检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：赖欣钟增涛郑会明朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在许多种类的细菌中均发现了LuxR/LuxI类型的群体感应调控系统,其中LuxR是一种调节蛋白,对LuxI合成自体诱导物(AI,autoinducer)起着正调控作用.运用检测菌株JZA1在中慢生型天山根瘤菌(Mesorhizobium tianshanense)培养上清中检测到了高... 详细信息

在许多种类的细菌中均发现了LuxR/LuxI类型的群体感应调控系统,其中LuxR是一种调节蛋白,对LuxI合成自体诱导物(AI,autoinducer)起着正调控作用.运用检测菌株JZA1在中慢生型天山根瘤菌(Mesorhizobium tianshanense)培养上清中检测到了高活性的自体诱导物.通过建库筛选后,测序比对发现存在mrtR/mrtI系统,该系统与LuxR/LuxI有相当的同源性.通过基因重组发现缺失mrtR后菌株不再合成AI,使用lacZ融合表达技术对mrtR进行研究,发现不止是AI合成需要mrtR,同时mrtR的表达也受到AI影响.

关键词：群体感应天山根瘤菌 mrtR

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假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析

假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析

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第四届全国发酵工程学术研讨会

作者：邓海华曹慧李晓丹王世明崔中利李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine,Phe)为唯一碳源生长.SEFA-PCR扩增转座子侧翼... 详细信息

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine,Phe)为唯一碳源生长.SEFA-PCR扩增转座子侧翼序列发现其与已报道的尿黑酸1,2-双加氧酶基因hmgA的同源性为92％.将hmgA定向克隆至表达载体pET-29a中,转化至Escherichia coli BL21,经IPTG诱导后可表达分子量约为48kD的蛋白;诱导后转化子粗酶液对尿黑酸有很好的降解效果.将hmgA连入自杀性载体pEX19Gm,通过同源重组整合至M18染色体中,使其恢复了DLL-E4利用Phe的能力,证实了HmgA是尿黑酸苯环裂解酶.

关键词：转座子标签法同源重组基因敲入单胞菌尿黑酸克隆

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杀螟硫磷降解菌FDS-1的分离鉴定及其降解特性

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中国环境科学 2005年第1期25卷 52-56页

作者：张忠辉洪青张国顺徐剑宏李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从长期受杀螟硫磷污染的土壤中分离到一株能以杀螟硫磷为唯一碳源生长的细菌 FDS-1,根据其生理生化分析和 16S rDNA(GenBank Accession No. AY550913)序列同源性分析,将该菌初步鉴定为伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia sp.).该菌能在 14h... 详细信息

从长期受杀螟硫磷污染的土壤中分离到一株能以杀螟硫磷为唯一碳源生长的细菌 FDS-1,根据其生理生化分析和 16S rDNA(GenBank Accession No. AY550913)序列同源性分析,将该菌初步鉴定为伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia sp.).该菌能在 14h 内完全降解100mg/L 的杀螟硫磷.该菌降解杀螟硫磷最适 pH 值为 7.0,最适温度为 30℃,菌株降解杀螟硫磷的速率和起始接种量呈正相关.酶的定域试验表明,该菌中有机磷水解酶为胞内酶.

关键词：鉴定杀螟硫磷降解酶的定域

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红球菌CDT3降解氯氰菊酯的特性及途径

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中国环境科学 2005年第4期25卷 399-402页

作者：许育新李晓慧张明星崔中利李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

以一株降解氯氰菊酯的红球菌(Rhodococcussp.)CDT3为材料,研究了CDT3降解氯氰菊酯的最适条件(温度、pH值、接种量、培养时间、添加营养物).结果表明,在温度30℃,pH8.0时,CDT3对氯氰菊酯的降解率最高,添加少量葡萄糖、蛋白胨、酵母汁均... 详细信息

以一株降解氯氰菊酯的红球菌(Rhodococcussp.)CDT3为材料,研究了CDT3降解氯氰菊酯的最适条件(温度、pH值、接种量、培养时间、添加营养物).结果表明,在温度30℃,pH8.0时,CDT3对氯氰菊酯的降解率最高,添加少量葡萄糖、蛋白胨、酵母汁均能促进它对氯氰菊酯的降解.研究了CDT3降解氯氰菊酯的代谢途径,通过GC-MS分析,证实氯氰菊酯被CDT3降解后的产物是3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)和二氯菊酸(DCVA),推测氯氰菊酯是由CDT3产生的羧酸酯酶降解的,作为验证,提取了CDT3的粗酶液,并且通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测了羧酸酯酶.

