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江苏省生物化学与分子生物学第九届会员代表大会暨第十次学术会议

作者：王珊珊杨维维曹洋张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京 210095

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降钙素基因相关肽(CGRP)对肉鸡摄食调控的影响

降钙素基因相关肽(CGRP)对肉鸡摄食调控的影响

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：卢镜宇严莉君张帅马文强赵茹茜南京农业大学农业部动物生理生化重点实验室

降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)是是一类重要的脑肠肽,由7个氨基酸组成的生物活性肽,属于降钙素(calcitonin,CT)基因家族,可通过中枢和外周神经系统调节摄食,即可通过直接调节血糖、食欲神经肽如NPY,CCK等或... 详细信息

降钙素基因相关肽(Calcitonin gene-related peptide,CGRP)是是一类重要的脑肠肽,由7个氨基酸组成的生物活性肽,属于降钙素(calcitonin,CT)基因家族,可通过中枢和外周神经系统调节摄食,即可通过直接调节血糖、食欲神经肽如NPY,CCK等或间接影响激素如胰岛素、胰高血糖素等分泌。本研究通过肉鸡静脉注射不同剂量CGRP,研究其对肉鸡摄食、饮水、血液生化指标及下丘脑摄食相关基因的影响。根据体重及采食量将30羽36日龄肉鸡分为对照组、20μg/kgCGRP组及40μg/kgCGRP组,每组10羽,分笼饲养。肉鸡预饲7d,预饲期自由摄食和饮水,舍内温湿度及光照按常规饲养管理要求进行。正式试验时,肉鸡自由饮水,禁食12h后,进行静脉注射试验。各组分别注射生理盐水、20μg/kg和40μg/kg体重的CGRP。注射结束后开始给料,记录各组10只肉鸡6h后的饲料重量,计算摄食量与饮水量,6h后屠宰,取血液并剖检取下丘脑。结果表明,与对照组相比,静脉注射CGRP对摄食量与饮水量无显著影响(P>0.05),但摄食量随CGRP注射量的增加有升高趋势,其中40μg/kg静脉CGRP注射后肉鸡摄食量明显增加(P=0.057)。20μg/kgCGRP静脉注射显著提高血液总蛋白及胆固醇水平(P<0.05)。肉鸡静脉注射CGRP对血液胰高血糖素与胰岛素含量并无显著差异(P>0.05)。40μg/kgCGRP静脉注射显著提高了下丘脑AGRP mRNA水平(P<0.05),但对但CCK、ORX、NPY、LEPR、FTO、GR mRNA水平并无显著影响。肉鸡静脉注射40μg/kgCGRP可提高肉鸡采食量,并显著增加肉鸡下丘脑AGRP表达。

关键词： CGRP 摄食基因表达肉鸡

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岭南黄羽肉种鸡饲喂半胱胺对后代肉鸡抗氧化功能的影响

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中国畜牧杂志 2013年第17期49卷 43-48页

作者：史明雷柯连坤赵茹茜杨晓静倪迎冬占秀安浙江大学动物科学学院浙江杭州310058 湖北省黄冈市畜牧局湖北黄冈438000 南京农业大学农业部动物生理生化重点实验室江苏南京210095

试验旨在研究肉用种母鸡饲喂半胱氨酸（CS）对肉仔鸡抗氧化功能的影响。选取300只67周龄健康岭南黄羽肉用种母鸡（矮脚B系），随机分成2组（每组5个重复，每重复30只）。对照组为玉米一豆粕型基础日粮，试验组为基础日粮＋120mg／kgCS... 详细信息

试验旨在研究肉用种母鸡饲喂半胱氨酸（CS）对肉仔鸡抗氧化功能的影响。选取300只67周龄健康岭南黄羽肉用种母鸡（矮脚B系），随机分成2组（每组5个重复，每重复30只）。对照组为玉米一豆粕型基础日粮，试验组为基础日粮＋120mg／kgCS。饲喂期7周。饲喂期第26—32天采集种蛋，每组每重复选取40枚种蛋进行孵化。结果表明：与对照组相比，种母鸡饲用CS对鸡胚肝脏抗氧化能力无明显影响（P〉0.05）。种母鸡饲用CS总体趋势是提高了1d仔鸡组织的抗氧化能力，且具有性别差异（P〈0．05）。种母鸡饲用CS提高了65d仔鸡组织的抗氧化能力．且具有性别差异。结果提示．肉用种母鸡饲喂半胱胺可以提高肉仔鸡的抗氧化能力且具有性别差异。

关键词：半胱氨酸抗氧化能力种母鸡肉仔鸡

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母猪低蛋白日粮增强雄性新生仔猪肝脏线粒体DNA编码基因的调控机制

