检索结果-内蒙古大学图书馆

环境科学 2008年第7期29卷 1973-1976页

作者：陆鹏洪源范洪青蒋新李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室南京210008

通过转座子介导同源重组的方法,将甲基对硫磷水解酶基因mpd导入到六六六降解菌BHC-A的染色体上,构建了能同时降解六六六和甲基对硫磷的基因工程菌BHC-A-mpd.对其生长特性和降解特性的研究表明,工程菌在LB培养基中的生长特性与原始菌株... 详细信息

通过转座子介导同源重组的方法,将甲基对硫磷水解酶基因mpd导入到六六六降解菌BHC-A的染色体上,构建了能同时降解六六六和甲基对硫磷的基因工程菌BHC-A-mpd.对其生长特性和降解特性的研究表明,工程菌在LB培养基中的生长特性与原始菌株没有差别,生长至对数期A600 nm值都可达到2.5;对六六六的降解特性和原始菌株相同,可在10 h内将5 mg/L的六六六完全降解.mpd基因在BHC-A-mpd中稳定表达,BHC-A-mpd可以降解多种有机磷类农药.该基因工程菌的构建为六六六和甲基对硫磷复合污染环境的生物修复奠定了基础.

关键词：六六六甲基对硫磷生物降解基因工程菌

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大肠杆菌单拷贝rRNA操纵元菌株的构建及其生长特性研究

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南京农业大学学报 2008年第3期31卷 60-64页

作者：杨瑾李晓丹曹慧管莉菠崔中利南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

以1株染色体上的5个rRNA操纵元(rrnA、rrnD、rrnE、rrnG和rrnH)被敲除的大肠杆菌(Escherichia coli)菌株SQ88为出发菌,运用λ Red同源重组系统和卡那霉素抗性基因筛选重组子,并利用抗性基因两端的FRT位点通过位点专一性重组将抗性基因去... 详细信息

以1株染色体上的5个rRNA操纵元(rrnA、rrnD、rrnE、rrnG和rrnH)被敲除的大肠杆菌(Escherichia coli)菌株SQ88为出发菌,运用λ Red同源重组系统和卡那霉素抗性基因筛选重组子,并利用抗性基因两端的FRT位点通过位点专一性重组将抗性基因去除,最终成功构建了1株仅具有单拷贝rRNA操纵元(rrnB)的***菌株--SQ88C.试验结果发现,此菌株并未出现明显的生长障碍,其生长速率和rRNA/蛋白值与出发菌株SQ88相比有所下降,但并不显著.从而证明了单拷贝rRNA 操纵元在一定条件下能够满足大肠杆菌正常生长的需要,也为在大肠杆菌及其他菌株中快速精确地构建多rRNA 基因缺失菌株提供了有益的参考,并可望在16S rRNA 基因突变研究等方面发挥一定的作用.

关键词：大肠杆菌 Red同源重组 rRNA 操纵元 16S rRNA基因

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产多糖溶磷细菌对难溶性Ca-P的活化特性

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南京农业大学学报 2008年第2期31卷 49-54页

作者：易艳梅黄为一南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室/生命科学学院江苏南京210095

以肠杆菌EnHy-401、节杆菌ArHy-505、固氮菌AzHy-510和巨大芽孢杆菌P17为材料,比较了4种溶磷细菌在摇瓶培养条件下对不同难溶性Ca-P中的磷活化能力。结果表明,4种溶磷细菌均能促使难溶性Ca-P中的磷活化,但3种产多糖的溶磷细菌(EnHy-401... 详细信息

