检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物学报 2023年第12期63卷 4714-4725页

作者：彭泽仁吴宗福南京农业大学动物医学院江苏南京210014 农业部动物细菌学重点实验室江苏南京210014 世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室江苏南京210014

【目的】猪链球菌(Streptococcus suis)是猪的重要致病菌,同时也是一种人畜共患病原。屠宰场健康猪的猪链球菌感染率较高,血清型多而复杂,是人和猪的重要传染源。四川、广西两地都曾暴发猪链球菌疫情,大量生猪发病死亡的同时,也导致部... 详细信息

【目的】猪链球菌(Streptococcus suis)是猪的重要致病菌,同时也是一种人畜共患病原。屠宰场健康猪的猪链球菌感染率较高,血清型多而复杂,是人和猪的重要传染源。四川、广西两地都曾暴发猪链球菌疫情,大量生猪发病死亡的同时,也导致部分与病猪有密切接触的人群发病死亡。因此,对上述两地区屠宰场进行猪链球菌感染调查,明确其致病特征,具有重要公共卫生意义。【方法】本研究自2021‒2022年采集广西、四川两地屠宰场健康猪扁桃体,分离鉴定猪链球菌并进行血清型分型,对分离株进行斑马鱼毒力、小鼠毒力试验,并对毒力株进行基因组测序,进行多序列位点分型(multilocus sequence typing,MLST)及毒力标志基因分析,探究其致病特征。【结果】广西57份健康猪扁桃体样品猪链球菌阳性率为84.21%(48/57),分离鉴定出60株猪链球菌,其中分离率最高的是血清31型(16.67%,10/60),其次为9型(11.67%,7/60)、4型(10.00%,6/60)、12型(8.33%,5/60)等,2型菌株仅分离出1株,含2种及以上不同血清型猪链球菌的扁桃体占33.33%(16/48);四川250份健康猪扁桃体样品猪链球菌阳性率为10.8%(27/250),分离鉴定出41株猪链球菌,其中分离率最高的血清型为31型(34.15%,14/41),其次为16型(17.07%,7/41)、9型(12.20%,5/41)、28型(9.76%,4/41)等,2型菌株仅分离出1株,含有2种以上不同血清型的扁桃体占33.33%(9/27)。选择44株不同血清型的代表菌株(广西28株,四川16株)进行斑马鱼毒力试验,结果显示,5株菌株对斑马鱼致病性较强,攻毒计量在3×106 CFU/尾时,对斑马鱼的致死率高达70%‒100%,其中广西3株分别为2型、9型和新荚膜基因簇(novel capsular polysaccharide loci,NCL)18型,四川2株分别为2型和9型。对上述5株毒力株进行小鼠毒力试验,结果显示4株菌株致死率高达80%‒100%,1株致死率为60%,与斑马鱼试验较为相符。MLST及毒力标志基因分析表明,2株血清2型菌株均为ST1型及mrp+、epf+、sly+毒力型,为世界范围内广泛流行的具有人畜共患潜力的致病型菌株;2株血清9型菌株毒力型均为mrp‒、epf‒和sly‒,ST型分别为ST1198和ST2104,1株NCL18型菌株为ST2102型和mrp+、epf‒、sly‒毒力型。【结论】上述结果表明,两地屠宰场猪链球菌的感染情况存在差异,广西屠宰场猪链球菌分离率较高,都存在世界范围内广泛流行的具有人畜共患潜能的血清2型ST1毒力株,公共卫生意义值得关注。

关键词：猪链球菌广西四川屠宰场健康猪致病特征

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源于屠宰场健康猪的猪链球菌分离菌株致病与耐药特征

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微生物学报 2024年

作者：许杨王瑞光彭泽仁吴宗福南京农业大学动物医学院农业农村部动物细菌学重点实验室世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室广东省养猪与猪病防控技术研究企业重点实验室

【目的】猪链球菌（Streptococcus suis， SS）是猪的常见致病菌，也是一种人畜共患病原。江苏曾于1998年暴发猪链球菌疫情，大量生猪死亡的同时，也导致14人感染死亡。因此，对江苏地区屠宰场健康猪进行猪链球菌感染调查，有重大的公... 详细信息

