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昆虫学报 2006年第2期49卷 247-253页

作者：杨恩会林雁吴益东南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

用氰戊菊酯-辛硫磷混剂(有效成分1∶10,简称氰-辛混剂)对棉铃虫Helicoverpaarmigera室内品系(YS)进行16代的抗性选育,获得棉铃虫对氰-辛混剂的抗性品系(YS-FP)。YS-FP品系与YS品系相比,对氰-辛混剂的抗性为14.7倍,对其中的单剂氰戊菊酯... 详细信息

用氰戊菊酯-辛硫磷混剂(有效成分1∶10,简称氰-辛混剂)对棉铃虫Helicoverpaarmigera室内品系(YS)进行16代的抗性选育,获得棉铃虫对氰-辛混剂的抗性品系(YS-FP)。YS-FP品系与YS品系相比,对氰-辛混剂的抗性为14.7倍,对其中的单剂氰戊菊酯和辛硫磷的抗性分别为2170倍和3.1倍。随着筛选的进行,氰戊菊酯和辛硫磷之间的共毒系数在F2代出现短暂的增加,然后逐渐降低,它们之间的互作由增效变为拮抗。交互抗性测定结果表明,YS-FP品系对氯氰菊酯、溴氰菊酯、三氟氯氰菊酯、三唑磷和灭多威产生了明显的交互抗性,对硫丹、多杀菌素和爱玛菌素没有产生交互抗性。YS-FP品系6龄幼虫中肠细胞色素P450氧化酶甲氧基香豆素O-脱甲基活性为YS品系的10倍,3龄幼虫谷胱甘肽S-转移酶和酯酶活性分别是YS品系的1.7倍(CDNB结合作用)和2.4倍(α-NA酯酶水解作用)。氰-辛混剂的筛选导致了棉铃虫多种解毒酶活性的增加,特别是细胞色素P450氧化酶活性增强最为明显。本研究结果表明氰-辛混剂对棉铃虫的筛选导致了广谱的交互抗性和多种代谢抗性机理,并且两个单剂之间的互作由增效变为拮抗,因此氰-辛混剂在棉铃虫抗性治理中的作用是有限的和暂时的。

关键词：棉铃虫氰戊菊酯辛硫磷混剂抗性演化交互抗性解毒酶活性

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不同种群棉铃虫三龄幼虫酯酶活性频率分布与抗药性的关系

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昆虫学报 2002年第6期45卷 733-738页

作者：陈松杨亦桦吴益东南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部农业病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

选用室内饲养的棉铃虫Helicoverpaarmigera偃师和湖北 2个敏感品系、对辛硫磷高抗的PCP2 0品系、对氰戊菊酯高抗的YG4 5品系及 1999或 2 0 0 0年采自山东阳谷、河北邯郸和河南安阳的田间高抗种群 ,江苏徐州、湖北武汉的田间中等抗性水... 详细信息

选用室内饲养的棉铃虫Helicoverpaarmigera偃师和湖北 2个敏感品系、对辛硫磷高抗的PCP2 0品系、对氰戊菊酯高抗的YG4 5品系及 1999或 2 0 0 0年采自山东阳谷、河北邯郸和河南安阳的田间高抗种群 ,江苏徐州、湖北武汉的田间中等抗性水平种群和新疆沙湾的田间敏感种群 ,采用酶标板酶动力学法测定了各品系 (种群 )的 3龄幼虫个体酯酶活性频率分布和平均酯酶活性。结果表明 ,偃师敏感品系、湖北敏感品系和新疆沙湾田间敏感种群的酯酶活性个体频率分布相似 ,三个品系 (种群 )的平均酯酶活性相近 ,分别为 991、 1138、 10 5 5mOD·min- 1 ·larva- 1 。室内选育的PCP2 0抗性品系、YG4 5抗性品系及山东阳谷、河北邯郸、河南安阳田间高抗种群的高酯酶活性 (活性在 180 0mOD·min- 1 ·larva- 1 以上 )个体频率明显高于三个敏感品系 (种群 ) ,平均酯酶活性在 15 10～ 2 4 82mOD·min- 1 ·larva- 1 之间。江苏徐州、湖北武汉的田间中抗水平种群高酯酶活性个体频率及平均酯酶活性都介于敏感和高抗品系 (种群 )之间 ,平均酯酶活性为 12 5 8～ 14 0 4mOD·min- 1 ·larva- 1 。棉铃虫各品系 (种群 )平均酯酶活性与对拟除虫菊酯类杀虫剂抗性个体频率的相关性要比对有机磷类的高 ,相关系数分别为 0 82和 0 4 2。分?