以肠杆菌EnHy-401、节杆菌ArHy-505、固氮菌AzHy-510和巨大芽孢杆菌P17为材料,比较了4种溶磷细菌在摇瓶培养条件下对不同难溶性Ca-P中的磷活化能力。结果表明,4种溶磷细菌均能促使难溶性Ca-P中的磷活化,但3种产多糖的溶磷细菌(EnHy-401、ArHy-505、AzHy-510)对难溶性Ca-P的活化能力普遍强于不产多糖的溶磷细菌(P17),肠杆菌EnHy-401对Ca3-P、Ca8-P和Ca10-P中的磷活化率分别达61.53%、63.40%和4.32%。在产多糖的溶磷细菌中,有机酸和多糖均高的菌株活化磷的能力最高,3种产多糖的溶磷细菌活化难溶磷酸钙能力的大小顺序依次为肠杆菌EnHy-401、节杆菌ArHy-505、固氮菌AzHy-510。结果还表明,产多糖的溶磷细菌对难溶磷的活化作用是由分泌有机酸和多糖的协同作用实现的,多糖对磷的吸持推动了磷的溶解平衡向溶解方向移动,且该协同作用受胞外多糖持磷能力和环境中C/N的影响,单位体积发酵液中多糖持磷量与菌株的磷活化能力呈正相关。在本试验条件下,C/N值高时,多糖产量高,有机酸分泌多,活化磷的能力就强。同一菌株只有在最适于产有机酸和产多糖的C/N值下,才能表现出最佳的溶磷效果。

关键词：溶磷细菌难溶性磷酸钙多糖磷活化

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萘降解菌N19-3的分离、鉴定和萘双加氧酶基因的检测

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环境科学研究 2008年第5期21卷 27-31页

作者：刘怡辰曹娟高国庆沈标南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从石油污染土壤中分离到一株高效降解萘的N19-3菌株.经形态观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析等鉴定其为丛毛单胞菌属（Comamonassp.）.该菌株能在30℃,30 h内将1 000 mg/L的萘完全降解.降解萘的适宜温度为20-30℃,适宜pH为7.0-9.0.... 详细信息

从石油污染土壤中分离到一株高效降解萘的N19-3菌株.经形态观察、生理生化实验和16S rDNA序列分析等鉴定其为丛毛单胞菌属（Comamonassp.）.该菌株能在30℃,30 h内将1 000 mg/L的萘完全降解.降解萘的适宜温度为20-30℃,适宜pH为7.0-9.0.0.1 mmol/L的Ca^2＋和Fe^3＋对N19^-3菌株降解萘有较强的促进作用,0.1 mmol/L的Mn^2＋和Zn^2＋对N19-3菌株的生长和萘的降解也有一定的促进作用,而0.1 mmol/L的Cu2＋则完全抑制了N19-3菌株的生长和萘的降解.通过PCR方法在N19-3菌株中扩增出分别与***菌株的萘双加氧酶铁硫蛋白大亚基基因（pahAc）与双加氧酶铁硫蛋白小亚基基因（pahAd）高度同源的核苷酸片断.

关键词：丛毛单胞菌属分离鉴定萘双加氧酶基因

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生淀粉糖化酶产生菌Cellulosimicrobium sp. SDE的分离鉴定及酶学性质研究

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工业微生物 2008年第5期38卷 45-49页

作者：李风玲张璐刘连成沈标南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从淀粉制品厂周围土壤中分离到一株高产生淀粉糖化酶的菌株SDE，经形态、生理生化及16S rDNA序列分析将其鉴定为Cellulosimicrobium ***菌株的最适产酶条件为pH7．0，培养温度为30℃。培养42h粗酶液的酶活达175．3U／mL。该酶以生玉米... 详细信息

从淀粉制品厂周围土壤中分离到一株高产生淀粉糖化酶的菌株SDE，经形态、生理生化及16S rDNA序列分析将其鉴定为Cellulosimicrobium ***菌株的最适产酶条件为pH7．0，培养温度为30℃。培养42h粗酶液的酶活达175．3U／mL。该酶以生玉米淀粉为底物时，最适作用pH6．0，最适作用温度40℃，pH6、0～7．0范围内酶活力稳定。在Ca2’存在下，酶的热稳定性很高，80℃保温1h后，酶活力仍保持50％。Ba^2＋、Cu^2＋对酶活有强烈的抑制作用，Ca^2＋、Zn^2＋有很强的激活作用。

