检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2005年第6期25卷 591-593页

作者：彭小华何孔旺陆承平南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农科院兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014

根据G enB ank中猪胸膜肺炎放线杆菌(A ctinobacillus p leurop eum on iae,A pp)外膜蛋白(om l)基因序列,设计合成1对特异性引物,进行PCR检测。对A pp 1、2、3、4、5a、5b、6、7、9型参考株均扩增出大小为1 010 bp左右的片段,而对马链... 详细信息

根据G enB ank中猪胸膜肺炎放线杆菌(A ctinobacillus p leurop eum on iae,A pp)外膜蛋白(om l)基因序列,设计合成1对特异性引物,进行PCR检测。对A pp 1、2、3、4、5a、5b、6、7、9型参考株均扩增出大小为1 010 bp左右的片段,而对马链球菌兽疫亚种、多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、产肠毒素大肠杆菌等均未扩增出任何条带。用相应的限制性内切酶分别酶切PCR扩增产物,均得到与预期一致的结果;PCR检测的敏感度达10 CFU。将建立的PCR方法初步应用于6头人工发病猪的鼻拭子和病死猪的肺组织,均得到较好的检测结果。

关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白聚合酶链反应

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新疆地区猪戊型肝炎血清流行病学调查

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中国病毒学 2004年第3期19卷 285-287页

作者：马勋陆承平孟继鸿南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 东南大学医学院微生物与免疫系江苏南京210095

The purpose of the present study was to determine the prevalence of swine Hepatitis E virus (HEV) infection in Xinjiang. 813 swine serum samples collected from 1 to 12 months of age at 9 swine farms in Xinjiang region were tested by ELISA for the presence of IgG antibodies against HEV. The recombinant protein pUS166 containing region 452-617aa of the ORF2 of HEV US strain was used as coating antigen. The result showed that anti –HEV IgG were detected in 265 of 405 pigs (65.43%) in one group and 238 of 408 pigs (58.33%) in another group , and that the seropositivity rate was not related to geographic district and breeds, but differed remarkably by age, being 40% among the 1- to 3-month-old piglets, but 77.33% among ones over 3-month-old. It suggested that swine HEV was widespread in different geographic regions of XinJiang.

关键词：戊型肝炎病毒猪血清酶联免疫吸附试验

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鸭疫里氏杆菌地区流行株的分离与外膜蛋白A的变异性分析

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中国兽医科学 2011年第6期41卷 562-568页

作者：毕振威王永山杨建朋欧阳伟张炜范红结江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

2010年从安徽省和江苏省境内发病鸭的病理组织中分离到8株鸭疫里氏杆菌(RA),分别被命名为AH1、AH2、AH3、AH4、JS1、JS2、JS3、JS4,其中AH1、JS4为血清1型,AH2、AH3、AH4、JS1、JS2、JS3为血清2型。8株RA的菌体形态、生化特性、PCR鉴定... 详细信息

2010年从安徽省和江苏省境内发病鸭的病理组织中分离到8株鸭疫里氏杆菌(RA),分别被命名为AH1、AH2、AH3、AH4、JS1、JS2、JS3、JS4,其中AH1、JS4为血清1型,AH2、AH3、AH4、JS1、JS2、JS3为血清2型。8株RA的菌体形态、生化特性、PCR鉴定结果相同,但致病力不同,AH1毒力最弱,对鸭的发病致死率仅为16.7%。序列分析结果显示,8株分离菌的外膜蛋白A(OmpA)基因的核苷酸序列同源性为96.9%～100%,氨基酸序列同源性为98.2%～100%。将8株RA与GenBank中登录的其他55株RA的OmpA进行变异性分析,结果其核苷酸序列同源性为89.6%～100%,氨基酸序列同源性为90.2%～100%。从系统发育进化树中可将这63株RA分为4个亚群,不同国家和地区的RA株在亚群中没有显示地域或时间特征,而是呈现出了互相交叉的现象,RA的OmpA差异与血清型、分离时间和分离地点没有必然的联系,本试验近期分离的8个RA株分布在2个亚群中。

关键词：鸭疫里氏杆菌分离外膜蛋白A 变异

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靶向传染性法氏囊病病毒VP1基因siRNA对病毒复制的抑制

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中国兽医学报 2011年第10期31卷 1404-1409页

