检索结果-内蒙古大学图书馆

四川大学学报（医学版） 2023年第5期54卷 947-953页

作者：李新华闫爱丽常晋瑞李汾朱娟霞西安医学院药理学与毒理学教研室西安710021 西安医学院病理学教研室西安710021 西安医学院生理学教研室西安710021

目的本研究旨在探讨橙皮素(hesperetin,Hes)能否通过调控沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)/核转录因子E2相关因子2(nuclear transcription factor E2-related factor 2,NRF2)信号减轻氧化应激改善阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的H9c2心肌细胞毒性。方法采用DOX诱导的H9c2心肌细胞毒性模型,随机分为4组:对照组(Control)、DOX处理组(DOX)、Hes加DOX处理组(DOX+Hes)以及Hes加SIRT1抑制剂EX527联合DOX处理组(DOX+Hes+EX527)。光镜下观察细胞形态,CCK-8检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DCFH-DA染色观察各组ROS水平,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和SIRT1活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测裂解的caspase-3(cleaved caspase-3)、细胞色素c(cytochrome c)、SIRT1、Ac-FOXO1、NRF2和血红素加氧酶1(heme oxygenase1,HO-1)的表达。结果和Control组相比,DOX组细胞形态肿胀,密度减小,细胞活力降低,培养基中LDH活性增加(P<0.01);细胞凋亡增多,cleaved caspase-3和cytochrome c表达增加(P<0.01);CAT和SOD活性降低,MDA含量和ROS水平增加(P<0.01);SIRT1、NRF2和HO-1表达以及SIRT1活性降低,Ac-FOXO1表达增加(P<0.01);与DOX组相比,DOX+Hes组细胞形态改善,密度和细胞活力增加,培养基中LDH活性降低(P<0.01);细胞凋亡减少,cleaved caspase-3和cytochrome c表达降低(P<0.01);CAT和SOD活性升高,MDA含量和ROS水平降低(P<0.01);SIRT1、NRF2和HO-1表达以及SIRT1活性增加,Ac-FOXO1表达降低(P<0.01);而与DOX+Hes组相比,EX527阻断Hes对DOX诱导的H9c2细胞损伤、氧化应激和SIRT1/NRF2信号的作用。结论Hes可以通过调控SIRT1/NRF2信号抑制氧化应激和细胞凋亡减轻DOX诱导的H9c2心肌细胞毒性。

关键词：橙皮素氧化应激 SIRT1/NRF2 H9c2细胞阿霉素

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吲哚菁绿对人晶状体上皮细胞生物学行为和转分化的抑制作用及其机制

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中华实验眼科杂志 2023年第12期41卷 1160-1168页

作者：刘亚军赵英迪张文文张司何自芳陈菲菲解正高南京大学医学院附属鼓楼医院眼科南京210009 皖南医学院解剖教研室芜湖241002

目的研究吲哚菁绿(ICG)对人晶状体上皮细胞(HLECs)生物学行为和转分化的抑制作用及其机制。方法将HLECs细胞系分为空白对照组、5%葡萄糖溶液(GS)组和0.5%、1.5%、2.5%ICG组,分别用平衡盐溶液、5%GS以及0.5%、1.5%和2.5%的ICG溶液处理3 m... 详细信息

