检索结果-内蒙古大学图书馆

中国农业科学 2021年第12期54卷 2559-2569页

作者：李扬凡邵美琪刘畅郭庆港王培培陈秀叶苏振贺马平河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业农村部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室河北农业大学植物保护学院南京农业大学植物保护学院

【目的】由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani AG-3)引起的马铃薯黑痣病是马铃薯生产中重要的土传病害,严重影响马铃薯的产量和质量。利用微生物杀菌剂防治马铃薯黑痣病是环境友好、切实可行的措施之一。本研究旨在获得有效防治马铃薯黑痣... 详细信息

【目的】由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani AG-3)引起的马铃薯黑痣病是马铃薯生产中重要的土传病害,严重影响马铃薯的产量和质量。利用微生物杀菌剂防治马铃薯黑痣病是环境友好、切实可行的措施之一。本研究旨在获得有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌并明确其防病作用方式,为生防细菌发酵工艺的优化、微生物杀菌剂的合理施用提供科学依据。【方法】通过对峙培养法和温室盆栽试验筛选有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌,通过Biolog微生物鉴定系统、16S rDNA序列以及gyrA、gyrB、rpoB和rpoC多基因序列分析对生防细菌进行分类鉴定。通过盆栽试验比较生防细菌菌株发酵液、无菌体上清液和菌体悬浮液对马铃薯黑痣病的防治效果,利用高效液相色谱(HPLC)对脂肽提取物进行分离,通过抑菌活性测定结合质谱(UPLC-Triple TOF-MS/MS)技术鉴定生防细菌产生的抑菌活性物质。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术测定马铃薯根际黑痣病菌的DNA拷贝数。【结果】通过对2 106株细菌进行筛选,获得3株有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌,其中HMB33604菌株对马铃薯黑痣病的防治效果较高,达到52.9%。通过生理生化及多基因序列比对,将HMB33604菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌株发酵液和上清液对马铃薯黑痣病具有显著的防治效果,分别为52.2%和66.4%,而菌体悬浮液对马铃薯黑痣病的防治效果仅为16.9%,证明该菌株主要通过产生抑菌活性物质而起到防治马铃薯黑痣病的作用。HMB33604菌株可以产生泛革素(fengycin)、伊枯草菌素A(iturin A)和表面活性素(surfactin),抑菌试验证明泛革素和伊枯草菌素是HMB33604菌株产生的主要抑菌活性物质,这两种脂肽类抗生素能够显著抑制黑痣病菌的生长,并且造成菌丝畸形。菌株发酵液和无菌体上清液均显著降低马铃薯根际黑痣病菌的DNA拷贝数,与对照相比分别降低了60.3%和64.0%;而菌体悬浮液处理后根际黑痣病菌的DNA拷贝数仅降低10.3%。【结论】获得一株有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌——解淀粉芽孢杆菌HMB33604,该菌株主要通过产生抑菌活性物质而发挥生防作用。泛革素和伊枯草菌素是HMB33604菌株产生的主要抑菌活性物质。泛革素和伊枯草菌素不仅造成黑痣病菌菌丝畸形,还可显著降低马铃薯根际黑痣病菌的数量,从而有效防治马铃薯黑痣病。

关键词：马铃薯黑痣病解淀粉芽孢杆菌抑菌物质脂肽类抗生素生物防治

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新疆马铃薯甲虫对噻虫嗪的抗性监测及其细胞色素P450基因表达分析

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中国农业科学 2021年第14期54卷 3004-3016页

作者：石鑫李莎王志敏付开赟付文君姜卫华南京农业大学植物保护学院新疆农业科学院植物保护研究所/农业农村部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室新疆伊犁州农业技术推广总站

【目的】以世界性害虫马铃薯甲虫（Leptinotarsa decemlineata）为研究对象,筛选其参与噻虫嗪解毒的细胞色素P450主效基因。【方法】于2018、2019年利用点滴法监测新疆察布查尔县、伊宁县、塔城市、乌鲁木齐市和吉木萨尔县11个马铃薯甲... 详细信息