【目的】猪链球菌（Streptococcus suis， SS）是猪的常见致病菌，也是一种人畜共患病原。江苏曾于1998年暴发猪链球菌疫情，大量生猪死亡的同时，也导致14人感染死亡。因此，对江苏地区屠宰场健康猪进行猪链球菌感染调查，有重大的公共卫生意义。【方法】于2023年采集江苏两地屠宰场猪扁桃体，进行猪链球菌分离鉴定和血清分型，通过所分离菌株对斑马鱼和小鼠毒力测定、药敏试验及耐药基因检测，探究猪链球菌分离菌株的致病和耐药特征。【结果】2023年7月采集江苏昆山地区扁桃体样本阳性率为50.85% （30/59），分离鉴定出62株猪链球菌，其中分离率最高为31型（12.90%，8/62），其次为19型（11.29%，7/62）、NCL2型（8.06%，5/62）等；2023年7月、11月采集江苏丹阳地区扁桃体样本阳性率为60.71% （34/56），分离鉴定出77株猪链球菌，其中分离率最高为16型（11.69%，9/77），其次为9型（10.39%，8/77）、21型（10.39%，8/77）、31型（10.39%，8/77）等。两地分离株对林可酰胺类（98.56%，137/139）、大环内酯类（95.68%，133/139）、四环素类（96.40%，134/139）抗生素耐药率较高；97.84% （136/139）的菌株属于多重耐药菌株。所有菌株对头孢噻肟、万古霉素敏感。根据分离株来源及血清型选择42株（昆山市18株，丹阳市24株）代表菌株进行斑马鱼毒力测定，攻毒剂量为3×106CFU/尾时，有7株菌对斑马鱼致病力强，致死率≥80%。选择致死率≥80%且死亡趋势与强度对照无显著差异的3株代表菌株（分别为血清1型、3型、23型）进行小鼠试验，致死率均≥80%。【结论】江苏地区健康猪扁桃体的猪链球菌携带率较高（55.65%，64/115），97.84% （136/139）的分离株为多重耐药菌株，血清1型、3型、23型分离株致病力强，值得关注。

关键词：猪链球菌屠宰场江苏耐药特征致病特征

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依福地平对猪流行性腹泻病毒的抑制作用研究

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畜牧与兽医 2024年第3期56卷 62-68页

作者：张财盛陈欢司安琪赵普齐传翔钱莺娟郑龙三戴建君南京农业大学动物医学院/教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室/农业农村部细菌学重点实验室江苏南京210095

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)是猪流行性腹泻(PED)的病原。本研究通过CCK-8、细胞ELISA、Western blot、时间过程分析、药物抑制病毒吸附和入胞试验,探究了依福地平对PEDV的抑制作用。结果表明,依福地平在2... 详细信息

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)是猪流行性腹泻(PED)的病原。本研究通过CCK-8、细胞ELISA、Western blot、时间过程分析、药物抑制病毒吸附和入胞试验,探究了依福地平对PEDV的抑制作用。结果表明,依福地平在20μmol/L浓度范围内,对Vero-E6和Marc-145细胞毒性较低;Western blot结果表明,依福地平能够显著降低宿主细胞中PEDV-N蛋白水平,主要抑制PEDV感染的入胞阶段。研究还发现,依福地平能抑制Ⅰ型单纯疱疹病毒和猪伪狂犬病毒感染宿主细胞,是一类潜在的广谱抗病毒药物。

关键词：猪流行性腹泻病毒依福地平病毒入胞广谱抗病毒效应

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乙酰基转移酶毒素SsGNAT影响猪链球菌的黏附能力

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微生物学报 2023年第9期63卷 3574-3590页

作者：朱夏雨古其兵杨雪梅姚火春潘子豪南京农业大学动物医学院江苏南京210014 农业部动物细菌学重点实验室江苏南京210014 世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室江苏南京210014 南靖县农业农村局福建南靖363600

【目的】猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人畜共患病病原,本研究旨在鉴定猪链球菌乙酰基转移酶毒素类毒素-抗毒素系统,并对其毒素功能进行分析,探讨猪链球菌毒素-抗毒素系统在细菌感染过程中发挥的作用。【方法】前期预测猪... 详细信息