目的研究吲哚菁绿(ICG)对人晶状体上皮细胞(HLECs)生物学行为和转分化的抑制作用及其机制。方法将HLECs细胞系分为空白对照组、5%葡萄糖溶液(GS)组和0.5%、1.5%、2.5%ICG组,分别用平衡盐溶液、5%GS以及0.5%、1.5%和2.5%的ICG溶液处理3 min,然后在新鲜培养基中孵育24 h。采用流式细胞术检测HLECs凋亡水平;采用Western blot法检测HLECs凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和caspase-9表达水平;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)法检测HLECs增生过程;采用细胞划痕实验检测HLECs迁移能力;采用Transwell法检测HLECs迁移和侵袭过程。采用Western blot法检测HLECs转分化相关蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、纤维连接蛋白(FN)和波形纤维蛋白(vimentin)表达水平。结果空白对照组、5%GS组、0.5%ICG组、1.5%ICG组和2.5%ICG组细胞凋亡率分别为(4.35±0.60)%、(4.63±0.19)%、(8.17±0.69)%、(13.90±0.33)%和(23.08±1.12)%,总体比较差异有统计学意义(F=412.74,P<0.05),其中0.5%ICG组、1.5%ICG组和2.5%ICG组细胞凋亡率明显高于空白对照组和5%GS组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。0.5%ICG组、1.5%ICG组、2.5%ICG组caspase-3、caspase-9和Bax蛋白相对表达量明显高于空白对照组和5%GS组,1.5%ICG组、2.5%ICG组Bcl-2蛋白相对表达量较空白对照组和5%GS组降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。0.5%ICG组、1.5%ICG组和2.5%ICG组EdU阳性细胞率明显低于空白对照组和5%GS组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。0.5%ICG组、1.5%ICG组、2.5%ICG组细胞生存率明显低于空白对照组和5%GS组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,0.5%ICG组、1.5%ICG组、2.5%ICG组细胞迁移率明显低于空白对照组和5%GS组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Transwell实验结果显示,0.5%ICG组、1.5%ICG组、2.5%ICG组细胞迁移数和侵袭细胞数明显少于空白对照组和5%GS组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。0.5%ICG组、1.5%ICG组和2.5%ICG组α-SMA、N-cadherin和FN蛋白相对表达量明显低于空白对照组和5%GS组,1.5%ICG组和2.5%ICG组vimentin蛋白相对表达量较空白对照组和5%GS组降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论ICG可促进HLECs凋亡,抑制其增生、迁移、侵袭和转分化,并呈浓度依赖性。

关键词：白内障囊膜混浊吲哚菁绿晶状体上皮细胞生物学行为转分化

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重型载货运营卡车司机的疲劳状况及影响因素分析

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环境与职业医学 2024年第7期41卷 789-795页

作者：张建江王少颖陈思萍刘建铃宁德师范学院医学院福建省毒物与药物毒理学重点实验室福建宁德352100 宁德师范学院医学院临床医学教研室福建宁德352100 韶关学院医学院广东韶关512005

[背景]疲劳驾驶是现代社会公路交通事故的重要诱因,重型载货运营卡车司机疲劳状况引起广泛关注。目前,我国对重型载货运营卡车司机的疲劳状况及其影响因素的研究比较薄弱。[目的]分析重型载货运营卡车司机的疲劳状况以及工作时间、失眠... 详细信息

[背景]疲劳驾驶是现代社会公路交通事故的重要诱因,重型载货运营卡车司机疲劳状况引起广泛关注。目前,我国对重型载货运营卡车司机的疲劳状况及其影响因素的研究比较薄弱。[目的]分析重型载货运营卡车司机的疲劳状况以及工作时间、失眠和职业倦怠等因素对其疲劳状况的影响。[方法]采用整群抽样的方法,于2023年7—8月选取新疆维吾尔自治区W市3个行政区的长途货运物流市场(站)的重型载货运营卡车司机为调查对象进行横断面研究。使用自行设计的问卷调查重型载货运营卡车司机的人口信息学特征和职业特征,并采用中文版《疲劳量表-14》、《阿森斯失眠量表》和《职业倦怠量表》对其疲劳、失眠和职业倦怠状况进行测量。采用Mann-Whitney U检验和Kruskal-Wallis H检验比较组间差异,Spearman相关系数分析各变量之间的相关性,以疲劳状况为应变量进行分层回归,研究各自变量对疲劳状况的影响。[结果]有效问卷311份,有效率88.86%(311/350)。调查对象的身体疲劳、脑力疲劳和疲劳总分的中位数和第25、75百分位数[M(P_(25),P_(75))]分别为3.00(2.00,4.00)、2.00(1.00,3.00)和5.00(4.00,6.00)分。分组比较结果显示,除是否吸烟外,不同年龄、婚姻状况、子女数量、文化程度、从事货运时间、日均工作时间和平均月收入组疲劳总分差异均有统计学意义(P<0.05);无睡眠障碍、可疑失眠和失眠组疲劳总分的差异有统计学意义(P<0.001);无、中度和重度职业倦怠组疲劳总分的差异亦有统计学意义(P<0.001)。失眠状况得分与身体疲劳(r_(s)=0.507)、脑力疲劳(r_(s)=0.547)和疲劳总分(r_(s)=0.618)间均呈正相关(P<0.001)。分层回归分析结果提示,子女数量增加、日均工作时间延长、失眠问题和个人成就感降低维度得分的增加与重型载货运营卡车司机疲劳状况呈正向关联(P<0.05),所建立的重型载货运营卡车司机疲劳状况的多元回归方程为:疲劳总分=7.579+0.581×子女数量+0.916×日均工作时间+0.434×失眠状况得分+0.754×个人成就感降低维度得分。[结论]重型载货运营卡车司机的疲劳状况不容乐观,子女数量增加、日均工作时间延长、失眠症状严重和个人成就感降低维度得分增加可能对其疲劳状况具有负面影响。

