检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2022年第7期54卷 115-121页

作者：金慧琴赵冬杜旭彬单衍可刘斐南京农业大学动物医学院单分子纳米生物学实验室江苏南京210095

旨在研究三丁酸甘油酯和氧化苦参碱及其复合物对肉仔鸡生长性能、血清指标、抗氧化能力和肠道形态结构的影响。选取1日龄爱拔益加(AA)肉鸡公雏250只,随机分为5组,每组5个重复,每个重复10只。对照组(CON)饲喂基础饲粮,三丁酸甘油酯组(TBP... 详细信息

旨在研究三丁酸甘油酯和氧化苦参碱及其复合物对肉仔鸡生长性能、血清指标、抗氧化能力和肠道形态结构的影响。选取1日龄爱拔益加(AA)肉鸡公雏250只,随机分为5组,每组5个重复,每个重复10只。对照组(CON)饲喂基础饲粮,三丁酸甘油酯组(TBP)在基础饲粮中添加1 000 mg/kg三丁酸甘油酯制剂,氧化苦参碱组(OMP)在基础饲粮中添加1 000 mg/kg氧化苦参碱制剂,复合组(TBP+OMP)在基础饲粮中添加1000 mg/kg三丁酸甘油酯和氧化苦参碱复合制剂,抗生素组(CTC)在基础饲粮中添加50 mg/kg金霉素,试验期为21 d。结果显示:与对照组相比,三丁酸甘油酯和氧化苦参碱复合组肉仔鸡平均日增重显著升高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05);与抗生素组相比无显著差异(P>0.05)。与对照组相比,复合组显著升高血清HDL-C含量(P<0.05),降低TG含量(P<0.05)。与对照组和抗生素组相比,复合组提高血清和肠黏膜中总抗氧化能力(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)的积累,对过氧化氢酶(CAT)活性无显著影响(P>0.05)。与对照组相比,复合组和抗生素组均显著提高十二指肠绒毛高度以及绒毛高度/隐窝深度比,降低隐窝深度(P<0.05);复合组空肠绒毛高度/隐窝深度比显著低于其他组(P<0.05)。结果表明:日粮添加三丁酸甘油酯和氧化苦参碱复合物能够提高肉仔鸡生长性能,改善血清生化指标,增强机体抗氧化能力,改善肠道形态结构,从而促进肉仔鸡的生长发育。

关键词：三丁酸甘油酯氧化苦参碱生长性能血清生化指标抗氧化能力肠道形态

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重组酶介导等温核酸扩增结合核酸试纸条即时检测猪流行性腹泻病毒方法的建立

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病毒学报 2024年第5期40卷 1054-1061页

作者：易玮婕李嘉豪赵伊然单衍可刘斐南京农业大学动物医学院单分子纳米实验室南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所南京210014

本文旨在建立一种基于重组酶介导等温扩增技术(Recombinase aided amplification,RAA)结合核酸试纸条的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)可视化检测方法,以应用于养殖场内部实现现场快速检测。选择PEDV N基因保... 详细信息

本文旨在建立一种基于重组酶介导等温扩增技术(Recombinase aided amplification,RAA)结合核酸试纸条的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)可视化检测方法,以应用于养殖场内部实现现场快速检测。选择PEDV N基因保守序列为模板,设计特异性引物及荧光探针,对引物进行对比筛选,对反应条件、引物浓度、探针浓度进行优化,并对其特异性、敏感性和重复性进行评价。将建立的检测方法应用于临床样品,并与荧光定量PCR方法进行比较。结果表明:建立的方法在38℃恒温10 min扩增反应以及5 min侧流向层析后,即可完成检测,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪德尔塔冠状病毒、猪轮状病毒、猪传染性胃肠炎病毒均无交叉反应,最低检测限可达101拷贝/μL。应用该方法检测20份阴性和20份阳性,共40份临床样本,检测结果与荧光定量PCR方法保持一致。本研究建立的RAA结合核酸试纸条的方法具有特异性好、灵敏度高、耗时短、仪器设备简便等优点,适用于基层现场快速检测。

关键词：猪流行性腹泻病毒重组酶介导等温核酸扩增技术现场快速检测

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猪大脑皮质、海马结构、梨状叶和杏仁核内leptin长形受体mRNA的分布定位

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畜牧兽医学报 2003年第2期34卷 206-210页

作者：雷治海王红星武枫林丁菲谭湘陵南京农业大学动物医学院南京210095 南通医学院分子神经生物学实验室

用分子生物学的方法合成了leptin长形受体 (Ob Rb)反意和正意核酸探针 ,用原位杂交法研究了 5头 2～ 3月龄母猪端脑一些结构内Ob RbmRNA的分布定位。结果表明 ,猪Ob RbmRNA分布于大脑皮质、梨状叶、海马、齿状回和杏仁核。大脑皮质和梨... 详细信息

