检索结果-内蒙古大学图书馆

猪业科学 2010年第10期27卷 32-36页

作者：庞然南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

根据影响猪场猪群免疫力低下的原因,如饲料营养、应激、疫苗接种、疾病、环境管理、药物和防疫消毒等因素,提出提高猪免疫力的一些措施,如提高饲料营养水平、消除应激因素、做好免疫工作,制定科学合理的免疫程序、改善猪场环境、建立人... 详细信息

根据影响猪场猪群免疫力低下的原因,如饲料营养、应激、疫苗接种、疾病、环境管理、药物和防疫消毒等因素,提出提高猪免疫力的一些措施,如提高饲料营养水平、消除应激因素、做好免疫工作,制定科学合理的免疫程序、改善猪场环境、建立人性化、合理的管理方式、合理使用药物和严格消毒制度等,提出养猪的一些见解。

关键词：免疫力影响因素解决措施

来源：评论

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八株芽孢杆菌的分离鉴定及其抗逆性比较

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中国兽医科学 2010年第10期40卷 1017-1022页

作者：王晓丽朱小翠王永山诸玉梅刘小娟周宇王冉江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所江苏南京210014

从土壤中分离到3个菌株,分别命名为KF、DY和LB1,从猪粪便中分离到5个菌株,分别命名为KH、K2X、KY1、LB2和LY3,通过16SrRNA基因序列分析,结合细菌形态学、生理生化特性进行了鉴定,并对分离菌的抗逆性进行了比较。经鉴定,KF、KH、K2X和KY... 详细信息

从土壤中分离到3个菌株,分别命名为KF、DY和LB1,从猪粪便中分离到5个菌株,分别命名为KH、K2X、KY1、LB2和LY3,通过16SrRNA基因序列分析,结合细菌形态学、生理生化特性进行了鉴定,并对分离菌的抗逆性进行了比较。经鉴定,KF、KH、K2X和KY1菌株为枯草芽孢杆菌,LB1、LB2和LY3菌株为蜡样芽孢杆菌,DY菌株为地衣芽孢杆菌;抗逆性比较结果显示,K2X菌株对温度比较敏感,其他菌株经60℃处理30min后不影响其生长;DY菌株耐酸性最强,能在pH3的胃液中正常生长;KY1菌株的耐酸性次之,耐胆盐能力最强,能在胆盐含量为6g/L的培养基和模拟肠液中正常生长。研究还发现,这8个菌株对共培养的大肠杆菌都没有抑制作用,只有KF、KH和LB2菌株对共培养的沙门氏菌分别有28.6%、27.0%和24.6%的抑菌效果。

关键词：芽孢杆菌 16S rRNA 抗逆性

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重组酵母鸡α干扰素的诱导表达及其抗MDV、NDV能力

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2010年第9期38卷 37-41页

作者：蔡梅红曹瑞兵曹景立王秀红陈溥言江苏大学食品与生物工程学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院中国人民解放军73081部队农副业基地江苏大学理学院

【目的】获得鸡α干扰素重组酵母菌诱导表达的最佳诱导时间和甲醇的体积分数,并测定诱导表达产物对鸡马立克氏病毒(MDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的抑制能力。【方法】挑取2个鸡α干扰素重组酵母菌单菌落至BMGY培养基中培养,待菌液OD600为4... 详细信息

【目的】获得鸡α干扰素重组酵母菌诱导表达的最佳诱导时间和甲醇的体积分数,并测定诱导表达产物对鸡马立克氏病毒(MDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的抑制能力。【方法】挑取2个鸡α干扰素重组酵母菌单菌落至BMGY培养基中培养,待菌液OD600为4左右时,分别转接至BMMY培养液诱导,1瓶每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇,另1瓶每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇,于24,48,72 h收集样品,备SDS-PAGE检测用。根据不同时间(24,48,72,96 h)诱导上清液表达量的差异,留用表达量最高时段的上清液,经初步纯化后,利用鸡胚成纤维细胞(CEF),分别测定重组酵母鸡α干扰素抑制MDV及NDV的能力。【结果】鸡α干扰素重组酵母菌在每隔12 h补加1次体积分数1%甲醇诱导48 h时,或每隔12 h补加1次体积分数0.5%甲醇诱导72 h时,重组酵母鸡α干扰素表达量均达到最高;且诱导上清液具有较好地抑制MDV、NDV的能力。【结论】获得了鸡α干扰素重组酵母菌小量发酵的最佳条件;获得的重组酵母鸡α干扰素对MDV和NDV有明显的抑制作用。

