检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2024年第4期56卷 66-71页

作者：张欣王福成韩先干祁克宗宋祥军董雨豪蒋蔚中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 安徽农业大学兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室安徽合肥230036

为建立阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)的免疫学快速检测方法,分别制备了阪崎克罗诺杆菌的特异性单抗和多抗,建立阪崎克罗诺杆菌的双抗夹心酶联免疫吸附DAS-ELISA检测方法。结果:获得4株抗阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体阳性细胞株,... 详细信息

为建立阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)的免疫学快速检测方法,分别制备了阪崎克罗诺杆菌的特异性单抗和多抗,建立阪崎克罗诺杆菌的双抗夹心酶联免疫吸附DAS-ELISA检测方法。结果:获得4株抗阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体阳性细胞株,分泌抗体效价分别是1∶128000、1∶32000、1∶256000和1∶256000,抗阪崎克罗诺杆菌兔多克隆抗体效价是1∶128000。建立的阪崎克罗诺杆菌DAS-ELISA检测方法,分别以抗阪崎克罗诺杆菌兔多抗和单抗作为捕获抗体和检测抗体,兔多抗的最佳稀释度为1∶4000,单克隆抗体最佳稀释度为1∶1000,灵敏性可达1×106 CFU/mL;该检测方法具有良好的特异性,与常见的6种食源性病原菌都没有交叉反应,且能够同时检测6种克罗诺杆菌属细菌;重复性结果显示,该检测方法的批内批间变异系数均小于15%,具有良好的重复性。综上,利用抗阪崎克罗诺杆菌的单抗和兔多抗成功建立了DAS-ELISA方法,该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可为阪崎克罗诺杆菌的快速检测提供技术支撑。

关键词：阪崎克罗诺杆菌单克隆抗体双抗体夹心ELISA

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“耕读教育”背景下动物生物化学教学改革探索

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中文科技期刊数据库（全文版）教育科学 2022年第8期 259-261页

作者：许媛媛王换换张源淑南京农业大学动物医学院动物生物化学教研室江苏南京210095

“动物生物化学”是生命科学各专业的重要专业基础课程,在动物生产和兽医临床实践中占据重要地位和作用。针对课程特点实施教学改革,使课程具有先进性、科学性以及实践性,同时融合思政教育,能够更好地把握育人导向,坚持立德树人的根本任... 详细信息

“动物生物化学”是生命科学各专业的重要专业基础课程,在动物生产和兽医临床实践中占据重要地位和作用。针对课程特点实施教学改革,使课程具有先进性、科学性以及实践性,同时融合思政教育,能够更好地把握育人导向,坚持立德树人的根本任务,针对现代农业新业态新技术,深化科教协同、产教融合,拓展耕读教育内涵与外延,创新卓越农林人才培养模式,积极推进新时代的教育的新探索、新实践。

关键词：动物生物化学思政教育耕读教育教学改革与实践

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乙酸钠对油酸诱导的BRL-3A细胞脂肪变性的影响及机制分析

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畜牧兽医学报 2022年第12期53卷 4450-4460页

作者：李林宫彬彬王广力赵梅张源淑邢台学院生物科学与工程学院邢台054001 河北医科大学附属邢台人民医院病理科邢台054031 南京农业大学动物医学院农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

通过向油酸诱导的大鼠肝成纤维细胞(BRL-3A)脂肪变性模型中添加不同浓度(2、4、8 mmol·L^(-1))的乙酸钠,探讨其对脂肪变性细胞模型脂代谢的调控机理及细胞损伤的修复作用。试验方法:1)用不同浓度的油酸(0、0.03、0.06、0.12、0.24... 详细信息