【目的】以世界性害虫马铃薯甲虫（Leptinotarsa decemlineata）为研究对象,筛选其参与噻虫嗪解毒的细胞色素P450主效基因。【方法】于2018、2019年利用点滴法监测新疆察布查尔县、伊宁县、塔城市、乌鲁木齐市和吉木萨尔县11个马铃薯甲虫田间种群对噻虫嗪的抗性水平,并测定分析噻虫嗪LD50处理72 h后成虫中3种主要解毒酶细胞色素P450酶（P450）、谷胱甘肽S-转移酶（GST）和酯酶（EST）的活性变化。利用Illumina HiSeqTM2500高通量测序技术进行转录组测序,获得抗性和敏感种群之间的差异表达基因（DEG）,运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术验证3个P450基因并分析6个P450基因（CYP4C1、CYP9e2、CYP305a1、CYP9Z25、CYP9Ya和CYP9Yc）在不同种群及噻虫嗪处理后的表达情况。【结果】抗性监测发现,2018年的YN1、URMQ1、TC和QPQL1以及2019年的YN2和JMS种群成虫对噻虫嗪抗性倍数（RR）分别达到5.99、8.81、10.86和20.33倍和11.82、14.05倍,为低至中水平抗性。解毒酶活性测定结果表明,2个敏感种群URMQ2、URMQ3以及2个抗性种群YN2、JMS成虫分别经噻虫嗪LD50处理72 h后其P450活性均显著增加,分别为对照的1.76、2.75、1.91和1.66倍。另外,URMQ3种群的GST（CDNB和DCNB为底物）及URMQ2、YN2种群的EST活性显著升高,分别为对照的1.19、2.10倍和1.35、1.91倍。转录组分析表明,通过合并组装分别获得噻虫嗪敏感和抗性种群样品56 872 051和62 249 136个原始序列数据以及55 903 706和61 082 076个过滤后的序列数据,过滤后的序列长度分别为8.39和9.16 G,碱基错误率均为0.03%。抗性种群中差异表达的P450基因13个,其中2个基因显著上调。3个上调的P450基因CYP4C1、CYP9e2和CYP305a1的qRT-PCR检测结果与转录组测序结果基本一致,qRT-PCR分析还发现CYP9Ya、CYP9Yc、CYP4C1、CYP305a1和CYP9Z25在抗性种群成虫中表达量显著增加,噻虫嗪LD50处理均可引起URMQ2种群4龄幼虫和成虫CYP9Ya、CYP9Yc表达量显著上调。相关性分析发现成虫对噻虫嗪的抗性水平与CYP9Ya表达量呈显著正相关。【结论】CYP9Ya可能在马铃薯甲虫中对噻虫嗪具有重要的解毒作用,其他基因的作用也不能排除。

关键词：马铃薯甲虫噻虫嗪抗药性细胞色素P450 基因表达

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梨小食心虫几丁质合成酶1基因的克隆与表达分析

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昆虫学报 2017年第9期60卷 994-1005页

作者：杨静高越刘中芳张鹏九樊建斌牛国飞韩召军范仁俊山西省农业科学院植物保护研究所农业有害生物综合治理山西省重点实验室太原030031 南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室南京210095

【目的】克隆梨小食心虫Grapholitha molesta(Busck)几丁质合成酶1基因,分析该基因的分子特征及时空表达模式,为探析其生理功能奠定基础。【方法】利用简并引物和RACE技术从梨小食心虫5龄幼虫和蛹中克隆几丁质合成酶1基因的全长c DNA序... 详细信息

