检索结果-内蒙古大学图书馆

南京农业大学学报 2019年第1期42卷 130-136页

作者：姚瑶李龙龙姜志浩马海田南京农业大学动物医学院/农业农村部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

[目的]分析不同浓度棕榈酸诱导对BRL-3A细胞(大鼠肝脏间质细胞)胰岛素抵抗和脂代谢的影响,为研究胰岛素抵抗发生的生物化学机制提供肝细胞模型。[方法]采用不同浓度(0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.25 mmol·L^(-1))棕榈酸处理BRL-3... 详细信息

[目的]分析不同浓度棕榈酸诱导对BRL-3A细胞(大鼠肝脏间质细胞)胰岛素抵抗和脂代谢的影响,为研究胰岛素抵抗发生的生物化学机制提供肝细胞模型。[方法]采用不同浓度(0、0.05、0.10、0.15、0.20和0.25 mmol·L^(-1))棕榈酸处理BRL-3A细胞,分别检测细胞活力、细胞死亡率、甘油三酯含量和葡萄糖消耗量; RT-qPCR法检测脂代谢相关基因表达;免疫印迹法检测胰岛素抵抗相关蛋白表达。[结果]与对照组相比,0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸处理12～48 h显著降低BRL-3A细胞活力,并显著增加其死亡率。0.15～0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸处理显著增加BRL-3A细胞中脂滴的堆积及甘油三酯含量,显著降低葡萄糖消耗量。0.15～0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸处理显著增加脂代谢合成相关基因表达,显著降低脂代谢分解相关基因和胰岛素抵抗相关蛋白的表达。[结论]0.15～0.25 mmol·L^(-1)棕榈酸处理可诱发BRL-3A细胞发生脂代谢紊乱和胰岛素抵抗。考虑到剂量效应和细胞毒性,0.20 mmol·L^(-1)棕榈酸处理BRL-3A细胞24 h可作为后续探讨胰岛素抵抗机制相关研究理想模型构建的最佳条件。

关键词：棕榈酸 BRL-3A细胞胰岛素抵抗脂代谢紊乱

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肾素血管紧张素系统(RAS)两条轴相互负向调节与大鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)肝损伤的关系研究

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畜牧与兽医 2019年第5期51卷 48-54页

作者：刘颖王凯纪晓霞张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

探讨了肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)两条轴对大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝脏损伤的相互负向调节作用。30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,... 详细信息

探讨了肾素血管紧张素系统(renin angiotensin system,RAS)两条轴对大鼠非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)肝脏损伤的相互负向调节作用。30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和用药组。除正常对照组外,其余2组饲喂高脂饲料,用药组另外给伐他汀50 mg/kg·d。3周后,宰杀大鼠,测定血清中甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量;测定肝组织匀浆羟自由基(·OH)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)酶活性;ELISA法测定组织匀浆中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素1-7(Ang1-7)及白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Western blot分析肝组织血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素转化酶2(ACE2)、血管紧张素Ⅱ受体1亚型(AT1R)、Mas受体(MasR)蛋白水平。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清TG、AST和ALT含量以及·OH和NOS活性均显著升高(P<0.05), T-AOC、SOD活性显著降低(P<0.05);IL-1β和TNF-α含量极显著升高(P<0.01);ACE、ACE2的蛋白表达水平与ACE/ACE2的比值均显著升高(P<0.05),AngⅡ、Ang1-7含量与AT1R表达升高(P<0.05),MasR表达有升高趋势(P>0.05)。结论:高脂饲料连续饲喂3周可诱导大鼠发生NAFLD,肝脏局部RAS两条轴均处于激活状态,ACE介导AngⅡ-AT1R经典轴促进肝损伤,而ACE2介导Ang1-7-MasR轴抵抗肝损伤;ACE2负性调节RAS作用,对大鼠NAFLD时肝脏氧化应激及炎性损伤有一定保护作用。

关键词：肾素血管紧张素系统(RAS) 负向调节血管紧张素转化酶2(ACE2) 非酒精性脂肪肝病肝损伤

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血管紧张素转化酶2(ACE2)在保育猪肠道增生性炎症中的作用

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中国兽医学报 2019年第9期39卷 1806-1812页

作者：申正杰聂建言刘颖纪晓霞张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

选取49日龄慢性腹泻保育猪为试验对象,测定其血液中葡萄糖(GLU)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)等生化指标;制作病理组织切片,观察胃、十二指肠、空肠... 详细信息