母猪低蛋白日粮增强雄性新生仔猪肝脏线粒体DNA编码基因的调控机制

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中国畜牧兽医学会2013年学术年会

作者：贾逸敏李润生丛日华杨晓静孙钦伟 Nahid Parvizi 赵茹茜南京农业大学农业部生理生化重点开放实验室西北农林科技大学动物医学院

目的线粒体对维持细胞能量稳态有重要的作用,线粒体氧化磷酸化功能失调会导致代谢紊乱,影响动物健康。新生期是能量需求的关键期,母猪低蛋白日粮是否会改变新生仔猪肝脏线粒体氧化磷酸化功能以及其调控机制目前仍不清楚。材料方法本试... 详细信息

目的线粒体对维持细胞能量稳态有重要的作用,线粒体氧化磷酸化功能失调会导致代谢紊乱,影响动物健康。新生期是能量需求的关键期,母猪低蛋白日粮是否会改变新生仔猪肝脏线粒体氧化磷酸化功能以及其调控机制目前仍不清楚。材料方法本试验选取14头初产梅山母猪,随机分成两组。整个妊娠期分别饲喂正常日粮(含12%粗蛋白,SP)和低蛋白日粮(含6%粗蛋白,LP),母猪分娩后,从每窝选取平均体重雄性和雌性仔猪各1头,宰杀,收集血清和肝脏组织。结果母猪低蛋白日粮导致新生仔猪IUGR,雄性仔猪表现出低血糖。同时,降低了雄性仔猪肝脏线粒体DNA拷贝数(P<0.01),而上调了肝脏AMP含量(P<0.01)和降低了能荷值(P<0.01)。另外,线粒体DNA编码基因realtime-PCR检测显示,母猪饲喂低蛋白日粮显著升高了雄性仔猪肝脏ND6、COX1、COX2、COX3和CYTB mRNA表达(P<0.01)及COX酶活性(P<0.01)。此外,母猪低蛋白日粮显著显著降低了雄性仔猪肝脏线粒体DNA启动子区5′-甲基和5′-羟甲基化程度(P<0.01),并增加了糖皮质激素受体结合在启动子的含量(P<0.01),而显著降低了雌性仔猪肝脏线粒体DNA启动子区5′-甲基和5′-羟甲基化程度(P<0.01)。结论综上所述,母猪妊娠期低蛋白日粮能导致新生仔猪肝脏性别依赖的表遗传改变,这种变化导致了新生仔猪肝脏氧化磷酸化功能的改变,而糖皮质激素受体可能也参与了母体营养对仔猪肝脏线粒体DNA编码基因的转录调控。

关键词：新生仔猪肝脏线粒体甲基化 miRNA

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牛磺脱氧胆酸钠和CpGDNA对灭活H9N2禽流感病毒鼻腔免疫鸭的呼吸道抗体分泌细胞的影响

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畜牧兽医学报 2012年第5期43卷 761-766页

作者：康海泓申育萌王红丽杨倩南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

运用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合鸭源禽流感H9N2灭活病毒滴鼻免疫雏鸭,通过检测鸭呼吸道各组织中IgA和IgG抗体分泌细胞面积的变化对免疫效果进行评价。结果发现:应用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后3、5和7周,鼻腔... 详细信息

运用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合鸭源禽流感H9N2灭活病毒滴鼻免疫雏鸭,通过检测鸭呼吸道各组织中IgA和IgG抗体分泌细胞面积的变化对免疫效果进行评价。结果发现:应用牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后3、5和7周,鼻腔、气管和气管叉组织中的IgA和IgG分泌细胞面积显著或极显著(P<0.05或P<0.01)高于单独H9N2灭活病毒免疫后的水平;应用CpG DNA配合H9N2灭活病毒鼻腔免疫后鼻腔和气管组织中IgA和IgG分泌细胞的面积有部分提高(P<0.05);而单独运用H9N2灭活病毒鼻腔免疫后IgA和IgG分泌细胞面积同对照组相比没有显著差异。结果表明:在牛磺脱氧胆酸钠和CpG DNA的配合下,禽流感H9N2灭活病毒鼻腔免疫能够提高雏鸭呼吸道组织中IgA分泌细胞和IgG分泌细胞的面积,有效地增强呼吸道局部的免疫应答水平。

关键词：鸭鼻腔免疫呼吸道禽流感灭活病毒抗体分泌细胞

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山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的组织结构观察

