检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医科学 2021年第8期51卷 1015-1022页

作者：祝可心于栋安家慧李玉峰南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点开放实验室江苏南京210095

为评价副猪嗜血杆菌标准血清5型菌株(HPS-5)抗原抗体复合物疫苗对小鼠的免疫保护效果,选用40只ICR小鼠,随机分为5组(每组8只),分别设为灭活疫苗组、抗原抗体复合物疫苗组、阴性对照组、攻毒对照组和空白组。将制备的疫苗接种小鼠,在首... 详细信息

为评价副猪嗜血杆菌标准血清5型菌株(HPS-5)抗原抗体复合物疫苗对小鼠的免疫保护效果,选用40只ICR小鼠,随机分为5组(每组8只),分别设为灭活疫苗组、抗原抗体复合物疫苗组、阴性对照组、攻毒对照组和空白组。将制备的疫苗接种小鼠,在首次免疫前、首次免疫2周后、二次免疫2周后分别采集小鼠血清通过间接ELISA方法检测抗体水平。二次免疫2周后,每组随机取3只小鼠分离外周血淋巴细胞并提取总RNA进行反转录,通过SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测小鼠细胞因子水平。随后,用HPS-5攻毒,观察7 d,计算免疫保护率。取每组小鼠的肺和脾,制作病理切片后置于显微镜下观察。结果显示:抗原抗体复合物疫苗组刺激小鼠产生的TNF-α、IL-6、IFN-γ细胞因子水平与灭活疫苗组、阴性对照组相当(P>0.05),IL-10细胞因子水平显著低于这两组(P<0.05)。抗原抗体复合物疫苗组的D_(450,IgG2a)/D_(450,IgG1)值(0.76)显著高于灭活疫苗组(0.54)和阴性对照组(0.55)(P<0.01)。灭活疫苗组与抗原抗体复合物疫苗组小鼠的存活率均为60%,病理切片结果显示,抗原抗体复合物疫苗组对肺、脾的保护作用略优于灭活疫苗组。以上结果提示,制备的抗原抗体复合物疫苗可能通过下调Th2型反应从而维持Th1/Th2型免疫反应平衡,同时可以降低小鼠机体的炎性反应,具有较好的免疫保护效果,为研究抗原抗体复合物疫苗预防副猪嗜血杆菌感染奠定了理论基础。

关键词：副猪嗜血杆菌抗原抗体复合物疫苗 Th1/Th2平衡存活率病理变化

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副猪格拉瑟菌感染的研究进展

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畜牧与兽医 2025年第06期 121-127页

作者：杨凯一李玉峰南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点开放实验室

副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)是一种常见于猪上呼吸道的共生菌，在一定条件下可侵入宿主并引发严重的全身性疾病，表现为多发性纤维素性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等。GPS常与其他病原菌如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒... 详细信息

副猪格拉瑟菌(Glaesserella parasuis,GPS)是一种常见于猪上呼吸道的共生菌，在一定条件下可侵入宿主并引发严重的全身性疾病，表现为多发性纤维素性浆膜炎、关节炎和脑膜炎等。GPS常与其他病原菌如猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒等混合感染，严重危害生猪特别是保育期仔猪的健康。在现代化猪场中，该病频繁发生，对养猪行业造成了严重的经济损失。本文综述了GPS感染的临床病理特征、流行病学、诊断、预防和治疗等方面的最新研究进展，旨在为副猪格拉瑟病的临床诊治及科学研究提供参考。

关键词：副猪格拉瑟菌流行病学诊断防控

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重庆屠宰场猪链球菌感染的调查

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畜牧与兽医 2022年第6期54卷 58-65页

作者：都玉刘召颖彭泽仁吴宗福南京农业大学动物医学院江苏南京210095 农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京210095 世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室江苏南京210095

旨在调查2021年重庆地区屠宰场表观健康猪群中猪链球菌的血清型、耐药和毒力特征,为制定该地区猪链球菌病的防控策略提供参考。以2021年重庆地区屠宰场表观健康猪扁桃体样品为试验材料,分离猪链球菌并对菌株进行血清型分型、耐药基因检... 详细信息

