检索结果-内蒙古大学图书馆

Rhodococcus sp.T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶酶学性质及分离纯化

南京农业大学学报 2015年第1期38卷 78-84页

作者：董维亮侯颖王飞李周坤黄彦崔中利南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003 江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045

[目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵（FE）降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸（FA）。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供... 详细信息

[目的]Rhodococcus sp.T1是一株高效的精恶唑禾草灵（FE）降解菌株,T1菌株可以断裂FE的酯键将其转化为精恶唑禾草灵酸（FA）。对T1菌株胞内精恶唑禾草灵酯酶的酶学性质进行研究并对其进行分离纯化,以期为生物修复精恶唑禾草灵污染提供更多的理论依据。[方法]以酯酶的通用底物乙酸-1-萘酯作为定量测定胞内酯酶活力的底物,分析温度和p H值对酯酶活力和稳定性的影响,同时探讨金属离子对酯酶活力的影响;通过硫酸铵沉淀、疏水层析、DEAE离子交换层析和Superdex-200凝胶层析柱组合技术对精恶唑禾草灵酯酶进行分离纯化,计算了纯化过程中酯酶的比活力、纯化倍数和回收率。[结果]胞内酯酶最适反应p H值为8.0,在p H 4.0-10.0内处理24 h活性稳定;最适反应温度为42℃,在温度50℃以下处理30 min活性稳定;1.0 mmol·L^-1Ag^＋对酯酶活力有强烈的抑制作用。纯化后的酯酶比活力从0.058 U·mg^-1提高到21.5 U·mg^-1,纯化倍数为369.5倍,回收率为3%。纯化后的粗酶经SDS-PAGE电泳后至少有4条明显的蛋白条带,通过酶谱确定精恶唑禾草灵酯酶条带的相对分子质量为42.3×10^3。[结论]精恶唑禾草灵酯酶具有较好的酸碱稳定性和热稳定性,在精恶唑禾草灵污染土壤修复中可能具有较好的应用潜力。

关键词： Rhodococcus sp.T1 精恶唑禾草灵分离纯化酶学性质酯酶酶谱

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除草剂二甲戊灵微生物降解代谢及其分子机制

除草剂二甲戊灵微生物降解代谢及其分子机制

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第十八次全国环境微生物学学术研讨会

作者：倪海燕李娜王飞何健洪青李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

二硝基苯胺类除草剂二甲戊灵在农业中应用十分广泛，但在保证农业正常生产，保障人们生活需求的同时，也不可避免地带来严重的环境污染.因此，研究除草剂二甲戊灵的微生物降解代谢过程及其分子机制具有非常重要的理论意义和实际应用价值...

二硝基苯胺类除草剂二甲戊灵在农业中应用十分广泛，但在保证农业正常生产，保障人们生活需求的同时，也不可避免地带来严重的环境污染.因此，研究除草剂二甲戊灵的微生物降解代谢过程及其分子机制具有非常重要的理论意义和实际应用价值.以二甲戊灵为唯一碳源，连续传代富集筛选得到一株能够降解并利用二甲戊灵为碳源生长的菌株Y3.通过菌株生理生化实验和菌株16S rRNA系统发育进化分析将菌株Y3鉴定为Bacillus sp..

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一个角度双加氧酶催化的二苯醚类化合物微生物降解新机制

一个角度双加氧酶催化的二苯醚类化合物微生物降解新机制

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第十八次全国环境微生物学学术研讨会

作者：蔡舒陈立伟王成红蔡天明何健李顺鹏南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 南京农业大学资源与环境科学学院南京210095

二苯醚及其衍生化合物如二苯醚类除草剂、杀虫剂和多卤代二苯醚在农业和化工行业中得到广泛应用,在保证农业生产、保障人们生活的同时,也导致严重的环境污染.因此研究二苯醚类化合物的微生物降解过程和机制具有非常重要的理论意义和实...