关键词：种群棉铃虫三龄幼虫酯酶活性频率分布抗药性生化检测

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棉铃虫细胞色素P450 CYP9A12基因5′-上游区的克隆及序列分析

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昆虫学报 2008年第2期51卷 120-125页

作者：周颖君杨亦桦武淑文吴益东南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

细胞色素P450基因CYP9A12的过量表达已被证实与棉铃虫Heliocverpa armigera对拟除虫菊酯的抗性相关。为探明棉铃虫CYP9A12基因的表达调控机理,根据棉铃虫CYP9A12基因cDNA全长的5′-末端核苷酸序列,采用基因组步移方法,获得CYP9 A12的5′... 详细信息

细胞色素P450基因CYP9A12的过量表达已被证实与棉铃虫Heliocverpa armigera对拟除虫菊酯的抗性相关。为探明棉铃虫CYP9A12基因的表达调控机理,根据棉铃虫CYP9A12基因cDNA全长的5′-末端核苷酸序列,采用基因组步移方法,获得CYP9 A12的5′-上游区序列(总长为3575bp)。与cDNA序列进行比对,表明在起始密码子上游3bp处有一长为2124bp的内含子。利用NNPP分析软件预测出转录起始位点,与根据CYP9A12全长cDNA序列推测的结果是一致的。TFSEARCH 1.3软件分析转录因子结合位点的结果显示,该序列不仅包含启动子的核心结构序列——TATA-box和CAAT-box,亦包含多个转录因子结合位点,如GATA-1,CdxA,Dfd等。本研究结果为深入研究棉铃虫CYP9A12的表达调控机制及其参与杀虫剂抗性的分子机理奠定了一定基础。

关键词：棉铃虫细胞色素P450 CYP9A12 基因组步移 5′-上游区

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kdr突变和解毒代谢在B型烟粉虱对高效氯氰菊酯抗性中的作用

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昆虫学报 2008年第3期51卷 277-283页

作者：王利华吴益东南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

本研究明确了kdr突变和解毒代谢在B型烟粉虱Bemisia tabaci对高效氯氰菊酯抗性中的作用。B型烟粉虱NJ品系相对于烟粉虱敏感品系(SUD-S,非B型)对高效氯氰菊酯有266倍的抗性。对NJ品系用高效氯氰菊酯进行群体筛选获得抗性为811倍的NJ-R1品... 详细信息

本研究明确了kdr突变和解毒代谢在B型烟粉虱Bemisia tabaci对高效氯氰菊酯抗性中的作用。B型烟粉虱NJ品系相对于烟粉虱敏感品系(SUD-S,非B型)对高效氯氰菊酯有266倍的抗性。对NJ品系用高效氯氰菊酯进行群体筛选获得抗性为811倍的NJ-R1品系,对NJ品系进行单对交配筛选获得抗性达2634倍的NJ-R2品系。在NJ,NJ-R1和NJ-R2品系间,酯酶、多功能氧化酶和谷胱甘肽S-转移酶活性无显著差异,说明在筛选过程中解毒代谢没有发生变化。PASA检测结果表明,NJ-R2品系钠离子通道基因L925I突变(kdr突变)频率为100%,NJ-R1品系为80.6%,NJ品系为55%。由此可见,kdr突变频率的增加是B型烟粉虱种群对高效氯氰菊酯抗性上升的主要原因。在NJ,NJ-R1和NJ-R2品系中,增效醚(PBO)对高效氯氰菊酯的增效作用均为20倍左右,而PBO对SUD-S品系没有任何增效作用。PBO能同时抑制烟粉虱的多功能氧化酶和酯酶,通过与TPP增效作用进行对比表明,在B型烟粉虱中PBO所产生的增效作用主要来源于对酯酶的抑制。因此,B型烟粉虱品系(NJ-R2,NJ-R1和NJ)与非B型SUD-S品系相比存在20倍左右的先天抗性,该先天抗性主要与B型烟粉虱的特有酯酶有关。在B型烟粉虱品系对高效氯氰菊酯的抗性中,抗性水平完全由kdr突变频率高低所决定。

