检索结果-内蒙古大学图书馆

畜牧与兽医 2018年第11期50卷 69-73页

作者：阮智杨胡波宋艳华魏后军范志宇吴晓东王芳钱莺娟南京农业大学动物医学院教育部动物健康与食品安全国际合作联合实验室江苏南京210095 江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210014 中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心山东青岛266032

为建立小反刍兽疫病毒（PPRV）液相芯片检测方法,根据Gen Bank上公布的PPRV的N蛋白基因序列高度保守区设计引物与探针;对探针进行C12臂修饰后与荧光编码微球偶联,将偶联后的探针与PPRV的PCR产物进行杂交,在Bio-Plex系统上读取荧光信号,... 详细信息

为建立小反刍兽疫病毒（PPRV）液相芯片检测方法,根据Gen Bank上公布的PPRV的N蛋白基因序列高度保守区设计引物与探针;对探针进行C12臂修饰后与荧光编码微球偶联,将偶联后的探针与PPRV的PCR产物进行杂交,在Bio-Plex系统上读取荧光信号,建立了小反刍兽疫病毒液相芯片检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行了研究,最终用建立的方法对临床样本进行检测。结果显示,该方法只与PPRV基因的PCR产物反应,而不与其他病毒基因反应,可检出的最低基因拷贝数为5. 78×104copies/m L,表明该方法具有良好的特异性与敏感性。利用该方法对25份临床样本进行检测,共检出阳性样本15份,与传统PCR方法检测结果一致。本研究建立了小反刍兽疫病毒的快速液相芯片检测方法,为进一步建立多种外来动物疫病的液相芯片检测方法奠定了基础。

关键词：小反刍兽疫外来病原液相芯片检测方法

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兔支气管败血波氏杆菌双夹心ELISA检测方法的建立

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江苏农业学报 2010年第1期26卷 120-125页

作者：熊富强王芳恽时锋林焱范志宇胡波赵宁江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京军区南京总医院比较医学科江苏南京210002 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为建立特异性好、敏感性高、稳定可靠的兔支气管败血波氏杆菌(Bb)双夹心ELISA检测方法,制备了兔抗Bb免疫血清和小鼠抗Bb腹水单抗(Bb McAb),并将它们提纯。用方阵法筛选最佳反应浓度,用特异性试验、敏感性试验和重复性试验对该方法进行鉴... 详细信息

为建立特异性好、敏感性高、稳定可靠的兔支气管败血波氏杆菌(Bb)双夹心ELISA检测方法,制备了兔抗Bb免疫血清和小鼠抗Bb腹水单抗(Bb McAb),并将它们提纯。用方阵法筛选最佳反应浓度,用特异性试验、敏感性试验和重复性试验对该方法进行鉴定,并与PCR检测方法比较。结果表明,兔抗Bb IgG的最佳稀释度为1∶6 400,浓度为2.5 mg/L;单抗的最佳稀释度为1∶800,浓度为5.0 mg/L。特异性试验和重复性试验结果表明,该方法特异性强、重复性好,与兔常见病菌大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌和产气荚膜梭菌均不发生反应,同时与PCR检测方法的符合率为100%。

关键词：支气管败血波氏杆菌免疫血清单克隆抗体双夹心ELISA

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引起免疫失败的传染性腔上囊病病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达

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中国兽医科学 2010年第2期40卷 130-134页

作者：曹冰玉王永山范红结欧阳伟王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京军区军事医学研究所江苏南京210002

将从安徽省传染性腔上囊病(IBD)免疫失败的病鸡腔上囊组织中扩增的VP2基因定向克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了原核表达质粒pGEX-VP2,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3);经IPTG诱导后,用IBDV双抗体夹心ELISA检测,结果呈阳性反应;SDS-PAG... 详细信息

将从安徽省传染性腔上囊病(IBD)免疫失败的病鸡腔上囊组织中扩增的VP2基因定向克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了原核表达质粒pGEX-VP2,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3);经IPTG诱导后,用IBDV双抗体夹心ELISA检测,结果呈阳性反应;SDS-PAGE分析结果显示,重组VP2融合蛋白的分子质量为68ku,表达量约占菌体总蛋白量的16.0%,表达产物主要以包涵体形式存在于菌体内;Western-blotting结果显示,重组VP2蛋白与IBDV抗体发生反应,形成一条特异性蛋白带,表明获得的重组蛋白具有良好的抗原反应性。

关键词：传染性腔上囊病病毒 VP2基因原核表达

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猪痢疾诊断技术研究进展

猪痢疾诊断技术研究进展

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第七届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：周斌南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

本文针对猪痢疾疾病的诊断技术研究进展进行了概述。其中包括:细菌学检查（显微镜检查、分离培养、鉴定），血清学检验（琼脂免疫扩散试验，白细胞游走抑制琼脂糖试验等）及PCR检测技术。

关键词：猪痢疾病理诊断技术分析分离培养

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传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合基因的构建及其表达产物分析

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中国预防兽医学报 2010年第11期32卷 879-883页

作者：刘小娟王永山欧阳伟张海彬王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京军区军事医学研究所江苏南京210002

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)... 详细信息

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)的抗原表位嵌合体基因分子载体pET-mHBc。将编码IBDV多表位基因5epis定向插入到pET-mHBc的mHBc基因中,获得嵌合体基因mHBc-5epis表达重组质粒pET-mHBc-5epis,并在大肠杆菌中表达。经SDS-PAGE分析,重组嵌合体蛋白的分子量约29 ku,表达量约占菌体总蛋白的47.6%;Western blot结果表明,重组嵌合体蛋白可与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带;重组嵌合体蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约100 nm～120 nm;用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到1∶200。本实验成功构建了5epis与HBcAg嵌合体基因,并在大肠杆菌中高效表达,具有IBDV抗原反应性的重组病毒样颗粒嵌合体蛋白,为研究其表位型基因工程疫苗提供了新途径。

