检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧兽医学报 2017年第4期48卷 740-751页

作者：郑亚妮高修歌刘晓晓滕佩季辉江善祥南京农业大学动物医学院兽医药理学与毒理学实验室南京210095

初步探讨盐霉素对鸡原代心肌细胞的毒性作用及其毒性机制。采用差速贴壁法结合化学纯化法分离鸡原代心肌细胞,应用免疫荧光法鉴定心肌细胞纯度,给予1、5、10、20、50μg·mL-1盐霉素处理后,观察心肌细胞形态,采用MTT法测定盐霉素对... 详细信息

初步探讨盐霉素对鸡原代心肌细胞的毒性作用及其毒性机制。采用差速贴壁法结合化学纯化法分离鸡原代心肌细胞,应用免疫荧光法鉴定心肌细胞纯度,给予1、5、10、20、50μg·mL-1盐霉素处理后,观察心肌细胞形态,采用MTT法测定盐霉素对心肌细胞活性的影响;比色法检测心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放、肌酸激酶(CK)活性;流式细胞术分析盐霉素对心肌细胞凋亡及线粒体膜电位的影响;电子显微镜观察盐霉素对心肌细胞超微结构的影响;荧光显微镜观察盐霉素对心肌细胞氧化应激的影响;比色法测定盐霉素对心肌细胞Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白酶活性的影响;qRT-PCR检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、细胞色素C(Cyt-C)、Bax及Bcl-2mRNA的转录水平。结果表明:分离所得鸡原代心肌细胞形态良好,纯度大于90%;盐霉素以显著的浓度-时间依赖性方式抑制心肌细胞生长并诱导细胞死亡;盐霉素导致心肌细胞LDH释放极显著增加(P<0.01),细胞内CK酶活性增强,呈浓度依赖性(P<0.01);盐霉素导致心肌细胞凋亡率极显著升高(P<0.01),线粒体膜电位(ΔΨm)明显下降(P<0.01);电子显微镜观察显示盐霉素导致心肌细胞线粒体严重肿胀、空泡化,嵴溶解甚至消失;盐霉素导致心肌细胞内活性氧(ROS)显著升高;细胞质Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白酶活性均极显著升高(P<0.01);qRT-PCR结果表明凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Cyt-C及Bax mRNA转录上调,Bcl-2mRNA转录下调(P<0.01)。盐霉素可以通过细胞凋亡引起鸡心肌细胞死亡,线粒体途径和死亡受体途径可能共同参与了盐霉素诱导的鸡心肌细胞凋亡。

关键词：盐霉素鸡原代心肌细胞细胞毒性凋亡

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马度米星铵诱导鸡原代心肌细胞死亡的作用及机制研究

马度米星铵诱导鸡原代心肌细胞死亡的作用及机制研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会

作者：高修歌郑亚妮彭麟季辉郭大伟江善祥南京农业大学动物医学院兽医药理与毒理学研究室南京210095

目的：本研究旨在探究马度米星铵对鸡心肌细胞的毒性作用,进一步阐释其毒性分子机制. 方法：以原代培养的鸡心肌细胞为体外研究模型,20μM的z-VAD-fmk和500mM的NAC预处理细胞lh后,不同浓度的马度米星铵(0～5μg/mL)处理24h,显微镜观... 详细信息

目的：本研究旨在探究马度米星铵对鸡心肌细胞的毒性作用,进一步阐释其毒性分子机制. 方法：以原代培养的鸡心肌细胞为体外研究模型,20μM的z-VAD-fmk和500mM的NAC预处理细胞lh后,不同浓度的马度米星铵(0～5μg/mL)处理24h,显微镜观察细胞形态改变;MTT法分析细胞活性;DAPI染色观察细胞核形态;Annexin V-FITC/PI染色后行流式细胞术分析细胞凋亡率;RT-qPCR分析凋亡基因变化;比色法检测凋亡蛋白活性;JC-1染色后经流式细胞仪和荧光显微镜分析线粒体膜电位变化;DCFH-DA染色后荧光显微镜观察ROS改变;比色法测定胞内GSH的含量. 结果：不同浓度的马度米星铵处理鸡心肌细胞24～72h,细胞损伤严重且细胞活性下降显著(P＜0.01);马度米星铵诱导细胞凋亡率升高,同时Caspase-3/8/9基因和蛋白表达水平均显著上调(P＜0.01),细胞内线粒体膜电位显著降低(P＜0.01);z-VAD-fmk预处理可削弱马度米星铵诱导的细胞凋亡和细胞毒性;NAC预处理未能改善马度米星铵引起的细胞凋亡但可降低细胞毒性. 结论：细胞凋亡介导了马度米星铵引起的鸡心肌细胞毒性,抑制细胞凋亡和和ROS产生有助于削弱马度米星铵的细胞毒性作用.