关键词： Cellulosimicrobium sp.SDE 生淀粉糖化酶酶学性质

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Arthrobacter ***1菌株降解土壤中阿特拉津研究

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土壤 2008年第5期40卷 754-759页

作者：代先祝蒋建东李荣李顺鹏南京农业大学生命科学学院、农业部环境微生物工程重点开放实验室南京210095 西南大学资源环境学院、微生物学实验中心重庆400715

在阿特拉津浓度为50mg/kg干土的黄棕壤、潮土和红壤接种1.5×106CFU/g干土的降解菌Arthrobacter sp. AG1,10天后土壤中的阿特拉津分别降解至1.5、6.6和10mg/kg干土。阿特拉津的降解速率受到土壤性质的影响,但AG1仍能在不满足其生长... 详细信息

在阿特拉津浓度为50mg/kg干土的黄棕壤、潮土和红壤接种1.5×106CFU/g干土的降解菌Arthrobacter sp. AG1,10天后土壤中的阿特拉津分别降解至1.5、6.6和10mg/kg干土。阿特拉津的降解速率受到土壤性质的影响,但AG1仍能在不满足其生长繁殖要求的pH值的土壤中有效降解酸性土壤中阿特拉津;土壤中水分含量对降解效果影响较大,>20%时降解效果较好;土壤低含水量和低pH值会导致AG1降解阿特拉津的活力下降。不同的接种量对降解效果有一定影响,但105～107CFU/g干土接种量的AG1都能有效发挥降解作用。AG1降解完土壤中的阿特拉津后,在土壤含水量分别为5%和15%的情况下能长期保持降解活性,对60天后第2次施入黄棕壤和潮土中的50mg/kg阿特拉津4天时降解效率在65%以上。

关键词：阿特拉津土壤生物修复降解效果土壤性质

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氯氰菊酯污染土壤的微生物修复及对土著微生物的影响

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土壤学报 2008年第4期45卷 693-698页

作者：许育新李晓慧滕齐辉陈义吴春艳李顺鹏浙江省农业科学院环境资源与土壤肥料研究所杭州310021 南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在实验室条件下,在含有氯氰菊酯的土壤中添加氯氰菊酯和3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)降解菌CDT3(Rhodococcussp.)和PBM11(Pesudomonassp.),同时设不加菌的对照。分别于0、3、7、15、30 d取样,测定土壤中氯氰菊酯和3-PBA的残留,同时用平板计数... 详细信息

在实验室条件下,在含有氯氰菊酯的土壤中添加氯氰菊酯和3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)降解菌CDT3(Rhodococcussp.)和PBM11(Pesudomonassp.),同时设不加菌的对照。分别于0、3、7、15、30 d取样,测定土壤中氯氰菊酯和3-PBA的残留,同时用平板计数和变性梯度凝胶电泳(DGGE)方法分析土壤微生物群落的变化。结果显示:CDT3和PBM11在土壤中协同作用能够更好地降解氯氰菊酯及其中间产物3-PBA。氯氰菊酯对土著微生物有较强的抑制作用。投加降解菌可以消除农药对土壤微生物的抑制,有助于土著微生物种群的恢复,但短期内无法改变农药对土壤微生物结构的破坏。

关键词：氯氰菊酯 3-PBA 降解菌土壤微生物 DGGE

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石油烃降解菌Rhodococcus sp．15-3的分离鉴定及特性研究

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农业环境科学学报 2008年第5期27卷 1737-1741页

作者：张璐赵硕伟李凤玲张建沈标南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 镇江市环保局江苏镇江212000