【目的】猪链球菌(Streptococcus suis)是一种重要的人畜共患病病原,本研究旨在鉴定猪链球菌乙酰基转移酶毒素类毒素-抗毒素系统,并对其毒素功能进行分析,探讨猪链球菌毒素-抗毒素系统在细菌感染过程中发挥的作用。【方法】前期预测猪链球菌血清型5型菌株HN105基因组中假定的Ⅱ型毒素-抗毒素系统。进一步鉴定毒素-抗毒素系统的活性并分析该毒素-抗毒素系统的遗传进化关系;运用Western blotting揭示毒素在猪链球菌内的表达情况。同时以HN105为亲本株,构建毒素缺失株、抗毒素缺失株以及毒素-抗毒素缺失株,研究该系统对猪链球菌黏附能力、生物被膜形成能力、抗吞噬与胞内存活能力的影响。【结果】预测并鉴定出猪链球菌血清型5型菌株HN105基因组中DF184_RS00980-DF184_RS00985编码的乙酰基转移酶(Gcn5-related N-acetyltransferase,GNAT)毒素类毒素-抗毒素系统,根据保守结构域将该系统命名为SsMarR-SsGNAT。SsGNAT毒素在大肠杆菌(Escherichia coli)的周质间隙发挥毒性作用,且抗毒素可以中和毒素的毒性;猪链球菌SsGNAT毒素与目前已鉴定的乙酰基转移酶毒素氨基酸序列一致性较低且亲缘关系较远;SsGNAT毒素在猪链球菌内存在被切割的现象,且抗毒素表达量降低可上调SsGNAT毒素的表达量;SsGNAT毒素对猪链球菌的生物被膜形成能力、抗吞噬与胞内存活能力无影响,但可影响猪链球菌对人喉癌上皮细胞(human laryngeal cancer epithelial cells,Hep-2)和人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)的黏附能力。【结论】发现并鉴定了猪链球菌中新的Ⅱ型毒素-抗毒素系统SsMarR-SsGNAT,SsGNAT毒素在大肠杆菌周质间隙发挥毒性作用,缺失后导致细菌对细胞的黏附水平显著上升,该发现为进一步揭示猪链球菌的致病机制提供参考。

关键词： 5型猪链球菌毒素-抗毒素系统毒素乙酰基转移酶黏附

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2023年江苏地区屠宰场健康猪源猪链球菌致病与耐药特征

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微生物学报 2025年第1期65卷 211-224页

作者：许杨王瑞光彭泽仁吴宗福南京农业大学动物医学院江苏南京210014 农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京210014 世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室江苏南京210014 广东省养猪与猪病防控技术研究企业重点实验室广东海大畜牧兽医研究院广东广州511400

【目的】猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是猪的常见致病菌,也是一种人畜共患病原。江苏曾于1998年暴发猪链球菌疫情,大量生猪死亡的同时,也导致14人感染死亡。因此,对江苏地区屠宰场健康猪进行猪链球菌感染调查,具有公共卫生意义。【... 详细信息

【目的】猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是猪的常见致病菌,也是一种人畜共患病原。江苏曾于1998年暴发猪链球菌疫情,大量生猪死亡的同时,也导致14人感染死亡。因此,对江苏地区屠宰场健康猪进行猪链球菌感染调查,具有公共卫生意义。【方法】于2023年采集江苏两地屠宰场健康猪扁桃体,进行猪链球菌分离鉴定和血清分型,通过所分离菌株对斑马鱼和小鼠毒力测定、药敏试验及耐药基因检测,探究猪链球菌分离菌株的致病和耐药特征。【结果】2023年7月采集江苏昆山地区扁桃体样本,阳性率为50.85%(30/59),分离鉴定出62株猪链球菌,其中分离率最高为31型(12.90%,8/62),其次为19型(11.29%,7/62)、NCL2型(8.06%,5/62)等;2023年7月、11月采集江苏丹阳地区扁桃体样本,阳性率为60.71%(34/56),分离鉴定出77株猪链球菌,其中分离率最高为16型(11.69%,9/77),其次为9型(10.39%,8/77)、21型(10.39%,8/77)、31型(10.39%,8/77)等。两地分离株对林可酰胺类(98.56%,137/139)、大环内酯类(95.68%,133/139)、四环素类(96.40%,134/139)抗生素耐药率较高;97.84%(136/139)的菌株属于多重耐药菌株。所有菌株对头孢噻肟、万古霉素敏感。根据分离株来源及血清型选择42株(昆山市18株,丹阳市24株)代表菌株进行斑马鱼毒力测定,攻毒剂量为3×106 CFU/尾时,有7株菌对斑马鱼致病力强,致死率≥80.00%。选择致死率≥80.00%且死亡趋势与强度对照无显著差异的3株代表菌株(分别为血清1型、3型、23型)进行小鼠试验,致死率均≥80.00%。【结论】江苏地区健康猪扁桃体的猪链球菌携带率较高(55.65%,64/115),97.84%(136/139)的分离株为多重耐药菌株,血清1型、3型、23型分离株致病力强,值得关注。