关键词：红球菌氯氰菊酯降解特性降解途径羧酸酯酶

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中度嗜盐菌Halomonas sp. BYS-1启动子的克隆和测序

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应用与环境生物学报 2005年第6期11卷 729-732页

作者：洪青张忠辉张晓舟徐剑宏李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

提取了中度嗜盐菌***1的基因组DNA,以甲基对硫磷水解酶基因(mpd)为报告基因,以启动子探针pUCmpd为载体,通过鸟枪法在***5α中构建了BYS1的启动子文库.通过筛选获得了17个阳性克隆,编号为P1～P17.测定了阳性克隆的甲基对硫磷水解酶(MPH)... 详细信息

提取了中度嗜盐菌***1的基因组DNA,以甲基对硫磷水解酶基因(mpd)为报告基因,以启动子探针pUCmpd为载体,通过鸟枪法在***5α中构建了BYS1的启动子文库.通过筛选获得了17个阳性克隆,编号为P1～P17.测定了阳性克隆的甲基对硫磷水解酶(MPH)活性,结果表明,P3中mpd基因的启动子活性最强,它的酶活高达2554.3U/mg,而P17中mpd基因的启动子活性最弱,它的酶活只有68.3U/mg.对P3、P8、P17克隆中的重组质粒的插入片段进行了测序和在线启动子预测.

关键词：中度嗜盐菌启动子克隆测序

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华癸根瘤菌中自体诱导物的初步研究

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微生物学报 2005年第1期45卷 19-22页

作者：高轶静钟增涛郑会明王卉朱军南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验... 详细信息

群体感应 (Quorumsensing)是细菌通过产生可扩散的小分子量自体诱导物信号分子感知细胞群体密度变化 ,进行基因表达调控的生理行为。将根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)构建为超量表达群体感应调节蛋白TraR的检测菌株JZA1,试验证明该检测菌株能检测纳摩尔浓度的自体诱导物 ,利用该菌株对 3株不同华癸根瘤菌(Mesorhizobiumhuakuii)进行自体诱导物活性检测 ,发现该 3株华癸根瘤菌均能产生自体诱导物 ,其表达量与菌体密度成正相关 ,但 3株菌在相同培养条件下自体诱导物的表达量存在差异 ,结果表明自体诱导物在种内水平上存在一定的多样性 ;同时发现高pH条件能大大降低自体诱导物的稳定性。

关键词：群体感应自体诱导物华癸根瘤菌

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富集液中六六六(γ-BHC)脱氯基因的克隆、表达及降解试验

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微生物学报 2005年第1期45卷 44-47页

作者：张国顺洪青马爱芝张晓舟李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液 ,其对六六六 4种异构体的降解效果均为10 0 % ,但至今未能获得纯培养。根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了 4 71bp... 详细信息

从长期受六六六污染的土壤中获得高效降解六六六的富集液 ,其对六六六 4种异构体的降解效果均为10 0 % ,但至今未能获得纯培养。根据国外报道的六六六脱氯基因linA序列 ,设计并合成一对引物 ,通过PCR技术从富集液总DNA中扩增了 4 71bp的基因片段 ,命名为linN ,测序结果表明linN与报道的脱氯基因linA和linA2的同源性达 99% ,与linA1的同源性达 97%。将linN定向克隆到pET 2 9α表达载体中 ,转化至E .coliBL2 1,经IPTG诱导后可表达分子量约 17kD的蛋白 ,表达产物占菌体总蛋白的 30 %左右 ;诱导后转化子的降解能力明显提高 ,粗酶也有很好的降解效果。

关键词：富集液六六六脱氯基因克隆和表达

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重金属镉抗性菌株的筛选及其对镉活化作用的研究

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生态学杂志 2005年第11期24卷 1357-1360页