通过向油酸诱导的大鼠肝成纤维细胞(BRL-3A)脂肪变性模型中添加不同浓度(2、4、8 mmol·L^(-1))的乙酸钠,探讨其对脂肪变性细胞模型脂代谢的调控机理及细胞损伤的修复作用。试验方法:1)用不同浓度的油酸(0、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48)mmol·L^(-1)刺激BRL-3A细胞24 h后,分别检测细胞相对活力、总脂滴面积、三酰甘油(TG)含量、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,建立脂肪变性细胞模型;2)向BRL-3A细胞中添加不同浓度的乙酸钠,通过流式细胞术检测细胞凋亡率;3)用不同浓度的乙酸钠和0.12 mmol·L^(-1)油酸共同孵育BRL-3A细胞,试验分为4组,分别为油酸处理组、2 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组、4 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组和8 mmol·L^(-1)乙酸钠+油酸处理组,分别对细胞脂滴、TG含量、AST、ALT活性、AMPK信号通路蛋白以及脂代谢关键基因进行检测。结果显示:1)用0.12 mmol·L^(-1)油酸处理BRL-3A细胞24 h,成功建立BRL-3A细胞脂肪变性模型。2)不同浓度的乙酸钠对BRL-3A细胞凋亡率没有影响;3)4、8 mmol·L^(-1)乙酸钠处理脂肪变性细胞模型后,与油酸处理组相比,细胞总脂滴面积、每平方毫米脂滴数、TG含量、AST和ALT活性均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)下降,P-AMPK表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上升;脂合成代谢相关基因ACC、FAS以及SCD-1 mRNA表达水平均有一定程度下降;脂分解代谢相关基因CPT-1、CPT-2以及ACO mRNA表达水平均有一定程度上升。本研究表明,乙酸钠会通过AMPK通路激活脂分解代谢,减轻肝细胞脂质蓄积,并且对油酸诱导的BRL-3A细胞脂肪变性模型的损伤具有一定缓解作用。

关键词： BRL-3A细胞乙酸钠脂肪变性细胞模型脂代谢

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砷剂对吉非替尼耐药非小细胞肺癌裸鼠皮下肿瘤的作用

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畜牧与兽医 2022年第10期54卷 65-73页

作者：沈艳毛建华王华枫阮铮李祥瑞南京农业大学动物医学院江苏南京210095 上海交通大学医学院附属瑞金医院实验医学研究中心上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院/上海血液学研究所/医学基因组学国家重点实验室上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院病理科上海200025

旨在研究三氧化二砷对吉非替尼耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株NCI-H1975建立的裸鼠皮下肿瘤模型的作用效果。将NCI-H1975细胞(8×106个/只)注射于裸鼠右腋下,待肿瘤长到100 mm3时,随机将小鼠分为3组,对照组(生理盐水200μL,腹腔注... 详细信息

旨在研究三氧化二砷对吉非替尼耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株NCI-H1975建立的裸鼠皮下肿瘤模型的作用效果。将NCI-H1975细胞(8×106个/只)注射于裸鼠右腋下,待肿瘤长到100 mm3时,随机将小鼠分为3组,对照组(生理盐水200μL,腹腔注射),砷剂组(三氧化二砷5 mg/kg,腹腔注射)以及吉非替尼组(吉非替尼125 mg/kg,灌胃)。裸鼠接种肿瘤细胞待肉眼可见的肿瘤出现后,每天测量肿瘤的长径和短径,计算肿瘤体积。药物作用18 d时,对小鼠进行整体拍照后进行安乐死,分离肿瘤、肺、脾等脏器,分别进行病理和电镜检测。结果显示:与对照组和吉非替尼组相比,砷剂组小鼠的肿瘤体积、重量及脾脏指数显著(P<0.05)或极显著降低(P<0.0001,P<0.01);肿瘤组织病理观察发现,与对照组和吉非替尼组相比,砷剂组肿瘤内出现明显坏死灶;电镜结果显示,砷剂组肿瘤内部能观察到自噬体;肺部病理结果显示,与对照组和吉非替尼组相比,砷剂组的肺泡壁较薄,仅见少许淋巴细胞浸润。研究表明,在裸鼠体内,砷剂能够抑制吉非替尼耐药NSCLC皮下移植瘤生长,诱导肿瘤发生自噬和坏死,保护肺部结构的完整性。