二苯醚及其衍生化合物如二苯醚类除草剂、杀虫剂和多卤代二苯醚在农业和化工行业中得到广泛应用,在保证农业生产、保障人们生活的同时,也导致严重的环境污染.因此研究二苯醚类化合物的微生物降解过程和机制具有非常重要的理论意义和实际应用价值.以2-PBA(2-phenoxybenzoate,2-苯氧基苯甲酸)为唯一碳源,通过连续传代富集筛选到两株能够降解并利用2-PBA和二苯醚为碳源生长的菌株SC_3和SC_4.通过多相分类技术将菌株SC_3和SC_4鉴定为Sphingobium属的两个新种,分别命名为Sphingobium phenoxybenzoativorans ***.和Sphingobium diphenylethervorans ***..

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赤霉病菌拮抗菌Bacillus subtilis AF0907抗菌物质研究

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中国生物防治学报 2015年第3期31卷 378-385页

作者：胡晓丹王建伟李孝敬祭芳史建荣徐剑宏南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室/江苏省转基因安全评价公共服务中心南京210014 江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心南京210014

菌株AF0907是从土壤中分离到的1株对小麦赤霉病菌具有显著拮抗作用的枯草芽孢杆菌,该菌株不仅对小麦赤霉病菌具有很好的拮抗活性,对其他多种植物病原菌都具有很好的拮抗效果。为了明确菌株AF0907对赤霉病菌的抑菌机理,本研究首先使用平... 详细信息

菌株AF0907是从土壤中分离到的1株对小麦赤霉病菌具有显著拮抗作用的枯草芽孢杆菌,该菌株不仅对小麦赤霉病菌具有很好的拮抗活性,对其他多种植物病原菌都具有很好的拮抗效果。为了明确菌株AF0907对赤霉病菌的抑菌机理,本研究首先使用平板对持法对拮抗物质进行定位,结果表明该菌分泌的拮抗物质主要位于细胞上清液中。采用不同饱和度的硫酸铵沉淀细胞上清液,确定了60%的硫酸铵饱和度是沉淀该拮抗物质的最佳条件;分别研究了温度、p H值、蛋白酶K、氯仿对该拮抗物质活性的影响,结果表明该拮抗物质在低温下比较稳定,在60℃以上的高温下,活性迅速降低;在酸性或碱性条件下不稳定;该拮抗物质分别加入蛋白酶K和氯仿作用后拮抗活性分别下降了60.68%、80.07%,因此,初步判断该拮抗物质为蛋白质。利用DEAE-52离子交换柱层析法分离纯化了该拮抗蛋白并进行了SDS-PAGE电泳,结果显示该拮抗蛋白的分子量为48 k Da;利用PPSQ-31A蛋白自动测序仪测定拮抗蛋白N-末端15个氨基酸序列为:His-Glu-Phe-Pro-Thr-Tyr-Lys-His-Met-Tyr-Gln-Val-Met-His-Leu。

关键词：小麦赤霉病菌枯草芽孢杆菌拮抗菌拮抗蛋白

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一个四氢叶酸依赖型的麦草畏脱甲基新机制

一个四氢叶酸依赖型的麦草畏脱甲基新机制

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第十八次全国环境微生物学学术研讨会

作者：姚利贾兴军陶青丁德荣于林鹭张俊杰谢香庭闫新洪青何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 大北农生物技术中心北京100193

生物技术的兴起带来了一个全新的农田杂草控制时代：以孟山都公司的草甘膦和抗草甘膦转基因作物(转cp4-EPSPS基因)组合为代表,两者配套使用可以在保证农作物安全前提下极有效地控制农田杂草.2013年全球种植了26.3亿亩转基因作物,其中抗...

生物技术的兴起带来了一个全新的农田杂草控制时代：以孟山都公司的草甘膦和抗草甘膦转基因作物(转cp4-EPSPS基因)组合为代表,两者配套使用可以在保证农作物安全前提下极有效地控制农田杂草.2013年全球种植了26.3亿亩转基因作物,其中抗除草剂性状占比超过80％,且绝大多数是抗草甘膦性状.但长期使用草甘膦带来一个严重问题：杂草产生抗性.全世界迄今已报道牛筋草、黑麦草、小飞蓬和豚草等多种重要杂草对草甘膦产生了抗药性,而且有愈演愈烈之势.麦草畏(Dicamba 3,6-二氯-2-甲氧基苯甲酸,又名百草敌)能防除200多种杂草,因广谱高效、低毒和杂草抗性产生慢,可以很好地弥补草甘膦的不足.美国生物技术巨头孟山都利用麦草畏脱甲基酶基因DMO成功构建抗麦草畏和草甘膦复合性状的转基因大豆(商标为Roundup Ready 2 XtendTM)和抗麦草畏、草甘膦和草铵膦的棉花(Bollgard Ⅱ(R)XtendFlexTM),已经通过相关安全性评估,计划2015年进入商业化应用.

