检索结果-内蒙古大学图书馆

高等农业院校文化角度提升学生创新能力的实证研究——以南京农业大学动物医学院为例

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科教文汇 2013年第24期 58-59页

作者：盛馨南京农业大学动物医学院江苏南京210095

该文通过对17所高等农业院校的调查研究,指出高等农业院校校园文化尤其是创新文化缺失对学生创新能力培养的影响,并以南京农业大学动物医学院为例开展实证研究,提出校园文化的创新途径。

关键词：创新文化实证研究高等农业院校

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鹅星状病毒2型单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

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南京农业大学学报 2025年第2期48卷 401-409页

作者：王雯佟贺杨兴淼曹瑞兵南京农业大学动物医学院江苏南京210095

[目的]本研究旨在制备抗鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)单克隆抗体并鉴定其识别的抗原表位,为快速检测GAstV感染和研究P2蛋白的结构与功能奠定基础。[方法]通过原核表达系统表达并纯化GAstV-2 P2蛋白,用其免疫6周龄BALB/c雌鼠,利... 详细信息

[目的]本研究旨在制备抗鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)单克隆抗体并鉴定其识别的抗原表位,为快速检测GAstV感染和研究P2蛋白的结构与功能奠定基础。[方法]通过原核表达系统表达并纯化GAstV-2 P2蛋白,用其免疫6周龄BALB/c雌鼠,利用杂交瘤技术,经过细胞筛选和亚克隆,获得3株能稳定分泌抗P2蛋白的单克隆抗体,利用Western blot(WB)和间接免疫荧光(IFA)鉴定单抗特异性,用获得的单抗对GAstV感染阴、阳性肾脏切片进行免疫组化检测,用间接ELISA测定单抗效价和亚型,同时构建P2蛋白的不同截短体来鉴定单抗识别抗原表位。[结果]本研究共获得3株能稳定分泌抗P2蛋白抗体的杂交瘤细胞,命名为1B10、3C6、5B1。单抗效价分别为1∶2048000、1∶512000、1∶256000,亚型鉴定结果显示,3株单抗的重链均为IgG2b,轻链均为Kappa型。WB和IFA结果显示,3株单抗均可以特异性结合鹅星状病毒。免疫组化结果显示,5B1和3C6可以应用于免疫组化的检测。抗原表位鉴定结果显示,1B10识别_(109)TSTTSTGGLITELRN_(123),3C6识别_(206)LTDPEEDDDPLS_(217),5B1识别_(96)LNPELETAVLRV_(107)。[结论]本研究成功制备能识别不同抗原表位的3株单克隆抗体,为快速检测GAstV感染和研究P2蛋白的结构与功能奠定物质基础。

关键词：鹅星状病毒 P2蛋白原核表达单克隆抗体抗原表位

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胞内劳森菌夹心ELISA检测方法的建立与应用

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中国农业科学 2025年第5期58卷 1032-1042页

作者：洪润婧周红蔺辉星范红结南京农业大学动物医学院

【目的】通过建立检测胞内劳森菌（Lawsonia intracellularis,LI）的夹心ELISA方法，进行猪增生性肠炎（porcine proliferative enteropathy,PPE）灭活疫苗研制中抗原含量的测定。【方法】以LI为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗LI多克隆... 详细信息

