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农业环境科学学报 2005年第z1期24卷 223-227页

作者：刘爱民黄为一南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 安徽师范大学生命科学学院

从某冶炼厂污染土壤中分离出一株能高度抗镉和吸附镉的菌株J5,经初步鉴定为假单胞菌属(Pseudo-m onassp.)。研究结果表明该菌株在液体细菌培养基中耐硫酸镉高达40 mmol.L-1,琼脂平板上耐硫酸镉高达75mmol.L-1;J5产碱,有一定絮凝性;Cu2+... 详细信息

从某冶炼厂污染土壤中分离出一株能高度抗镉和吸附镉的菌株J5,经初步鉴定为假单胞菌属(Pseudo-m onassp.)。研究结果表明该菌株在液体细菌培养基中耐硫酸镉高达40 mmol.L-1,琼脂平板上耐硫酸镉高达75mmol.L-1;J5产碱,有一定絮凝性;Cu2+和Cd2+的共同存在增加了对菌株J5的毒害,Cd2+浓度影响J5绿色色素的表达;活菌体的菌浓度对J5耐Cd2+能力影响很大,菌浓度愈大,耐性愈强,在0~1.5 mmol.L-1Cd2+浓度范围内,J5菌体的全细胞SDS-PAGE电泳图谱差异不明显;活菌体对100μ***-1Cd2+积累率为99.1%,吸附率达100%。

关键词：抗Cd细菌色素抗性变化 SDS-PAGE电泳

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3-苯氧基苯甲酸降解菌的分离及降解特性研究

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微生物学通报 2005年第5期32卷 62-66页

作者：许育新李晓慧秦华李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部环境微生物工程重点开放实验室中国科学院南京土壤研究所生物与生化研究室南京210008

从农药厂污泥中分离到一株3-苯氧基苯甲酸(3-Phenoxybenzoicacid,3-PBA)降解菌PBM11。经生理生化试验和16SrDNA测定初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonassp·)。PBM11能以3-PBA为唯一碳源生长,降解试验表明:在基础盐培养基中,初始pH7&#... 详细信息

从农药厂污泥中分离到一株3-苯氧基苯甲酸(3-Phenoxybenzoicacid,3-PBA)降解菌PBM11。经生理生化试验和16SrDNA测定初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonassp·)。PBM11能以3-PBA为唯一碳源生长,降解试验表明:在基础盐培养基中,初始pH7·0,30℃,160r/min,装瓶量为100mL/250mL的条件下,PBM11经过24h可完全降解200mg/L的3-PBA;添加低浓度的外源营养物质能够在一定程度上促进降解;Cu2+和Co2+等对其降解性能有抑制作用,而Fe3+有明显的促进作用;通过分析底物利用情况,初步推断3-PBA降解的中间产物可能为原儿茶酸和苯酚。经过7d的处理,PBM11对土壤中100mg/L3-PBA的降解率为66·25%。从PBM11中检测到一个质粒。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸降解菌降解特性中间产物

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牛粪沼气发酵过程中物质转化、微生物生理群变化及产甲烷菌多样性研究

牛粪沼气发酵过程中物质转化、微生物生理群变化及产甲烷菌多样性...

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沼气产业化发展研讨会

作者：汪婷何健赵子如李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

我国奶牛养殖近年来得到了极大的发展,但与之俱来的是产生了大量的奶牛粪便,据统计每头奶牛日产鲜牛粪约30公斤,牛尿和冲洗废水150公斤,奶牛粪便已成:为我国农村环境主要污染源之一。沼气发酵是奶牛粪便最有应用前景的处理工艺之一,在... 详细信息

我国奶牛养殖近年来得到了极大的发展,但与之俱来的是产生了大量的奶牛粪便,据统计每头奶牛日产鲜牛粪约30公斤,牛尿和冲洗废水150公斤,奶牛粪便已成:为我国农村环境主要污染源之一。沼气发酵是奶牛粪便最有应用前景的处理工艺之一,在使奶牛粪便无害化的同时,产生的沼液沼渣可作为有机肥料,沼气可作为能源。但是由于奶牛粪便有机质浓度和难降解的纤维素含量高,作为原料进行沼气发酵时,普遍存在调试启动慢,运行过程不稳定,易出现酸化和不产气或产气率低等问题,这已经在很大程度上制约了沼气发酵在奶牛粪便处理中的应用。对奶牛粪便沼气发酵物质转化及其微生物种群变化过程进行研究,对奶牛粪便沼气发酵的快速启动、产气率提高和稳定运行具有非常重要的意义。