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乙草胺降解菌Novosphingobium ***-9的分离及N-脱烷氧乙基酶基因的克隆

乙草胺降解菌Novosphingobium ***-9的分离及N-脱烷氧乙基酶基因...

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第十八次全国环境微生物学学术研讨会

作者：陈青庄文倪海燕姚利王红妹何健李顺鹏枣庄学院生命科学学院山东枣庄271600 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 枣庄学院城市与建筑工程学院山东枣庄271600 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 枣庄学院生命科学学院山东枣庄271600

[目的]从生产除草剂乙草胺的工厂活性污泥中筛选新的乙草胺降解菌,了解降解基因及降解特性.[方法]以乙草胺作为唯一碳源碳源从生产除草剂乙草胺的工厂活性污泥中富集筛选出乙草胺降解菌.采用16S rRNA基因序列同源性分析、生理生化指标... 详细信息

[目的]从生产除草剂乙草胺的工厂活性污泥中筛选新的乙草胺降解菌,了解降解基因及降解特性.[方法]以乙草胺作为唯一碳源碳源从生产除草剂乙草胺的工厂活性污泥中富集筛选出乙草胺降解菌.采用16S rRNA基因序列同源性分析、生理生化指标测定及碳源利用实验等多种方法对该菌株进行鉴定,并根据已报道乙草胺脱N-烷基酶基因设计引物进行扩增.[结果]获得一株能够高效降解乙草胺的菌株DC-9,经过16S rRNA系统发育分析表明它属于新鞘氨醇杆菌属(Novosphingobium),与Novosphingobium chloroacetimidivorans BUT-14T相似性达98.13％;接触酶阴性,氧化酶阳性.菌株可以利用多种糖和有机酸的碳源生长.从该菌株中扩增获得一条N烷基酶基因片段,在NCBI上Blastn分析表明均与菌株Sphingomonas ***-6乙草胺N-烷基酶基因(Genbank登录号：KJ461679)的同源性为100％.[结论]菌株Novosphingobium ***-9可能是新鞘酯属内新种,在环境中乙草胺的污染修复中将会有一定的应用潜力.

关键词：乙草胺新鞘酯属 N-脱烷氧乙基酶基因生物修复

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Delftia sp.T3-6菌株及其粗酶液对2',6'-甲乙基-2-氯乙酰苯胺的降解

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环境科学学报 2014年第6期34卷 1396-1402页

作者：侯颖王飞李静泉董维亮崔中利南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室南京210095 河南科技大学食品与生物工程学院洛阳471003 江西农业大学生物科学与工程学院南昌330045

研究了Delftia sp.T3-6菌株对2’,6’-甲乙基-2-氯乙酰苯胺(CMEPA)的降解特性,以及该菌株胞内酶对CMEPA的酶促特性.结果表明,菌株T3-6对CMEPA有很好的降解性能.反应12 h内,随着CMEPA浓度的增加,反应速度加快;当CMEPA浓度达到500 mg·... 详细信息

研究了Delftia sp.T3-6菌株对2’,6’-甲乙基-2-氯乙酰苯胺(CMEPA)的降解特性,以及该菌株胞内酶对CMEPA的酶促特性.结果表明,菌株T3-6对CMEPA有很好的降解性能.反应12 h内,随着CMEPA浓度的增加,反应速度加快;当CMEPA浓度达到500 mg·L-1时,菌体的降解活性受到一定程度的抑制;在菌体接种量为0.5%~5%的范围内,接种量越大,CMEPA的降解转化速率越快.菌株T3-6降解CMEPA的最适温度为30℃,且其在pH 7~10的范围内对500 mg·L-1CMEPA的降解率均可达50%以上.T3-6菌株对CMEPA降解起催化作用的活性酶为胞内酶,该酶的最适反应温度和pH分别为25℃和8.0;该酶的温度稳定性较差,需在20℃以下贮存;但其在4℃下,pH 6~9的缓冲液中均可保持很好的稳定性.