选取49日龄慢性腹泻保育猪为试验对象,测定其血液中葡萄糖(GLU)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)等生化指标;制作病理组织切片,观察胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠等组织病理变化;检测保育猪十二指肠、回肠组织中ACE2、Mas受体mRNA的表达及AngⅡ、Ang1-7的含量;比较分析十二指肠、回肠组织中炎症相关因子TNF-α、IL-1β、IL-10 mRNA的表达变化。结果显示,腹泻猪血液中GLB、AST含量显著上调(P<0.05),GLU、TG和ALP显著下调(P<0.05);病理学观察发现,腹泻猪胃组织上皮损伤脱落;十二指肠肠粘膜脱落、肠腺细胞大量增生、肠隐窝增厚;空肠肠绒毛坏死,黏膜上皮细胞坏死脱落,肠腺上皮细胞增生;回肠、结肠肠腺细胞均明显增生;腹泻组与对照组猪相比,十二指肠中RAS系统相关成员ACE2、Mas受体mRNA表达显著下调(P<0.05),Ang1-7含量显著下降(P<0.05),但AngⅡ的含量显著升高(P<0.05),并且其炎症相关因子TNF-α、IL-1βmRNA表达也显著上调(P<0.05,P<0.01),IL-10无显著变化。结果表明,腹泻猪表现明显增生性炎症,在此情况下,高水平的AngⅡ的促炎作用处于优势,ACE2及其介导的ACE2-Ang1-7-MAS受体轴的抗炎作用处于劣势。

关键词： ACE2 保育猪肠道增生性炎症作用

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不同高精料耐受时间对泌乳期山羊肝脏糖脂代谢的影响

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草业学报 2018年第1期27卷 177-186页

作者：罗燕文田平华灿枫陶诗煜倪迎冬南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

为了研究饲喂高精料日粮对泌乳期山羊肝脏糖脂代谢的影响,试验选用16只健康经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为3组,低精料组(LC,n=5)、长期高精料组(HL,n=7)和短期高精料组(HS,n=4)。实验结束后采集血液和肝脏组织。结果显示,与LC组相比,H... 详细信息

为了研究饲喂高精料日粮对泌乳期山羊肝脏糖脂代谢的影响,试验选用16只健康经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为3组,低精料组(LC,n=5)、长期高精料组(HL,n=7)和短期高精料组(HS,n=4)。实验结束后采集血液和肝脏组织。结果显示,与LC组相比,HL和HS组奶山羊血糖和肝糖原水平显著升高(P<0.05),血液中甘油三酯(TG)水平显著降低(P<0.05),胆固醇(Tch)含量没有显著变化(P>0.05);HS组山羊肝脏TG和Tch水平显著增加(P<0.05),HL组无显著变化(P>0.05)。HL组肝脏中丙酮酸羧化酶(PC)和葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)mRNA表达水平显著上调;HS组肝脏PC、固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)mRNA表达水平显著升高(P<0.05),SREBP-2有升高的趋势(P=0.76),肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)和胆固醇7α-羟化酶(CYP7α1)mRNA表达显著下降(P<0.05);线粒体型磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PCK2)蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。以上结果表明,短期饲喂高精料日粮能增强肝脏糖异生能力,促进肝脏胆固醇和脂肪合成;而长期饲喂高精料日粮能增强肝脏糖异生作用,但对胆固醇和脂肪代谢相关基因的表达没有影响。

关键词：高精料日粮糖代谢脂代谢肝脏山羊

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真核表达质粒pcDNA.3.1(+)-ACE2的构建及其在CHO细胞中的表达

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畜牧与兽医 2018年第1期50卷 54-58页

作者：肖航王凯王换换王鲲张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室

为了构建pcDNA.3.1（＋）-血管紧张素转化酶2（ACE2）真核表达质粒并检测在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中的表达,从羊肾脏中提取总RNA,经RT-PCR扩增出ACE2基因,后将其与pcDNA3.1载体进行连接重组,构建pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,经H... 详细信息

为了构建pcDNA.3.1（＋）-血管紧张素转化酶2（ACE2）真核表达质粒并检测在中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中的表达,从羊肾脏中提取总RNA,经RT-PCR扩增出ACE2基因,后将其与pcDNA3.1载体进行连接重组,构建pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,经HindⅢ、XhoⅠ限制性内切酶双酶切及DNA序列测序分析等方法验证后,通过Lipofectamine 3000脂质体介导转染至CHO细胞,Western blot法检验ACE2基因在蛋白质水平上的表达。结果显示：RT-PCR扩增出大小约为2 200 bp特异ACE2基因片段,连接获得的pcDNA3.1（＋）-ACE2重组体经HindⅢ、XhoⅠ酶切后分别出现约2 200 bp和5 000 bp片段,测序分析与Gen Bank上公布的结果完全一致,表明成功克隆了重组pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,Western blot检测显示该pcDNA3.1（＋）-ACE2能在CHO细胞中表达。本研究成功构建了pcDNA3.1（＋）-ACE2真核表达质粒,并证实其能在CHO中表达,为后续探究ACE2蛋白活性及其作用的研究奠定了基础。