关键词：兽用药物马度米星铵心肌细胞细胞凋亡毒性评价

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注射用温敏型原位凝胶处方的筛选

注射用温敏型原位凝胶处方的筛选

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第七届中国畜牧科技论坛

作者：高颖江善祥季辉彭麟南京农业大学动物医学院兽医药理学与毒理学研究室

(目的)本研究旨在制备注射用温敏原位凝胶,选择适宜的基质筛选得到最优处方并对其质量进行初步评价。（方法）本试验选择2种可注射温敏材料——泊洛沙姆和聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物,分别以两者作为处方基质,制备不同浓度配比的空白凝胶... 详细信息

(目的)本研究旨在制备注射用温敏原位凝胶,选择适宜的基质筛选得到最优处方并对其质量进行初步评价。（方法）本试验选择2种可注射温敏材料——泊洛沙姆和聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物,分别以两者作为处方基质,制备不同浓度配比的空白凝胶,以胶凝温度、胶凝时间、pH和黏度作为评价指标,综合考察筛选出最优处方,并对其外观、显微结构、粒径、电位和初步稳定性进行评价。（结果）结果表明,筛选得到泊洛沙姆凝胶的最优处方为P407 17.0%、P188 5.0%、HPMC 0.4%,T 35.6℃,Gt 47.72s,pH 7.18,常温黏度54mPa·s,粒径70.66nm,zeta电位1.30mV,该凝胶溶液在常温下是无色透明、流动性良好的液体,环境温度高于T时呈透明的半固体凝胶状态;筛选出PLGA-PEG-PLGA凝胶的最适浓度为20%,T 35.3℃,Gt 64.66s,pH 6.47,常温黏度为50mPa·s,粒径26.02nm,zeta电位-0.16mV。该溶液在常温下是略带淡蓝色的透明均匀液体,环境温度高于T时呈白色半透明的半固体凝胶状态。（结论）结果提示,2种温度敏感型原位凝胶均可用于注射,制备简单,给药方便,具有良好的水溶性和稳定性,推测其可用于生物大分子药物（如蛋白质、多肽类药物）或其他治疗成分（如疫苗、抗体）的可控输送,改善药物的释放动力学,有望成为通过注射途径给药并具有缓释效果的药物传递系统。

关键词：温敏原位凝胶泊洛沙姆聚乳酸聚乙二醇嵌段共聚物处方筛选质量评价

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纳米银诱发细胞毒性的作用机制

纳米银诱发细胞毒性的作用机制

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：郭大伟王丽平南京农业大学动物医学院兽医药理学与毒理学研究室

纳米银由于良好的抗菌性能成为商业化程度最高的纳米材料,广泛应用于纺织品、食品包装材料、日化用品、牙菌斑和创伤感染治疗等领域。在兽医领域也具有广泛的应用潜力,研究显示纳米银对奶牛乳房炎、奶牛子宫内膜炎、鸡球虫、猪传染性胃... 详细信息

纳米银由于良好的抗菌性能成为商业化程度最高的纳米材料,广泛应用于纺织品、食品包装材料、日化用品、牙菌斑和创伤感染治疗等领域。在兽医领域也具有广泛的应用潜力,研究显示纳米银对奶牛乳房炎、奶牛子宫内膜炎、鸡球虫、猪传染性胃肠炎病毒、新城疫病毒、流感病毒H1N1等也具有良好的疗效。然而其细胞毒性较强,极大的限制了其临床应用。因此,深入研究纳米银细胞毒性机制是纳米银研究领域的焦点。我们的前期研究证实聚乙烯吡咯烷酮（PVP）包覆的纳米银对多药耐药大肠杆菌具有良好的抗菌疗效,也能有效抑制髓系白血病细胞的增殖,与芬维A胺联用可以协同杀伤白血病细胞。但其对正常细胞的毒性及作用机制尚不清楚。我们研究发现纳米银可以诱导细胞凋亡、引起DNA损伤,进一步研究显示活性氧（ROS）的产生和银离子（Ag）的释放共同介导了纳米银对正常细胞的毒性作用。最新研究发现自噬参与纳米银细胞毒性的调控,但其确切的作用和机制尚无定论。我们进一步发现纳米银能够诱导正常细胞产生自噬且发挥毒性作用,通过3-甲基腺嘌呤（3-MA）抑制自噬可以降低纳米银诱导的细胞凋亡和DNA损伤。本研究深化了对纳米银细胞毒性机制的认知,为降低纳米银毒性以更好地应用该材料提供了一种新策略。

关键词：纳米银细胞毒性凋亡 DNA损伤自噬

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香菇多糖介导的纳米银合成、表征及抗菌作用研究

香菇多糖介导的纳米银合成、表征及抗菌作用研究

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中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十一届会员代表大会暨第十三次学术讨论会与中国毒理学会兽医毒理专业委员会第五次学术研讨会

作者：郭大伟江善祥南京农业大学动物医学院兽医药理学与毒理学研究室

随着纳米技术的迅速发展和纳米银越来越广泛的应用,纳米银的制备方法也有了很大的发展。目前,纳米银的制各方法大致可分为物理法、化学法和生物法。随着纳米银在生物医学领域的应用,其生物相容性越来越受到人们的关注,因此绿色合成法越... 详细信息