关键词：传染性法氏囊病病毒抗原表位乙肝病毒核心抗原(HBcAg) 嵌合体

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谈谈猪呼吸道疾病综合征病猪的治疗

谈谈猪呼吸道疾病综合征病猪的治疗

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第七届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：吴增鉴周斌南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

本文介绍猪呼吸道疾病综合征是多种疾病复合感染的一种并发症，该病会导致脱水、败血症、衰竭、缺氧等现象的发生，从而致死。该病的常规治疗中存在忽视护理重要性，用药单一等误区。为了对此病进行有效治疗，本文建议猪场对该类病猪应... 详细信息

本文介绍猪呼吸道疾病综合征是多种疾病复合感染的一种并发症，该病会导致脱水、败血症、衰竭、缺氧等现象的发生，从而致死。该病的常规治疗中存在忽视护理重要性，用药单一等误区。为了对此病进行有效治疗，本文建议猪场对该类病猪应搞好护理，对病猪实时进行抗菌消炎、抗病毒、缓解呼吸困难等。

关键词：猪呼吸道疾病综合征临床治疗发病机制并发症

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实时荧光定量PCR技术及在猪重大疫病中的诊断应用

实时荧光定量PCR技术及在猪重大疫病中的诊断应用

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第七届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：周斌南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

实时荧光定量PCR技术(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)是在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光探针,利用荧光信号积累实时监测整个PCR反应进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析.该技术具有操作简便、特异性强、... 详细信息

实时荧光定量PCR技术(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)是在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光探针,利用荧光信号积累实时监测整个PCR反应进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析.该技术具有操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、快速高效、全封闭反应、高通量等特点.随着现代医学和分子生物学的飞速发展,该技术已在兽医诊断研究及临床应用方面发挥着越来越大的作用.文章对FQ-PCR的原理、分类以及在猪重大疫病的诊断应用进行了综述.

关键词：猪免疫病理鉴别诊断实时荧光定量PCR技术

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猪繁殖障碍疾病的病因分析与防控技术

猪繁殖障碍疾病的病因分析与防控技术

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第七届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：姜平南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

猪繁殖障碍疾病临床表现形式主要包括:流产、死胎、木乃伊和母猪无乳症，其原因包括传染性疾病、中毒和环境因素等。其中，传染性病原感染为其主要病因。为了有效防止猪繁殖障碍疾病的发生，猪场应加强饲养管理，搞好环境卫生与消毒，... 详细信息

猪繁殖障碍疾病临床表现形式主要包括:流产、死胎、木乃伊和母猪无乳症，其原因包括传染性疾病、中毒和环境因素等。其中，传染性病原感染为其主要病因。为了有效防止猪繁殖障碍疾病的发生，猪场应加强饲养管理，搞好环境卫生与消毒，对猪及时进行疫苗接种，并做好药物预防和保健。

关键词：猪繁殖障碍疾病发病机制防治对策饲养管理

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5株乳酸菌的分离鉴定与生物学特性研究

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江苏农业科学 2011年第1期39卷 390-392页

作者：王晓丽王永山诸玉梅朱小翠刘小娟周宇王冉江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所江苏南京210014

从泡菜和仔猪粪便中分离出5株乳酸菌,分别命名为RS、RB、RFT、RST、RO,结合细菌形态学、生理生化特性和16S rRNA序列同源性分析进行鉴定,并对其特性进行了研究。结果表明RS菌株为植物乳杆菌,RB、RO菌株为粪肠球菌,RFT、RST为屎肠球菌。... 详细信息

从泡菜和仔猪粪便中分离出5株乳酸菌,分别命名为RS、RB、RFT、RST、RO,结合细菌形态学、生理生化特性和16S rRNA序列同源性分析进行鉴定,并对其特性进行了研究。结果表明RS菌株为植物乳杆菌,RB、RO菌株为粪肠球菌,RFT、RST为屎肠球菌。其中RS菌株具有较好的耐酸性、一定的胆盐耐受力,对温度敏感;RB、RFT、RST、RO菌株对模拟肠液具有较强的耐受力,45~55℃处理30 min不影响其生长;5个菌株对大肠杆菌O157和沙门氏菌的抑菌率均达到98%~100%,可作为优良的益生菌候选菌。

关键词：乳酸菌分离鉴定生物学特性

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猪圆环病毒病免疫中存在的问题和解决途径

猪圆环病毒病免疫中存在的问题和解决途径

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第七届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：姜平南京农业大学动物医学院/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

本文介绍我国圆环病毒病感染的猪场较多，圆环病毒病流行越来越广泛，甚至育肥猪早期也常有感染。猪圆环病毒病的发生主要因素是PCV2感染，猪场应减少相关的诱因从而控制PCV2的发病。国内外有很多PCV2的商品化疫苗，但是在疫苗的使用过... 详细信息

本文介绍我国圆环病毒病感染的猪场较多，圆环病毒病流行越来越广泛，甚至育肥猪早期也常有感染。猪圆环病毒病的发生主要因素是PCV2感染，猪场应减少相关的诱因从而控制PCV2的发病。国内外有很多PCV2的商品化疫苗，但是在疫苗的使用过程中应有效降低副作用，提高免疫效果，并制定有效的猪场免疫程序。

关键词：猪圆环病毒病免疫保护发病机制

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