关键词：重型载货运营卡车司机疲劳失眠职业倦怠

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PD-L1单抗加强紫杉醇联合香菇多糖体外抗人乳腺癌MDA-MB-231作用

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西安交通大学学报(医学版) 2025年第1期46卷 94-100页

作者：李汾平娜娜曾菊绒胥晓丽刘鹏西安医学院药理学和毒理学教研室陕西西安710021 陕西省血液中心陕西西安710061

目的探讨程序性细胞死亡-配体1(PD-L1)单抗、紫杉醇(PTX)联合香菇多糖(LNT)体外对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的作用。方法将MDA-MB-231、人外周血单个核细胞(PBMC)和MDA-MB-231+PBMC共培养,随机分为对照组、PTX组、LNT组、MPDL3280A(PD... 详细信息

目的探讨程序性细胞死亡-配体1(PD-L1)单抗、紫杉醇(PTX)联合香菇多糖(LNT)体外对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的作用。方法将MDA-MB-231、人外周血单个核细胞(PBMC)和MDA-MB-231+PBMC共培养,随机分为对照组、PTX组、LNT组、MPDL3280A(PD-L1单抗)组、PTX+LNT组和PTX+LNT+MPDL3280A组。采用CCK8检测细胞的活性;流式细胞术检测MHC-I和PD-L1的表达;ELISA试剂盒检测IFN-γ和TNF-α的含量。结果与对照组相比,PTX组、MPDL3280A组、PTX+LNT组及PTX+LNT+MPDL3280A组显著抑制MDA-MB-231的活性(P<0.01);LNT组和PTX+LNT+MPDL3280A组显著促进PBMC的免疫作用(P<0.05,P<0.01);PTX+LNT+MPDL3280A组显著抑制MDA-MB-231+PBMC共培养MDA-MB-231的活性(0.56±0.16 vs. 0.39±0.13,P<0.05);LNT显著促进MDA-MB-231上PD-L1的表达和PBMC分泌IFN-γ(P<0.05)。结论 PD-L1单抗通过阻断PD-L1与PD-1之间的作用,提高免疫,促进PTX联合LNT的体外抗三阴性乳腺癌作用。

关键词：程序性细胞死亡-配体1(PD-L1)单抗紫杉醇(PTX) 香菇多糖(LNT) 抗人乳腺癌MDA-MB-231

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猪小肠内容物中苯甲酸和马尿酸高效液相色谱检测方法的建立

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饲料研究 2024年第14期47卷 128-133页

作者：张寒蒋永嘉刘为王志强肖霞扬州大学兽医学院兽医药理毒理教研室江苏扬州225009

试验为建立猪小肠内容物中苯甲酸及其代谢物马尿酸的高效液相色谱(HPLC)测定方法,采用乙酸乙酯为提取剂,亚铁氰化钾-乙酸锌为蛋白沉淀剂,提取样品中的苯甲酸,流动相为甲醇∶0.02%磷酸水;水、亚铁氰化钾-乙酸锌共同提取样品中的马尿酸,... 详细信息