旨在调查2021年重庆地区屠宰场表观健康猪群中猪链球菌的血清型、耐药和毒力特征,为制定该地区猪链球菌病的防控策略提供参考。以2021年重庆地区屠宰场表观健康猪扁桃体样品为试验材料,分离猪链球菌并对菌株进行血清型分型、耐药基因检测、药敏试验、斑马鱼毒力试验,分析猪链球菌的流行特征。结果显示:2021年5—6月于重庆屠宰场共采集表观健康猪扁桃体154份,检出猪链球菌阳性样本80份(51.95%),从中分离到菌株87株;主要血清型分别为16型(16.09%,14/87)、9型(9.20%,8/87)、4型(8.05%,7/87),而血清2型检出率较低,占比4.60%(4/87)。分离株对林可酰胺类、四环素类、大环内酯类抗生素耐药率较高,分别为100%(87/87)、95.40%(83/87)、93.10%(81/87);对氨基糖苷类抗生素耐药率为59.77%(52/87);对利奈唑胺、β-内酰胺类、万古霉素、利福平的耐药率较低,分别为5.75%(5/87)、5.75%(5/87)、0(0/87)、0(0/87);96.55%(84株)的菌株对3类及以上的抗菌药耐药,属于多重耐药菌株。选取19株猪链球菌代表菌株进行斑马鱼攻毒试验,结果显示78.95%(15/19)的菌株对斑马鱼致死率≤33.33%,但血清3型菌株2021WUSS071和新荚膜基因簇-7(NCL-7)菌株2021WUSS102对斑马鱼的致死率高,分别为93.33%、86.67%,属于强毒株;菌株2021WUSS067和2021WUSS082对斑马鱼的致死率分别为60.00%、40.00%,属于中等毒力菌株。研究表明,重庆地区屠宰场猪群中猪链球菌流行率较高且血清型复杂,绝大多数菌株属于多药耐药,且存在毒力较强的菌株,需引起重视。

关键词：猪链球菌健康猪耐药毒力重庆

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特异性识别K1荚膜大肠杆菌的噬菌体PNJ1809-36生物学特性及全基因组分析

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畜牧兽医学报 2021年第6期52卷 1677-1688页

作者：巩倩雯李一昊曾颃于沛欣钱新杰王瑜欣戴建君汤芳南京农业大学动物医学院教育部动物健康与食品安全国际联合实验室农业农村部细菌学重点实验室南京210095

本研究以K1荚膜大肠杆菌DE058(avian pathogenic Escherichia coli )为宿主菌,从鸡粪中分离烈性噬菌体PNJ1809-36并对其进行生物学特性的研究和基因组测序及分析。将噬菌体PNJ1809-36进行分离纯化,通过形态学观察、最佳MOI测定、一步生... 详细信息

本研究以K1荚膜大肠杆菌DE058(avian pathogenic Escherichia coli )为宿主菌,从鸡粪中分离烈性噬菌体PNJ1809-36并对其进行生物学特性的研究和基因组测序及分析。将噬菌体PNJ1809-36进行分离纯化,通过形态学观察、最佳MOI测定、一步生长曲线测定、温度和酸碱耐受性测定、体外裂解能力测定以及全基因组测序及分析来研究该噬菌体的生物学特性和基因组特征。结果显示:噬菌体PNJ1809-36能够形成清晰透明的噬菌斑,其电镜照片显示为具有收缩尾部的肌尾科噬菌体;宿主谱分析结果显示,该噬菌体能够特异性裂解具有K1荚膜的大肠杆菌;最佳MOI为0.01;一步生长曲线结果显示,其潜伏期为10 min,爆发期为40 min;噬菌体PNJ1809-36在40和50 ℃下存活良好,60 ℃ 30 min可使噬菌体完全失活;噬菌体在pH3~11之间均可存活,最适pH为6;体外裂解试验表明,该噬菌体可在6 h内完全抑制宿主菌的生长。经基因组测序与分析,噬菌体PNJ1809-36基因组全长为152 343 bp,GC含量为39.11%,含有277个开放阅读框(ORF),11个tRNA基因。同源性分析显示其与早期发现的K1特异性的短尾噬菌体(如K1F、K1E)的同源性较低,而与噬菌体nepoznato、PVP-SE 1和phAPEC8等K1特异性噬菌体同源性较高,基因序列相似性达90%。噬菌体PNJ1809-36是一株特异性识别K1荚膜大肠杆菌的烈性噬菌体,属于肌尾科噬菌体新的系统发育分支。其针对K1荚膜的特性,提示该噬菌体在鉴定K1型大肠杆菌和治疗K1型大肠杆菌引起的疾病方面存在潜力。

关键词：噬菌体 K1荚膜大肠杆菌生物学特性全基因组分析

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白在昆虫细胞中的可溶性表达

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畜牧与兽医 2021年第6期53卷 99-103页

作者：尹园英高雁怩夏婷婷白娟姜平南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室江苏南京210095