用分子生物学的方法合成了leptin长形受体 (Ob Rb)反意和正意核酸探针 ,用原位杂交法研究了 5头 2～ 3月龄母猪端脑一些结构内Ob RbmRNA的分布定位。结果表明 ,猪Ob RbmRNA分布于大脑皮质、梨状叶、海马、齿状回和杏仁核。大脑皮质和梨状叶内的Ob RbmRNA标记神经元主要位于第Ⅱ Ⅵ层 ,分子层偶见标记神经元。海马结构内的Ob RbmRNA标记神经元主要位于海马的锥体细胞层和齿状回的颗粒层 ,在海马的始层和齿状回的多形层偶见标记神经元 ,在海马的辐射层和腔隙层罕见标记细胞。实验结果弥补了猪端脑内Ob RbmRNA分布定位资料的空白 ,为理解leptin的生理功能提供了形态学基础。

关键词： Ob-Rb 基因表达大脑皮质海马结构梨状叶杏仁核猪原位杂交

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基于量子点微球和RPA技术的ASFV抗体-核酸快速现场联检方法的建立

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中国农业科学 2024年第24期57卷 4990-5002页

作者：赵伊然单衍可李嘉豪何昭群王欣艺温墩王米拉储蕊赵东明刘斐南京农业大学动物医学院单分子生物化学与生物医学实验室兽医生物技术国家重点实验室/中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

【背景】非洲猪瘟（African swine fever,ASF）作为世界动物卫生组织（world organization for animal health,WOAH）规定必须通报的疫病之一，同时也是我国一类动物疫病，因缺乏有效疫苗和治疗方法，早期、有效、快速和敏感的检测对防... 详细信息

【背景】非洲猪瘟（African swine fever,ASF）作为世界动物卫生组织（world organization for animal health,WOAH）规定必须通报的疫病之一，同时也是我国一类动物疫病，因缺乏有效疫苗和治疗方法，早期、有效、快速和敏感的检测对防控ASF至关重要。目前，非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）常用临床检测方法主要包括荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)、酶联免疫吸附测定试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）等，但这些技术均需要复杂的操作、昂贵的仪器以及较长的检测时间，不适用于现场快速检测。此外，ASFV感染后宿主体内的抗体和核酸含量在不同时间段有明显的差异，因此单独检测ASFV核酸或抗体可能会导致假阴性的存在。【目的】通过研发一种基于量子点微球和重组酶聚合酶扩增技术（recombinase polymerase amplification,RPA）的ASFV抗体-核酸联检试纸条，实现ASFV抗体和核酸的现场同时检测，以提高检测的灵敏度、特异性，降低检测成本，节约检测时间。【方法】通过结合量子点荧光免疫层析技术及RPA技术建立了同时检测ASFV抗体及核酸的侧向流层析试纸条，配套便携式荧光分析仪可实现ASFV抗体-核酸的快速现场联检。本研究优化了量子点偶联蛋白量及检测线包被浓度等条件。在此基础上，确定了该检测方法的cutoff值、敏感性、特异性及重复性，并将所建立的ASFV联检试纸条与市售ELISA试剂盒、qPCR检测试剂盒对临床样品进行检测，比较检测结果，验证该方法的符合率，评价该试纸条的实用性。【结果】联检试纸条使用方便、快速，整个检测过程可在30 min内完成。且与其他6种常见猪传染性病毒之间不存在交叉反应，特异性良好。核酸检测灵敏度可达10 copies/μL，抗体检测灵敏度可达1:3 200。抗体和核酸检测批内变异系数均小于10%，批间变异系数均小于15%，重复性良好。经市售ELISA试剂盒、qPCR试剂盒分别验证，符合率均为100%。除此之外，在临床样品检测中发现，有2份抗体检测阳性的样品其对应的猪只核酸检测为阴性，且这2头猪无明显临床症状，该结果进一步证明了通过抗体和核酸联检能够提高检测的准确性，减少假阴性的存在。【结论】核酸-抗体联检单次试验成本与病原核酸抗体分别检测总成本相比有所降低，节约了检测成本和时间，对于ASF急性发作、慢性感染检测均敏感，避免了仅检测单个核酸或单个抗体的局限性。此方法对操作环境要求低，使用的荧光分析仪便于携带，易于操作，整个操作过程无需过多昂贵的实验仪器和专业技术人员，降低了对检测设备的精密要求，适用在偏远地区以及基层中开展ASFV检测工作。因此，该方法有望成为未来猪场ASFV即时检测的可靠方法。