【目的】克隆梨小食心虫Grapholitha molesta(Busck)几丁质合成酶1基因,分析该基因的分子特征及时空表达模式,为探析其生理功能奠定基础。【方法】利用简并引物和RACE技术从梨小食心虫5龄幼虫和蛹中克隆几丁质合成酶1基因的全长c DNA序列,同时获得其两个可变剪切外显子序列,并用邻接法(neighbor-joining method)与其他昆虫同源序列构建系统进化树。利用RTq PCR技术研究该基因及两个可变剪切外显子在1日龄预蛹不同组织(头、体壁、脂肪体、中肠、气管和马氏管)中以及不同发育阶段(2-5龄幼虫、预蛹、蛹和成虫)的表达特性。【结果】克隆获得梨小食心虫几丁质合成酶1基因,将其命名为Gm CHS1,该基因编码1 565个氨基酸,包含了16个跨膜螺旋,两个可变剪切外显子包含177个碱基,编码59个氨基酸序列,分别命名为Gm CHS1a(Gen Bank登录号:MF000781)和Gm CHS1b(Gen Bank登录号:MF000782)。系统发育树同源分析结果表明,Gm CHS1属于几丁质合成酶1,Gm CHS1a和Gm CHS1b分别归属于可变剪切外显子CHS1a和CHS1b。组织表达模式表明,Gm CHS1基因在体壁中表达量最高,其次是在头和气管中,其余组织中表达量较低或不表达;发育表达模式表明,该基因在各个发育阶段均有表达,幼虫蜕皮期、预蛹-蛹和蛹-成虫转变过程中表达量上调。Gm CHS1a在体壁和头部的表达量高于Gm CHS1b,而在气管和脂肪体中的表达量略低于Gm CHS1b,两者在中肠和马氏管中表达量都很低。在梨小食心虫不同发育阶段,Gm CHS1a的表达趋势表现为在幼虫蜕皮和预蛹-蛹转变过程中高表达;Gm CHS1b在幼虫各个阶段表达量都较低,在预蛹-蛹和蛹-成虫转变过程中高表达。【结论】Gm CHS1a和Gm CHS1b属于昆虫几丁质合成酶1家族,其基因在梨小食心虫不同组织及发育阶段的表达量显著不同,推测其在梨小食心虫发育过程中发挥着不同的作用。本研究为进一步探索该基因在梨小食心虫体内的功能奠定了基础。

关键词：梨小食心虫几丁质合成酶表达谱 RT-qPCR 可变剪切外显子

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大豆疫霉与大豆互作中的识别与反识别

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生物技术通报 2018年第2期34卷 2-9页

作者：谭新伟靳雨婷刘美彤王群青山东农业大学植物保护学院山东省农业微生物重点实验室泰安271018 教育部农作物生物灾害综合治理重点实验室农业部华东作物有害生物综合治理重点实验室南京210095

大豆疫霉引起的大豆疫病是大豆生产上的毁灭性病害。深入了解大豆疫霉与寄主在分子层面的互作机制是解析病原菌致病机理、针对性地制定防治措施的必要前提。目前研究表明,植物通过两个层面的识别机制来启动防卫反应,而能否正确识别"... 详细信息

大豆疫霉引起的大豆疫病是大豆生产上的毁灭性病害。深入了解大豆疫霉与寄主在分子层面的互作机制是解析病原菌致病机理、针对性地制定防治措施的必要前提。目前研究表明,植物通过两个层面的识别机制来启动防卫反应,而能否正确识别"非我"分子则是植物开启免疫系统的关键。而对于病原菌,则采用多种分子策略来极力逃避寄主的识别机制,分泌效应分子协同抑制寄主免疫反应。本文综述了一系列大豆抗病基因介导的小种专化抗性丧失的原因,以及大豆疫霉效应分子逃避和破坏寄主免疫反应的分子策略,并讨论了基于这些分子互作机制应用于筛选新型抗病资源和精确育种的可能性。

关键词：大豆疫病大豆疫霉效应分子分子互作

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防除机插秧田萤蔺等杂草的除草剂筛选

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植物保护 2024年第6期50卷 313-320页

作者：马里超蒋易凡陈芳芳于佳星董立尧光明食品集团上海农场有限公司种植业中心盐城224151 南京农业大学植物保护学院农业农村部华东作物有害生物综合治理重点实验室南京210095