试验为建立猪小肠内容物中苯甲酸及其代谢物马尿酸的高效液相色谱(HPLC)测定方法,采用乙酸乙酯为提取剂,亚铁氰化钾-乙酸锌为蛋白沉淀剂,提取样品中的苯甲酸,流动相为甲醇∶0.02%磷酸水;水、亚铁氰化钾-乙酸锌共同提取样品中的马尿酸,流动相为甲醇∶20 mmol/L乙酸铵溶液,紫外检测波长230 nm。结果显示:在猪小肠内容物中苯甲酸添加浓度为0.10~10.00μg/g内线性关系良好(R^(2)=0.9994);检测限为0.05μg/g,定量限为0.10μg/g;添加浓度在0.10、0.50、1.00、5.00、10.00μg/g时,回收率为(101.62±4.49)%,批内和批间变异系数分别低于4.80%和9.96%。猪小肠内容物中马尿酸添加浓度在0.30~10.00μg/g内线性关系良好(R^(2)=1.0000);检测限和定量限分别为0.10μg/g和0.30μg/g;马尿酸添加浓度在0.50、1.00、5.00、20.00μg/g时,回收率为(90.3±4.00)%,批内和批间变异系数分别低于5.93%和5.26%。研究表明,此方法苯甲酸及马尿酸预处理方法简单省时,无须固相萃取及使用有毒有害溶剂,节约成本,为猪小肠内容物中苯甲酸及马尿酸的检测提供参考。

关键词：猪苯甲酸马尿酸 HPLC 小肠内容物

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3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛对小鼠及鹌鹑高尿酸血症模型的降尿酸作用比较

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西安交通大学学报（医学版） 2022年第6期43卷 827-832页

作者：李汾张光伟李新华曾菊绒胥晓丽弥曼西安医学院药理学和毒理学教研室陕西西安710021

目的观察3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛(3,4-dihydroxy-5-nitrobenzaldehyde, DHNB)对小鼠及鹌鹑高尿酸血症模型的降尿酸作用,完善高尿酸血症模型的药效学验证。方法氧嗪酸钾(potassium oxonate, PO)300 mg/kg腹腔注射制备小鼠高尿酸血症... 详细信息

目的观察3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛(3,4-dihydroxy-5-nitrobenzaldehyde, DHNB)对小鼠及鹌鹑高尿酸血症模型的降尿酸作用,完善高尿酸血症模型的药效学验证。方法氧嗪酸钾(potassium oxonate, PO)300 mg/kg腹腔注射制备小鼠高尿酸血症动物模型;30 g/(kg·d)的酵母粉混合饲料(酵母粉∶饲料为1∶4)制备鹌鹑高尿酸血症动物模型。于小鼠高尿酸血症模型造模前1 h腹腔注射DHNB 100 mg/kg;连续2 d灌胃DHNB 100 mg/kg处理鹌鹑高尿酸血症模型。另设对照组。生化试剂盒检测各组小鼠及鹌鹑血清尿酸(serum uric acid, SUA)、谷草转氨酶(aspartate aminotransaminase, AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransaminase, ALT)、肌酐(creatinine, Cr)和尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)。取小鼠及鹌鹑的心、肺、肝和肾组织进行HE染色。结果小鼠及鹌鹑高尿酸血症模型组SUA均高于对照组[(277.37±94.89)μmol/L vs.(176.49±44.83)μmol/L,P<0.05;(313.58±191.87)μmol/L vs.(167.26±66.56)μmol/L,P<0.05],提示造模成功。DHNB不能降低高尿酸血症小鼠模型SUA[(277.37±94.89)μmol/L vs.(238.72±63.43)μmol/L,P>0.05],但明显降低高尿酸血症鹌鹑模型SUA[(313.58±191.87)μmol/L vs.(160.44±49.90)μmol/L,P<0.05]。DHNB 100 mg/kg给药对小鼠和鹌鹑肝肾功无影响,且对小鼠和鹌鹑心、肺、肝和肾组织无毒性。结论 DHNB对高尿酸血症鹌鹑模型具有降尿酸作用,且单次给予降尿酸剂量对小鼠及鹌鹑脏器无明显毒性。鹌鹑高尿酸血症模型比小鼠高尿酸血症模型更适用于DHNB降尿酸药效的验证。

