运蛋白GLUT4与氧化分解关键酶CS的蛋白表达水平。结果显示:1)成功诱导得到了3T3-L1脂肪细胞,前脂肪细胞诱导至第14天,有95%以上细胞内出现脂滴;2)确定了DIZE作用浓度为12.5和25μmol·L^(-1),处理时间为48h,并用该药物浓度及时间处理3T3-L1脂肪细胞,细胞上清中三酰甘油含量显著降低(P<0.05),葡萄糖含量显著升高(P<0.05);25μmol·L^(-1)DIZE处理组细胞脂滴减少,siACE2组无显著变化,siACE2+DIZE组脂滴蓄积介于对照组和DIZE组之间;25μmol·L^(-1)DIZE组ACE2蛋白水平显著高于对照组(P<0.05);siACE2组显著下调(P<0.05),siACE2+DIZE组较siACE2组无明显变化;3)与对照组相比25μmol·L^(-1)DIZE组细胞中FAS、ACC和SREBP-1c蛋白表达下调,siACE2组和siACE2+DIZE组则表达均上调;4)与对照组相比,25μmol·L^(-1)DIZE组GLUT4和CS蛋白表达水平显著上调(P<0.05),siACE2组和siACE2+DIZE组则均显著下调(P<0.05)。综上所述,DIZE处理通过介导脂肪细胞ACE2的内源性激活改善了脂肪细胞的脂肪沉积。其机理:一方面抑制脂质合成;另一方面促进葡萄糖摄取和氧化代谢,两方面协同减少了脂肪沉积。结果提示,ACE2或DIZE可作为防控脂肪沉积发生和发展的潜在靶点或药物。

关键词：二脒那秦(DIZE) 血管紧张素转化酶2(ACE2) 脂质沉积

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大豆黄酮影响青春期小鼠乳腺发育的潜在机制

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南京农业大学学报 2024年第1期47卷 36-43页

作者：谢娜娜黄心河张亚锋张源淑韩正康南京农业大学动物医学院/农业农村部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

[目的]以大豆黄酮(DZ)作用于青春期雌性小鼠,探讨其通过上调雌二醇(E2)水平和雌激素受体β(ERβ)受体表达影响青春期小鼠乳腺发育的机制,为DZ及其他植物雌激素类在畜牧生产和临床应用提供依据。[方法]选取48只2周龄C57BL/6雌性小鼠,随... 详细信息

[目的]以大豆黄酮(DZ)作用于青春期雌性小鼠,探讨其通过上调雌二醇(E2)水平和雌激素受体β(ERβ)受体表达影响青春期小鼠乳腺发育的机制,为DZ及其他植物雌激素类在畜牧生产和临床应用提供依据。[方法]选取48只2周龄C57BL/6雌性小鼠,随机均分为3组:对照组,腹腔注射无菌的PBS;DZ处理组,腹腔注射DZ(100 mg·kg^(-1));阳性对照组,腹腔注射E2(0.2 mg·kg^(-1)),每组16只。分别在饲养至21和28 d,每组随机选取8只,采集血液,测定血液中E2含量,处死后摘取乳腺,测定乳腺指数并检测乳腺组织中E2含量。取同侧部位乳腺制作组织学切片,免疫组化检测核增殖抗原蛋白(PCNA)的表达,Western blot法分析乳腺组织内细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和D3(cyclin D3)、ERβ蛋白表达水平。[结果]与对照组相比,DZ处理显著增加饲养21~28 d小鼠体重及采食量;增加21 d小鼠血液和乳腺组织中E2含量,但未达到显著水平(P>0.05);显著增加28 d小鼠血液和乳腺组织中E2含量(P<0.05);E2处理血液中E2含量均极显著增加。DZ处理对饲养21 d小鼠乳腺指数影响较小,显著增加饲养28 d小鼠乳腺指数(P<0.05);E2处理具有相同趋势(P<0.05)。HE染色结果显示,DZ和E2处理均极显著增加饲养21和28 d小鼠乳腺组织小叶内的导管数(P<0.01)和乳腺组织PCNA阳性细胞数(P<0.01)。Western blot结果显示,DZ及E2处理均可上调小鼠乳腺组织cyclinD1、cyclinB1、ERβ蛋白的表达,显著上调饲养28 d小鼠cyclinD1、cyclinB1、ERβ蛋白的表达(P<0.05)。[结论]DZ处理可促进青春期小鼠乳腺发育,促进乳腺细胞增殖和分裂,这种作用可能与内源性E2水平升高及ERβ受体有关。

关键词：大豆黄酮(DZ) 雌二醇(E2) 青春期小鼠乳腺发育细胞周期

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衣康酸二甲酯对H_(2)O_(2)诱导的AML-12细胞线粒体功能障碍的调节作用及机制研究

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南京农业大学学报 2024年第1期47卷 28-35页

作者：闫巍元张锐马海田南京农业大学动物医学院/农业农村部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