关键词：非小细胞肺癌三氧化二砷吉非替尼耐药裸鼠皮下移植瘤

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MicroRNA-98促进猪圆环病毒2型在3D4/21细胞中的复制

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微生物学报 2020年第8期60卷 1709-1717页

作者：王小敏徐祥兰徐鹏王兴开惠禄露范红结何孔旺遵义医科大学微生物学教研室贵州遵义563000 江苏省农业科学院兽医研究所江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

【目的】通过高通量测序的方法获得PCV2感染3D4/21细胞的miRNAs表达谱,并探讨miRNA-98在PCV2复制中的作用。【方法】本研究以猪肺泡巨噬细胞系3D4/21细胞为细胞模型,对PCV2感染过程中的3D4/21细胞进行miRNAs差异表达分析,筛选与病毒复... 详细信息

【目的】通过高通量测序的方法获得PCV2感染3D4/21细胞的miRNAs表达谱,并探讨miRNA-98在PCV2复制中的作用。【方法】本研究以猪肺泡巨噬细胞系3D4/21细胞为细胞模型,对PCV2感染过程中的3D4/21细胞进行miRNAs差异表达分析,筛选与病毒复制相关的特异性miRNAs,并探讨其在PCV2复制中的作用。【结果】经高通量测序,获得PCV2感染3D4/21细胞的miRNAs表达谱,结合实验室前期研究筛选获得miRNA-98。实验表明,miRNA-98的表达量随PCV2感染时间的延长而持续升高,其变化趋势与Cap蛋白表达变化基本一致,由此推测miRNA-98与PCV2复制正相关。过表达miRNA-98可显著上调Cap蛋白的表达量和PCV2的复制。进一步的研究表明,miRNA-98参与调节宿主免疫相关细胞因子的表达和PCV2的复制。【结论】miRNA-98可通过调节免疫相关细胞因子的表达调控宿主免疫功能,帮助PCV2逃逸宿主免疫,促进PCV2在3D4/21细胞中的复制。这些发现不仅为深入了解PCV2与宿主之间的关系提供了新视角,还有望为猪圆环病毒相关疾病的防控提供新的抗病毒策略。

关键词：猪圆环病毒2型微小RNA-98 复制

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噬菌体裂解酶专家共识——齐鲁公共卫生云讲堂

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中国兽医学报 2021年第8期41卷 1451-1457页

作者：顾敬敏杨航李锦铨严亚贤卢雪梅张炜胡永飞王冉童贻刚胡福泉危宏平刘玉庆韩文瑜吉林大学动物医学学院吉林长春130062 中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071 华中农业大学食品科学技术学院湖北武汉430070 上海交通大学农业与生物学院上海200240 山东大学微生物技术国家重点实验室山东青岛250100 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 中国农业大学动物营养学国家重点实验室北京100083 江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所江苏南京210014 北京化工大学北京100029 陆军军医大学微生物学教研室重庆400038 山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东济南250100

随着抗生素持续、不合理应用乃至滥用,使得细菌对抗生素的耐药性日益严重。特别是抗多黏菌素mcr-1基因以及耐万古霉素"超级细菌"的发现,标志着"后抗生素时代"的来临。为了应对细菌的耐药性、抗生素残留所导致的机... 详细信息