关键词：血管紧张素转化酶2(ACE 2) 真核表达质粒转染 CHO细胞

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饲喂高精料日粮对泌乳期山羊泌乳性能及抗氧化能力的影响

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草业学报 2017年第4期26卷 99-105页

作者：田平孙利利董海波田靖端木永前陶诗煜倪迎冬南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

为了研究长期饲喂高精料日粮对泌乳期山羊泌乳性能和乳腺组织抗氧化能力的影响,实验选用12只健康经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为两组,分别饲喂精粗比为35∶65(低精料组,LC,n=6)和65∶35(高精料组,HC,n=6)的日粮。实验期共10周,实验期... 详细信息

为了研究长期饲喂高精料日粮对泌乳期山羊泌乳性能和乳腺组织抗氧化能力的影响,实验选用12只健康经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为两组,分别饲喂精粗比为35∶65(低精料组,LC,n=6)和65∶35(高精料组,HC,n=6)的日粮。实验期共10周,实验期间采集羊奶与血液;实验结束后采用静脉注射的方法对山羊进行安乐死,随后采集乳腺组织并迅速置于液氮中速冻后保存于-70℃待测。结果显示,HC组山羊乳产量显著高于LC组(P<0.01),同时乳中乳糖,乳蛋白的比例随着泌乳时间的增加而显著升高。与LC组山羊比较,HC组山羊乳腺组织中SREBP1和GLUT1 mRNA表达显著下降(P<0.05);磷酸化AKT1蛋白表达呈下降趋势(P=0.08);除此之外,HC组山羊乳腺组织的总抗氧化能力T-AOC(P=0.06)和GSH酶活均呈下降趋势(P=0.08)。这些结果表明,长期饲喂高精料日粮可降低乳腺组织的抗氧化能力,同时可降低乳中乳脂率以及乳腺组织中SREBP-1和P-AKT的表达。

关键词：高精料日粮泌乳性能抗氧化乳腺山羊

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高精料对泌乳奶山羊瘤胃上皮氧化应激和胆固醇代谢的影响

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草业学报 2017年第11期26卷 94-103页

作者：耿雅丽田平罗燕文华灿枫陶诗煜田靖倪迎冬南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

为了研究长期或短期饲喂高精料日粮对泌乳期奶山羊瘤胃上皮组织氧化应激和胆固醇代谢的影响,实验选用17只健康的经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为3组:饲喂低精料组(对照组,LC,n=5);长期饲喂高精料组(HL,n=7),19周饲喂期;短期饲喂高精料... 详细信息

为了研究长期或短期饲喂高精料日粮对泌乳期奶山羊瘤胃上皮组织氧化应激和胆固醇代谢的影响,实验选用17只健康的经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为3组:饲喂低精料组(对照组,LC,n=5);长期饲喂高精料组(HL,n=7),19周饲喂期;短期饲喂高精料组(HS,n=5),4周饲喂期。实验结束后采集瘤胃组织,用PBS反复清洗,于液氮中速冻后置于-80℃冰箱保存。结果显示,与对照组相比,HL和HS组山羊瘤胃上皮组织中细胞周期相关基因CDK2和CDK4 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),且HS组p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P<0.05),但GPR41和GPR43蛋白表达无显著变化(P>0.05);HL和HS组山羊瘤胃上皮组织促细胞凋亡基因Casepase9mRNA表达显著升高(P<0.05),HS组抗凋亡Bcl-2/Bax mRNA表达比例呈下降趋势(0.050.05);HS组瘤胃上皮组织中胆固醇含量下降达显著水平(P<0.05),且HL组呈下降趋势(0.050.05)。与HL组相比,HS组山羊瘤胃上皮组织中总抗氧化能力T-AOC显著升高(P<0.05);且胆固醇含量显著下降(P<0.05)。以上结果说明,短期饲喂高精料日粮可加快泌乳期奶山羊瘤胃上皮组织的更新,提高组织总抗氧化能力;而长期饲喂高精料日粮未引起细胞增殖相关蛋白和总抗氧化能力的显著变化;饲喂高精料日粮可以加快瘤胃上皮组织对VFA的转运。此外,饲喂高精料日粮引起瘤胃上皮组织内胆固醇含量降低,胆固醇酰基转移酶基因表达的显著上调,提示其对瘤胃上皮组织更新的潜在影响。