[目的]本文主要探究衣康酸二甲酯(dimethyl itaconate,DMI)对小鼠肝细胞线粒体功能障碍的调节作用及其机制,旨在为衣康酸二甲酯作为一种生理调节剂用于防控畜禽因线粒体功能障碍引发的相关疾病提供理论依据。[方法]以小鼠肝细胞系(AML-1... 详细信息

[目的]本文主要探究衣康酸二甲酯(dimethyl itaconate,DMI)对小鼠肝细胞线粒体功能障碍的调节作用及其机制,旨在为衣康酸二甲酯作为一种生理调节剂用于防控畜禽因线粒体功能障碍引发的相关疾病提供理论依据。[方法]以小鼠肝细胞系(AML-12细胞)为研究对象,试验分为对照组(NC)、0.5 mmol·L^(-1)DMI处理组、150μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理组和0.5 mmol·L^(-1)DMI+150μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理组。分别检测AML-12细胞中ATP含量、线粒体DNA(mtDNA)拷贝数、线粒体活性氧(mROS)水平和线粒体膜电位(MMP)等生化指标,并用免疫印迹法检测AMP-依赖性蛋白激酶(AMPK)信号通路关键因子蛋白的表达水平。[结果]0~0.5 mmol·L^(-1)DMI和0~150μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)对细胞活力无显著影响。DMI处理显著抑制H_(2)O_(2)诱导的AML-12细胞中mROS水平升高以及MMP的异常下降,以及ATP含量和mtDNA拷贝数的下降(P<0.01)。DMI处理极显著抑制H_(2)O_(2)诱导的小鼠肝细胞中p-AMPK、NAD-依赖性去乙酰化酶1(SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)、核呼吸因子1(Nrf1)和线粒体转录因子A(TFAM)蛋白水平的下降(P<0.01),而AMPK抑制剂Compound C预处理则可逆转这一效应。[结论]DMI通过激活AMPK-SIRT1-PGC1α信号通路缓解H_(2)O_(2)诱导的AML-12细胞线粒体功能障碍。

关键词：衣康酸二甲酯线粒体功能障碍 AMPK-SIRT1-PGC1α信号轴

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棕榈酸对BRL-3A细胞胰岛素抵抗和脂代谢的影响

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南京农业大学学报 2019年第1期42卷 130-136页

作者：姚瑶李龙龙姜志浩马海田南京农业大学动物医学院/农业农村部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

[目的]分析不同浓度棕榈酸诱导对BRL-3A细胞(大鼠肝脏间质细胞)胰岛素抵抗和脂代谢的影响,为研究胰岛素抵抗发生的生物化学机制提供肝细胞模型。[方法]采用不同浓度(0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.25 mmol·L^(-1))棕榈酸处理BRL-3... 详细信息

[目的]分析不同浓度棕榈酸诱导对BRL-3A细胞(大鼠肝脏间质细胞)胰岛素抵抗和脂代谢的影响,为研究胰岛素抵抗发生的生物化学机制提供肝细胞模型。[方法]采用不同浓度(0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.25 mmol·L^(-1))棕榈酸处理BRL-3A细胞,分别检测细胞活力、细胞死亡率、甘油三酯含量和葡萄糖消耗量; RT-qPCR法检测脂代谢相关基因表达;免疫印迹法检测胰岛素抵抗相关蛋白表达。[结果]与对照组相比,0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸处理12～48 h显著降低BRL-3A细胞活力,并显著增加其死亡率。0.15～0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸处理显著增加BRL-3A细胞中脂滴的堆积及甘油三酯含量,显著降低葡萄糖消耗量。0.15～0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸处理显著增加脂代谢合成相关基因表达,显著降低脂代谢分解相关基因和胰岛素抵抗相关蛋白的表达。[结论]0.15～0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸处理可诱发BRL-3A细胞发生脂代谢紊乱和胰岛素抵抗。考虑到剂量效应和细胞毒性,0.20 mmol·L^(-1)棕榈酸处理BRL-3A细胞24 h可作为后续探讨胰岛素抵抗机制相关研究理想模型构建的最佳条件。

关键词：棕榈酸 BRL-3A细胞胰岛素抵抗脂代谢紊乱

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皱胃灌注酪蛋白对湖羊瘤胃消化代谢及内分泌的影响

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华中农业大学学报 2005年第4期24卷 373-375页

作者：方华圣陈杰南京农业大学动物医学院动物生理生化农业部重点开放实验室

对4头安装有永久性瘤胃和皱胃瘘管的成年湖羊进行皱胃酪蛋白灌注,观察湖羊瘤胃消化代谢、血浆激素水平以及皱胃食糜中阿片样物质总活性的变化。结果表明皱胃酪蛋白灌注,使湖羊瘤胃总挥发性脂肪酸(TVFA)水平升高19.64%(P<0.05),瘤胃... 详细信息