关键词：猪链球菌屠宰场江苏耐药特征致病特征

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EAEC噬菌体PNJ1809-11和PNJ1809-13作为环境消毒剂的杀菌效果评估

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微生物学报 2021年第7期61卷 2018-2030页

作者：钱新杰李一昊曾颃殷晗杰王瑜欣黄豪圣巩倩雯李德志薛峰汤芳戴建君南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室江苏南京210095

【目的】分析2株肠聚集性大肠杆菌(EAEC)CVCC232噬菌体PNJ1809-11、PNJ1809-13的生物学特性,并对其作为环境消毒剂的杀菌效果进行评估。【方法】透射电镜下观察PNJ1809-11、PNJ1809-13的形态;通过宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长... 详细信息

【目的】分析2株肠聚集性大肠杆菌(EAEC)CVCC232噬菌体PNJ1809-11、PNJ1809-13的生物学特性,并对其作为环境消毒剂的杀菌效果进行评估。【方法】透射电镜下观察PNJ1809-11、PNJ1809-13的形态;通过宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、对pH和温度耐受性的测定分析PNJ1809-11、PNJ1809-13的生物学特性;比较2株噬菌体的体外杀菌效果和喷雾、雾化处理后的杀菌效果;检测噬菌体在模拟养殖环境下的耐受性,及喷雾处理的噬菌体制剂在模拟养殖环境下的杀菌效果和对宿主菌生物被膜的清除效果;分析宿主菌的抗性突变率。【结果】电镜下观察PNJ1809-11、PNJ1809-13均为肌尾病毒科噬菌体;PNJ1809-11可裂解155株大肠杆菌,PNJ1809-13可裂解46株大肠杆菌;噬菌体PNJ1809-11、PNJ1809-13的最佳感染复数(MOI)均为10,最适pH均为7;与PNJ1809-13相比,PNJ1809-11具有较好的热稳定性;在模拟的封闭装置中,将两株噬菌体分别经喷雾、雾化处理后,二者对宿主菌的杀灭效果均可达99%以上;对人工污染的粪便表面细菌的杀灭效果均达到99%以上。噬菌体PNJ1809-11、PNJ1809-13及两者的混合制剂(噬菌体鸡尾酒)对宿主菌CVCC232形成的生物被膜的裂解效率分别为78%、30%和83%。噬菌体PNJ1809-11在养殖温度、粪便pH以及阳光照射下,其耐受性均强于PNJ1809-13。宿主菌对PNJ1809-11、PNJ1809-13的抗性突变率分别为2.5×10^(-3)和1.0×10^(-3)。【结论】综上,噬菌体PNJ1809-11的环境耐受力更强,噬菌体鸡尾酒对生物被膜的裂解效果更好,提示噬菌体PNJ1809-13或噬菌体鸡尾酒经喷雾处理后具有作为环境杀菌剂的潜力。

关键词：噬菌体噬菌体鸡尾酒消毒剂耐受性生物被膜

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猪伪狂犬病病毒ZJ01ΔgI/gE/TK株种子批的免疫原性鉴定

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中国兽医科学 2022年第7期52卷 861-866页

作者：姜辰龙马梓承吕林刘星白娟孙杨杨姜平南京农业大学动物医学院农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京210095

本研究选用30头28~30日龄猪伪狂犬病病毒(PRV)阴性仔猪,随机分为6组,每组5头,第1~5组分别接种F1、F5、F20、F30、F35代次PRV TK/gE/gI基因缺失毒株ZJ01R病毒液,接种剂量为每头106.0 TCID50,第6组为非免疫对照组。接种后第28天用PRV ZJ0... 详细信息

本研究选用30头28~30日龄猪伪狂犬病病毒(PRV)阴性仔猪,随机分为6组,每组5头,第1~5组分别接种F1、F5、F20、F30、F35代次PRV TK/gE/gI基因缺失毒株ZJ01R病毒液,接种剂量为每头106.0 TCID50,第6组为非免疫对照组。接种后第28天用PRV ZJ01株攻击,结果显示,5个代次疫苗病毒免疫组猪PRV gB血清抗体均为阳性,gE抗体均为阴性,PRV ZJ01特异性中和抗体效价可达1∶32以上。用PRV ZJ01株强毒滴鼻攻击后,非免疫攻毒对照组猪出现严重的临床症状,表现明显的呼吸道症状与神经症状,3/5头猪死亡。5个代次ZJ01R免疫组猪攻毒后均无明显临床症状,脑组织PRV载量均明显低于攻毒对照组(P<0.05),免疫保护效力达100%。证明该疫苗毒株免疫原性稳定,可用于疫苗研制。