【目的】通过建立检测胞内劳森菌（Lawsonia intracellularis,LI）的夹心ELISA方法，进行猪增生性肠炎（porcine proliferative enteropathy,PPE）灭活疫苗研制中抗原含量的测定。【方法】以LI为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗LI多克隆抗体；同时免疫6周龄BALB/c小鼠，通过杂交瘤细胞技术制备抗LI单克隆抗体。用Western Blot、间接免疫荧光试验（IFA）和免疫过氧化物酶单层试验（IPMA）对制备的抗体进行鉴定。将单克隆抗体作为捕获抗体，多克隆抗体作为检测抗体，建立检测LI的夹心ELISA方法，优化反应条件，并对该方法进行特异性、敏感性和重复性评价。用优化后的检测方法对灭活后的LI进行定量检测。【结果】制备的多克隆抗体效价达1:409 600。经三轮亚克隆后共筛选出3株阳性杂交瘤细胞，分别命名为1B7、3C7、4F10，腹水效价均为1:204 800。3株单克隆抗体均与LI发生特异性反应，与肠致病性大肠杆菌（*** O157:H7）、猪霍乱沙门氏菌（Salmonella cholerasuis,***）、鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium,***）均无交叉反应。夹心ELISA方法经优化后条件为:捕获抗体为4F10；捕获抗体与检测抗体的工作浓度分别为1.25和0.625μg·m L-1；包被液为磷酸盐缓冲液，包被条件为4℃14 h；封闭液为1%明胶，封闭条件为37℃1.5 h；抗原孵育条件为37℃1 h；检测抗体孵育条件为37℃0.5 h；酶标抗体稀释度为1:16 000，孵育条件为37℃1.5 h；显色条件为室温孵育10 min。该方法对其他常见的肠道病原菌检测均为阴性，对LI的最低检测限为1×10～5个/m L，且批内、批间变异系数均小于10%。LI浓度在1×10～5—1×10～8个/m L范围内与P/N值呈线性关系，标准方程:y=2.7349x-11.643（R2=0.9966）。使用该方法对该实验室制备的PPE灭活疫苗进行抗原定量，结果显示灭活前后抗原含量基本不变，且两组疫苗样品定量结果批内重复性良好。120份猪临床粪便样品检测结果显示，用夹心ELISA方法共检出62份阳性样品，58份阴性样品；用巢式PCR方法共检出67份阳性样品，53份阴性样品。二者的阳性符合率为86.6%，阴性符合率为92.5%，总符合率为89.2%,kappa值为0.78。【结论】成功制备针对LI的多克隆抗体与单克隆抗体，建立并优化了检测LI抗原的夹心ELISA检测方法。该方法特异性与重复性良好，对LI的检测限为1×10～5个/m L。可用于PPE灭活疫苗制备过程中抗原的定量检测及PPE临床样品的检测。

关键词：胞内劳森菌单克隆抗体夹心ELISA 抗原定量

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我国奶牛乳房炎链球菌对常用抗菌药物耐药性的Meta分析

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中国人兽共患病学报 2025年第2期41卷 208-217页

作者：司星星徐祥瀚王晓明王丽平黄金虎南京农业大学动物医学院南京210095

目的旨在掌握我国奶牛乳房炎链球菌对常用抗菌药物的耐药情况、地区差异及变化规律,为我国奶牛乳房炎链球菌抗菌药物的合理使用和新药开发提供科学的指导意见。方法采用Meta分析方法,针对2000-2023年奶牛源链球菌对20种不同抗菌药物... 详细信息

目的旨在掌握我国奶牛乳房炎链球菌对常用抗菌药物的耐药情况、地区差异及变化规律,为我国奶牛乳房炎链球菌抗菌药物的合理使用和新药开发提供科学的指导意见。方法采用Meta分析方法,针对2000-2023年奶牛源链球菌对20种不同抗菌药物的耐药率数据进行搜集和整理,通过文献的排除和纳入,进行质量评价后,共计纳入文献67篇、链球菌3154株,对20种抗菌药物进行总体以及采集地区和时间亚组进行Meta分析。结果我国奶牛源链球菌对抗菌药物表现出不同程度的耐药,耐药率在30%以上的有:青霉素(60%,95%CI=0.48~0.72)、链霉素(57%,95%CI=0.46~0.68)、复方新诺明(56%,95%CI=0.28~0.82)、林可霉素(51%,95%CI=0.26~0.76)、四环素(49%,95%CI=0.40~0.59)、多西环素(42%,95%CI=0.24~0.60)、克林霉素(41%,95%CI=0.28~0.54)、氨苄西林(39%,95%CI=0.27~0.52)、红霉素(37%,95%CI=0.28~0.45)、卡那霉素(36%,95%CI=0.20~0.54)、阿莫西林(30%,95%CI=0.10~0.53)。从采集地区看,东北地区和西南地区的奶牛源链球菌对抗菌药物的耐药率普遍较高。从菌株分离时间看,奶牛源链球菌对四环素、多西环素和林可霉素等抗菌药物的耐药率升高趋势显著;而对链霉素、庆大霉素和恩诺沙星等抗菌药物的耐药率下降趋势较为显著。结论奶牛源链球菌对部分抗菌药物耐药性较为严重,不同地区的耐药性因养殖和管理不同而存在差异,仍需加强抗菌药物耐药率的监测、加强耐药机制的研究,规范抗菌药物的使用。