关键词：鸡α干扰素酵母 MDV NDV

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IBDV抗原表位与VP2组合基因的分子构建及其在昆虫细胞中的表达

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中国兽医学报 2010年第10期30卷 1301-1306页

作者：周宇王永山范红结欧阳伟唐雨德王忠灿江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京军区军事医学研究所江苏南京210002

运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBac HT中,转化***10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac HT-VP2-5e,用脂质体... 详细信息

运用PCR重叠延伸技术将传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位5e与VP2基因连接构建组合基因VP2-5e,将其插入到杆状病毒表达系统供体质粒pFastBac HT中,转化***10Bac感受态细胞,经三抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac HT-VP2-5e,用脂质体法转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒vBac HT-VP2-5e。对vBac HT-VP2-5e感染的Sf9细胞,以间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;电镜检查,重组VP2-5e蛋白能够自组装成病毒样颗粒(VLP);用免疫印迹分析(Western-blotting),在59 000处出现一条特异性蛋白条带。本试验为组合基因型重组IBD多价疫苗的研究奠定了基础。

关键词：传染性法氏囊病病毒 VP2基因抗原表位组合基因表达

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四种商品化试剂盒检测猪瘟病毒抗体的比较分析

四种商品化试剂盒检测猪瘟病毒抗体的比较分析

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第四届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：庞然张小敏周斌何丹妮陈溥言南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室，江苏南京 210095

随机抽取某规模猪场70头不同日龄阶段的猪血清样品，经中和抗体试验验证后，再使用4种商品化试剂盒进行猪瘟抗体检测，通过中和抗体试验和4种试剂盒之间阳性率和符合度的比较分析，希望了解各种试剂盒的敏感性和特异性，明确各种试剂盒... 详细信息

随机抽取某规模猪场70头不同日龄阶段的猪血清样品，经中和抗体试验验证后，再使用4种商品化试剂盒进行猪瘟抗体检测，通过中和抗体试验和4种试剂盒之间阳性率和符合度的比较分析，希望了解各种试剂盒的敏感性和特异性，明确各种试剂盒的应用范畴。并根据不同的生产情况，有针对性地选择试剂盒，进行临床猪血清样品的检测与监测。

关键词：猪瘟病毒抗体 ELISA试剂盒结果符合率

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2009～2010年华东部分地区猪圆环病毒病血清学调查

2009～2010年华东部分地区猪圆环病毒病血清学调查

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第四届南京农业大学畜牧兽医学术年会

作者：赵津周斌张小敏庞然何丹妮陈溥言南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室，江苏南京 210095

为了了解华东地区近两年来猪圆环病毒的流行情况，以便更好的控制猪圆环病毒病。应用韩国JBT(PCV2-ELISA)试剂盒对2009年1月～2010年9月送检的华东(包括河南)5个省(直辖市)的55个规模化猪场(均未免疫商品化猪圆环病毒疫苗)的826份猪血... 详细信息

为了了解华东地区近两年来猪圆环病毒的流行情况，以便更好的控制猪圆环病毒病。应用韩国JBT(PCV2-ELISA)试剂盒对2009年1月～2010年9月送检的华东(包括河南)5个省(直辖市)的55个规模化猪场(均未免疫商品化猪圆环病毒疫苗)的826份猪血清样品进行PCV2抗体水平检测。结果显示：送检血清中阳性数为507份，阳性率占61.38％;2009和2010年送检样品的阳性率分别为35.33％和80.63％，表明圆环病毒血清抗体阳性率逐年呈现明显上升趋势;对不同生长阶段的猪群检测结果分析表明，圆环病毒抗体阳性率随猪龄的增长而升高，且不同生长阶段猪群圆环病毒抗体抗体阳性率有明显差异。

关键词：猪圆环病毒病血清学调查抗体水平 ELISA方法

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猪肺炎支原体基因组学研究进展

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中国兽医杂志 2010年第4期46卷 63-65页

作者：祝永琴刘茂军邵国青江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

一个生物的全部DNA序列称作该生物的基因组(geneome),基因(gene)是基因组中有关蛋白质遗传信息的编码单位。基因组学是关于基因组结构、基因功能以及基因组比较的一门科学。[第一段]