关键词： 3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛(DHNB) 小鼠鹌鹑高尿酸血症模型尿酸

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人支气管上皮样细胞中苯并[a]芘代谢物-DNA加合物图谱:基于染色质免疫共沉淀测序技术

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环境与职业医学 2024年第3期41卷 323-329页

作者：冀婷玉曹彬吕懿佟晓敏孙宏宇郑金平山西医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室山西太原030001 长治医学院公共卫生与预防医学系山西长治046000

[背景]苯并[a]芘(BaP)的活性代谢产物7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘(BPDE)可与DNA加合,但BPDE-DNA加合物图谱尚不明确。[目的]采用染色质免疫共沉淀测序技术(ChIP-Seq),在全基因组水平上鉴定BPDE加合位点分布及加合基因,为深入研究BaP的... 详细信息

[背景]苯并[a]芘(BaP)的活性代谢产物7,8-二羟-9,10-环氧苯并[a]芘(BPDE)可与DNA加合,但BPDE-DNA加合物图谱尚不明确。[目的]采用染色质免疫共沉淀测序技术(ChIP-Seq),在全基因组水平上鉴定BPDE加合位点分布及加合基因,为深入研究BaP的毒作用机制提供依据。[方法]人支气管上皮样细胞16HBE培养至第四代达对数生长期。收获细胞并加入染色质免疫共沉淀裂解缓冲液,将裂解产物等分为实验组和对照组,实验组添加终浓度20μmol·L^(–1)的BPDE溶液,对照组添加相同体积的二甲基亚砜溶液,在37℃环境下孵育24 h。超声获得100~500 bp的染色质小片段。使用BPDE特异性抗体(anti-BPDE 8E11)富集与BPDE加合的DNA片段,高通量测序检测BPDE加合位点,使用MEME和DREME软件对前1000个峰序列进行模体分析,注释BPDE在全基因组水平的加合靶基因,并通过生物信息学技术对BPDE加合靶基因进行基因本体论(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。[结果]高通量测序共检测出842个BPDE结合位点,在各染色体上均有分布。BPDE可以与基因编码区和非编码区共价结合,73.9%的结合位点分布在基因间区,19.6%分布在内含子区,上游2千碱基区域、外显子区、下游2千碱基区域及5′非翻译区也有少量分布。对前1000个峰序列进行分析,寻找到4条可靠的模体,发现富含鸟嘌呤(G)和腺嘌呤(A)的位点易于结合。对结合位点进行富集,共鉴定出199个BPDE加合靶基因,大多分布在1号、5号、7号、12号、17号和X染色体上。GO分析显示,靶基因主要富集于核酸和蛋白质结合,参与调节催化活性、转运活性、翻译延伸因子活性,在细胞分裂、分化、运动、物质运输和信息传递方面发挥重要作用。KEGG分析显示靶基因主要富集于心血管疾病、癌症、免疫炎症反应等相关通路。[结论]利用ChIP-Seq在全基因组水平上共鉴定出199个BPDE加合靶基因,主要影响细胞分裂、分化、运动、物质运输和信息传递等生物学功能,与心血管疾病、肿瘤及免疫炎症反应密切相关。

关键词： 7 8-二羟-9 10-环氧苯并[a]芘人支气管上皮样细胞染色质免疫共沉淀测序 DNA加合物生物信息学

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富马酸西他沙星注射液在中国志愿者体内的耐受性与药动学

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中国新药杂志 2023年第7期32卷 712-718页

作者：李相鸿辛玉霞邵静孙华周理想梁大虎贾元威沈杰谢海棠皖南医学院弋矶山医院药物临床试验机构皖南医学院临床药学教研室南京优科制药有限公司

目的:评价富马酸西他沙星注射液在中国健康志愿者体内的耐受性和药动学。方法:共入组40例志愿者，男女各20例，分别进行富马酸西他沙星注射液400和500 mg单次给药及300 mg（qd）和400 mg（qd）多次给药研究。试验期间观察药品的不良反... 详细信息

