检索结果-内蒙古大学图书馆

菌物学报 2006年第4期25卷 587-591页

作者：丁一新赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室南京210095

根据已报道的lz8基因序列设计引物,以灵芝基因组DNA为模板,PCR扩增获得lz8基因。构建了原核表达载体pET30a-lz8,转化原核表达宿主菌RosettaDE3,IPTG诱导融合蛋白表达,并用Ni-NTA亲和层析柱对LZ-8蛋白进行分离纯化。将纯化的LZ-8蛋白用Fr... 详细信息

根据已报道的lz8基因序列设计引物,以灵芝基因组DNA为模板,PCR扩增获得lz8基因。构建了原核表达载体pET30a-lz8,转化原核表达宿主菌RosettaDE3,IPTG诱导融合蛋白表达,并用Ni-NTA亲和层析柱对LZ-8蛋白进行分离纯化。将纯化的LZ-8蛋白用Freund佐剂乳化后注射到新西兰白兔体内,经数次加强免疫后采血分离抗血清,并以抗血清为探针建立了LZ-8蛋白的免疫印迹法定性检测方法。

关键词：载体构建异源表达 Western杂交

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低温胁迫下香菇基因表达差异研究

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应用与环境生物学报 2006年第5期12卷 614-617页

作者：冯志勇米朔甫陈明杰赵明文李军辉潘迎捷南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 上海丰科生物科技股份有限公司上海201401 上海市农业科学院食用菌研究所/上海市农业遗传重点实验室上海201106

香菇为变温结实型担子菌，为探讨低温胁迫诱导香菇子实体形成的分子机理，应用mRNA差异显示技术对低温胁迫下香菇菌丝体基因表达差异进行了比较．电泳差异展示结果表明，低温胁迫前后基因表达在数量水平和质量水平上都存在显著差异，数... 详细信息

香菇为变温结实型担子菌，为探讨低温胁迫诱导香菇子实体形成的分子机理，应用mRNA差异显示技术对低温胁迫下香菇菌丝体基因表达差异进行了比较．电泳差异展示结果表明，低温胁迫前后基因表达在数量水平和质量水平上都存在显著差异，数量水平的差异表现为低温胁迫过程中表达序列标签（expressed sequence tags，ESTs）增强表达或减弱表达；质量水平上的差异表现为低温胁迫使部分ESTs特异诱导表达或沉默表达．差异ESTs的类型比较和多态性分析发现，低温胁迫处理6～12h可能是诱发香菇原基发生的关键时段．本文还对显著差异表达的基因片段进行序列分析和Northern杂交验证，初步讨论了低温胁迫时间在调控香菇子实体发生中的作用．

关键词：香菇低温胁迫 mRNA差异显示基因表达序列标签(ESTs)

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酿酒酵母鲨烯单加氧酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

酿酒酵母鲨烯单加氧酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

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首届全国食用菌中青年专家学术交流会

作者：李娜赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室南京农业大学生命科学学院农业部农业微生物环境工程重点开放实验室

以酿酒酵母鲨烯单加氧酶基因的全长质粒DNA为模板进行PCR扩增;将PCR产物克隆到巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPIC9K中,并位于α-因子信号肽序列的下游,获得重组质粒pPIC9K-SE。重组质粒线性化后用电转化法导入毕赤酵母菌株GS11... 详细信息

以酿酒酵母鲨烯单加氧酶基因的全长质粒DNA为模板进行PCR扩增;将PCR产物克隆到巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris表达载体pPIC9K中,并位于α-因子信号肽序列的下游,获得重组质粒pPIC9K-SE。重组质粒线性化后用电转化法导入毕赤酵母菌株GS115中,经大量筛选,及PCR验证获得在染色体上整合有目的基因的菌株,取上清液进行SDS-PAGE 电泳可以检测到目的条带。

关键词：鲨烯单加氧酶载体构建分泌表达

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香菇低温胁迫应答基因的克隆及其表达分析

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农业生物技术学报 2006年第3期14卷 381-386页

