检索结果-内蒙古大学图书馆

乙草胺降解菌Sphingomonas ***-6的分离鉴定及其代谢途径的初步研究

中国农业科技导报 2013年第5期15卷 67-74页

作者：陈青姚利王成红邓诗凯褚翠伟何健南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

从生产乙草胺的农药厂排污口污泥中分离到一株乙草胺降解菌,命名为DC-6。根据形态特征、生理生化特性以及16S rDNA系统发育分析,初步鉴定其为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)。该菌能够降解甲草胺、乙草胺和丁草胺,而对于异丙甲草胺... 详细信息

从生产乙草胺的农药厂排污口污泥中分离到一株乙草胺降解菌,命名为DC-6。根据形态特征、生理生化特性以及16S rDNA系统发育分析,初步鉴定其为鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)。该菌能够降解甲草胺、乙草胺和丁草胺,而对于异丙甲草胺、丙草胺和异丙草胺却没有任何降解效果,48 h对丁草胺、乙草胺和甲草胺的降解率分别为76.7%、93.6%和98.6%,对甲草胺的降解效率最高,而对丁草胺的降解效率最低,表明侧链烷基长短影响着该类除草剂的降解速率,随着侧链基团碳原子的增加以及支链的增多降解效率呈下降的趋势。通过气相色谱-质谱鉴定了该菌降解乙草胺的代谢产物并分析了乙草胺的代谢途径,发现乙草胺首先N-脱烷基形成2-氯-N-(2-乙基-6-甲基苯基)乙酰胺(CMEPA),然后水解生成苯胺衍生物2-乙基-6-甲基苯胺(MEA),MEA能够进一步完全降解。但苯胺类化合物降解途径中的关键酶苯胺双加氧酶没有参与MEA降解代谢,表明菌株DC-6对MEA的降解不同于已报道苯胺降解途径。

关键词：乙草胺鞘胺醇单胞菌属 N-脱烷基代谢途径

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Hyphomicrobium ***-1菌株修复甲胺磷乙酰甲胺磷和水胺硫磷污染土壤的实验研究

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农业环境科学学报 2013年第1期32卷 81-87页

作者：王莉凌琪伍昌年李顺鹏蒋建东王敏安徽建筑工业学院环境与能源工程系合肥230022 南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095

在实验室条件下,评估了菌株Hyphomicrobium ***-1对甲胺磷、乙酰甲胺磷和水胺硫磷污染土壤的修复能力。革兰氏阴性菌MAP-1在土壤中能很好的定殖,以1×107CFU·g-1soil的浓度接种于土壤,15d后菌株浓度仅下降了1个数量级。土壤非... 详细信息

在实验室条件下,评估了菌株Hyphomicrobium ***-1对甲胺磷、乙酰甲胺磷和水胺硫磷污染土壤的修复能力。革兰氏阴性菌MAP-1在土壤中能很好的定殖,以1×107CFU·g-1soil的浓度接种于土壤,15d后菌株浓度仅下降了1个数量级。土壤非灭菌状态下,30℃pH6.8,接种量为1×107CFU·g-1soil时,9d内可分别将土壤100mg·kg-1甲胺磷、100mg·kg-1乙酰甲胺磷完全降解,13d内将50mg·kg-1水胺硫磷完全降解。添加甲醇和加大接种量能促进土壤中三种有机磷农药降解,土壤是否处于淹水状态对其降解影响不大。在20～30℃之间,土壤中三种农药有比较好的去除效果。土壤投加菌株MAP-1,第10d可使100mg·kg-1甲胺磷和100mg·kg-1乙酰甲胺磷抑制的土壤脱氢酶、蔗糖酶和脲酶活性恢复至施农药前水平,对50mg·kg-1水胺硫磷抑制的这三种土壤酶活性也有较大的恢复作用。可见将菌株MAP-1应用于降低甲胺磷、乙酰甲胺磷和水胺硫磷对土壤的潜在风险是可接受的。

关键词： Hyphomicrobium sp MAP-1 甲胺磷乙酰甲胺磷水胺硫磷土壤生物修复

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精噁唑禾草灵降解菌株Acinetobacter sp.T-1的分离鉴定及降解特性研究

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农业环境科学学报 2013年第5期32卷 979-985页

作者：董维亮侯颖陶健曹慧崔中利南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物重点开放实验室南京210095 河南科技大学食品与生物工程学院河南洛阳471003

