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中华劳动卫生职业病杂志 2006年第2期24卷 103-105页

作者：杨萍刘起展李爱萍李婷洪霞周建伟南京医科大学公共卫生学院江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室 210029

目的探讨亚砷酸钠（Na2AsO2）所致人胚肺成纤维细胞（HELF）增殖兴奋效应与氧化应激的关系。方法0．0、0．1、0．5、1．0、5．0和10．0μmol／LNa2ASO2处理HELF细胞4h或24h后，检测Na2AsO2对HELF细胞增殖率、细胞中活性氧（ROS）水平、... 详细信息

目的探讨亚砷酸钠（Na2AsO2）所致人胚肺成纤维细胞（HELF）增殖兴奋效应与氧化应激的关系。方法0．0、0．1、0．5、1．0、5．0和10．0μmol／LNa2ASO2处理HELF细胞4h或24h后，检测Na2AsO2对HELF细胞增殖率、细胞中活性氧（ROS）水平、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）和还原性谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力的影响。结果0．1和0．5μmol／L Na2ASO2引起HELF细胞增殖率均明显升高，差异有统计学意义（P〈0．01），细胞增殖高峰表现在0．5μmol／L，而5．0和10．0μmol／L Na2ASO2引起HELF细胞增殖率均明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01），其剂量-反应关系曲线呈倒U形；0．5—10．0μmol／L Na2ASO2引起ROS水平均明显升高，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），ROS水平与Na2ASO2处理剂量有明显的正相关关系（r=0．934，P〈0．01）；5．0和10．0μmol／L Na2ASO2引起MDA含量均明显升高和GSH-Px活力明显降低。与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01）；0．5μmol／L Na2ASO2引起SOD活力明显升高。而5．0和10．0μmol／L Na2ASO2引起SOD活力均明显降低，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01），其剂量-反应关系呈倒U形曲线。结论Na2ASO2可引起HELF细胞增殖明显兴奋效应，其剂量-反应关系呈倒U形曲线，其机制可能与不同浓度Na2ASO2引起HELF细胞小同程度的氧化应激有关。

关键词：砷剂亚砷酸钠类氧化性应激活性氧组分

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JWA在N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍诱导的人支气管上皮细胞凋亡中的作用

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中华劳动卫生职业病杂志 2006年第4期24卷 205-208页

作者：徐艳琼李爱萍陈瑞周建伟南京医科大学公共卫生学院江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室 210029

目的探讨JWA在化学致突变物烷化剂N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导人支气管上皮(HBE)细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Western blot法检测JWA蛋白表达,用Sou... 详细信息

目的探讨JWA在化学致突变物烷化剂N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导人支气管上皮(HBE)细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Western blot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检测JWA基因近端启动子的结合蛋白。结果MNNG处理HBE细胞24 h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系；MNNG诱导HBE细胞凋亡过程中伴随着JWA蛋白表达升高。进一步用2．0μg/ml MNNG处理HBE细胞24h后,用Southwestern方法从HBE细胞核蛋白中检测出一与JWA近端启动子能特异性结合的转录因子。结论MNNG激活HBE细胞中核转录因子与JWA近端启动子结合后可能激活了细胞内凋亡的信号通路。

关键词：基因,JWA 细胞凋亡烷化剂转录因子

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诱导分化联合热休克处理对K562细胞JWA和热休克蛋白70表达的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2004年第1期22卷 60-63页

作者：茆文革李爱萍叶健黄曙李爱群周建伟南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室(江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室) 210029

目的　研究不同诱导分化剂单独或与热休克联合作用下 ,K562细胞JWA蛋白表达的特点和规律 ,探讨JWA与热休克蛋白 70 (Hsp70 )表达的关系以及可能涉及的信号调节机制。方法　建立诱导K562细胞定向分化以及和热休克联合作用的实验模型 ,用W... 详细信息