关键词：沼气发酵奶牛粪便产甲烷菌微生物生理群物质转化多样性研究

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牛粪沼气发酵过程中产甲烷菌群落结构的RFLP分析

牛粪沼气发酵过程中产甲烷菌群落结构的RFLP分析

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沼气产业化发展研讨会

作者：何健汪婷梅琴李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

我国奶牛养殖近年来得到了极大的发展,但与之俱来的是产生了大量的奶牛粪便,据统计每头奶牛日产鲜牛粪约30公斤,牛尿和冲洗废水150公斤,奶牛粪便已成为我国农村环境主要污染源之一。沼气发酵是奶牛粪便最有应用前景的处理工艺之一,在使... 详细信息

我国奶牛养殖近年来得到了极大的发展,但与之俱来的是产生了大量的奶牛粪便,据统计每头奶牛日产鲜牛粪约30公斤,牛尿和冲洗废水150公斤,奶牛粪便已成为我国农村环境主要污染源之一。沼气发酵是奶牛粪便最有应用前景的处理工艺之一,在使奶牛粪便无害化的同时,产生的沼液沼渣可作为有机肥料,沼气可作为能源。但是由于奶牛粪便有机质浓度和难降解的纤维素含量高,作为原料进行沼气发酵时,普遍存在调试启动慢,运行过程不稳定,易出现酸化和不产气或产气率低等问题,这已经在很大程度上制约了沼气发

关键词：沼气发酵奶牛粪便不同阶段产甲烷菌甲烷八叠球菌属群落结构

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牛粪沼气发酵过程中产甲烷菌群落结构的RFLP分析

牛粪沼气发酵过程中产甲烷菌群落结构的RFLP分析

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中国沼气学会第七次全国代表大会暨沼气产业化发展研讨会

作者：何健汪婷梅琴李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

本文进行了牛粪沼气发酵过程中产甲烷菌群落结构的RFLP分析。我国奶牛养殖近年来得到了极大的发展，但与之俱来的是产生了大量的奶牛粪便，据统计每头奶牛日产鲜牛粪约30公斤，牛尿和冲洗废水150公斤，奶牛粪便已成为我国农村环境主要... 详细信息

本文进行了牛粪沼气发酵过程中产甲烷菌群落结构的RFLP分析。我国奶牛养殖近年来得到了极大的发展，但与之俱来的是产生了大量的奶牛粪便，据统计每头奶牛日产鲜牛粪约30公斤，牛尿和冲洗废水150公斤，奶牛粪便已成为我国农村环境主要污染源之一。沼气发酵是奶牛粪便最有应用前景的处理工艺之一，在使奶牛粪便无害化的同时，产生的沼液沼渣可作为有机肥料，沼气可作为能源。但是由于奶牛粪便有机质浓度和难降解的纤维素含量高，作为原料进行沼气发酵时，普遍存在调试启动慢，运行过程不稳定，易出现酸化和不产气或产气率低等问题，这已经在很大程度上制约了沼气发酵在奶牛粪便处理中的应用。由于产甲烷菌是专性严格厌氧菌，培养条件苛刻，生长缓慢，依靠分离纯化的方法分析沼气发酵过程中产甲烷菌的种群演替，不仅耗时长，而且还无法反映一些未可培养的产甲烷菌种群，因此无法全面、快速、准确的反映沼气发酵过程中产甲烷菌的演替情况。随着分子生物学的发展，建立在微生物核糖体小亚基(16S rRNA)序列分析基础上的分子系统发育分析方法快速、方便，不依赖于培养，可以突破传统培养方法的局限性，直接在基因水平上进行分析。

关键词：农村能源沼气工程牛粪发酵微生物群落

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牛粪沼气发酵过程中物质转化、微生物生理群变化及产甲烷菌多样性研究

牛粪沼气发酵过程中物质转化、微生物生理群变化及产甲烷菌多样性...