作者：冯志勇米朔甫赵明文陈明杰李军辉谭琦潘迎捷南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室上海丰科生物科技股份有限公司上海市农业科学院食用菌研究所上海市农业遗传重点实验室

用RT-PCR和RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术相结合,从香菇(Lentinulaedodes)苏香菌株中得到了1个与低温胁迫相关的全长2432bp的cDNA,该基因含1个1962bp的开放式阅读框,基因组序列分析发现该基因有11个内含子。经数据库同源查找... 详细信息

用RT-PCR和RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术相结合,从香菇(Lentinulaedodes)苏香菌株中得到了1个与低温胁迫相关的全长2432bp的cDNA,该基因含1个1962bp的开放式阅读框,基因组序列分析发现该基因有11个内含子。经数据库同源查找及序列比较,发现该基因编码的氨基酸与青霉菌(Penicilliumnordicum)的聚酮合酶和酿酒酵母(Saccha-romycescerevisiae)的α-氨基己二酸还原酶分别具有30%、22%的同源性和46%、40%的相似性。表达谱分析表明,当低温胁迫的温差为5℃时,该基因即开始表达,但mRNA丰度较低;温差达到10℃时,mRNA达到最大表达量;低温胁迫处理后,该基因在菌丝转色前的表达丰度低于转色后的丰度。将该基因初步命名为ICS(geneinducedundercoldstress,GenBank登录号为DQ211659),并初步推测该基因可能参与了低温胁迫的信号传导,低温胁迫信号在影响氮代谢后进而诱发子实体的形成。

关键词：香菇低温胁迫快速分离cDNA末端(RACE) 基因克隆表达谱

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DDT降解菌株DB-1的分离、系统发育及降解特性

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中国环境科学 2005年第6期25卷 674-677页

作者：张明星洪青何健许育新李顺鹏南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

从农药厂下水道污泥中分离、筛选到1株能够在好氧条件下降解DDT的细菌菌株DB-1,根据表型特征、生理生化特性及16S rDNA序列的系统发育分析,将菌株DB-1初步鉴定为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp).该菌株能在含酵母膏(40mg/L)的DDT(40mg... 详细信息

从农药厂下水道污泥中分离、筛选到1株能够在好氧条件下降解DDT的细菌菌株DB-1,根据表型特征、生理生化特性及16S rDNA序列的系统发育分析,将菌株DB-1初步鉴定为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp).该菌株能在含酵母膏(40mg/L)的DDT(40mg/L)无机盐液体培养基中降解DDT,10d降解率达到83.6%,菌株DB-1在25～30℃长势较好,最适生长pH值为8.0.

关键词： DDT 农药残留生物降解系统发育分析

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3-苯氧基苯甲酸降解菌的分离及降解特性研究

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微生物学通报 2005年第5期32卷 62-66页

作者：许育新李晓慧秦华李顺鹏南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部环境微生物工程重点开放实验室中国科学院南京土壤研究所生物与生化研究室南京210008

从农药厂污泥中分离到一株3-苯氧基苯甲酸(3-Phenoxybenzoicacid,3-PBA)降解菌PBM11。经生理生化试验和16SrDNA测定初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonassp·)。PBM11能以3-PBA为唯一碳源生长,降解试验表明:在基础盐培养基中,初始pH7&#... 详细信息

从农药厂污泥中分离到一株3-苯氧基苯甲酸(3-Phenoxybenzoicacid,3-PBA)降解菌PBM11。经生理生化试验和16SrDNA测定初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonassp·)。PBM11能以3-PBA为唯一碳源生长,降解试验表明:在基础盐培养基中,初始pH7·0,30℃,160r/min,装瓶量为100mL/250mL的条件下,PBM11经过24h可完全降解200mg/L的3-PBA;添加低浓度的外源营养物质能够在一定程度上促进降解;Cu2+和Co2+等对其降解性能有抑制作用,而Fe3+有明显的促进作用;通过分析底物利用情况,初步推断3-PBA降解的中间产物可能为原儿茶酸和苯酚。经过7d的处理,PBM11对土壤中100mg/L3-PBA的降解率为66·25%。从PBM11中检测到一个质粒。