关键词：非洲猪瘟核酸检测抗体检测侧向流免疫试纸条

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用原位杂交法研究猪下丘脑内瘦素长形受体mRNA的分布定位

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南京农业大学学报 2002年第1期25卷 80-84页

作者：王红星雷治海丁菲谭湘陵南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南通医学院分子神经生物学实验室江苏南通226001

用体外转录方法合成了瘦素 (leptin)长形受体 (Ob Rb)反义和正义RNA探针 ,用原位杂交法研究了 5头 2～ 3月龄母猪下丘脑内瘦素长形受体mRNA的分布定位。结果表明 ,猪瘦素长形受体mRNA分布于下丘脑的弓状核、腹内侧核、背内侧核、室旁核。

关键词：猪瘦素长形受体 mRNA 下丘脑原位杂交法分布定位

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甲砜霉素在鸡肌肉中的残留消除规律

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畜牧兽医学报 2012年第7期43卷 1150-1155页

作者：谢恺舟张小杰陈学森谢星孙瑛瑛张跟喜王金玉陈国宏扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 南京农业大学动物医学院南京210095

为研究甲砜霉素在鸡肌肉中的残留消除规律,鸡肌肉样品经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后用流动相溶解,上高效液相色谱荧光检测器检测。测定鸡肌肉样品中甲砜霉素的检测限为1.5μ***-1(S/N=3)、定量限为5μ***-1(S/N... 详细信息

为研究甲砜霉素在鸡肌肉中的残留消除规律,鸡肌肉样品经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后用流动相溶解,上高效液相色谱荧光检测器检测。测定鸡肌肉样品中甲砜霉素的检测限为1.5μ***-1(S/N=3)、定量限为5μ***-1(S/N=10)。各试验组鸡分别按体质量以10.0、20.0和50.0mg.(kg.d)-1剂量给药,每天1次,连续5d内服给药后,鸡肉中甲砜霉素残留量随给药剂量增大呈上升趋势,随休药期的延长而降低。休药第1天时,鸡肉中甲砜霉素残留量均达到峰值。休药前期甲砜霉素残留消除较快,后期消除缓慢。休药第5天时,鸡肉中甲砜霉素残留量均低于50μ***-1,休药第9天时,鸡肌肉中甲砜霉素残留量均低于检测限(1.5μ***-1);甲砜霉素在鸡肌肉中的残留量与给药剂量呈正相关。

关键词：鸡肌肉甲砜霉素残留消除高效液相色谱荧光检测法

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氨苄西林在鸡组织中的残留消除规律

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畜牧兽医学报 2015年第1期46卷 130-137页

作者：孙礼瑞谢星谢恺舟张小杰王剑锋崔璐璐刘建宇张跟喜戴国俊王金玉扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室扬州225009 南京农业大学动物医学院南京210095

旨在研究氨苄西林在鸡组织中残留消除规律。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白质,正己烷去脂肪,饱和二氯甲烷萃取,上清液经甲醛在酸性条件下沸水浴衍生化后,在激发波长327nm、发射波长409nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。... 详细信息

旨在研究氨苄西林在鸡组织中残留消除规律。鸡组织样品经磷酸二氢钠溶液提取,乙腈去蛋白质,正己烷去脂肪,饱和二氯甲烷萃取,上清液经甲醛在酸性条件下沸水浴衍生化后,在激发波长327nm、发射波长409nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果显示:该方法测定鸡组织中氨苄西林的检测限为3.5μg·kg-1(S/N=3)、定量限为10.0μg·kg-1(S/N=10)。氨苄西林在鸡组织样品中平均回收率在75.31%~85.87%,变异系数均低于10.20%。各试验组京海黄鸡分别按体重以120、240mg·(kg·d)-1剂量内服氨苄西林,每天1次,连续7d给药后,休药4h(零休药期),各组织中氨苄西林的残留量最高,并在休药后第3天迅速降低。休药第5天后所有组织中氨苄西林残留量均低于最高残留限量(50μg·kg-1),休药第9天各组织中氨苄西林残留量均低于检测限。休药后相同时间点鸡肌肉中药物残留量最低,肝中的药物残留量最高;氨苄西林在肾中残留比肌肉、肝消除缓慢且消除时间长。氨苄西林在鸡肌肉、肝和肾中的残留量均与给药剂量呈正相关。根据WT1.4软件按95%置信区间计算所得,建议黄羽肉鸡按体重以120、240mg·(kg·d)-1剂量给药,每天1次,连续7d后,其休药期(WT)分别为4和5d。

关键词：氨苄西林高效液相色谱荧光检测法残留消除鸡组织

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氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡肌肉中的残留消除规律

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畜牧兽医学报 2012年第8期43卷 1298-1305页