作者：夏娟娟盛下放江春玉南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过在培养基中加入一定浓度的Cd2+,从土壤中分离筛选出2株具有较强镉抗性及产酸能力的细菌JL-4和JC-9.经初步鉴定,JL-4和JC-9分别属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.)和黄单胞菌属(Xanthomonas sp.).将菌株JL-4和JC-9接种到添加不溶性镉(100m... 详细信息

通过在培养基中加入一定浓度的Cd2+,从土壤中分离筛选出2株具有较强镉抗性及产酸能力的细菌JL-4和JC-9.经初步鉴定,JL-4和JC-9分别属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.)和黄单胞菌属(Xanthomonas sp.).将菌株JL-4和JC-9接种到添加不溶性镉(100mg·L-1)的培养液中28℃培养48 h,接菌处理比不接菌对照培养液中有效镉含量分别增加1 392.3%和1 410.8%,培养液pH分别降低了2.87和3.18.将JL-4和JC-9分别接入含不同浓度重金属镉(100、200mg·kg-1)的土壤中28℃培养20 d,接菌处理比不接菌对照土壤中有效镉含量分别增加17.02%～100%(JL 4)和36.17%～61.80%(JC-9).菌株JL-4和JC-9的最适生长温度均为28℃,最适pH值分别为7和8.除对镉具有抗性外,两菌株对重金属铅、铜、镍、锌也具有一定抗性.

关键词：重金属污染镉菌株筛选活化

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重金属铜抗性菌株的筛选及其生物学特性的研究

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生态学杂志 2005年第1期24卷 6-8,96页

作者：江春玉盛下放夏娟娟南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

通过在培养基中加入一定浓度的Cu(CuSO4·5H2 O ,Cu 2 0 0mg·L-1) ,从 4 2份土壤样品中筛选得到 2株具有很强Cu抗性的细菌B和G ,经初步鉴定它们分别属于无色细菌属和芽胞杆菌属。将菌株B和G接种到添加Cu(15 0mg·L-1)的培... 详细信息

通过在培养基中加入一定浓度的Cu(CuSO4·5H2 O ,Cu 2 0 0mg·L-1) ,从 4 2份土壤样品中筛选得到 2株具有很强Cu抗性的细菌B和G ,经初步鉴定它们分别属于无色细菌属和芽胞杆菌属。将菌株B和G接种到添加Cu(15 0mg·L-1)的培养液中进行沉淀态铜的活化试验 ,结果表明 ,与不接菌对照相比 ,B和G菌株分别使培养液中有效铜含量增加 4 75 5 %和 2 4 9 5 % ,培养液pH由 6 5分别降低到 4 2和 5 0 ,菌株B和G的活化效能与其代谢产酸有关。B菌株和G菌株最适生长温度为 2 8℃ ,最适 pH分别为 6～ 7和 8,G菌株在 5 %NaCl下生长良好。除抗Cu外 ,两株菌对重金属Pb(40 0mg·L-1)、Cd(10 0mg·L-1)也具抗性。

关键词：重金属污染铜菌株筛选生物学持性

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以四氢嘧啶为主要相容性溶质的中度嗜盐菌I15的分离和特性研究

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微生物学报 2005年第6期45卷 900-904页

作者：何健汪婷孙纪全顾立锋李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从草地土壤中分离到一株中度嗜盐菌I15,经过16SrDNA(GenBank登录号为DQ010162)序列分析、形态学和生理生化特征分析,该菌株初步鉴定为Virgibacillusmarismortui。I15能在0%～25%NaCl的培养基中生长,最适生长NaCl浓度为10%,最适生长温度... 详细信息

从草地土壤中分离到一株中度嗜盐菌I15,经过16SrDNA(GenBank登录号为DQ010162)序列分析、形态学和生理生化特征分析,该菌株初步鉴定为Virgibacillusmarismortui。I15能在0%～25%NaCl的培养基中生长,最适生长NaCl浓度为10%,最适生长温度为30℃,最适pH为7.5～8.0。在高盐条件下,I15细胞内主要的相容性溶质为四氢嘧啶,在15%NaCl培养基中其含量达到1.608mmol(g·cdw),占到相容性溶质总摩尔含量的89.6%。渗透冲击试验表明I15细胞内四氢嘧啶在低渗冲击时能够快速分泌到细胞外,在高渗冲击冲剂时能够较快地重新合成。

关键词：中度嗜盐菌相容性溶质四氢嘧啶细菌泌乳工艺

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