目的　研究不同诱导分化剂单独或与热休克联合作用下 ,K562细胞JWA蛋白表达的特点和规律 ,探讨JWA与热休克蛋白 70 (Hsp70 )表达的关系以及可能涉及的信号调节机制。方法　建立诱导K562细胞定向分化以及和热休克联合作用的实验模型 ,用Westernblot方法检测JWA、Hsp70、热休克转录因子 1(HSF1)、HSF2等蛋白表达。结果　 (1)佛波酯 (TPA ,10 0、2 0 0ng/ml)或阿霉素 (adri amycin ,4× 10 - 8mol/L)处理细胞 48h后 ,再热休克 (42℃ )处理 2h ,JWA和Hsp70蛋白表达均增加 ;而氯化高铁血红素 (hemin ,3× 10 - 5 mol/L ,48h)、阿糖胞苷 (Ara C ,80ng/ml,48h)和三氧化二砷 (As2 O3,1× 10 - 6 mol/L ,48h)处理后再热休克处理细胞 2h ,则JWA和Hsp70蛋白表达均下调 ;全反式维A酸(ATRA ,1× 10 - 6 mol/L ,48h)处理细胞后 ,再热休克处理 ,则JWA和Hsp70蛋白表达无明显变化。 (2 )不同诱导分化剂处理K562细胞后再热休克处理 ,HSF1和HSF2表达变化均不明显。结论　JWA不但参与K562细胞的诱导分化调节 ,也参与细胞对热应激的调节 ,JWA可能是多种化学诱导分化剂和热休克的共同靶基因。诱导K562细胞分化过程中 ,Hsp70的表达不需要热休克转录因子介导 ,JWA可能是一种与Hsp70信号通路平行的新的信号分子。

关键词：热休克 K562细胞 JWA 热休克蛋白70 基因表达血红蛋白

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新的环境应答蛋白JWA在MCF-7细胞应答氧化应激中的表达

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中华劳动卫生职业病杂志 2005年第2期23卷 122-124,i002页

作者：朱婷陈瑞李爱萍顾灯安刘起展周建伟南京医科大学公共卫生学院江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室 210029

目的　研究氧化应激诱导MCF 7 细胞氧化损伤过程中,JWA表达的调节规律及其作用,尤其是与热休克蛋白(HSPs)间的关系。方法　以不同浓度的H2O2(0.01、0.10、1.00 mmol/L)分别处理MCF 7细胞10、30、60、180 min,建立MCF 7细胞氧化损伤模型... 详细信息

目的　研究氧化应激诱导MCF 7 细胞氧化损伤过程中,JWA表达的调节规律及其作用,尤其是与热休克蛋白(HSPs)间的关系。方法　以不同浓度的H2O2(0.01、0.10、1.00 mmol/L)分别处理MCF 7细胞10、30、60、180 min,建立MCF 7细胞氧化损伤模型并用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定;用四唑蓝(MTT)法分析H2O2 对MCF 7细胞的相对细胞增殖率和细胞毒性的影响;采用Western blot方法检测JWA、HSP70、HSP27和热休克转录因子(HSF1)蛋白表达水平的变化。结果　H2O2 对MCF 7细胞的增殖抑制和细胞毒性呈时间和剂量依赖关系,MCF 7细胞在最高剂量、最长处理时间(1.00 mmol/L、180 min)时,细胞增殖几乎完全受抑制。H2O2 活跃地调节JWA的表达,氧化损伤使JWA、HSP70 和HSF1表达上调并呈剂量依赖关系,而且JWA、HSP70和HSF1的表达规律相似,而HSP27 表达似乎与氧化应激的信号调节无关。结论　在H2O2 致MCF 7 细胞氧化应激时,JWA作为有效的环境应答蛋白,其与HSP70共同参与的信号通路可能受HSF1调控。

关键词： JwA基因氧化性应激热休克蛋白质类肿瘤发生机制

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苯并(a)芘作用下人胚肺细胞JWA基因的表达及其与DNA损伤修复的关系

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中华预防医学杂志 2005年第3期39卷 187-190页

作者：顾灯安李爱萍朱婷叶健周建伟南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室 210029

目的研究苯并(a)芘诱导人胚肺(ccc HPF1)细胞DNA损伤修复中基因JWA和热休克蛋白(hsp70)的表达规律,探讨JWA基因参与细胞DNA损伤修复的作用和可能机制。方法建立ccc HPF1细胞DNA损伤模型,在S9活化状态下分别以10～100μmol/L苯并(a)芘处... 详细信息

目的研究苯并(a)芘诱导人胚肺(ccc HPF1)细胞DNA损伤修复中基因JWA和热休克蛋白(hsp70)的表达规律,探讨JWA基因参与细胞DNA损伤修复的作用和可能机制。方法建立ccc HPF1细胞DNA损伤模型,在S9活化状态下分别以10～100μmol/L苯并(a)芘处理细胞3h收获细胞或再恢复24h,用碱性单细胞凝胶电泳鉴定DNA损伤和修复情况,免疫印迹方法检测JWA和hsp70的表达水平。结果在DNA损伤模型中,苯并(a)芘活跃地调节JWA的表达,50μmol/L和100μmol/L处理组JWA和hsp70明显上调,在恢复期内10～100μmol/L处理组两者都处于较高的表达水平并且JWA和hsp70的表达规律几乎完全一致。结论JWA是一个有效的环境应答基因,活跃地参与细胞应答与DNA切除修复有关的信号通路。