关键词：乙草胺 2’,6’-甲乙基-2-氯乙酰苯胺代尔伏特菌降解特性

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1株饲用木聚糖酶产生菌的分离、鉴定、发酵、酶学性质及应用

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江苏农业科学 2014年第10期42卷 196-200页

作者：郄卫那张兰英何健贺芹南京农业大学生命科学学院/农业部农业环境微生物工程重点开放实验室江苏南京210095 江西省南康市第一小学江西南康341400

以木聚糖为唯一碳源,从长期堆放枯枝败叶的土壤中筛选能够高效降解木聚糖的菌株,并对该菌的产酶条件和酶学性质进行研究。分离得到1株酶活性较高且产酶相对稳定的菌株,鉴定为尖孢镰刀菌,命名为Fusarium oxysporum MJ23。研究表明,木聚... 详细信息

以木聚糖为唯一碳源,从长期堆放枯枝败叶的土壤中筛选能够高效降解木聚糖的菌株,并对该菌的产酶条件和酶学性质进行研究。分离得到1株酶活性较高且产酶相对稳定的菌株,鉴定为尖孢镰刀菌,命名为Fusarium oxysporum MJ23。研究表明,木聚糖、酵母粉是该菌的最适培养底物,在最适培养条件下,该菌株所产木聚糖酶活力可达186 U/mL;木聚糖酶的最适作用温度、pH值分别为55℃、6,55℃保温3 h,酶活力仍可维持90%以上;Ca2+、Fe2+、Mn2+、Tween 80和聚乙二醇对木聚糖酶活力有较强促进作用,Cu2+、Zn2+、EDTA、尿素和SDS则会抑制酶活,其中SDS的抑制作用最强。模拟动物体内对饲料中半纤维素组分的消化,木聚糖酶的添加可使猪饲料中木糖生成量提高28%,鸡饲料中木糖生成量提高16%,表明该菌株所产木聚糖酶具有用作饲料添加剂的可能性。

关键词：木聚糖酶酶学性质产酶条件饲料尖孢镰刀菌

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微生物产木聚糖酶研究进展

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江苏农业科学 2014年第7期42卷 387-391页

木聚糖酶是生物技术领域的研究热点。介绍了木聚糖酶的分类、作用机理、高产菌株的种类及获得、工业应用等,以期为指导木聚糖酶工业化生产与应用建立基础。

关键词：木聚糖酶功能分类作用机理高产菌株工业化应用

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Rhodococcus sp.T3-1菌株降解乙草胺的特性

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中国环境科学 2013年第10期33卷 1785-1790页

作者：侯颖王飞董维亮崔中利河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003 南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室江苏南京210095 江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045

以乙草胺为唯一碳源，通过摇瓶培养研究了Rhodococcus sp.T3—1对乙草胺的降解特性．结果表明，菌株T3—1降解乙草胺的最适温度为37℃，且其在pH值6～10的范围内对100mg／L乙草胺的降解率均在96％曲7％之间．该菌株在接种量为5％条件下... 详细信息

以乙草胺为唯一碳源，通过摇瓶培养研究了Rhodococcus sp.T3—1对乙草胺的降解特性．结果表明，菌株T3—1降解乙草胺的最适温度为37℃，且其在pH值6～10的范围内对100mg／L乙草胺的降解率均在96％曲7％之间．该菌株在接种量为5％条件下，14h内可将200mg／L的乙草胺降解95.5％：乙草胺的降解速率与乙草胺初始浓度呈负相关，与菌株T3—1的初始接种量呈正相关．菌株T3-1还可以降解丁草胺，但不能降解丙草胺、异丙草胺和毗草胺．

关键词：乙草胺红球菌属降解特性

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