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中国沼气学会第七次全国代表大会暨沼气产业化发展研讨会

作者：汪婷何健赵子如李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

我国奶牛养殖近年来得到了极大的发展，但与之俱来的是产生了大量的奶牛粪便，据统计每头奶牛日产鲜牛粪约30公斤，牛尿和冲洗废水150公斤，奶牛粪便已成为我国农村环境主要污染源之一。沼气发酵是奶牛粪便最有应用前景的处理工艺之一... 详细信息

我国奶牛养殖近年来得到了极大的发展，但与之俱来的是产生了大量的奶牛粪便，据统计每头奶牛日产鲜牛粪约30公斤，牛尿和冲洗废水150公斤，奶牛粪便已成为我国农村环境主要污染源之一。沼气发酵是奶牛粪便最有应用前景的处理工艺之一，在使奶牛粪便无害化的同时，产生的沼液沼渣可作为有机肥料，沼气可作为能源。但是由于奶牛粪便有机质浓度和难降解的纤维素含量高，作为原料进行沼气发酵时，普遍存在凋试启动慢，运行过程不稳定，易出现酸化和不产气或产气率低等问题，这已经在很大程度上制约了沼气发酵在奶牛粪便处理中的应用。对奶牛粪便沼气发酵物质转化及其微生物种群变化过程进行研究，对奶牛粪便沼气发酵的快速启动、产气率提高和稳定运行具有非常重要的意义。本文介绍了牛粪沼气发酵过程中物质转化、微生物生理群变化及产甲烷菌多样性研究的材料方法与结果，在实际的研究工作中，应该考虑，将分子生物学手段与传统的微生物学培养技术相结合，做到尽可能全面、准确地反映实际情况。用分子生物学的方法指导传统的分离培养技术，与此同时，以传统的分离培养技术验证分子生物学的分析结果。

关键词：农村能源沼气工程牛粪发酵微生物种群

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多功能降解菌Pseudomonas putida KT2440-DOP的构建与降解特性研究

多功能降解菌Pseudomonas putida KT2440-DOP的构建与降解特性研究

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第八次全国环境微生物学术研讨会

作者：顾立锋何健黄星贾开志李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

三唑磷水解酶基因为本实验室发现的一个新的广谱有机磷水解酶基因,通过PCR从有机磷降解菌株***-4总DNA扩增了tpd,将tpd定向克隆到pBBRMCS-5载体上,构建重组质粒pTPD,在辅助质粒pRK2013的帮助下,通过三亲接合将pTPD转移到Pseudomonasputi... 详细信息

三唑磷水解酶基因为本实验室发现的一个新的广谱有机磷水解酶基因,通过PCR从有机磷降解菌株***-4总DNA扩增了tpd,将tpd定向克隆到pBBRMCS-5载体上,构建重组质粒pTPD,在辅助质粒pRK2013的帮助下,通过三亲接合将pTPD转移到PseudomonasputidaKT2440中,获得的工程菌PseudomonasputidaKT2440-DOP可以降解多种有机磷农药及芳香烃化合物;KT2440-DOP的有机磷水解酶活较出发菌株mp4提高了一倍左右.

关键词：有机磷农药有机磷降解菌 KT2440 工程菌构建芳香烃化合物三唑磷水解酶基因

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奶牛粪便沼气发酵前后发酵液中产甲烷菌多样性分析

奶牛粪便沼气发酵前后发酵液中产甲烷菌多样性分析

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第八次全国环境微生物学术研讨会

作者：汪婷何健徐剑宏李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

采用产甲烷菌16SrDNA特异性引物和PCR扩增的方法,构建了以牛粪为发酵基质模拟产沼气前后的发酵液16SrDNA文库,并通过RFLP酶切分析和序列分析.结果表明沼气发酵前后存在着产甲烷菌的演替过程,在发酵前后各自存在着占优势地位的种群.发酵... 详细信息