关键词： B型烟粉虱高效氯氰菊酯抗药性解毒代谢 kdr突变

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棉铃虫P450基因CYP6AE12和CYP9A18的克隆与mRNA表达水平

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昆虫学报 2007年第3期50卷 234-240页

作者：岳丽娜杨亦桦武淑文吴益东南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

采用RT-PCR和RACE技术克隆到2个新的棉铃虫细胞色素P450基因:CYP6AE12和CYP9A18。CYP6AE12的cDNA编码区长1569bp,编码523个氨基酸;CYP9A18的cDNA编码区长1590bp,编码530个氨基酸。用实时定量PCR技术分析了这2个基因在棉铃虫YS敏感品系和... 详细信息

采用RT-PCR和RACE技术克隆到2个新的棉铃虫细胞色素P450基因:CYP6AE12和CYP9A18。CYP6AE12的cDNA编码区长1569bp,编码523个氨基酸;CYP9A18的cDNA编码区长1590bp,编码530个氨基酸。用实时定量PCR技术分析了这2个基因在棉铃虫YS敏感品系和YS-FP抗性品系(由氰戊菊酯加辛硫磷混剂筛选YS品系而得)6龄幼虫脂肪体和中肠中mRNA的表达水平。结果表明:CYP6AE12和CYP9A18的mRNA表达具有组织特异性,CYP6AE12在脂肪体中表达量较高,而CYP9A18在中肠中的表达量较高。与相对敏感品系YS相比,CYP6AE12在YS-FP抗性品系中肠和脂肪体中的mRNA表达量分别为YS品系的3.6倍和1.3倍;CYP9A18在YS-FP品系中肠和脂肪体的mRNA表达量分别为YS品系的0.3倍和1.0倍。CYP6AE12的过量表达与YS-FP品系棉铃虫的抗药性可能有一定关系。

关键词：棉铃虫细胞色素P450 实时定量PCR P450基因

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棉铃虫田间种群Bt毒素Cry1Ac抗性基因频率的估算

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昆虫学报 2007年第1期50卷 25-30页

作者：陈海燕杨亦桦武淑文杨亚军吴益东南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

采用改进的F1筛查法检测了2005年采自华北地区的棉铃虫Helicoverpaarmigera(H櫣bner)田间种群对Bt毒素Cry1Ac的抗性基因频率。2005年从河南安阳和河北沧县转Bt基因抗虫棉上采集二代棉铃虫卵,在室内用人工饲料饲养至2龄幼虫,用1μg/cm2的... 详细信息

采用改进的F1筛查法检测了2005年采自华北地区的棉铃虫Helicoverpaarmigera(H櫣bner)田间种群对Bt毒素Cry1Ac的抗性基因频率。2005年从河南安阳和河北沧县转Bt基因抗虫棉上采集二代棉铃虫卵,在室内用人工饲料饲养至2龄幼虫,用1μg/cm2的Cry1Ac活化毒素进行初筛,将初筛存活成虫与室内筛选的GYBT抗性品系成虫进行单对杂交,并用区分剂量(2·5μg/cm2)对F1代进行检测。经检测,2005年河南安阳棉铃虫种群和河北沧县棉铃虫种群对Cry1Ac抗性基因频率基本一致,分别为1·4×10-3和1·5×10-3。用毒素涂表法测定了2004、2005年采自河南安阳、河北高阳、河北沧县、新疆阿克苏和新疆沙湾棉铃虫田间种群对Cry1Ac活化毒素的敏感性水平,结果表明华北棉区与新疆内陆棉区棉铃虫种群对Cry1Ac的敏感性存在一定的地区性差异(<8倍)。总体上,我国华北棉区棉铃虫种群对Cry1Ac还未产生明显抗性,抗性基因频率处于正常水平。棉铃虫对转Bt基因抗虫棉的抗性风险依然存在,需要尽快启动全国性的早期抗性检测和预警工作。