关键词：苯并(a)芘人胚肺细胞 JWA基因基因表达 DNA损伤 DNA修复

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过氧化氢处理K562细胞中JWA基因的表达及其与DNA损伤和凋亡的关系

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中华预防医学杂志 2005年第3期39卷 182-186页

作者：朱婷李爱萍刘起展王心如周建伟南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室 210029

目的研究过氧化氢(H2O2)诱导K562细胞氧化应激过程中,JWA蛋白、热休克蛋白(hsp70和hsp27)和p53蛋白的表达特点,探讨JWA参与细胞应答氧化应激的作用和可能机制。方法用0.01、0.1、1mmol/L的H2O2处理K562细胞10、30、60、180min建立氧化... 详细信息

目的研究过氧化氢(H2O2)诱导K562细胞氧化应激过程中,JWA蛋白、热休克蛋白(hsp70和hsp27)和p53蛋白的表达特点,探讨JWA参与细胞应答氧化应激的作用和可能机制。方法用0.01、0.1、1mmol/L的H2O2处理K562细胞10、30、60、180min建立氧化损伤模型;用0.1mmol/LH2O2处理不同时间(6～48h)和不同浓度(0.5～1000μmol/L)的H2O2处理48h分别诱导K562细胞凋亡,然后用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA损伤和凋亡,用免疫印迹方法检测热休克蛋白(hsp70和hsp27)、p53以及JWA的蛋白表达水平。结果在DNA损伤模型中,H2O2活跃地调节JWA的表达,JWA对氧化应激的应答比热休克蛋白更快速,JWA和hsp70的表达规律相似;在低剂量H2O2(0.01mmol/L)处理时,JWA和热休克蛋白的表达均显著增高;在细胞凋亡模型中,JWA、hsp70、hsp27和p53的表达均显著增高,其中,JWA、hsp70和p53三者的表达规律相似。结论JWA是一个有效的环境应答基因并活跃地参与细胞应答氧化应激所致的DNA损伤和细胞凋亡的信号通路,其介导的信号通路可能与hsp70和p53有关。

关键词：过氧化氢 K562细胞 JWA基因基因表达 DNA损伤细胞凋亡

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可能参与调节中枢神经系统病变的新的信号分子:JWA基因对HEK293细胞谷氨酸转运的影响

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中国临床康复 2004年第7期8卷 1259-1261,T002页

作者：齐泓李爱萍周建伟江苏省人类功能基因组学重点实验室江苏省应用毒理学重点实验室分子毒理研究室南京医科大学公共卫生学院江苏省南京市210029

目的:探讨新的微管相关蛋白JWA对谷氨酸转运的调控及其机制。方法:用构建JWA高表达载体转染的HEK293细胞,建立JWA高表达模型;用反义寡核苷酸技术抑制细胞JWA表达,建立JWA低表达模型;用激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+的含量,用免疫荧光... 详细信息

目的:探讨新的微管相关蛋白JWA对谷氨酸转运的调控及其机制。方法:用构建JWA高表达载体转染的HEK293细胞,建立JWA高表达模型;用反义寡核苷酸技术抑制细胞JWA表达,建立JWA低表达模型;用激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca2+的含量,用免疫荧光和Westernblot法检测细胞内Jwa蛋白的表达水平。掺入犤3H犦-D,L-谷氨酸为标志物观察JWA基因对细胞摄取谷氨酸的影响。结果:JWA基因高表达的细胞摄取谷氨酸增加;用反义寡核苷酸关闭JWA后,谷氨酸摄取下降。佛波酯可使JWA高表达细胞和对照组未转染细胞谷氨酸转运都增加,但未转染细胞与JWA高表达细胞谷氨酸摄取增加无显著差别。佛波酯还可引起HEK293细胞内游离钙浓度一过性升高。结论:JWA编码的微管相关蛋白可通过非PKC途径增强HEK293细胞谷氨酸转运功能,增强谷氨酸介导的神经兴奋传递,参与中枢神经系统病变,因而是一种可能参与调节中枢神经系统病变的新的信号分子。而佛波酯引起的细胞谷氨酸转运功能增强可能与细胞内钙稳态的改变有关。

关键词：中枢神经系统疾病信号分子 JWA基因 HEK293细胞谷氨酸转运调控机制

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JWA基因启动子-76G→C多态性和膀胱癌易感性关系的配对研究