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白是该病毒基因工程亚单位疫苗研究的重要靶向抗原,基因变异较大,且难以高效表达。本研究通过比对美洲型PRRSV 3种基因亚型的代表性毒株GP5蛋白的氨基酸序列,选取其同源性较高的氨基酸序列组合为杂合... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白是该病毒基因工程亚单位疫苗研究的重要靶向抗原,基因变异较大,且难以高效表达。本研究通过比对美洲型PRRSV 3种基因亚型的代表性毒株GP5蛋白的氨基酸序列,选取其同源性较高的氨基酸序列组合为杂合GP5(xGP5m),并在其N端分别添加3种穿膜肽序列(TAT、ppTG20、MPG),克隆至杆状病毒表达载体pFastBac^(TM)Dual,构建获得4株重组杆状病毒,Western blot、间接免疫荧光试验和小鼠试验结果显示,TAT能明显提高GP5蛋白的可溶性表达水平,且能增强小鼠对GP5蛋白的免疫应答能力,为PRRSV亚单位疫苗的研制奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 穿膜肽杆状病毒表达系统

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猪链球菌分子流行病学研究方法

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微生物学报 2021年第12期61卷 3928-3936页

作者：杨诗鑫卞晨吴宗福南京农业大学动物医学院江苏南京210014 农业部动物细菌学重点实验室江苏南京210014 世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室江苏南京210014

猪链球菌(Streptococcus suis)是猪重要的细菌性病原,它可以导致猪的脑膜炎、败血症和关节炎等症状,给养猪业带来严重经济损失;同时该菌还可感染人,是一种人畜共患病原菌。应用分子流行病学方法,阐明猪链球菌病的流行病学特征,明确其毒... 详细信息

猪链球菌(Streptococcus suis)是猪重要的细菌性病原,它可以导致猪的脑膜炎、败血症和关节炎等症状,给养猪业带来严重经济损失;同时该菌还可感染人,是一种人畜共患病原菌。应用分子流行病学方法,阐明猪链球菌病的流行病学特征,明确其毒力分型、时空分布、传播途径、传染源,确定传播的遗传决定因素等,将有助于猪链球菌病的防控。目前常用的分子流行病学方法主要有多位点序列分型、脉冲场凝胶电泳、全基因组测序和基于PCR的方法等。本文介绍了上述方法的原理以及在猪链球菌流行病学中的应用,并分析这几种方法的优缺点,从而为更好地揭示猪链球菌流行病学特征、制定猪链球菌病的防控策略提供参考。

关键词：猪链球菌流行病学多位点序列分型脉冲凝胶电泳全基因组测序

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非洲猪瘟病毒pp62蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

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中国兽医科学 2022年第5期52卷 579-585页

作者：储珺赵普张婕妮王振忠苗雨润鲍晨沂郑龙三吴晓东钱莺娟戴建君南京农业大学动物医学院教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室和农业部细菌学重点实验室江苏南京210095 中国动物卫生与流行病学中心国家非洲猪瘟参考实验室山东青岛266000

pp62蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)CP530R基因编码的多聚蛋白前体,可被蛋白水解酶切割形成成熟蛋白p35、p15和p8,与pp220多聚蛋白前体的加工产物组装成病毒核壳。本研究参考ASFV China/2018/AnhuiXCGQ毒株基因序列,分析后选取CP530R基因N端(... 详细信息

pp62蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)CP530R基因编码的多聚蛋白前体,可被蛋白水解酶切割形成成熟蛋白p35、p15和p8,与pp220多聚蛋白前体的加工产物组装成病毒核壳。本研究参考ASFV China/2018/AnhuiXCGQ毒株基因序列,分析后选取CP530R基因N端(1—612 bp)及C端(784—1593 bp),分别构建原核表达质粒pET-28a-pp62-N和pET-28a-pp62-C;转化Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达pp62蛋白;再用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和阳性克隆筛选后,获得4株可稳定分泌pp62单克隆抗体的杂交瘤细胞。Western-blot检测ASFV感染PAM细胞中pp62剪切体的结果显示,1株仅识别pp62蛋白,1株仅识别p35蛋白,1株仅识别p15蛋白,1株可识别pp62和p8蛋白。IFA鉴定结果显示,4株均能与ASFV感染PAM细胞产生特异性绿色荧光。本研究为建立ASFV诊断方法和研究pp62的生物学功能奠定了生物材料基础。

关键词：非洲猪瘟病毒 pp62蛋白单克隆抗体

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法氏囊活性肽BP7调节鸡未成熟B细胞的基因表达谱及功能分析

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畜牧与兽医 2021年第4期53卷 82-88页

作者：李彤彤张则陈佳静李陈飞卢安然周广防冯秀丽南京农业大学动物医学院/农业部动物细菌学重点实验室/教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室江苏南京210095