关键词：奶牛乳房炎链球菌耐药性 Meta分析

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猪链球菌SSU0468基因缺失株的构建及其对菌株形态和抗氧化能力的影响

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畜牧与兽医 2025年第3期57卷 111-117页

作者：董子璇孙俊杰代兴杨赵文斌王晓明王丽平南京农业大学动物医学院江苏南京210095

旨在初步探究猪链球菌mutT-like家族基因SSU0468的功能。采用无痕缺失方法构建猪链球菌P1/7的SSU0468基因缺失株,通过测定菌株的菌体形态、菌落溶血环大小、药物敏感性、生长速率,以及利福平突变频率和H2O2处理下的细菌存活率,比较野生... 详细信息

旨在初步探究猪链球菌mutT-like家族基因SSU0468的功能。采用无痕缺失方法构建猪链球菌P1/7的SSU0468基因缺失株,通过测定菌株的菌体形态、菌落溶血环大小、药物敏感性、生长速率,以及利福平突变频率和H2O2处理下的细菌存活率,比较野生株P1/7和缺失株ΔSSU0468的基本生物学特性差异。结果:经PCR和测序验证,SSU0468基因被成功敲除;与野生型菌株相比,SSU0468缺失后对菌株的溶血活性、药物敏感性无影响,但会使菌株生长变慢,并使菌体链长增加,发生丝状化;SSU0468缺失后还会导致菌株在对数期末期的突变频率显著下降(P<0.01),并且缺失株用不同浓度的H2O2处理后的存活率显著低于野生株(P<0.01)。试验结果提示SSU0468基因与猪链球菌形态以及生长相关,并可增强菌株的抗氧化能力。研究结果为揭示猪链球菌mutT-like家族的基因功能奠定基础。

关键词：猪链球菌 mutT-like基因菌体形态突变存活率

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盐酸头孢噻呋注射液在比格犬体内的药代动力学研究

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畜牧与兽医 2025年第4期57卷 45-50页

作者：王梦云王俊丽郭凡溪仇亚伟陈宝昌赵欣雨余祖功南京农业大学动物医学院江苏南京210095

旨在考察成年健康比格犬皮下注射盐酸头孢噻呋注射液后体内头孢噻呋的药物代谢动力学行为。选取6只成年健康比格犬,雌雄各半,以10 mg/kg剂量单次皮下注射10%盐酸头孢噻呋注射液,于给药前和给药后不同时间点经前肢静脉采血,分离血浆,血... 详细信息

旨在考察成年健康比格犬皮下注射盐酸头孢噻呋注射液后体内头孢噻呋的药物代谢动力学行为。选取6只成年健康比格犬,雌雄各半,以10 mg/kg剂量单次皮下注射10%盐酸头孢噻呋注射液,于给药前和给药后不同时间点经前肢静脉采血,分离血浆,血浆样品经二硫赤鲜醇(DTE)作用,使头孢噻呋及其脱氧呋喃甲酰头孢噻呋(DFC)代谢物从蛋白或含硫化合物中分离,经提取净化后用高效液相色谱法测定,外标法定量,测得的血药浓度以非房室模型计算药物代谢动力学参数。结果:达峰时间(T_(max))为(7.33±3.27)h,达峰浓度(C_(max))为(33.87±7.58)μg/mL,药-时曲线下面积(AUC_(0-t))为(720.54±150.39)h·μg/mL,药-时曲线下面积(AUC_(0-∞))为(726.77±148.90)h·μg/mL,消除半衰期(t_(1/2λz))为(16.61±5.51)h,单次给药可维持有效血药浓度达4 d以上。本试验结果表明,犬皮下注射自研盐酸头孢噻呋注射液后,消除缓慢且能够维持较长时间的有效血药浓度。