从长期受精噁唑禾草灵污染的土壤中分离筛选得到了精噁唑禾草灵降解菌T-1,根据生理生化特性和16S rRNA同源性序列分析,将其鉴定为不动杆菌属（Acinetobacter sp.）。菌株T-1能够以精噁唑禾草灵为唯一碳源进行生长,在5 d内对50 mg.L-1精... 详细信息

从长期受精噁唑禾草灵污染的土壤中分离筛选得到了精噁唑禾草灵降解菌T-1,根据生理生化特性和16S rRNA同源性序列分析,将其鉴定为不动杆菌属（Acinetobacter sp.）。菌株T-1能够以精噁唑禾草灵为唯一碳源进行生长,在5 d内对50 mg.L-1精噁唑禾草灵的降解率可达95%以上。T-1降解精噁唑禾草灵的最适温度为37℃,而其在pH5~11的范围内对50 mg.L-1精噁唑禾草灵的降解率均可以达到85%以上。经LC-MS鉴定Acinetobacter sp.T-1降解精噁唑禾草灵的主要产物为精噁唑禾草灵酸,表明菌株T-1对精噁唑禾草灵的降解是通过断裂其酯键形成精噁唑禾草灵酸和乙醇实现的。

关键词：精噁唑禾草灵降解 Acinetobactersp

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茉莉酸甲酯对灵芝三萜生物合成的影响及其灵芝应答基因的差异表达

茉莉酸甲酯对灵芝三萜生物合成的影响及其灵芝应答基因的差异表达

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中国菌物学会第四届全国药用真菌学术研讨会

作者：任昂李梦娇师亮穆大帅姜爱良韩琴赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,灵芝三萜含量的多少是衡量灵芝质量高低的重要指标.经研究发现茉莉酸甲酯能显著提高灵芝三萜含量并上调灵芝三萜生物合成途径中的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶、法尼酯焦磷酸合成酶和羊毛甾醇合... 详细信息

灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,灵芝三萜含量的多少是衡量灵芝质量高低的重要指标.经研究发现茉莉酸甲酯能显著提高灵芝三萜含量并上调灵芝三萜生物合成途径中的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶、法尼酯焦磷酸合成酶和羊毛甾醇合成酶等基因的表达.通过在灵芝中建立的cDNA-AFLP体系,采用64对引物组合对灵芝的转录组进行分析.64对引物组合共产生3 910个TDFs.茉莉酸甲酯不同诱导条件下约有919个TDFs的表达谱发生了变化,占表达谱的23.5％,其中上调表达的有703个,下调表达的有216个.选择458个TDFs进行回收、TA克隆、测序后,获得390个高质量的TDFs片段.通过蛋白数据库同源性检索,并对蛋白功能进行GO分类,结果表明：390个高质量的TDFs中,BlastX比对后没有显著匹配的序列占77.1％.在有匹配蛋白的序列中,与碳代谢及能量相关的基因为最大一组,占35.2％,转录调控类及信号传导类基因分别占14.3％和11.0％.通过荧光定量PCR技术考察了茉莉酸甲酯对20个基因转录水平的影响,与cDNA-AFLP分析的结果相一致.并通过灵芝基因过量表达技术和基因沉默技术对筛选到的相关基因进行沉默和过量表达,研究筛选到的基因在灵芝三萜生物合成与调控中的作用,获得大量参与灵芝三萜生物合成与调控的候选基因,进一步阐明了茉莉酸甲酯诱导下灵芝基因表达的变化图.

关键词：灵芝茉莉酸甲酯均匀设计 cDNA-AFLP分析过量表达基因沉默

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灵芝中基于内源ura3基因的多基因沉默系统的建立及其应用

灵芝中基于内源ura3基因的多基因沉默系统的建立及其应用

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中国菌物学会第四届全国药用真菌学术研讨会

作者：穆大帅师亮任昂李梦娇吴凤礼姜爱良赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

灵芝是一种重要的药用真菌，然而由于近几年缺乏有效的反向遗传体系研究，灵芝的分子遗传相关研究进展相对缓慢.该研究建立了一种更加简便快捷的灵芝电穿孔转基因方法，利用灵芝内源乳清酸核苷-5'-单磷酸脱羧酶基因(ura3)作为反向... 详细信息