本试验旨在研究氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡肌肉中的残留消除规律。鸡肌肉样品经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后,以乙腈-磷酸二氢钠溶液(0.01mol.L-1,含0.005mol.L-1十二烷基硫酸钠和0.1%三乙胺)(体积比35∶... 详细信息

本试验旨在研究氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺在鸡肌肉中的残留消除规律。鸡肌肉样品经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后,以乙腈-磷酸二氢钠溶液(0.01mol.L-1,含0.005mol.L-1十二烷基硫酸钠和0.1%三乙胺)(体积比35∶65)为流动相,流速为***-1,在激发波长225nm、发射波长285nm处用高效液相色谱荧光检测器检测。结果:测得鸡肌肉中氟苯尼考、氟苯尼考胺的检测限分别为1.5和0.5μ***-1(S/N=3)、定量限分别为5和2μ***-1(S/N=10)。各试验组京海黄鸡分别按体质量以25.0、50.0和***-1.d-1剂量给药,每天1次,连续5d内服给药后,休药第1天时,鸡肌肉中氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的残留量均达到峰值,且残留量随给药剂量的增大而增大,随休药期的延长而降低。休药第7天时,鸡肌肉中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺的总残留量均低于MRLs(100μ***-1);休药第11天时,鸡肌肉中氟苯尼考及其代谢产物氟苯尼考胺的总残留量均低于检测限;氟苯尼考、氟苯尼考胺在鸡肌肉中的残留量及其总残留量均与给药剂量呈正相关。

关键词：氟苯尼考氟苯尼考胺鸡肌肉残留消除高效液相色谱荧光检测法

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高效液相色谱荧光检测法同时检测鸡血浆中阿莫西林和氨苄西林残留

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中国兽医学报 2014年第9期34卷 1501-1506页

作者：孙礼瑞赵敏谢恺舟郭辉生李爱华谢星王剑锋倪海球张跟喜戴国俊王金玉扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

建立高效液相色谱荧光法同时检测鸡血浆中阿莫西林和氨苄西林的残留量。鸡血浆经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,酸性条件下水杨醛沸水浴衍生化后,以0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液（A）和乙腈溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,荧光... 详细信息

建立高效液相色谱荧光法同时检测鸡血浆中阿莫西林和氨苄西林的残留量。鸡血浆经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,酸性条件下水杨醛沸水浴衍生化后,以0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液（A）和乙腈溶液（B）为流动相,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为445nm。阿莫西林和氨苄西林线性范围均为5.0~5 000.0μg/L,线性关系良好（r=0.999 9,0.999 6）。当阿莫西林和氨苄西林添加水平均为5.0~125.0mg/L时,鸡血浆样品平均回收率均高于74.72%,相对标准偏差（RSD）均低于8.65%,日内相对标准偏差分别低于4.99%和10.60%,日间相对标准偏差分别低于7.98%和11.29%。测定鸡血浆样品中AMO的检测限（LODs）为2.0μg/L（S/N=3）、定量限（LOQs）为5.0μg/L（S/N=10）,AMP的检测限为1.0μg/L（S/N=3）、定量限为2.5μg/L（S/N=10）。该方法操作简便、快速,且结果精确、灵敏、可靠,可适用于鸡血浆中阿莫西林、氨苄西林同时提取和检测。

关键词：高效液相色谱阿莫西林氨苄西林荧光检测法

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高效液相色谱荧光检测法检测鸡蛋中阿莫西林残留

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食品科学 2012年第22期33卷 264-268页

作者：谢恺舟陈学森徐东郭辉生贾龙飞谢星黄玉萍张小杰孙瑛瑛戴国俊张跟喜王金玉扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

建立鸡蛋中阿莫西林残留的高效液相色谱荧光检测的方法。鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,水杨醛酸性条件下沸水浴衍生化后,以0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈溶液(B)为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为... 详细信息

建立鸡蛋中阿莫西林残留的高效液相色谱荧光检测的方法。鸡蛋经乙腈提取,饱和二氯甲烷萃取,水杨醛酸性条件下沸水浴衍生化后,以0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液(A)和乙腈溶液(B)为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测激发波长为354nm,发射波长为445nm。阿莫西林在5.0～800ng/mL质量浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数为0.9997。当添加水平阿莫西林为5～125ng/g时,该方法平均回收率为80.47%～89.53%,相对标准偏差为5.77%～6.87%;日内相对标准偏差为8.61%～9.61%;日间相对标准偏差为11.01%～14.80%。阿莫西林检测限为1.2ng/g(RSN=3)、定量限为3.9ng/g(RSN=10)。所建立的方法简便、快速、灵敏度高,适用于鸡蛋中阿莫西林残留的高灵敏度检测。

关键词：高效液相色谱荧光检测法阿莫西林鸡蛋残留

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