关键词：盐酸头孢噻呋注射液比格犬皮下注射药物代谢动力学高效液相色谱法

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福建省赤腹松鼠源盖塔病毒的分子鉴定及其遗传进化分析

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畜牧与兽医 2025年第1期57卷 105-110页

作者：鄢梓晴粟硕南京农业大学动物医学院江苏南京210095

盖塔病毒(Getah virus,GETV)是一种人畜共患的虫媒传播病毒,主要感染养殖动物,遗传多样性高,具有流行风险。本研究基于高通量测序技术,在来自福建省的死亡野生赤腹松鼠中首次发现了GETV,结合一代测序技术进一步鉴定到赤腹松鼠肺组织感染... 详细信息

盖塔病毒(Getah virus,GETV)是一种人畜共患的虫媒传播病毒,主要感染养殖动物,遗传多样性高,具有流行风险。本研究基于高通量测序技术,在来自福建省的死亡野生赤腹松鼠中首次发现了GETV,结合一代测序技术进一步鉴定到赤腹松鼠肺组织感染GETV,并成功获得该病毒的全基因组序列,命名为GETV/RS/China/2022毒株。基于GETV全基因组的系统发育分析结果表明,源自野生啮齿目动物的GETV/RS/China/2022毒株属于罕见GETV谱系Ⅱ型衍生株,这提示了GETV宿主谱的扩展以及野生动物对甲病毒进化和传播的重要性。

关键词：啮齿目动物盖塔病毒甲病毒系统发育分析野生动物

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猫杯状病毒VP1蛋白原核表达及间接ELISA检测方法的建立

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畜牧与兽医 2025年第3期57卷 87-94页

作者：姬晶晶王彬何昭群李嘉豪单衍可刘斐南京农业大学动物医学院江苏南京210095

旨在建立一种灵敏、准确、高通量检测猫杯状病毒(feline calicivirus, FCV)抗体的间接ELISA方法。本研究通过优化表达条件,在大肠杆菌中表达FCV的VP1蛋白,对重组蛋白进行镍离子亲和层析纯化和透析复性,通过SDS-PAGE和Western blot验证... 详细信息

旨在建立一种灵敏、准确、高通量检测猫杯状病毒(feline calicivirus, FCV)抗体的间接ELISA方法。本研究通过优化表达条件,在大肠杆菌中表达FCV的VP1蛋白,对重组蛋白进行镍离子亲和层析纯化和透析复性,通过SDS-PAGE和Western blot验证重组蛋白;以重组VP1蛋白为包被抗原建立检测FCV抗体的间接ELISA方法,通过方阵滴定法确定抗原最佳包被浓度和抗体最佳稀释度,优化抗原包被条件、样品孵育时间、封闭液种类等条件,并对其性能进行验证。结果:表达的目的蛋白条带清晰、大小正确,与FCV阳性血清具有良好的反应性,建立的间接ELISA方法检测6份FCV阴性血清,猫细小病毒(feline parvovirus, FPV)阳性血清,猫疱疹病毒(feline herpesvirus, FHV)阳性血清均为阴性,对FCV阳性血清的最低检出效价可达1∶10 240,组间与组内变异系数均小于10%,与商品化试剂盒相比符合率达100%。综上,本研究建立的间接ELISA方法具有良好的灵敏度、重复性和符合率,与其他猫常见病毒阳性血清不发生交叉反应,可以用于临床样品的检测,为FCV感染的诊断、防控、疫苗免疫效力评价提供了技术手段。