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畜牧兽医学报 2012年第1期43卷 133-137页

作者：李正平李鹏成杨倩南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

选取健康10月龄奶山羊10头,断头宰杀后取咽扁桃体和咽鼓管扁桃体,应用组织学光镜和电镜制片技术研究咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的显微和亚显微组织结构。结果表明:山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的黏膜上皮主要由2～3层多边形上皮细胞组成,部... 详细信息

选取健康10月龄奶山羊10头,断头宰杀后取咽扁桃体和咽鼓管扁桃体,应用组织学光镜和电镜制片技术研究咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的显微和亚显微组织结构。结果表明:山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体的黏膜上皮主要由2～3层多边形上皮细胞组成,部分区域只有单层扁平细胞,相邻上皮细胞间空隙很大,上皮细胞表面有丰富的微绒毛。上皮细胞之间和黏膜上皮下方固有层内有大量淋巴细胞浸润。扁桃体的实质部分由数个次级淋巴小结和弥散淋巴组织构成,弥散淋巴组织中有大量分布的淋巴管和毛细血管后微静脉。此外,在紧贴黏膜上皮细胞下方的固有层和淋巴滤泡中可观察到少量的树突状细胞。结果提示山羊的咽扁桃体和咽鼓管扁桃体可作为鼻腔免疫的主要诱导位点和效应部位。

关键词：山羊扁桃体淋巴细胞鼻腔免疫

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不同精粗比日粮对泌乳山羊肝脏蛋白表达谱及乳脂肪合成的影响

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南京农业大学学报 2012年第6期35卷 97-103页

作者：姜雪元张树坤张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

采用双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)结合MAIDI-TOF/TOF质谱方法分析不同精粗比日粮条件下肝脏蛋白/酶表达谱的差异,探讨不同精粗比日粮条件下肝脏糖脂代谢与乳脂肪合成的关系及可能机制。8只健康的泌乳中期山羊随机分... 详细信息

采用双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)结合MAIDI-TOF/TOF质谱方法分析不同精粗比日粮条件下肝脏蛋白/酶表达谱的差异,探讨不同精粗比日粮条件下肝脏糖脂代谢与乳脂肪合成的关系及可能机制。8只健康的泌乳中期山羊随机分为2组,日粮精粗比分别为4∶6(低精料)和6∶4(高精料),采用2×2拉丁方设计,2次重复。取乳样,测定产奶量和乳中甘油三酯(TG)的含量,并进行活体肝脏穿刺取样,应用双向电泳技术对肝脏样品进行蛋白表达谱分析。试验结果表明:与低精料组相比,高精料组山羊日平均产奶量显著增高(P<0.05),而乳中TG含量显著降低(P<0.05)。经PDQuest 7.1软件分析和MAIDI-TOF/TOF质谱分析发现在两种日粮模式下表达量存在3倍以上差异的蛋白点有34个,其中15个得到鉴定。被鉴定的蛋白主要涉及物质代谢和能量转移。其中,当精料比例提高时,脂肪分解代谢的关键酶脂酰CoA合成酶(ACS)和细胞色素b5的表达上调;糖异生作用的关键酶磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)表达下调,参与糖分解代谢的烯醇化酶的表达上调。结论:饲喂高精料日粮,产奶量增加而乳中TG含量降低,其机制可能与肝脏中糖脂分解代谢加强,糖异生作用受阻,竞争消耗了乳腺TG合成前体物有关。

关键词：不同精粗比日粮泌乳山羊肝脏蛋白表达谱乳脂肪

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不同精粗饲料对泌乳中期山羊氨基酸的代谢流向及乳蛋白含量的影响

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草业学报 2012年第3期21卷 258-265页

作者：张树坤姜雪元倪迎冬沈向真庄苏张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

通过检测泌乳中期山羊血浆及乳中游离氨基酸含量的变化,探讨不同精粗比饲料对机体中氨基酸(aminoacids,AA)的代谢流向及乳蛋白的影响。选用泌乳中期山羊7只,随机分为2组,分别饲喂精粗比4∶6(低精料组)和6∶4(高精料组)日粮,颈静脉血管... 详细信息