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中华医学遗传学杂志 2005年第6期22卷 648-652页

作者：吴为李春平陈瑞曹兴江李爱萍王玉杨克虎钱立新刘起展李芝兰周建伟兰州大学公共卫生学院 730000 南京医科大学公共卫生学院江苏省人类功能基因组学重点实验室江苏省应用毒理学重点实验室分子毒理研究室兰州大学循证医学中心 730000 江苏省人民医院泌尿外科

目的检测JWA启动子单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),探讨其对基因转录活性的影响和与膀胱癌遗传易感性的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性和DNA测序的方法,检测了155例膀胱癌病例和155例非肿瘤对照... 详细信息

目的检测JWA启动子单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),探讨其对基因转录活性的影响和与膀胱癌遗传易感性的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性和DNA测序的方法,检测了155例膀胱癌病例和155例非肿瘤对照人群的JWA基因启动子多态性位点;构建启动子多态性片段氯霉素乙酰转移酶报告基因重组质粒,瞬时转染NIH-3T3细胞,检测启动子多态性片段对基因转录活性的影响。结果检测到一个新SNP-76G→C;C等位基因和GC基因型频率在膀胱癌病例组为10·00%、20.00%,比正常对照组(5.16%、10.32%)高,差异有统计学意义(P<0.05);与GG基因型相比,GC基因型启动子的转录活性显著降低(P<0.01)。Logistic多元回归分析结果(P<0.05,OR=2.05)显示这一多态性可能是形成膀胱癌新的独立危险因素。结论JWA基因启动子-76G→C多态性可能影响JWA基因转录和表达,从而增加膀胱癌易感性。

关键词： JWA基因膀胱癌聚合酶链反应-单链构象多态性单核苷酸多态性启动子

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苯并[a]芘作用下人胚肺细胞JWA表达与DNA损伤修复

苯并[a]芘作用下人胚肺细胞JWA表达与DNA损伤修复

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第四届全国环境与职业医学研究生学术研讨会

作者：顾灯安李爱萍朱婷叶健周建伟江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室

[目的]研究苯并[a]芘[benzo(a)pyrene,B(a)P]诱导人胚肺细胞(ccc-HPF-1)DNA损伤修复中,JWA和热休克蛋白70(heat shock protein 70,hsp70)的表达规律,探讨JWA参与细胞DNA损伤修复的作用和可能机制。[方法] 建立ccc-HPF-1细胞DNA损伤模型,在S9活化状态下分别以10-100μmol/L B(a)P处理细胞3h收获细胞或再恢复24h,用碱性单细胞凝胶电泳(comet assay)鉴定DNA损伤和修复情况,免疫印迹(Western blot)方法检测JWA和hsp70的表达水平。[结果]在DNA损伤模型中,B(a)P活跃地调节JWA的表达,50μmol/L和100μmol/L处理组JWA和hsp70明显上调,在恢复期内10-100μmol/L处理组两者都处于较高的表达水平并且JWA和hsp70的表达规律几乎完全一致。[结论]JWA是一个有效的环境应答基因,活跃地参与细胞应答与DNA切除修复有关的信号通路。

关键词：苯并[a]芘 JWA DNA损伤修复 hsp70

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JWA参与调节N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍诱导的HBE细胞凋亡

JWA参与调节N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍诱导的HBE细胞凋亡

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第五节全国环境与职业医学研究生学术研讨会

作者：徐艳琼李爱萍陈瑞周建伟 210029 南京江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室南京医科大学公共卫生学院

[目的]探讨JWA在化学致突变物N-甲基-N‘-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HBE细胞凋亡中的作用及可能机制. [方法]用MTT法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Westernblot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检... 详细信息

[目的]探讨JWA在化学致突变物N-甲基-N‘-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HBE细胞凋亡中的作用及可能机制. [方法]用MTT法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Westernblot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检测JWA基因近端启动子的结合蛋白. [结果]MNG处理HBE细胞24h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系;MNNG诱导HBE细胞凋亡过程中伴随着JWA蛋白表达升高.进一步用2μg/mlMNNG处理HBE细胞24h后,用Southwestern方法从HBE细胞核蛋白中检测出一与JWA近端启动子能特异性结合的转录因子. [结论]MNNG激活HBE细胞中核转录因子与JWA近端启动子结合后可能激活了细胞内凋亡信号通路.

关键词： HBE细胞凋亡 JWA基因核转录因子信号通路 MNNG激活

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