作者：欧阳伟王永山刘小娟张海彬江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

根据传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP1基因保守区序列,选择设计了3个靶向VP1的小干扰RNA序列(siR-NA):VP1-siRNA668、VP1-siRNA1034和VP1-siRNA2250,化学合成DNA序列,体外转录合成siRNA,转染鸡胚成纤维细胞(CEF)后接种IBDV,分析siRNA对病毒复制的影响。结果显示,病毒接种后72h,3个VP1-siRNA转染组未出现明显的细胞病变(CPE),病毒滴度分别为102.75,102.00,101.75 TCID50/0.1mL,而siRNACON转染和单纯IBDV接种对照组均出现明显CPE,病毒滴度均为106 TCID50/0.1mL;用荧光定量RT-PCR分析VP1基因水平,3个VP1-siRNA转染组比对照组分别降低了73.10%,81.79%,90.28%。结果表明,本试验选择设计的3个siRNA具有明显抑制IBDV复制功能,其中2 250位点的siRNA抑制效果最明显,推测该区域是VP1基因的重要功能区,是新型抗IBDV药物与疫苗设计的重要靶标。

关键词： RNA干扰(RNAi) 小干扰RNA(siRNA) 传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP1基因

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EHEC O157：H7二重PCR的建立及应用

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华北农学报 2011年第6期26卷 59-66页

作者：李丽张雪寒何孔旺姜平赵攀登叶青栾晓婷温立斌倪艳秀周俊明吕立新郭容利俞正玉茅爱华李彬王小敏江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法。根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以E... 详细信息

建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法。根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以EHEC O157:H7纯培养和模拟制备的3种阳性样品为原材料,对方法的敏感性和特异性进行分析。运用成功建立的二重PCR,从带菌率最高的牛粪便中检测EHEC O157:H7,并进行菌株分离和鉴定。成功建立了rfbE与fliC的二重PCR方法,rfbE与fliC引物比例为2.5∶1,PCR循环参数中退火温度为56℃,扩增片段长度rfbE为812 bp,fliC为625 bp。检测阳性临床样品检测敏感性可以达到10 cfu/g。检测24株非EHEC O157:H7大肠杆菌和15株非大肠杆菌,只有EHECO157:H7能够扩增出特异性的rfbE条带,EHEC O157:H7和EPEC O55:H7能够扩增出fliC。只有EHEC O157:H7能够同时扩增出rfbE与fliC 2条目的条带。从63份牛粪便样品中分离到4株EHEC O157:H7:生化试验表明4株EHEC O157:H7具有典型EHECO157:H7的生化特性;药敏试验表明4株EHEC O157:H7具有较为广谱的耐药性;rfbE序列分析与GenBank序列同源性介于97.3%～99.2%之间,fliC序列与GenBank序列同源性介于97.6%～100%之间;4株EHEC O157:H7对Balb/c小鼠的致病性有差异,EHEC O157:H728#和EHEC O157:H738#致病性强,EHEC O157:H73#和EHEC O157:H717#较弱。以rfbE和fliC为目的基因成功建立了二重PCR,敏感性和特异性良好,可用于临床样品的检测,提高细菌分离率。

关键词： O157:H7 二重PCR 方法建立细菌分离样品检测

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重组猪α-干扰素喷干粉剂的制备及其效果评价

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中国兽药杂志 2017年第6期51卷 33-40页

作者：韩国英刘刚王兴业王茂超郭海岩曹瑞兵刘晓东山东仙普爱瑞科技股份山东高密261500 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京210095 青岛农业大学动物科技学院预防兽医学山东省重点实验青岛266000

为制备一种高活性、低价格重组猪α-干扰素(PoIFN-α),采用喷雾干燥技术制备出重组猪α-干扰素(rPoIFN-α)喷干粉剂,并通过对rPoIFN-α喷干粉剂的稳定性,安全性,治疗效果等质量标准进行综合评价。结果显示,本试验制备的重组猪α-干扰素... 详细信息

为制备一种高活性、低价格重组猪α-干扰素(PoIFN-α),采用喷雾干燥技术制备出重组猪α-干扰素(rPoIFN-α)喷干粉剂,并通过对rPoIFN-α喷干粉剂的稳定性,安全性,治疗效果等质量标准进行综合评价。结果显示,本试验制备的重组猪α-干扰素喷干粉剂质量稳定性,有效期暂定为两年;除10倍剂量rPoIFN-α喷干粉剂导致猪肝脏轻微脂肪样病变,其余各较低剂量rPoIFN-α喷干粉剂对猪无毒副作用;人工感染和临床应用试验表明rPoIFN-α喷干粉剂对猪腹泻具有显著的治疗效果,为PoIFN-α喷干粉剂的工程化生产及其在养猪业中的应用提供参考。

关键词：重组猪α干扰素喷干粉剂喷雾干燥技术猪腹泻

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重组酵母鸡α干扰素的诱导表达及其抗MDV、NDV能力

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2010年第9期38卷 37-41页

作者：蔡梅红曹瑞兵曹景立王秀红陈溥言江苏大学食品与生物工程学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院中国人民解放军73081部队农副业基地江苏大学理学院

【目的】获得鸡α干扰素重组酵母菌诱导表达的最佳诱导时间和甲醇的体积分数,并测定诱导表达产物对鸡马立克氏病毒(MDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的抑制能力。【方法】挑取2个鸡α干扰素重组酵母菌单菌落至BMGY培养基中培养,待菌液OD600为4... 详细信息