萤蔺Schoenoplectiella juncoides是我国机插秧水稻田中危害严重的恶性杂草之一,本文旨在筛选出能够有效防除萤蔺的除草剂。利用整株生物测定法,测定了萤蔺对稻田常用除草剂与其他作物田除草剂共18种相关除草剂的敏感性;探究了能防除萤... 详细信息

萤蔺Schoenoplectiella juncoides是我国机插秧水稻田中危害严重的恶性杂草之一,本文旨在筛选出能够有效防除萤蔺的除草剂。利用整株生物测定法,测定了萤蔺对稻田常用除草剂与其他作物田除草剂共18种相关除草剂的敏感性;探究了能防除萤蔺的其他作物田除草剂对粳稻‘三江6号’与籼稻‘两优669’的安全性;并进一步筛选出对萤蔺等杂草毒力强且对水稻安全性高的除草剂。结果表明,水稻田土壤处理剂嗪吡嘧磺隆、扑草净和双唑草腈对萤蔺的GR90分别为61.44、271.55 g/hm^(2)和87.42 g/hm^(2),在田间推荐剂量下对萤蔺的抑制率均在92%以上。水稻田茎叶处理剂2甲4氯钠和灭草松对萤蔺的GR90分别为300.53 g/hm^(2)和567.52 g/hm^(2),在田间推荐剂量下对萤蔺的抑制率均在98%以上。除灭草松在田间推荐剂量下对水稻田异型莎草的鲜重抑制率仅为26.67%外,其余4种药剂在田间推荐剂量下对水稻田常见阔叶及莎草科杂草鳢肠Eclipta prostrata、水苋菜Ammannia baccifera和异型莎草Cyperus difformis的鲜重抑制率均在83%以上,且GR90也均显著低于推荐剂量。因此可使用嗪吡嘧磺隆、扑草净、双唑草腈和2甲4氯钠防除水稻机插秧田萤蔺等阔叶及莎草科杂草。

关键词：杂草防除水稻萤蔺除草剂敏感性安全性

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不同真菌和植物种类对苜蓿滑刃线虫繁殖的影响

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植物保护 2021年第1期47卷 97-102页

作者：王珍李冉李红梅范钧星王暄南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室南京210095 新疆农业大学农学院农林有害生物监测与安全防控重点实验室乌鲁木齐830052

为探究美国进境苜蓿滑刃线虫对真菌的取食特性以及对植物的寄生性,通过接种试验观察该线虫在链格孢、灰葡萄孢、禾谷镰刀菌、拟盘多毛孢和核盘菌等5种真菌,以及在菊花、大豆、苜蓿和三叶草等4种植物8个品种上的繁殖情况。结果表明,苜蓿... 详细信息

为探究美国进境苜蓿滑刃线虫对真菌的取食特性以及对植物的寄生性,通过接种试验观察该线虫在链格孢、灰葡萄孢、禾谷镰刀菌、拟盘多毛孢和核盘菌等5种真菌,以及在菊花、大豆、苜蓿和三叶草等4种植物8个品种上的繁殖情况。结果表明,苜蓿滑刃线虫能取食5种真菌的菌丝体,但是在各真菌上的繁殖系数(Rf)有明显差异,在链格孢和拟盘多毛孢上能快速繁殖且数量很高,在灰葡萄孢上繁殖速度稍慢,但存活时间较长。接种苜蓿滑刃线虫后,大豆品种新叶出现轻微畸形或褐色病斑,苜蓿品种新叶出现畸形萎缩,而菊花和三叶草叶片没有症状;该线虫在各植物上的Rf值均低于1,表明这些植物不是合适的寄主。研究结果可为我国口岸实施外来植物线虫的检疫措施提供参考。