随着抗生素持续、不合理应用乃至滥用,使得细菌对抗生素的耐药性日益严重。特别是抗多黏菌素mcr-1基因以及耐万古霉素"超级细菌"的发现,标志着"后抗生素时代"的来临。为了应对细菌的耐药性、抗生素残留所导致的机体免疫力下降以及环境污染等问题,我国正在全力推进"减抗、限抗、禁抗"战略的实施,这是破解抗生素长期应用引发系列问题的根本之策,是事关畜禽健康养殖、公共卫生安全和人类健康的一件大事。这一战略的实施也对"安全、有效、质量可控,无残留、无污染"的绿色新型替抗剂的研发提出新的需求,亟需在这些方面寻求新的突破口,其中噬菌体裂解酶是一个重要的突破方向。噬菌体裂解酶作为一类新型抗菌蛋白,在应对细菌耐药性方面具有独特优势,在减抗、降抗中具有公共卫生战略价值。为推动噬菌体裂解酶的研究与应用,现汇聚全国十多位从事噬菌体裂解酶研究的专家和相关企业,联合齐鲁公共卫生云讲堂、噬菌体国际研讨会和《中国兽医学报》,专题研讨国内外关于噬菌体裂解酶的基础研究成果和实际应用案例,对噬菌体裂解酶的发展趋势进行分析、研判,形成一系列共识。

关键词：噬菌体裂解酶专家共识齐鲁公共卫生云讲堂

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CpGs对消化道黏膜树突状细胞跨上皮摄取灭活禽流感病毒的影响

CpGs对消化道黏膜树突状细胞跨上皮摄取灭活禽流感病毒的影响

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2016年江苏省微生物学会年会暨青年学术报告会

作者：阴银燕杨倩扬州大学医学院微生物与免疫学教研室扬州225001 南京农业大学动物医学院南京210095

研究背景：低致病性H9N2亚型禽流感是危害家禽养殖业的重要传染病，在鸭，鹅等水禽中广泛传播，尽管发病率和死亡率较低，但可以在宿主体内长期复制并且排毒，对家禽养殖业和人类公共卫生构成持续潜在威胁.H9N2亚型禽流感病毒不仅通过... 详细信息

研究背景：低致病性H9N2亚型禽流感是危害家禽养殖业的重要传染病，在鸭，鹅等水禽中广泛传播，尽管发病率和死亡率较低，但可以在宿主体内长期复制并且排毒，对家禽养殖业和人类公共卫生构成持续潜在威胁.H9N2亚型禽流感病毒不仅通过水禽呼吸道传播，而且可以通过粪便向外排毒，污染水源，增强了新型流感病毒变异重组的可能.

关键词：灭活H9N2禽流感病毒树突状细胞口服黏膜免疫 CpGs 肠黏膜屏障

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沉默Gpr3基因表达对猪卵泡颗粒细胞凋亡的影响

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中国细胞生物学学报 2014年第8期36卷 1116-1122页

作者：张宝乐徐银学徐州医学院神经生物学教研室徐州221004 南京农业大学动物科学技术学院南京210095

G蛋白偶联受体3(G protein-coupled receptor 3,Gpr3)属于G蛋白偶联受体超家族成员,能够维持卵泡卵母细胞减数分裂的前期阻滞,但在卵泡颗粒细胞中的作用不清。该研究利用RNAi技术,以化学合成的siRNA转染体外培养的猪卵泡颗粒细胞,并利用... 详细信息

G蛋白偶联受体3(G protein-coupled receptor 3,Gpr3)属于G蛋白偶联受体超家族成员,能够维持卵泡卵母细胞减数分裂的前期阻滞,但在卵泡颗粒细胞中的作用不清。该研究利用RNAi技术,以化学合成的siRNA转染体外培养的猪卵泡颗粒细胞,并利用Real-time PCR和Western blot技术检验Gpr3基因的沉默效果;利用MTT(四甲基偶氮唑盐)、流式细胞术和Real-time PCR技术检测沉默Gpr3基因表达对猪卵泡颗粒细胞凋亡以及凋亡相关基因表达的影响。结果显示,Gpr3-siRNA能够有效地抑制猪卵泡颗粒细胞中Gpr3基因mRNA和蛋白的表达(P<0.01);在沉默Gpr3基因表达后,猪卵泡颗粒细胞的细胞活性由0.419升高至0.586,同时细胞凋亡率由2.67%下降至0.42%,并在显著上调Bcl-2表达的同时,下调了Bax的表达(P<0.05)。结果表明,沉默Gpr3基因的表达抑制了猪卵泡颗粒细胞的凋亡,其机制可能与调控Bcl-2和Bax表达有关。