目的:评价富马酸西他沙星注射液在中国健康志愿者体内的耐受性和药动学。方法:共入组40例志愿者，男女各20例，分别进行富马酸西他沙星注射液400和500 mg单次给药及300 mg（qd）和400 mg（qd）多次给药研究。试验期间观察药品的不良反应，并监测生命体征、实验室检查等数据的变化，评估药物的耐受性和安全性。采用HPLC-MS/MS法测定西他沙星的血药浓度，计算其主要药动学参数并进行统计学分析。结果:试验期间未发生严重不良事件。多次给药后西他沙星主要药动学参数：300 mg（qd）组多次给药d 1时Cmax,AUC0-t,AUC0-∞分别为（2 913.00±436.63）μg·L-1,（18 368.93±4 141.28） h·μg·L-1及（19 662.17±4 820.31） h·μg·L-1,d 7时Cmax,AUC0-t,AUC0-∞分别为（3 080.00±695.11）μg·L-1,（22 625.89±5 729.43） h·μg·L-1,（22 990.68±5 866.94） h·μg·L-1;400 mg（qd）组多次给药d 1时Cmax,AUC0-t,AUC0-∞分别为（4 590.00±894.67）μg·L-1,（24 113.91±5 030.12） h·μg·L-1、（25 277.71±5 159.69） h·μg·L-1,d 7时主要药动学参数Cmax,AUC0-t,AUC0-∞分别为（4 570.00±1 230.04）μg·L-1,（30 280.20±7 007.20） h·μg·L-1,（30 586.30±7 055.85） h·μg·L-1。结论:富马酸西他沙星注射液在中国健康志愿者体内安全耐受。多次给药剂量间呈非线性动力学特征，qd给药体内无明显蓄积，在同一剂量组内主要药动学参数的性别差异无统计学意义。

关键词：西他沙星耐受性药动学高效液相色谱-串联质谱法

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Sublytic C5b-9上调KLF5促进Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞生成IL-23的作用

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南京医科大学学报（自然科学版） 2024年第9期44卷 1198-1206页

作者：刘玉应帅罗灿李玉荣灿王迎伟邱文江苏卫生健康职业学院临床医学院微生物与免疫学教研室江苏南京211800 南京医科大学基础医学院免疫学系江苏南京211166 江苏卫生健康职业学院临床医学院全科教研室江苏南京211800

目的:研究亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)上调转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)促进Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)产生炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-23的作用。方法:(1)建立大鼠Thy-1N模型和体外培养大鼠GMC,用Western blot(WB)检查Thy-1N大鼠肾组织和受sublytic C5b-9刺激的GMC中KLF5和IL-23的表达。(2)分别将KLF5过表达质粒(pIRES2-KLF5)或KLF5小干扰质粒(shKLF5)转染GMC,通过实时荧光定量PCR和WB检测KLF5和IL-23的mRNA和蛋白水平。(3)将IL-23全长启动子荧光素酶报告基因质粒(p GL3-IL-23-FL)转染GMC,再给予sublytic C5b-9刺激,或将p GL3-IL-23-FL与pIRES2-KLF5或shKLF5共转染GMC,用荧光素酶报告基因实验检测IL-23启动子活性的变化。(4)将慢病毒(lentivirus,LV)包装的LV-shKLF5和LV-shCTR行肾动脉灌注术导入大鼠肾组织,经小动物脏器可见光三维成像和冰冻切片观察GFP表达,证实LV-shCTR在肾组织中富集效率。之后再复制大鼠Thy-1N,用WB检查肾组织中KLF5和IL-23的蛋白表达。结果:(1)Thy-1N大鼠的肾组织和sublytic C5b-9刺激的GMC中,KLF5和IL-23的表达均显著升高,且KLF5的表达高峰稍早于IL-23。(2)在GMC中过表达或敲低KLF5能分别引起IL-23表达的升高或降低。(3)Sublytic C5b-9刺激或KLF5过表达均可增加GMC中IL-23启动子的活性,但敲低KLF5后可明显下调由sublytic C5b-9刺激GMC诱导的IL-23启动子活性。(4)敲低Thy-1N大鼠肾组织中KLF5的表达后,其肾组织中IL-23的表达水平明显降低。结论:大鼠Thy-1N发病早期,sublytic C5b-9刺激GMC后可通过上调KLF5促进IL-23基因的转录与表达。