随着纳米技术的迅速发展和纳米银越来越广泛的应用,纳米银的制备方法也有了很大的发展。目前,纳米银的制各方法大致可分为物理法、化学法和生物法。随着纳米银在生物医学领域的应用,其生物相容性越来越受到人们的关注,因此绿色合成法越来越受到人们的重视。评价绿色合成法必须满足以下三个方面:选择可溶解的介质;选择环境友好型的还原剂:选择无毒物质作为纳米银的稳定剂。香菇多糖具有抗肿瘤、抗病毒和免疫增强等作用,在医学、食品工业和兽医学等领域具有良好的应用前景。本研究以香菇多糖作为还原剂和稳定剂于70℃水浴中加热进行纳米银的绿色制备。合成的纳米银的UV-vis光谱的最大吸收峰是430 nm,表明纳米银的形成;进一步通过透射电子显微镜表征显示其呈球形,尺寸分布3～12 nm,平均粒径为7.09nm;DLS表征结果显示其水动力尺寸为21.35nm,zeta电位为-9.01 mV。牛津杯抗菌试验结果显示,香菇多糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均无抗菌活性,合成的纳米银对两种细菌均表现出剂量依赖性抑制,且其对革兰氏阴性大肠杆菌表现出更强的抗菌作用,电镜图片显示纳米银处理的大肠杆菌细胞膜和细胞浆分离,甚至发生胞浆泄漏。总来的说,我们使用香菇多糖合成了粒径小、分布窄、形貌均一、稳定的纳米银,且具有良好的抗菌应用价值。

关键词：纳米银香菇多糖抗菌

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应激诱发的海马神经元突触增强参与大鼠的新环境学习

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生理学报 2011年第2期63卷 138-142页

作者：刘娜邢华江善祥南京农业大学动物医学院兽医药理学与毒理学实验室南京210095 扬州大学兽医学院扬州225009

本文旨在研究应激对海马新环境空间学习记忆的损伤作用机制。在大鼠海马CA1区埋植电极,刺激Schaffer侧枝记录CA1区树突层的兴奋性突触后场电位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP),探索应激对大鼠新环境空间学习的突触可... 详细信息

本文旨在研究应激对海马新环境空间学习记忆的损伤作用机制。在大鼠海马CA1区埋植电极,刺激Schaffer侧枝记录CA1区树突层的兴奋性突触后场电位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP),探索应激对大鼠新环境空间学习的突触可塑性的影响。同时研究了再次新环境空间学习时,应激对动物海马的突触可塑性的影响。结果显示,在未给予外源性强直刺激(高频或低频刺激)诱导的前提下,应激适应大鼠首次探索新环境时诱发了海马神经元的突触抑制;而应激未适应大鼠首次探索新环境时却诱发了海马神经元的突触增强。在首次探索新环境24h后,再次将应激未适应大鼠放入"新环境"时,大鼠海马的突触传递却未发生显著变化。以上结果表明,应激通过产生突触增强来实现对海马新环境空间学习过程的损害,但是海马可通过再次接触经验对应激产生适应。

关键词：应激突触可塑性海马新环境探索大鼠

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多巴胺参与的海马神经元长时程抑制在大鼠新环境探索中的作用

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生理学报 2009年第6期61卷 511-516页

作者：刘娜薛彬邢华徐林江善祥南京农业大学动物医学院兽医药理与毒理学实验室南京210095 扬州大学兽医学院扬州225009 中国科学院云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室学习记忆学科组昆明650223 中南大学湘雅附属第二医院精神卫生研究所长沙410011

本文利用清醒自由移动大鼠研究海马神经元长时程抑制(long-term depression,LTD)在新环境探索中的作用,为进一步研究LTD在学习记忆机制中的作用提供证据。在大鼠海马CA1区埋植电极,刺激Schaffer侧枝记录CA1区树突层的兴奋性突触后场电位... 详细信息

本文利用清醒自由移动大鼠研究海马神经元长时程抑制(long-term depression,LTD)在新环境探索中的作用,为进一步研究LTD在学习记忆机制中的作用提供证据。在大鼠海马CA1区埋植电极,刺激Schaffer侧枝记录CA1区树突层的兴奋性突触后场电位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP)。观察动物探索新环境时海马的fEPSP变化,了解海马在空间探索学习过程中的信息存储过程;并对多巴胺在海马的空间学习记忆中的作用进行验证。结果显示,动物经过空间探索学习后,海马的fEPSP出现LTD,这种LTD依赖于海马多巴胺神经元的活动。以上结果提示,新环境探索产生的内源性LTD可能是海马空间学习记忆潜在的细胞水平机制,多巴胺在此过程中起到重要的调节作用。

关键词：长时程抑制多巴胺海弓新环境探索行为大鼠

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