关键词：棉铃虫转Bt基因棉 Bt长内毒素 Cry1Ac 抗性等位基因抗性检测

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斑痣悬茧蜂寄主搜索中的学习行为

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生态学杂志 2009年第10期28卷 2026-2031页

作者：杨德松孟玲李璐璐李保平南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室南京210095

利用风洞技术研究了斑痣悬茧蜂不同阶段的经历对其寄主甜菜夜蛾搜索行为的影响。结果表明:寄生蜂幼期发育到羽化早期所经历的植物对其成虫搜索行为具有一定的影响,在供试的大豆、棉花和白菜等3种植物中,只有大豆-寄主幼虫复合体对无经... 详细信息

利用风洞技术研究了斑痣悬茧蜂不同阶段的经历对其寄主甜菜夜蛾搜索行为的影响。结果表明:寄生蜂幼期发育到羽化早期所经历的植物对其成虫搜索行为具有一定的影响,在供试的大豆、棉花和白菜等3种植物中,只有大豆-寄主幼虫复合体对无经验寄生蜂的行为反应具有显著影响。寄生蜂1次产卵经历对后续搜索行为的影响取决于饲养寄主幼虫的植物种类,只有在大豆和白菜上的产卵经历对后续搜索行为产生显著影响,即明显偏好经历过的植物;对于在不同植物上经历2次产卵的寄生蜂,后续搜索行为反应取决于植物种类及其顺序,若2次产卵经历发生在大豆与白菜之间,无论顺序先后,后续行为反应均偏好大豆-寄主幼虫复合体;但若2次产卵经历发生在大豆与棉花之间,只有当第2次为大豆时,后续行为反应显著偏好大豆-寄主幼虫复合体;若2次寄生经历发生在棉花与白菜之间,只有当第2次经历为白菜时,后续行为反应显著偏好白菜-寄主幼虫复合体。根据研究结果推断,斑痣悬茧蜂幼期发育、成虫早期羽化的经历、成虫产卵经历对后续搜索行为具有显著影响,而且这种影响与寄主幼虫的食料植物有关。

关键词：甜菜夜蛾学习搜寻行为化学生态学生物防治

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东南沿海地区小菜蛾对Bt δ-内毒素和Bt制剂的抗性检测

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昆虫学报 2006年第1期49卷 70-73页

作者：王崇利武淑文杨亦桦吴益东南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部病虫监测与治理重点开放实验室南京210095

采用浸叶法测定了2003年秋季、2004年春季采自广东惠州、福建福州、浙江杭州和江苏南京的小菜蛾Plutellaxylostella田间种群对Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac和Cry2Aa以及Bt制剂kurstaki亚种(***,Btk)的抗性水平。与敏感品系PHI_S相比,广东惠... 详细信息