从原油污染土壤中分离筛选到一株石油烃降解菌15-3,根据其形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列同源性分析,将其初步鉴定为红球菌(Rhodococcus sp.)。采用室内培养的方法,研究了15-3菌株对原油、原油中的烃类及正十八烷的降解作用。结... 详细信息

从原油污染土壤中分离筛选到一株石油烃降解菌15-3,根据其形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列同源性分析,将其初步鉴定为红球菌(Rhodococcus sp.)。采用室内培养的方法,研究了15-3菌株对原油、原油中的烃类及正十八烷的降解作用。结果表明,15-3菌株能以正十八烷为惟一碳源生长,在48h内对500mg·L-1的正十八烷降解率达96.9%。15-3菌株降解正十八烷的最适温度、pH值和盐浓度(NaCl)分别为30℃、7.0、2%,在低温(10℃)及高盐(4%～5%NaCl)环境下也有良好的降解能力。15-3菌株可以降解原油中C_13～C_32的正构烷烃、芳香烃及姥鲛烷。在含5g·L-1原油的培养基中,30℃培养5d后,菌株15-3对原油的降解率为60.3%,对原油中C_13～C_31烷烃的降解率均大于90%,对原油中芳香烃的降解率为63.6%。该菌株以石蜡为惟一碳源生长时能产生表面活性剂,将发酵液表面张力由58.11mN·m-1降到36.6mN·m-1,表明菌株15-3具有较强的乳化和分散石油的能力。

关键词：红球菌分离鉴定石油生物降解

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微生物降解DDT研究进展

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土壤 2008年第3期40卷 329-334页

作者：洪青蒋新李顺鹏土壤与农业可持续发展国家重点实验室(中国科学院南京土壤研究所) 南京210008 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

DDT是《关于持久性有机污染物(POPs)的斯德哥尔摩公约》规定的12种禁限POPs之一。它的环境毒性越来越引起人们的关注。微生物降解是一种有效的环境友好型去除DDT污染的手段。本文简要综述了国内外在DDT微生物降解方面的研究进展,主要包... 详细信息

DDT是《关于持久性有机污染物(POPs)的斯德哥尔摩公约》规定的12种禁限POPs之一。它的环境毒性越来越引起人们的关注。微生物降解是一种有效的环境友好型去除DDT污染的手段。本文简要综述了国内外在DDT微生物降解方面的研究进展,主要包括降解DDT的微生物、微生物降解DDT的途径以及以影响土壤中微生物降解DDT的因素。并对通过生物强化手段消除土壤中的DDT污染进行了展望。

关键词： POPs DDT 微生物降解进展

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灵芝三萜高产菌株原生质体紫外诱变选育

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南京农业大学学报 2008年第1期31卷 37-41页

作者：朱芬陈军师亮李玉祥陈孝赵明文南京农业大学农业部农业环境微生物工程重点开放实验室／生命科学学院江苏南京210095 江苏省桑茧丝资源综合利用工程技术研究中心江苏东台224221

对灵芝(Ganoderma lucidum)HG菌株进行原生质体紫外诱变处理,经过初筛和复筛,获得了生长速度、菌丝干重和三萜含量明显高于出发菌株的9株诱变株;通过10次PDA斜面继代培养、液体培养以及栽培试验筛选,获得了菌丝干重和三萜含量稳定提高... 详细信息

对灵芝(Ganoderma lucidum)HG菌株进行原生质体紫外诱变处理,经过初筛和复筛,获得了生长速度、菌丝干重和三萜含量明显高于出发菌株的9株诱变株;通过10次PDA斜面继代培养、液体培养以及栽培试验筛选,获得了菌丝干重和三萜含量稳定提高的诱变株UV-3,该菌株在栽培袋中的菌丝生长速率及子实体中三萜含量分别比出发菌株高58.6%和29.4%。SRAP-PCR结果表明,诱变株UV-3与出发菌株相比,DNA指纹图谱发生了明显改变。

关键词：灵芝紫外诱变三萜栽培 SRAP-PCR

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