关键词：高精料瘤胃上皮氧化应激胆固醇山羊

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短期灌服丁酸钠对小鼠的保健功效研究

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黑龙江畜牧兽医 2018年第14期 152-154页

作者：洪键贾逸敏赵茹茜南京农业大学农业部动物生理生化重点实验室南京210095 盐城师范学院海洋与生物工程学院江苏盐城224007

为了研究丁酸对非肥胖小鼠的作用功效,试验选择3周龄SPF雄性小鼠20只,饲养成年后随机分为试验组和对照组,试验组灌胃丁酸钠,对照组灌胃纯化水,每2 d灌胃1次,共灌胃5次。试验结束时测定小鼠的生长指标、血液激素、生化指标以及骨骼肌和... 详细信息

为了研究丁酸对非肥胖小鼠的作用功效,试验选择3周龄SPF雄性小鼠20只,饲养成年后随机分为试验组和对照组,试验组灌胃丁酸钠,对照组灌胃纯化水,每2 d灌胃1次,共灌胃5次。试验结束时测定小鼠的生长指标、血液激素、生化指标以及骨骼肌和肝脏中的脂质含量。结果表明：与对照组比较,灌胃丁酸钠能显著降低小鼠的附睾脂肪重和附睾脂肪指数（P〈0.05）,骨骼肌中三酰甘油含量显著降低（P〈0.05）,但血液中三酰甘油、IL-6含量显著升高（P〈0.05）,肝脏中三酰甘油含量显著升高（P〈0.05）。说明在非肥胖条件下短期灌胃丁酸钠对小鼠具有一定的保健功效,但同时会造成体内脂质的沉积并引起炎症反应。

关键词：丁酸生化指标激素指标保健功效脂质沉积小鼠

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ACE 2在奶牛乳腺中的表达定位及其抗炎性损伤作用的研究

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畜牧兽医学报 2017年第3期48卷 552-560页

作者：刘小倩刘颖荣超王鲲肖航张源淑南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

本研究旨在通过体内外试验,明确ACE 2在奶牛乳腺中的表达定位,并对其在高精料饲喂致内源性奶牛乳房炎中的抗损伤作用进行初步探讨。体外试验分别选用牛乳腺组织样品和牛乳腺上皮细胞(Mac-T细胞),RTPCR和Western blotting法检测ACE 2在... 详细信息

本研究旨在通过体内外试验,明确ACE 2在奶牛乳腺中的表达定位,并对其在高精料饲喂致内源性奶牛乳房炎中的抗损伤作用进行初步探讨。体外试验分别选用牛乳腺组织样品和牛乳腺上皮细胞(Mac-T细胞),RTPCR和Western blotting法检测ACE 2在奶牛乳腺组织中的mRNA和蛋白表达;免疫荧光法测定ACE 2蛋白在Mac-T细胞中的定位。体内试验,选用6头健康泌乳期荷斯坦奶牛,随机分为对照组和高精料饲喂组,饲喂20周后,活体采集乳腺组织及乳。测定乳中LPS含量、体细胞数及相关炎性指标;制作乳腺组织学切片;分析乳腺组织中ACE、AT1、ACE2、MasR mRNA表达水平,ELISA法检测Ang II、Ang1-7含量。体外试验结果表明,奶牛乳腺中ACE2在基因和蛋白水平上均有表达,细胞学定位在细胞的胞浆和胞膜。体内试验结果显示,高精料长期饲喂,奶牛乳中体细胞数和LPS含量均明显升高(P<0.01);乳中NAGase和AKP酶活力均显著高于正常对照组(P<0.05),MPO活力两组之间无明显差异;乳腺组织学表现出一定炎性损伤变化;其中Ang1-7含量显著增高(P<0.05),Ang II的含量显著降低(P<0.05);ACE、AT 1、ACE 2、MasR mRNA表达量均显著上升((P<0.05)),ACE2/ACE mRNA比值高于对照组。本研究首次证实奶牛乳腺组织中有ACE 2的存在。在高精料长期饲喂造成奶牛乳房炎性损伤时,乳腺组织中RAS处于激活状态,ACE/ACE2比例失衡,以ACE 2-Ang1-7-MasR轴的活力处于优势状态,即ACE 2的抗损伤作用占优势。ACE 2可能通过降解AngII,产生Ang1-7发挥抗损伤作用,对乳腺组织炎性损伤具有一定的保护作用。

关键词：肾素-血管紧张素系统(RAS) 血管紧张素转化酶2(ACE 2) 奶牛乳腺组织表达抗损伤

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长期地塞米松处理对山羊肝脏甘油三酯代谢的影响

长期地塞米松处理对山羊肝脏甘油三酯代谢的影响

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中国畜牧兽医学会动物生理生化学分会第九届全国代表大会暨第十五次学术交流会

作者：陈渠牛立琼华灿枫耿雅丽蔡柳萍陶诗煜倪迎冬赵茹茜南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京 210095

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