关键词：猪 Gpr3 RNA干扰颗粒细胞细胞凋亡

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猪G蛋白偶联受体12(Gpr12)基因克隆鉴定及其表达分析

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畜牧与兽医 2014年第12期46卷 10-14页

作者：张宝乐李晔石放雄徐银学徐州医学院神经生物学教研室江苏徐州221002 南京农业大学动物科学技术学院江苏南京210095

为研究猪G蛋白偶联受体12(G protein-coupled receptor 12,Gpr12)基因的序列和组织表达特征,探索Gpr12 mRNA在卵泡发育过程中的表达规律,本研究利用克隆测序技术获取猪Gpr12基因的编码区序列,并利用生物信息学方法分析Gpr12基因序列和... 详细信息

为研究猪G蛋白偶联受体12(G protein-coupled receptor 12,Gpr12)基因的序列和组织表达特征,探索Gpr12 mRNA在卵泡发育过程中的表达规律,本研究利用克隆测序技术获取猪Gpr12基因的编码区序列,并利用生物信息学方法分析Gpr12基因序列和蛋白的潜在特征;RT-PCR技术检测Gpr12基因的组织表达模式;荧光定量PCR技术检测Gpr12 mRNA在猪卵泡发育过程中的表达规律。结果表明:猪Gpr12基因编码区序列长1 005 bp,编码蛋白含有典型的7次跨膜结构域和DRY基序,存在多个潜在的磷酸化和糖基化修饰位点;Gpr12基因在所检测的组织和细胞中均有表达,且在脑、垂体和卵母细胞中高表达;随着卵泡的发育,Gpr12 mRNA的表达量极显著升高(P<0.01),表明Gpr12基因可能参与了猪卵泡发育的调控过程。

关键词：猪 G蛋白偶联受体12 基因克隆表达

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过表达Gpr3诱导猪颗粒细胞G_1阻滞及凋亡

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中国生物化学与分子生物学报 2014年第10期30卷 999-1006页

作者：张宝乐李晔徐银学徐州医学院神经生物学教研室江苏徐州221002 南京农业大学动物科学技术学院南京210095 莱阳市畜牧兽医局山东莱阳265200

G蛋白偶联受体3(Gpr3)属于G蛋白偶联受体视紫质家族成员.Gpr3通过激活Gs蛋白介导的下游信号通路,维持卵泡卵母细胞减数分裂的前期阻滞,但在卵泡颗粒细胞中的作用不清.为了明确Gpr3在猪卵泡颗粒细胞中的功能,构建了Gpr3基因的真核表达载... 详细信息

G蛋白偶联受体3(Gpr3)属于G蛋白偶联受体视紫质家族成员.Gpr3通过激活Gs蛋白介导的下游信号通路,维持卵泡卵母细胞减数分裂的前期阻滞,但在卵泡颗粒细胞中的作用不清.为了明确Gpr3在猪卵泡颗粒细胞中的功能,构建了Gpr3基因的真核表达载体,利用过表达的方式激活其介导的信号通路,并利用MTT、流式细胞术和real-time PCR等方法检测了过表达Gpr3对猪卵泡颗粒细胞增殖及凋亡的影响.结果显示,过表达Gpr3后,猪颗粒细胞的增殖水平显著下调,G0/G1期细胞的百分比增加,S期细胞减少,Cyclin B1和CDK1 mRNA的表达量也显著降低;同时,显著增加了颗粒细胞的凋亡率,在抑制Bcl-2表达的同时,促进了Bax的表达.结果表明:过表达Gpr3在猪颗粒细胞中具有抑增殖促凋亡的作用,丰富了其在调节卵泡发育过程中的生物学功能.

关键词： G蛋白偶联受体3(Gpr3) 猪颗粒细胞过表达增殖凋亡

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