关键词：苜蓿滑刃线虫真菌植物繁殖系数寄生性

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橡胶树褐根病病菌LAMP快速检测方法的建立及应用

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农业生物技术学报 2020年第6期28卷 1114-1122页

作者：董文敏贺春萍吴伟怀梁艳琼谢立李锐黄兴郑金龙习金根陆英易克贤南京农业大学植物保护学院中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南大学林学院

有害层孔菌(Phellinus noxius)引起的橡胶树(Hevea brasiliensis)褐根病是严重危害天然橡胶的一种根部病害。环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术由于特异性强、灵敏度高、反应迅速、成本低等优势,已在... 详细信息

有害层孔菌(Phellinus noxius)引起的橡胶树(Hevea brasiliensis)褐根病是严重危害天然橡胶的一种根部病害。环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术由于特异性强、灵敏度高、反应迅速、成本低等优势,已在植保等诸多领域得到广泛应用。为了建立一种能够快速、高效、准确地检测橡胶树褐根病菌的技术,本研究以SYBR GreenⅠ为指示剂,建立了橡胶树褐根病菌有害层孔菌的环介导等温扩增可视化快速检测方法。根据橡胶树褐根病菌特异的核糖体转录间隔区序列设计了4条引物(2条内引物FIP/BIP, 2条外引物F3/B3)进行LAMP扩增。对LAMP反应条件和体系进行优化,并进行特异性和灵敏度验证,最后进行田间疑似褐根病样本验证。研究确定了最佳反应体系(25μL中模板100 ng/μL,外引物F3/B3各0.2μmol/L,内引物FIP/BIP各1.2μmol/L, dNTPs 1.4 mmol/L, Mg2+6 mmol/L,甜菜碱0.8mol/L, Bst DNA polymerase 8 U/μL)和反应条件(最佳反应温度63℃,反应时间1 h)。特异性验证结果显示,橡胶树褐根病病菌LAMP产物均呈阳性(绿色),而其他病原菌组织LAMP产物均为阴性(橙色)。灵敏度检测结果显示,该体系的DNA最低检测限为1 pg/μL,比常规PCR灵敏度高1 000倍。20株田间疑似褐根样本应用LAMP体系检测,其病原检出率为85%,而常规PCR检出率为70%或75%。本研究建立的LAMP检测体系能有效用于橡胶褐根病疑似样本的快速检测,对及时科学的防控该病害具有重要意义。

关键词：橡胶树褐根病环介导等温扩增(LAMP) 有害层孔菌快速分子检测

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大豆细菌性斑疹病的病原鉴定及大豆新种质抗性评价

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大豆科学 2015年第3期34卷 463-469页

作者：许媛程伟伍辉军郑蕾琦赵团结高学文南京农业大学植物保护学院/华东作物有害生物综合治理农业部重点实验室江苏南京210095 国家大豆改良中心/作物遗传与种质创新国家重点实验室江苏南京210095

通过对一种近年在江苏省南京市发生严重的大豆叶部病害的病原物进行分离鉴定,检测和评价了本地区大豆新育成品种系及亲本对该病害两个菌株的抗病性。结果表明:通过病原物分离和回接大豆,确定了4株细菌是引起该病害的病原物。形态学观察... 详细信息

通过对一种近年在江苏省南京市发生严重的大豆叶部病害的病原物进行分离鉴定,检测和评价了本地区大豆新育成品种系及亲本对该病害两个菌株的抗病性。结果表明:通过病原物分离和回接大豆,确定了4株细菌是引起该病害的病原物。形态学观察、生理生化测定、以及16S r DNA和gyr B聚类分析表明这4株菌株属于地毯黄单胞菌大豆致病变种(Xanthomonas axonopodis ***)。233份大豆新种质对强致病性菌株C5和B523的抗病性检测结果表明,其对两个菌株的抗性反应存在差异,对C5和B523具有抗病性(高度抗病+中度抗病)的种质分别只占鉴定材料的40.35%和37.77%,说明本地品种总体抗性水平并不高,病害具备流行的前提条件;只有苏鲜21和徐豆16对两个菌株均表现高抗,是抗病育种的优良亲本。