关键词： 3-苯氧基苯甲酸降解菌降解特性中间产物

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甲磺隆降解细菌S113的分离鉴定及其降解特性研究

甲磺隆降解细菌S113的分离鉴定及其降解特性研究

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农作物药害预防及控制技术研讨会

作者：黄星何健李顺鹏南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

从生产甲磺隆的农药厂内采取土样,经驯化富集后筛选到一株能高效降解甲磺隆的细茵S113,根据表型特征、生理生化特性及16SrDNA序列同源性分析,将S113初步鉴定为嗜甲基菌(Methylopila sp)。该菌能在含甲磺隆(30 mg/L)的无机盐液体培养基... 详细信息

从生产甲磺隆的农药厂内采取土样,经驯化富集后筛选到一株能高效降解甲磺隆的细茵S113,根据表型特征、生理生化特性及16SrDNA序列同源性分析,将S113初步鉴定为嗜甲基菌(Methylopila sp)。该菌能在含甲磺隆(30 mg/L)的无机盐液体培养基中降解甲磺隆,5 d降解率达72.6%,该茵降解甲磺隆的最适pH为7.0,最适温度为30℃,该茵降解甲磺隆的速率和起始接种量呈正相关。酶的定域实验表明,该菌中甲磺隆水解酶为胞内酶。土壤降解实验结果表明,土壤投加入S113后,可有效的提高甲磺隆的降解速率。

关键词：甲磺隆假单孢菌生物降解

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七株有机磷农药降解菌的降解特性比较

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中国环境科学 2004年第5期24卷 584-587页

作者：张瑞福戴青华何健代先祝李顺鹏南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095

对分离自同一有机磷农药污染土壤的7株有机磷农药降解菌的降解特性进行了比较,7株降解菌都能利用甲基对硫磷为唯一碳源生长,并生成中间代谢产物对硝基苯酚.对硝基苯酚的降解经过一段延滞期,不同菌株降解对硝基苯酚的能力和延滞期有很大... 详细信息

对分离自同一有机磷农药污染土壤的7株有机磷农药降解菌的降解特性进行了比较,7株降解菌都能利用甲基对硫磷为唯一碳源生长,并生成中间代谢产物对硝基苯酚.对硝基苯酚的降解经过一段延滞期,不同菌株降解对硝基苯酚的能力和延滞期有很大差异.降解菌株对多种有机磷类农药和芳香族化合物具有降解能力,其降解谱表现了一定的差异.用PCR方法从7株降解菌中克隆了有机磷农药水解酶基因.

关键词：有机磷农药降解菌降解特性水解酶基因

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鲨烯合酶的研究进展

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微生物学报 2003年第5期43卷 676-680页

作者：赵明文钟家禹王南梁婉琪潘迎捷南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 上海市农业科学院食用菌研究所农业部食用菌遗传育种重点开放实验室上海201106 上海市农业科学院生物技术中心上海市农业遗传育种重点实验室上海201106

鲨烯合酶（Squalene Synthase, EC 2.5.1.21，简称SQS）是催化两分子的法呢酯焦磷酸（Farnesyl diphosphate，简称FPP）缩合产生鲨烯（SQ）的关键酶，而鲨烯是生物合成三萜、甾醇、胆固醇等萜烯类重要物质的共同前体。因此，对鲨烯合酶... 详细信息

鲨烯合酶（Squalene Synthase, EC 2.5.1.21，简称SQS）是催化两分子的法呢酯焦磷酸（Farnesyl diphosphate，简称FPP）缩合产生鲨烯（SQ）的关键酶，而鲨烯是生物合成三萜、甾醇、胆固醇等萜烯类重要物质的共同前体。因此，对鲨烯合酶的研究部受重视，迄今人们已对14个不同物种中的鲨烯合酶进行了研究。本文简要综述国内外关鲨烯合酶研究的进展。

关键词：鲨烯合酶灵芝酸三萜萜烯类化合物生物合成

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