采用浸叶法测定了2003年秋季、2004年春季采自广东惠州、福建福州、浙江杭州和江苏南京的小菜蛾Plutellaxylostella田间种群对Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac和Cry2Aa以及Bt制剂kurstaki亚种(***,Btk)的抗性水平。与敏感品系PHI_S相比,广东惠州田间小菜蛾种群的抗性水平最高,其对Cry1Ab和Cry1Ac的抗性分别达到了168和120倍,均为高抗水平;对Btk制剂的抗性有47倍,达到了中抗水平;对Cry1Aa和Cry2Aa具有低水平抗性(分别为5.8和5.6倍)。福建福州、浙江杭州和江苏南京田间小菜蛾种群抗性水平相近,对Cry1Ab和Cry1Ac具有低至中等水平抗性(8～28倍),对Btk制剂具有低水平抗性(3.5～7倍),对Cry1Aa和Cry2Aa还没有产生明显抗性。因此,在我国东南沿海地区要注意Btk制剂与Bt其他亚种制剂或其他生物杀虫剂轮换使用,以减小Bt制剂对小菜蛾的选择压力,延缓小菜蛾对Bt抗性的发展。

关键词：小菜蛾 Bt制剂 Bt毒素抗药性

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甜菜夜蛾不同龄期幼虫被斑痣悬茧蜂寄生的风险分析

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生态学杂志 2010年第1期29卷 75-78页

作者：陶敏李保平孟玲南京农业大学植物保护学院昆虫学系、农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室南京210095

寄生蜂的寄主识别期是构建最优接受寄主模型的重要参数之一。本研究观察了斑痣悬茧蜂（Meteorus pulchricornis）对甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）不同龄期幼虫的识别期,并首次用生存分析方法估计寄主被寄生的风险以及寄生经历对寄主识... 详细信息

寄生蜂的寄主识别期是构建最优接受寄主模型的重要参数之一。本研究观察了斑痣悬茧蜂（Meteorus pulchricornis）对甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）不同龄期幼虫的识别期,并首次用生存分析方法估计寄主被寄生的风险以及寄生经历对寄主识别期的影响。结果表明：在2.5h观察期内,除1龄寄主幼虫外,其他各龄（2-5龄）幼虫均被寄生;对首次寄主识别期的Cox回归模型拟合分析表明,与2龄寄主幼虫（参照虫龄）相比,3-5龄寄主幼虫被寄生的累计风险比率显著高于2龄寄主幼虫（2.6-4.0倍）,而对再次寄主识别期的分析未发现3-5龄寄主幼虫与2龄幼虫之间存在显著差异。根据对首次与再次寄主识别期进行的生存曲线比较表明,对2-4龄幼虫的再次寄主识别期显著短于首次寄主识别期;说明寄生经历显著提高了寄生蜂的寄主识别期。由此推测,较高龄期甜菜夜蛾幼虫被无寄生经验斑痣悬茧蜂寄生的风险高于低龄幼虫。

关键词：斑痣悬茧蜂甜菜夜蛾寄生风险寄主龄期选择行为生态学

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广大腿小蜂对菜粉蝶蛹体型大小的产卵选择及后代发育表现

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生态学杂志 2010年第2期29卷 339-343页

作者：高珏晓孟玲李保平南京农业大学植物保护学院昆虫学系农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室南京210095

产卵选择与后代发育适合度之间的相关性是进化生态学的主要科学问题之一。为探究广大腿小蜂(Brachymeria lasus)对不同体型大小寄主的选择和后代发育表现的关系,采用饥饿方法处理4龄菜粉蝶(Pieris rapae)幼虫以获得体型大小(用体质量表... 详细信息

产卵选择与后代发育适合度之间的相关性是进化生态学的主要科学问题之一。为探究广大腿小蜂(Brachymeria lasus)对不同体型大小寄主的选择和后代发育表现的关系,采用饥饿方法处理4龄菜粉蝶(Pieris rapae)幼虫以获得体型大小(用体质量表示)差异较大的寄主蛹,供寄生蜂选择寄生。结果表明,广大腿小蜂显著偏好体型较大的寄主蛹,而且在体型较大的蛹内产雌性后代的概率更大;子代蜂体型大小与寄主蛹大小存在显著的正相关性,但子代蜂发育历期与寄主蛹大小无相关性。研究说明,广大腿小蜂对菜粉蝶蛹的寄生选择与后代发育表现,符合"寄主大小-质量"模型的预测。

关键词：寄主选择体型大小发育适合度生活史

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