【目的】获得鸡α干扰素重组酵母菌诱导表达的最佳诱导时间和甲醇的体积分数,并测定诱导表达产物对鸡马立克氏病毒(MDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的抑制能力。【方法】挑取2个鸡α干扰素重组酵母菌单菌落至BMGY培养基中培养,待菌液OD600为4左右时,分别转接至BMMY培养液诱导,1瓶每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇,另1瓶每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇,于24,48,72 h收集样品,备SDS-PAGE检测用。根据不同时间(24,48,72,96 h)诱导上清液表达量的差异,留用表达量最高时段的上清液,经初步纯化后,利用鸡胚成纤维细胞(CEF),分别测定重组酵母鸡α干扰素抑制MDV及NDV的能力。【结果】鸡α干扰素重组酵母菌在每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇诱导48 h时,或每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇诱导72 h时,重组酵母鸡α干扰素表达量均达到最高;且诱导上清液具有较好地抑制MDV、NDV的能力。【结论】获得了鸡α干扰素重组酵母菌小量发酵的最佳条件;获得的重组酵母鸡α干扰素对MDV和NDV有明显的抑制作用。

关键词：鸡α干扰素酵母 MDV NDV

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鸡腺胃型传染性支气管炎病毒金坛分离株核蛋白基因分析及与标准强毒株同源性比较

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中国兽医学报 2002年第2期22卷 111-113页

作者：凌雯钱建飞李银张则斌潘杰彦陈溥言江苏省农业科学院畜牧兽医研究所农业部畜禽疫病诊断重点开放实验室江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

根据已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (infectious bronchitis virus,IBV) Beau株、M41株的核苷酸序列 ,设计并合成 1对引物。应用该引物 ,通过 RT- PCR扩增出 IBV金坛分离株 (JT株 )的核蛋白基因 (N基因 ) ,片段大小为 82 8bp,与设计相... 详细信息

根据已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (infectious bronchitis virus,IBV) Beau株、M41株的核苷酸序列 ,设计并合成 1对引物。应用该引物 ,通过 RT- PCR扩增出 IBV金坛分离株 (JT株 )的核蛋白基因 (N基因 ) ,片段大小为 82 8bp,与设计相符。对 JT株的 N基因进行序列测定 ,并与标准毒株 KB85 2 3、CU - T2、Beau和 M41的 N基因进行同源性比较 ,结果表明 ,JT株与 KB85 2 3、CU- T2、Beau和 M41毒株的 N基因同源性分别为 87%、87%、86 %和 85 %,说明 JT株与标准毒株在 N基因上存在一定的差异。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒核蛋白基因序列测定同源性鸡腺胃型标准强毒株

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猪痢疾诊断技术研究进展

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猪业科学 2010年第2期27卷 28-30页

作者：周斌南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

猪痢疾（swine dysentery，SD）又称血痢，黏液性下痢或细菌痢疾等，是由猪痢疾短螺旋体（***）引起的一种肠道传染病。Whiting（1921）首次报道本病，1971年才确定其病原体为猪痢疾密螺旋体，现归为短螺旋体属。目前该病遍及世界主要... 详细信息

猪痢疾（swine dysentery，SD）又称血痢，黏液性下痢或细菌痢疾等，是由猪痢疾短螺旋体（***）引起的一种肠道传染病。Whiting（1921）首次报道本病，1971年才确定其病原体为猪痢疾密螺旋体，现归为短螺旋体属。目前该病遍及世界主要养猪国家。我国于1978年由美国进口种猪时发现本病，上海市畜牧兽医研究所经临诊观察、粪便及大肠黏膜检查、病原分离培养、动物接种等确诊为猪痢疾。

关键词：猪痢疾诊断技术畜牧兽医研究所密螺旋体肠道传染病分离培养动物接种病原体

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猪群免疫力低下的原因及临床表现

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猪业科学 2010年第10期27卷 32-36页

作者：庞然南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

根据影响猪场猪群免疫力低下的原因,如饲料营养、应激、疫苗接种、疾病、环境管理、药物和防疫消毒等因素,提出提高猪免疫力的一些措施,如提高饲料营养水平、消除应激因素、做好免疫工作,制定科学合理的免疫程序、改善猪场环境、建立人... 详细信息

根据影响猪场猪群免疫力低下的原因,如饲料营养、应激、疫苗接种、疾病、环境管理、药物和防疫消毒等因素,提出提高猪免疫力的一些措施,如提高饲料营养水平、消除应激因素、做好免疫工作,制定科学合理的免疫程序、改善猪场环境、建立人性化、合理的管理方式、合理使用药物和严格消毒制度等,提出养猪的一些见解。

关键词：免疫力影响因素解决措施

来源：评论

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