通过检测泌乳中期山羊血浆及乳中游离氨基酸含量的变化,探讨不同精粗比饲料对机体中氨基酸(aminoacids,AA)的代谢流向及乳蛋白的影响。选用泌乳中期山羊7只,随机分为2组,分别饲喂精粗比4∶6(低精料组)和6∶4(高精料组)日粮,颈静脉血管瘘采血,手工挤奶取奶样。Bradford法测定乳中总蛋白质浓度,RP-HPLC检测山羊血浆和乳中游离氨基酸的含量。结果表明,2组山羊血浆中均分离出14种游离氨基酸,乳中分离出8种游离氨基酸,不同精粗比饲料对血液或乳中游离氨基酸谱无明显影响。不同精粗比日粮情况下,除丙氨酸外,血液中游离氨基酸的含量均高于乳中同种氨基酸的含量;且血液中生酮氨基酸(Leu,Lys)、兼性氨基酸(Phe,Ile)和支链氨基酸(Leu,Ile和Val)含量显著或极显著高于乳中。高精料组除Gly和Ala外,其余氨基酸含量均低于低精料组;乳中总蛋白浓度略高于低精料组,但无统计学差异。表明血液中游离氨基酸为乳蛋白的合成提供了原料和能量保证。饲喂高精料日粮,血液中游离氨基酸含量较低,不利于乳蛋白含量和产量的提高。

关键词：不同日粮泌乳中期山羊血浆乳乳蛋白游离氨基酸

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A/J小鼠感染猪链球菌2型后脾脏消减cDNA文库的构建及相关差异基因表达分析

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南京农业大学学报 2012年第3期35卷 94-100页

作者：谢正露沈学怀殷复建刘琳马海田范红结南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095

为了分离与猪链球菌2型感染密切相关的基因,利用抑制性消减杂交(SSH)技术构建了8周龄A/J小鼠感染猪链球菌2型后的脾脏消减cDNA文库,并对其中169个阳性克隆进行测序,去除冗余的cDNA序列载体并聚类拼接后共获得110条差异表达序列标签(EST... 详细信息

为了分离与猪链球菌2型感染密切相关的基因,利用抑制性消减杂交(SSH)技术构建了8周龄A/J小鼠感染猪链球菌2型后的脾脏消减cDNA文库,并对其中169个阳性克隆进行测序,去除冗余的cDNA序列载体并聚类拼接后共获得110条差异表达序列标签(EST)。利用GenBank的BLAST软件分析比较核酸和蛋白质同源性,发现共有36个基因与这些EST具有高度的同源性,它们分别参与细胞成分、免疫、信号转导、凋亡、转录等重要功能。这些差异表达基因主要有ATP/GTP结合蛋白1(Agtpbp1)、天冬氨酸-谷氨酸-丙氨酸-天冬氨酸盒多肽5、核蛋白p68、ATP-依赖RNA解旋酶、真核生物转录因子2亚基(Eif2s2)、Na+/K+-ATP酶转运β3多肽、溶菌酶1、溶菌酶2等基因。结论:这些差异表达基因在猪链球菌2型感染过程中可能发挥重要功能。

关键词： A/J小鼠抑制性消减杂交差异表达基因消减cDNA文库

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Kisspeptin-10对鹌鹑开产及胆固醇代谢的影响

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南京农业大学学报 2012年第3期35卷 89-93页

作者：吴晶詹年谢怀东倪迎冬赵茹茜南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

为了探索kisspeptin-10(Kp-10)对禽类产蛋启动和脂代谢的影响,将75羽22日龄雌鹌鹑随机分为3组:腹腔注射300μL生理盐水组(对照组,C),注射0.1 nmol Kp-10(低剂量组,L)和1 nmol Kp-10组(高剂量组,H),每日注射1次,连续注射3周。记录鹌鹑开... 详细信息

为了探索kisspeptin-10(Kp-10)对禽类产蛋启动和脂代谢的影响,将75羽22日龄雌鹌鹑随机分为3组:腹腔注射300μL生理盐水组(对照组,C),注射0.1 nmol Kp-10(低剂量组,L)和1 nmol Kp-10组(高剂量组,H),每日注射1次,连续注射3周。记录鹌鹑开产情况并于60日龄时采集血液和肝脏组织,检测血清中雌二醇(E2),血清和肝脏中总胆固醇(Tch)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量,以及肝脏胆固醇代谢相关因子mRNA和蛋白水平。结果表明:与对照组相比,L组和H组鹌鹑开产率分别显著和极显著提高(P<0.05和P<0.01);注射Kp-10增加血液E2浓度且于高剂量时达显著水平;H组鹌鹑血清Tch和HDL-C浓度显著降低,肝脏Tch显著升高;L组血液和肝脏HDL-C浓度显著降低;H组鹌鹑肝脏中胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)mRNA转录极显著增加,而3-羟-3-甲基戊二酸单酰CoA还原酶(HMGCR)mRNA、固醇调节元件结合蛋白(SREBP-2)mRNA转录和蛋白表达均无显著性差异(P>0.05)。结论:产蛋前注射Kp-10可显著提高鹌鹑开产率,增加雌激素分泌水平,增强肝脏合成胆固醇的能力。

关键词： kispeptin-10 开产率胆固醇肝脏鹌鹑

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