关键词：猫杯状病毒VP1蛋白原核表达间接ELISA

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恩诺沙星油混悬注射液在犬体内的药代动力学研究

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畜牧与兽医 2025年第2期57卷 71-77页

作者：马瑞霞郭凡溪苗强强王奕萌王紫晗曹迪李重阳张冯奕驰余祖功南京农业大学动物医学院江苏南京210095

旨在考察犬单次皮下注射恩诺沙星油混悬注射液后恩诺沙星及其代谢产物的药代动力学特征。6只成年健康比格犬以20 mg·kg^(-1)的剂量单次皮下注射给药,分别于给药前、后不同时间点采血并分离血浆。血浆样品经乙腈沉淀蛋白和二氯甲烷... 详细信息

旨在考察犬单次皮下注射恩诺沙星油混悬注射液后恩诺沙星及其代谢产物的药代动力学特征。6只成年健康比格犬以20 mg·kg^(-1)的剂量单次皮下注射给药,分别于给药前、后不同时间点采血并分离血浆。血浆样品经乙腈沉淀蛋白和二氯甲烷液液萃取处理后,应用高效液相色谱法检测,外标法定量,对恩诺沙星和环丙沙星血药浓度计算药动学参数。结果:恩诺沙星和环丙沙星的达峰浓度C_(max)分别为(1.28±0.19)μg·mL^(-1)和(0.50±0.11)μg·mL^(-1),达峰时间T_(max)分别为(3.17±0.75)h和(4.83±1.33)h,消除相的半衰期t_(1/2λz)分别为(29.39±5.54)h和(21.61±11.79)h,药时曲线下面积AUC_(0→t)分别为(31.96±5.38)μg·h·mL^(-1)和(8.01±1.66)μg·h·mL^(-1);恩诺沙星+环丙沙星总浓度的C_(max-Total)为(1.65±0.10)μg·mL^(-1),AUC_(0→t-Total)为(40.21±6.38)μg·h·mL^(-1),AUC_(0→24 h-Total)为(40.21±6.38)μg·h·mL^(-1),C_(max-Total)/MIC为3.31~27.55,AUC_(0→24 h-Total)l/MIC为45.80~381.65,AUC_(0→t-Total)/MIC为80.41~670.10,t>MIC最长可达108 h。结论:恩诺沙星油混悬注射液在犬体内消除半衰期较长,长效作用明显,可实现减少给药频次的目的。

关键词：药动学恩诺沙星油混悬注射液比格犬

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血管生成素在猪囊肿卵巢中的表达

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畜牧与兽医 2025年第5期57卷 49-55页

作者：陆露蔡江雪孙一然李平华黄瑞华贺斌南京农业大学动物医学院江苏南京210095 南京农业大学动物科技学院江苏南京210095

旨在观察猪正常和囊肿卵巢中血管生成素(ANG)的定位和表达情况,探讨ANG的表达与猪卵巢囊肿发生之间的关系。从屠宰场收集250~300日龄的大白猪母猪卵巢,根据形态将其分为正常组和卵巢囊肿组(n=8),通过HE染色对正常卵巢和囊肿卵巢进行形... 详细信息

旨在观察猪正常和囊肿卵巢中血管生成素(ANG)的定位和表达情况,探讨ANG的表达与猪卵巢囊肿发生之间的关系。从屠宰场收集250~300日龄的大白猪母猪卵巢,根据形态将其分为正常组和卵巢囊肿组(n=8),通过HE染色对正常卵巢和囊肿卵巢进行形态学观察,利用Western blot检测卵巢中ANG蛋白的表达,采用免疫组织化学法检测卵巢中ANG的定位和表达情况。结果:外观上囊肿卵泡和囊肿黄体体积明显增大,卵泡膜细胞和黄体细胞均出现肿大、间隙不均和脂滴空泡增多的异常现象;Western blot结果表明囊肿卵巢中ANG的表达量极显著升高(P<0.01);免疫组化检测显示ANG在囊肿卵泡膜细胞和囊肿黄体细胞中的表达量明显上升,而在囊肿卵巢正常部位处有腔卵泡膜细胞中的表达量明显减少。结论:ANG与猪卵巢囊肿的发生之间存在关联,提示ANG可以作为一种诊断标志物,为临床上卵巢囊肿的确诊提供帮助。

关键词：血管生成素卵巢囊肿母猪

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