对4头安装有永久性瘤胃和皱胃瘘管的成年湖羊进行皱胃酪蛋白灌注,观察湖羊瘤胃消化代谢、血浆激素水平以及皱胃食糜中阿片样物质总活性的变化。结果表明皱胃酪蛋白灌注,使湖羊瘤胃总挥发性脂肪酸(TVFA)水平升高19.64%(P<0.05),瘤胃微生物蛋白(MCP)水平升高10.78%(P<0.01),血浆胰岛素水平上升115.80%(P<0.01)。与此同时,皱胃食糜中的阿片样物质总活性增加了128.32%(P<0.01)。结果提示,皱胃酪蛋白灌注可增加湖羊消化道食糜中阿片样物质总活性,同时改善其瘤胃代谢和内分泌调节。

关键词：湖羊酪蛋白阿片活性肽瘤胃消化内分泌

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猪应激性状QTL微卫星标记与运输应激后肉质性状关系的研究

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农业生物技术学报 2009年第3期17卷 386-392页

作者：王晓娜汪秀星赵茹茜刘香薛春阳陈杰南京农业大学动物科技学院南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室

在应激敏感品种皮特兰猪和抗应激品种二花脸猪为亲本建立的F2资源群体中选取52头140~150日龄、体重为65±5kg的猪。2h运输应激试验后静脉注射巴比妥钠麻醉屠宰取样。在已知的应激性状QTL座位区域内选择了22个微卫星标记,对各微卫星... 详细信息

在应激敏感品种皮特兰猪和抗应激品种二花脸猪为亲本建立的F2资源群体中选取52头140~150日龄、体重为65±5kg的猪。2h运输应激试验后静脉注射巴比妥钠麻醉屠宰取样。在已知的应激性状QTL座位区域内选择了22个微卫星标记,对各微卫星标记与运输应激后的pH45min、pH24h、嫩度、系水力、蒸煮损失以及肉色评分(l*,a*,b*)6项肉质指标进行了相关性分析。结果表明,各位点等位基因数为3~8个,杂合度为0.4155~0.7432,多态信息含量为0.3651~0.8150。方差分析显示,S0101对肉色a*有极显著影响(P<0.01);SW1023对系水力有显著影响(P<0.05);SW1808对系水力有极显著影响(P<0.01),对肉色l*和a*有显著影响(P<0.05);S0112和S0092对pH45min有显著影响(P<0.05)。研究结果表明在应激QTL座位内选取的这5个微卫星标记对运输后的猪肉品质存在显著影响。

关键词： F2群体微卫星运输应激肉质性状相关分析

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病原菌入侵宿主细胞的机制研究进展

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免疫学杂志 2010年第2期26卷 171-174页

作者：杨倩南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室 210095

传染病病原菌是对人类和动物健康的最大威胁。深入研究病原菌如何入侵宿主细胞的机制是揭示传染病的关键。经过长期的进化革兰氏阴性菌发展形成几种分泌途径破坏宿主细胞,包括普通分泌途径、Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型分泌途径。这些病原... 详细信息

传染病病原菌是对人类和动物健康的最大威胁。深入研究病原菌如何入侵宿主细胞的机制是揭示传染病的关键。经过长期的进化革兰氏阴性菌发展形成几种分泌途径破坏宿主细胞,包括普通分泌途径、Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型分泌途径。这些病原菌主要是通过摧毁宿主细胞的细胞骨架、调节信号转导途径和破坏宿主细胞的免疫机制达到感染宿主细胞的目的。本文首先就病原菌毒力因子的分泌途径进行了初步介绍,然后对目前有关病原菌如何入侵宿主细胞以及入侵宿主细胞后如何破坏细胞的结构和功能进行了概述。

关键词：病原菌宿主细胞相互作用机制

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枯草芽孢杆菌对仔猪小肠局部天然免疫及TLR表达的影响

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畜牧兽医学报 2011年第4期42卷 562-566页

作者：李云锋邓军张锦华杨倩南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

本研究主要探索枯草芽孢杆菌对仔猪小肠局部天然免疫及TLR表达的影响。选取4窝相同胎次的新生仔猪(15头)为研究对象。分别于仔猪0、7、14、26日龄灌喂枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(活菌数为1×***-1)。试验结果显示:枯草芽孢杆菌... 详细信息

本研究主要探索枯草芽孢杆菌对仔猪小肠局部天然免疫及TLR表达的影响。选取4窝相同胎次的新生仔猪(15头)为研究对象。分别于仔猪0、7、14、26日龄灌喂枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(活菌数为1×***-1)。试验结果显示:枯草芽孢杆菌能够显著地促进十二指肠中TLR9和细胞因子IL-6的表达(P<0.05)以及回肠中细胞因子IL-1的表达(P<0.01),同时能够显著地提高仔猪小肠IgA分泌细胞的数量(P<0.01)。结果提示,枯草芽孢杆菌可能通过胞外成分激活小肠TLR9的表达后,诱导细胞因子IL-6的分泌,促进IgA分泌细胞数量增加。饲喂枯草芽孢杆菌具有促进新生仔猪小肠细胞免疫和体液免疫的作用,对预防新生仔猪腹泻提供了应用前景。

关键词：枯草芽孢杆菌仔猪细胞因子 TLRs IgA分泌细胞

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