关键词：基因组学猪肺炎支原体 DNA序列基因组结构基因组比较遗传信息基因功能蛋白质

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兔支气管败血波氏杆菌双夹心ELISA检测方法的建立

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江苏农业学报 2010年第1期26卷 120-125页

作者：熊富强王芳恽时锋林焱范志宇胡波赵宁江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京军区南京总医院比较医学科江苏南京210002 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为建立特异性好、敏感性高、稳定可靠的兔支气管败血波氏杆菌(Bb)双夹心ELISA检测方法,制备了兔抗Bb免疫血清和小鼠抗Bb腹水单抗(Bb McAb),并将它们提纯。用方阵法筛选最佳反应浓度,用特异性试验、敏感性试验和重复性试验对该方法进行鉴... 详细信息

为建立特异性好、敏感性高、稳定可靠的兔支气管败血波氏杆菌(Bb)双夹心ELISA检测方法,制备了兔抗Bb免疫血清和小鼠抗Bb腹水单抗(Bb McAb),并将它们提纯。用方阵法筛选最佳反应浓度,用特异性试验、敏感性试验和重复性试验对该方法进行鉴定,并与PCR检测方法比较。结果表明,兔抗Bb IgG的最佳稀释度为1∶6 400,浓度为2.5 mg/L;单抗的最佳稀释度为1∶800,浓度为5.0 mg/L。特异性试验和重复性试验结果表明,该方法特异性强、重复性好,与兔常见病菌大肠埃希氏菌、多杀性巴氏杆菌和产气荚膜梭菌均不发生反应,同时与PCR检测方法的符合率为100%。

关键词：支气管败血波氏杆菌免疫血清单克隆抗体双夹心ELISA

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引起免疫失败的传染性腔上囊病病毒VP2基因在大肠杆菌中的表达

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中国兽医科学 2010年第2期40卷 130-134页

作者：曹冰玉王永山范红结欧阳伟王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京军区军事医学研究所江苏南京210002

将从安徽省传染性腔上囊病(IBD)免疫失败的病鸡腔上囊组织中扩增的VP2基因定向克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了原核表达质粒pGEX-VP2,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3);经IPTG诱导后,用IBDV双抗体夹心ELISA检测,结果呈阳性反应;SDS-PAG... 详细信息

将从安徽省传染性腔上囊病(IBD)免疫失败的病鸡腔上囊组织中扩增的VP2基因定向克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建了原核表达质粒pGEX-VP2,并转化大肠杆菌Rosetta(DE3);经IPTG诱导后,用IBDV双抗体夹心ELISA检测,结果呈阳性反应;SDS-PAGE分析结果显示,重组VP2融合蛋白的分子质量为68ku,表达量约占菌体总蛋白量的16.0%,表达产物主要以包涵体形式存在于菌体内;Western-blotting结果显示,重组VP2蛋白与IBDV抗体发生反应,形成一条特异性蛋白带,表明获得的重组蛋白具有良好的抗原反应性。

关键词：传染性腔上囊病病毒 VP2基因原核表达

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传染性法氏囊病病毒抗原表位与乙型肝炎病毒核心抗原嵌合基因的构建及其表达产物分析

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中国预防兽医学报 2010年第11期32卷 879-883页

作者：刘小娟王永山欧阳伟张海彬王忠灿唐雨德江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京军区军事医学研究所江苏南京210002

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)... 详细信息

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多表位基因5epis的免疫效力,本研究应用重叠延伸PCR技术,在乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因的231位～232位核苷酸(77位～78位氨基酸残基)之间插入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,构建基于HBcAg修饰基因(mHBc)的抗原表位嵌合体基因分子载体pET-mHBc。将编码IBDV多表位基因5epis定向插入到pET-mHBc的mHBc基因中,获得嵌合体基因mHBc-5epis表达重组质粒pET-mHBc-5epis,并在大肠杆菌中表达。经SDS-PAGE分析,重组嵌合体蛋白的分子量约29 ku,表达量约占菌体总蛋白的47.6%;Western blot结果表明,重组嵌合体蛋白可与IBDV抗体反应形成1条特异性蛋白带;重组嵌合体蛋白呈病毒样颗粒(VLP),直径约100 nm～120 nm;用IBDV抗体夹心ELISA检测,抗原效价达到1∶200。本实验成功构建了5epis与HBcAg嵌合体基因,并在大肠杆菌中高效表达,具有IBDV抗原反应性的重组病毒样颗粒嵌合体蛋白,为研究其表位型基因工程疫苗提供了新途径。

关键词：传染性法氏囊病病毒抗原表位乙肝病毒核心抗原(HBcAg) 嵌合体

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