灵芝是一种重要的药用真菌，然而由于近几年缺乏有效的反向遗传体系研究，灵芝的分子遗传相关研究进展相对缓慢.该研究建立了一种更加简便快捷的灵芝电穿孔转基因方法，利用灵芝内源乳清酸核苷-5'-单磷酸脱羧酶基因(ura3)作为反向筛选标记，构建4种沉默载体(颈环结构沉默载体，正向沉默载体，反向沉默载体以及正反双向启动子沉默载体)，并基于此转基因方法实现了对灵芝内源基因的沉默.通过系统比对以上4种沉默方法，发现4种沉默方法都不同程度地下调了ura3基因的表达，其中双向启动子沉默不仅载体构建方便并且能够获得最高的沉默效率(达到81.9％).利用这种双向启动子沉默载体以及ura3的反向筛选特性，建立了灵芝的共沉默体系，发现共沉默下基因转录的下调有一定的相关性，提高了基因沉默的筛选效率.该反向遗传体系的建立有助于深入研究灵芝中单基因或多基因的功能，推动灵芝等大型担子菌的分子遗传研究进展.

关键词：灵芝基因沉默共沉默电击转化

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灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因的克隆及其表达特性

灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因的克隆及其表达特性

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中国菌物学会第四届全国药用真菌学术研讨会

作者：任昂欧阳翔师亮姜爱良穆大帅李梦娇韩琴赵明文南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京 210095

灵芝三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,具有多种重要的生理功能,灵芝中三萜含量的高低已成为衡量灵芝质量高低的重要指标.灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因(Ahydroxymethylglutaryl-CoA synthase,GIHMGS)作为甲羟戊酸途径中的第一个催化... 详细信息

灵芝三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,具有多种重要的生理功能,灵芝中三萜含量的高低已成为衡量灵芝质量高低的重要指标.灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因(Ahydroxymethylglutaryl-CoA synthase,GIHMGS)作为甲羟戊酸途径中的第一个催化酶,催化乙酰CoA与乙酰乙酰CoA生成羟甲基戊二酰CoA,对于灵芝三萜的合成起着十分重要的作用.分别以灵芝总基因组DNA和反转录的原基cDNA为模板,扩增得到G1HMGS基因的全长DNA和cDNA序列,该基因DNA全长1870 bp,其中ORF为1 413 bp,编码471个氨基酸,推测的分子量为51.14kD.通过比对获得的DNA和cDNA序列,发现GIHMGS由5个外显子和4个内含子构成.与NCBI数据库中HMGS的蛋白序列比对发现,GIHMGS与解脂耶罗威亚酵母的HMGS表现出最高的同源性(51％).进化树分析也表明GIHMGS与真菌亲缘关系最近,这与灵芝的物种分类相吻合.通过酿酒酵母HMGS缺陷的菌株证实所得G1HMGS能够使HMGS缺陷的表型得到互补,证实GIHMGS的功能.利用SEFA-PCR技术扩增GIHMGS基因上游启动子序列,该序列长约1561 bp,用Softberry等软件对启动子序列进行分析,发现G1HMGS基因启动子中包含有明显的TATA-box和CAAT-box,并发现了多个与甾醇、激素和环境压力等调节相关的顺式作用元件.进一步研究发现,茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸能够提高GIHMGS基因的转录水平.在研究不同发育阶段和不同碳源对G1HMGS基因的影响时,发现GIHMGS基因的表达水平分别在第16天和以麦芽糖为碳源时达到最大.通过过量表达GIHMGS基因能够显著提高灵芝三萜含量.

关键词：灵芝三萜 HMG-CoA合酶功能验证表达谱过量表达

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卤代芳烃类农药的微生物脱卤机制

卤代芳烃类农药的微生物脱卤机制

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2013年中国微生物学会学术年会

作者：蒋建东南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室 210095南京

卤代芳烃类农药中由于卤素这种强吸电子基团的取代,不仅增加了难降解性,而且提高了形成有毒中间产物的风险,因此,脱卤是这类化合物脱毒和降解的关键.