关键词： Thy-1肾炎亚溶解型C5b-9 肾小球系膜细胞 krüppel样因子5 白细胞介素-23

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高表达UBE2S通过增加癌细胞干性促进肝癌的进程机制

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南方医科大学学报 2024年第3期44卷 455-464页

作者：陈浩李振汉王明婷卢林明唐乾利罗良平暨南大学临床医学博士后流动站广东广州510632 右江民族医学院研究生学院广西百色533000 皖南医学院病理解剖学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院临床医学院安徽芜湖241002 南京市第一医院产科江苏南京210006

目的探究UBE2S在肝癌微环境不同细胞类型的特异性表达及对肝癌细胞干性的影响。方法使用TCGA数据库分析肝癌中UBE2S转录水平及其启动子甲基化水平差异,使用CPTAC数据库分析UBE2S蛋白水平差异。使用TISCH单细胞测序数据挖掘UBE2S在不同... 详细信息

目的探究UBE2S在肝癌微环境不同细胞类型的特异性表达及对肝癌细胞干性的影响。方法使用TCGA数据库分析肝癌中UBE2S转录水平及其启动子甲基化水平差异,使用CPTAC数据库分析UBE2S蛋白水平差异。使用TISCH单细胞测序数据挖掘UBE2S在不同细胞类型中的表达,并分析细胞通讯的强度以及细胞群各自的关键转录因子。免疫组化验证UBE2S在肝癌组织中的表达;多色免疫荧光检测UBE2S在肝癌细胞以及T细胞的表达情况。利用shRNA敲低肝癌细胞HCC-LM3中的UBE2S,分为shCtrl(对照组)、shUBE2S-1(敲低组1)、shUBE2S-2(敲低组2)3个组,利用克隆形成实验、悬浮成球实验检测UBE2S敲低对HCC-LM3干性影响。结果UBE2S在TCGA数据库中非配对肿瘤组织中高表达(P<0.001),配对肿瘤组织中也高表达(P<0.001),随着肿瘤分级增高,转录水平逐渐增高(P<0.001);在CPTAC数据库中肝癌组织UBE2S蛋白水平表达也增高(P<0.001);肝癌中UBE2S启动子甲基化水平降低(P<0.001);TP53突变组UBE2S转录水平更高(P<0.001)。单细胞测序结果显示,UBE2S在T细胞等细胞群高表达;内皮与上皮及成纤维细胞之间的细胞交互强度较高,SMAD1等转录因子可能是Tprolif细胞关键转录因子。与正常组织相比,UBE2S在肝癌组织高表达;且在肝癌细胞和T细胞中均有较高表达。克隆形成实验显示:与shCtrl组相比,敲低UBE2S能减少肝癌细胞克隆形成数目(shUBE2S-1,P<0.05、P<0.01;shUBE2S-2,P<0.01、P<0.05);悬浮成球实验显示:与shCtrl组相比,敲低UBE2S能减少肝癌细胞肿瘤球形成数目(shUBE2S-1,P<0.05、P<0.01;shUBE2S-2,P<0.01、P<0.01)。结论UBE2S在肝癌组织T细胞中高表达,与预后不良相关,且其能促进肝癌细胞干细胞特性。

关键词：单细胞测序 UBE2S 肝癌 T细胞

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