关键词：伪狂犬病病毒三基因缺失免疫原性稳定性

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HEK-293T细胞敲除TRIM25基因促进脑心肌炎病毒复制的研究

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畜牧与兽医 2022年第6期54卷 78-84页

作者：刘文文吕林朱慧欣延君芳姜平白娟南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京210095

为了探究三方基序蛋白25(TRIM25)对脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)增殖的影响,在HEK-293T细胞上使用簇状规则间隔的短回文重复序列(CRISPR/Cas9)基因编辑技术敲除TRIM25基因,并通过PCR测序和Western blot确认敲除效果,然后观察敲除细胞形态并利用试剂盒测定TRIM25缺失后细胞增殖速度的变化,确认敲除细胞与野生细胞无明显差异,用EMCV感染敲除细胞后,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、病毒滴定测定和Western blot等方法测定病毒基因转录水平、蛋白表达情况。结果显示:感染EMCV后,敲除细胞与野生细胞相比,显著促进了病毒的转录水平、病毒蛋白的翻译水平和子代病毒的毒力(P<0.05)。综上,在HEK-293T细胞上,成功构建TRIM25缺失细胞系,且试验表明TRIM25的缺失有助于EMCV的复制。研究结果为后续TRIM25抗病毒机制研究提供了理论依据。

关键词： TRIM25基因基因敲除 HEK-293T细胞脑心肌炎病毒

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猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

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畜牧与兽医 2022年第6期54卷 91-96页

作者：王梦婕张杰孙杨杨白娟刘星姜平南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京210095

为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白单克隆抗体,将PRRSV类NADC30毒株FJ1402的M蛋白胞外区基因与TAT穿膜肽基因融合,密码子按大肠杆菌偏嗜性优化,构建了大肠杆菌表达质粒,制备获得重组M蛋白。取6周龄雌性BALB/c小鼠免疫重组蛋白,... 详细信息

为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白单克隆抗体,将PRRSV类NADC30毒株FJ1402的M蛋白胞外区基因与TAT穿膜肽基因融合,密码子按大肠杆菌偏嗜性优化,构建了大肠杆菌表达质粒,制备获得重组M蛋白。取6周龄雌性BALB/c小鼠免疫重组蛋白,将脾脏淋巴细胞和SP2/0细胞融合,用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株,获得4株分泌M蛋白抗体的杂交瘤细胞株。其中1E7、2F7、3A12的细胞上清液抗体效价为1∶3200,3G7的细胞上清液抗体效价为1∶800,传至第15代均能稳定分泌抗体。单抗经亚型鉴定可知1E7、2F7、3A12的重链类型为Ig2a,3G7的重链类型为IgG1,轻链类型都为κ型。经间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot鉴定,4株单克隆抗体均可与PRRSV产生特异性反应,鉴定出2个抗原表位,为PRRSV诊断和疫苗研制奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白单克隆抗体

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猪链球菌检测技术研究进展

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微生物学报 2025年第3期65卷 883-897页

作者：李繁彭泽仁刘荣启孙洁吴宗福深圳市动植物疫病预防控制中心广东深圳南京农业大学动物医学院江苏南京农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室江苏南京深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳

猪链球菌(Streptococcus suis)是猪的重要致病菌,能够引发猪的脑膜炎、败血症、关节炎等多种疾病,给养猪业带来严重的经济损失。此外,该菌也能感染人类,导致疾病甚至死亡,是重要的人兽共患病原菌。因此,建立准确、快速、灵敏且简便的检... 详细信息

猪链球菌(Streptococcus suis)是猪的重要致病菌,能够引发猪的脑膜炎、败血症、关节炎等多种疾病,给养猪业带来严重的经济损失。此外,该菌也能感染人类,导致疾病甚至死亡,是重要的人兽共患病原菌。因此,建立准确、快速、灵敏且简便的检测技术对于猪链球菌病的防控至关重要。目前,国内外已开发出多种猪链球菌检测技术,包括传统的微生物学、分子生物学、免疫学方法,以及基于纳米材料的免疫传感器、CRISPR-Cas12a系统、基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱等新型检测技术。本综述概述了上述技术的原理、应用及其优缺点,并探讨了猪链球菌检测技术未来的发展方向,旨在为猪链球菌病的防控提供重要参考。

关键词：猪链球菌免疫学检测分子生物学检测方法 CRISPR-Cas12a 免疫传感器

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