关键词：

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卤代芳烃类农药的微生物脱卤机制

卤代芳烃类农药的微生物脱卤机制

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第十六次全国环境微生物学学术研讨会

作者：蒋建东南京农业大学生命科学学院微生物学系农业部农业环境微生物工程重点开放实验室 210095南京

卤代芳烃农药包含除草剂、杀菌剂和杀虫剂，在农药中占有重要比例，由于广泛使用导致严重的环境污染问题。卤代芳烃类农药的脱卤是这类化合物脱毒和降解的关键。微生物编码的脱卤酶在卤代芳烃类化合物的脱毒、降解方面起着关键作用。本... 详细信息

卤代芳烃农药包含除草剂、杀菌剂和杀虫剂，在农药中占有重要比例，由于广泛使用导致严重的环境污染问题。卤代芳烃类农药的脱卤是这类化合物脱毒和降解的关键。微生物编码的脱卤酶在卤代芳烃类化合物的脱毒、降解方面起着关键作用。本文总结了脱氯酶基因的水平转移的生态学意义在于促进脱氯微生物多样性分化和微生物群落快速适应污染环境。脱氯酶基因的水平转移能够使得整个微生物群落具有更大的脱氯潜力，这也为生物修复污染环境提供了一个新的策略。

关键词：卤代芳烃类农药微生物脱卤机制脱氯酶基因生物修复

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降解菌DDS-1产3-AC-DON氧化酶的酶学特性

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中国农业科学 2013年第11期46卷 2240-2248页

作者：徐剑宏潘艳梅胡晓丹祭芳殷宪超史建荣江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地/农业部农产品质量安全控制技术与标准重点实验室/江苏省转基因安全评价公共服务中心南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室

【目的】研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)降解菌Devosia ***-1产生的3-AC-DON氧化酶的酶学特性,掌握DDS-1降解3-AC-DON到3-酮基-DON特性,为该酶的开发应用奠定理论基础。【方法】LG培养基培养DON毒素降解菌Devosia ***-1后,... 详细信息

【目的】研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)降解菌Devosia ***-1产生的3-AC-DON氧化酶的酶学特性,掌握DDS-1降解3-AC-DON到3-酮基-DON特性,为该酶的开发应用奠定理论基础。【方法】LG培养基培养DON毒素降解菌Devosia ***-1后,用PBS离心洗涤菌体后采用超声波破碎,用硫酸铵沉淀菌体破碎液获得粗酶液;然后在不同的酶反应体系中检测3-AC-DON氧化酶的酶活性。【结果】降解菌DDS-1产生3-AC-DON氧化酶的最适条件为:pH 7.0、25℃、培养36 h;该酶酶反应的最适温度为35℃,最适反应pH为7.0;该酶在20—40℃,pH 5.0—9.0的范围内能保持80%以上的酶活性;大多数金属离子在浓度为0.2—2 mmol.L-1对3-AC-DON氧化酶有促进作用;乙二胺四乙酸(EDTA)对该酶活性有抑制作用;酶的定域试验结果显示该酶为胞内酶;DDS-1产生的粗酶液能很好地降解小麦中的DON、3-AC-DON毒素。【结论】Devosia ***-1产生的3-AC-DON氧化酶的酶学特性研究表明,DDS-1产生的3-AC-DON氧化酶具有较好的温度和酸碱稳定性,该酶反应需要金属离子作为辅因子。

关键词： 3-AC-DON 降解徳沃斯氏菌酶活性

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假单胞菌菌株CTN-3对百菌清污染土壤的生物修复

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应用生态学报 2012年第3期23卷 807-811页

作者：王光利陈宏宏毕萌李顺鹏南京农业大学生命科学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室南京210095 淮北师范大学生命科学学院资源植物学安徽省重点实验室安徽淮北235000

百菌清被美国环境保护署列为优先控制污染物,利用微生物的降解作用修复被污染的土壤、清除环境中的污染物等具有重要的现实意义.假单胞菌(Pseudomonas sp.)菌株CTN-3是一株从污染土壤中分离得到的百菌清降解菌,考察了其在实验室条件下... 详细信息

百菌清被美国环境保护署列为优先控制污染物,利用微生物的降解作用修复被污染的土壤、清除环境中的污染物等具有重要的现实意义.假单胞菌(Pseudomonas sp.)菌株CTN-3是一株从污染土壤中分离得到的百菌清降解菌,考察了其在实验室条件下对百菌清污染土壤的生物修复能力及其影响因素.结果表明:降解菌株在灭菌土壤中的降解效果略好于未灭菌土壤;在外源添加降解菌106CFU.g-1、温度15～30℃和pH 5.8～8.3条件下,该菌株能有效降解土壤中10～200 ***-1的百菌清.菌株CTN-3在百菌清污染土壤的生物修复中具有良好的应用前景.

关键词：百菌清假单胞菌生物修复影响因素

来源：评论

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