采用产甲烷菌16SrDNA特异性引物和PCR扩增的方法,构建了以牛粪为发酵基质模拟产沼气前后的发酵液16SrDNA文库,并通过RFLP酶切分析和序列分析.结果表明沼气发酵前后存在着产甲烷菌的演替过程,在发酵前后各自存在着占优势地位的种群.发酵前的发酵基质中,109个克隆子被划分为29个不同的RFLP型,其中,最大的六大RFLP型分别含有22、14、12、11、7、7个转化子,而其余的23个RFLP类型中分别含有1～4个转化子,测序后表明这六种RFLP型的克隆子分别与甲烷粒球菌(Methanocorpusculumlabreanum,AF095267)、瘤胃甲烷短杆菌(Methanobre-vibacterruminantium,AY196666)以及甲烷短杆菌属(Methanobrevibacter)的产甲烷菌高度同源;而发酵盛产期发酵液中所挑取的109个转化子被分为14种酶切类型,其中占优势地位的四大RFLP型分别含有28、23、23、15个转化子,经测序后均与小甲烷粒菌(Methanocorpusculumbavaricum,AY260435.1)具有高度同源性.实验表明:随着沼气发酵的进行,沼液中的产甲烷菌的群落结构发生了很大的变化,存在着明显的演替过程.

关键词：沼气发酵产甲烷菌多样性 16S rDNA文库 RFLP酶切分析群落结构

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甲基对硫磷长期污染对土壤微生物的生态效应

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农村生态环境 2004年第4期20卷 48-50页

作者：张瑞福崔中利何健黄婷婷李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

研究了有机磷农药甲基对硫磷长期污染对土壤微生物的影响,结果表明:污染土壤中细菌、放线菌、真菌数量变化不大,自生固氮菌和反硝化细菌数量减少,氨化细菌、亚硝化细菌、硝化细菌数量有所增加;与对照土壤相比,污染土壤呼吸作用下降29.9... 详细信息

研究了有机磷农药甲基对硫磷长期污染对土壤微生物的影响,结果表明:污染土壤中细菌、放线菌、真菌数量变化不大,自生固氮菌和反硝化细菌数量减少,氨化细菌、亚硝化细菌、硝化细菌数量有所增加;与对照土壤相比,污染土壤呼吸作用下降29.93%,而氨化作用和硝化作用则增强。1g对照土壤(以干土计)中微生物总DNA提取量为(13.01±1.91)μg,污染土壤中则为(12.23±1.36)μg。

关键词：甲基对硫磷长期污染土壤微生物生态效应

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氯氰菊酯降解菌株CDT3的分离鉴定及生理特性研究

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农业环境科学学报 2004年第5期23卷 958-963页

作者：许育新戴青华李晓慧李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

采用室内培养试验方法,从农药厂污泥中分离到一株降解氯氰菊酯的放线菌(命名为CDT3),并对该菌进行了鉴定,研究了其生理特性。结果表明,CDT3能以共代谢的方式降解氯氰菊酯,经16SrDNA序列分析,鉴定为红球菌属(Rhodococcussp.)。降解性能... 详细信息

采用室内培养试验方法,从农药厂污泥中分离到一株降解氯氰菊酯的放线菌(命名为CDT3),并对该菌进行了鉴定,研究了其生理特性。结果表明,CDT3能以共代谢的方式降解氯氰菊酯,经16SrDNA序列分析,鉴定为红球菌属(Rhodococcussp.)。降解性能验证显示在摇瓶中对100mg·L-1氯氰菊酯72h降解效率达到84.24%。CDT3在LB培养基中经15h达到稳定期,在葡萄糖铵盐培养基中经25h达到稳定期。生长条件的初步研究显示,其最适碳源为葡萄糖,最适有机氮源为酵母膏,无机氮源为硫酸铵,最适温度30℃,最适pH8.0。无机盐利用试验表明,当添加1%的磷酸二氢钾,0.2%的氯化钠,0.2%的硫酸镁,0.05%的碳酸钙时菌体生长良好;抗生素试验表明,CDT3对多种抗生素均敏感。小区试验中对茶叶上氯氰菊酯的降解率达到68.94%。

关键词：氯氰菊酯降解菌生长条件降解效率

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