试验旨在探索法氏囊活性肽BP7调节鸡未成熟B细胞的分子基础。利用BP7刺激禽前B淋巴细胞DT40细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测IgM的mRNA水平,并采用基因芯片分析基因表达谱及其生物学功能。结果显示,BP7刺激的DT40细胞产生IgM的mRNA水平... 详细信息

试验旨在探索法氏囊活性肽BP7调节鸡未成熟B细胞的分子基础。利用BP7刺激禽前B淋巴细胞DT40细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测IgM的mRNA水平,并采用基因芯片分析基因表达谱及其生物学功能。结果显示,BP7刺激的DT40细胞产生IgM的mRNA水平明显升高。基因芯片分析发现,BP7处理的DT40细胞中共有1345个差异表达基因。通路分析发现,BP7诱导DT40细胞的差异表达基因涉及17条通路,包括受体互作、信号通路、代谢和蛋白质分解相关通路等。通路网络分析发现,细胞因子-细胞因子受体互作是BP7刺激后DT40细胞相关途径中的关键通路。基因本体论(GO)功能分析发现,BP7刺激DT40细胞中涉及的免疫相关功能主要包括免疫应答、免疫应答信号、Th1型免疫应答、细胞因子的产生和调节及其受体活性等方面。该研究阐述了法氏囊活性肽BP7调节禽未成熟B细胞的分子基础,为进一步研究法氏囊活性肽调控B细胞分化的分子机制提供了新的数据。

关键词：法氏囊活性肽BP7 DT40细胞基因表达谱通路分析生物学功能

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牛结节性皮肤病病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立与应用

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畜牧与兽医 2022年第11期54卷 100-105页

作者：伍子昂南文龙吴晓东王怡王俊荣高雁怩白娟杨振姜平南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室/“一带一路”国际重大跨境动物疫病诊断与免疫专业科技创新院江苏南京210095 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032

牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)是近年来我国新出现的一种牛传染性疾病。本研究根据LSD病毒(LSDV)的LSD022基因保守区域,设计出引物和探针,经过反应条件优化,建立了TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,测试了其敏感性、特异性和... 详细信息

牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)是近年来我国新出现的一种牛传染性疾病。本研究根据LSD病毒(LSDV)的LSD022基因保守区域,设计出引物和探针,经过反应条件优化,建立了TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,测试了其敏感性、特异性和重复性。结果发现,本方法敏感性达到15 copies/μL,不与其他牛病病毒和山羊痘弱毒疫苗AV41发生反应,变异系数均小于3%。用本方法和OIE推荐的普通PCR方法检测发病牛场94份临床样品,LSDV检出率分别为62%和37%,其中阳性样品2种方法检测符合率为96.7%,说明本方法敏感性、特异性和重复性较好,可用于LSDV检测。

关键词：牛结节性皮肤病 TaqMan探针实时荧光定量PCR

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法氏囊活性肽BP7和BP9调节T细胞的功能研究

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畜牧与兽医 2021年第5期53卷 88-93页

作者：张则郑阳郝珊珊蔡佳希冯秀丽南京农业大学动物医学院/农业农村部动物细菌学重点实验室/教育部“动物健康与食品安全”国际合作联合实验室江苏南京210095

旨在探索法氏囊活性肽BP7和BP9调节T细胞亚型的功能。采用禽流感灭活疫苗免疫小鼠,利用磁珠CD3阴选分选免疫小鼠T细胞,再用法氏囊多肽BP7和BP9刺激T细胞,检测T细胞活力及亚型变化情况。MTT结果表明,BP7和BP9均能提高活化T细胞的活力水平... 详细信息

旨在探索法氏囊活性肽BP7和BP9调节T细胞亚型的功能。采用禽流感灭活疫苗免疫小鼠,利用磁珠CD3阴选分选免疫小鼠T细胞,再用法氏囊多肽BP7和BP9刺激T细胞,检测T细胞活力及亚型变化情况。MTT结果表明,BP7和BP9均能提高活化T细胞的活力水平;流式分析图显示,法氏囊多肽BP7促进活化T细胞增殖分化成CD3^(+)CD4^(+)T细胞和CD3^(+)CD8^(+) T细胞,而BP9在48 h促进CD3^(+)CD8^(+) T细胞比例增加,但未达到差异水平;细胞凋亡结果显示,BP7和BP9均能抑制T淋巴细胞早期凋亡。此外,ELISA检测表明,BP7促进T细胞分泌IL-4和IFN-γ。以上结果表明:法氏囊活性肽BP7和BP9均参与T细胞分化成熟反应,但其调节功能略有差异。

关键词：法氏囊活性肽BP7 BP9 H9N2灭活疫苗 T细胞亚型

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