关键词：大豆细菌性斑疹病病原菌鉴定抗病种质

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磁场变化对粘虫飞行定向行为的影响

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应用昆虫学报 2014年第4期51卷 899-905页

作者：高月波胡高翟保平南京农业大学昆虫学系农业部病虫害监测与治理重点开放实验室南京210095 吉林省农业科学院植物保护研究所农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室公主岭136100

【目的】研究磁场的变化对于粘虫Mythimna separata(Walker)飞行中定向行为的影响,为揭示空中迁飞虫群的飞行行为机制提供基础理论依据。【方法】在人工模拟磁场条件下对粘虫的定向行为进行了比较研究。【结果】试虫在正常地磁场条件下... 详细信息

【目的】研究磁场的变化对于粘虫Mythimna separata(Walker)飞行中定向行为的影响,为揭示空中迁飞虫群的飞行行为机制提供基础理论依据。【方法】在人工模拟磁场条件下对粘虫的定向行为进行了比较研究。【结果】试虫在正常地磁场条件下表现为显著的群体共同定向。粘虫群体的共同定向是轴对称的。当将试虫置于较强的磁场条件下时,粘虫供试个体的定向行为发生变化,群体共同定向行为消失。试虫的定向行为不受磁场水平分量极向变化的影响。【结论】迁飞性昆虫可能利用磁场作为自身定向的罗盘信号,在这个过程中可能和鸟类一样利用了磁倾角。

关键词：人工模拟磁场粘虫定向行为正常磁场反向磁场强磁场磁倾角

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假禾谷镰孢菌细胞自噬相关基因的鉴定与表达分析

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植物病理学报 2018年第3期48卷 357-364页

作者：陈琳琳耿雪晶马宇明王利民施艳李洪连河南农业大学植物保护学院/小麦玉米作物学国家重点实验室/河南省粮食作物协同创新中心郑州450002 教育部农作物生物灾害综合治理重点实验室/农业部华东作物有害生物综合治理重点实验室南京210095

细胞自噬是真核生物中一类包含多种进化保守的Atgs蛋白参与的蛋白质降解途径,该途径也参与多种植物病原真菌的产孢、孢子萌发和致病性过程。本研究利用模式物种已知的Atgs,通过生物信息学分析在假禾谷镰孢菌中鉴定到29个Atgs,分属29种... 详细信息

细胞自噬是真核生物中一类包含多种进化保守的Atgs蛋白参与的蛋白质降解途径,该途径也参与多种植物病原真菌的产孢、孢子萌发和致病性过程。本研究利用模式物种已知的Atgs,通过生物信息学分析在假禾谷镰孢菌中鉴定到29个Atgs,分属29种不同蛋白类型。细胞自噬核心调控机制相关蛋白Atg1、Atg6、Atg8和Atg9的氨基酸序列系统进化分析结果显示,Atgs在丝状真菌间非常保守,符合物种进化的特点。通过假禾谷镰孢菌跟亲和与非亲和寄主转录组数据分析发现,与菌丝阶段相比26个Fp Atgs在侵染阶段的表达发生改变,其中Fp Atg1、2、3、4、5、7、8、9、13、22、23、28和Fp Vps34在侵染初期和中后期均诱导表达;Fp Atg6、14、17、20、24、29和Fp Vps15在侵染初期和中后期表达量均降低;Fp Atg10、11除在非亲和互作中后期表达量略有上调,其余阶段均显著下调表达;Fp Atg15、16在亲和互作初期诱导表达,其余阶段均下调表达;Fp Atg26、27在亲和互作初期下调表达,中后期诱导表达,而在非亲和互作初期表达量升高,到中后期下调表达。推测细胞自噬参与调控假禾谷镰孢菌的侵染过程。

关键词：假禾谷镰孢菌细胞自噬 Atg蛋白基因鉴定表达分析

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