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南京医科大学学报（自然科学版） 2014年第5期34卷 587-591页

作者：张慧慧陆海华唐思文王军肖杭高蓉南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系神经毒理教研室现代毒理教育部重点实验室江苏南京210029

目的:研究环境内分泌干扰物双酚A(BPA)对SD大鼠血-脑屏障成分表达及星形胶质细胞活力的影响并探讨其损伤机制。方法:通过MTT检测细胞活力,高效液相色谱法(HPLC)检测谷氨酸含量的变化,实时荧光定量PCR检测星形胶质细胞中Claudin-3、Claud... 详细信息

目的:研究环境内分泌干扰物双酚A(BPA)对SD大鼠血-脑屏障成分表达及星形胶质细胞活力的影响并探讨其损伤机制。方法:通过MTT检测细胞活力,高效液相色谱法(HPLC)检测谷氨酸含量的变化,实时荧光定量PCR检测星形胶质细胞中Claudin-3、Claudin-4、Claudin-5、JAM-1、JAM-2、ZO-1、E-cadherin基因的表达。结果:10-7 mg/ml的BPA与星型胶质细胞孵育24或48 h后即可引起细胞活力的下降,具有统计学差异。在该浓度的暴露下,血-脑屏障紧密连接相关蛋白Claudin-3、Claudin-4、JAM-1、E-cadherin蛋白的mRNA水平下调,而Claudin-5、JAM-2、ZO-1蛋白基因表达上调且具有统计学意义;HPLC结果显示,谷氨酸的浓度上调。结论:环境内分泌干扰物BPA对血-脑屏障的完整性具有潜在的损伤作用。

关键词：环境内分泌干扰物双酚A 星形胶质细胞血-脑屏障

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甲基苯丙胺对大鼠小胶质细胞损伤作用

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中国公共卫生 2013年第6期29卷 820-822页

作者：赵晶晶钱文溢刘景丽周景高蓉王军肖杭南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系神经毒理教研室现代毒理教育部重点实验室江苏南京210000

目的观察甲基苯丙胺(Meth)通过电压门控钾离子通道亚型1.3、1.5(Kv1.3、Kv1.5)对大鼠胎鼠小胶质细胞的损伤作用。方法 SD胎鼠原代培养小胶质细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;采用... 详细信息

目的观察甲基苯丙胺(Meth)通过电压门控钾离子通道亚型1.3、1.5(Kv1.3、Kv1.5)对大鼠胎鼠小胶质细胞的损伤作用。方法 SD胎鼠原代培养小胶质细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞活力和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应法观察Kv1.3、Kv1.5表达变化。结果 Meth呈浓度依赖性降低小胶质细胞活力,增加小胶质细胞凋亡;Kv1.3的抑制剂MgTx对Meth所致小胶质细胞损伤有部分保护作用;与对照组(1.047±0.165)比较,300μmol/L Meth组小胶质细胞Kv1.3 mRNA表达(7.453±0.675)增高(P<0.05),MgTx组Kv1.3 mRNA表达(1.684±0.875)低于Meth 300μmol/L组(P<0.05);Meth对Kv1.5 mRNA表达无影响。结论 Meth可引起小胶质细胞损伤,其机制可能与Kv1.3表达变化有关。

关键词：甲基苯丙胺(Meth) 小胶质细胞损伤原代培养钾通道

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N-乙酰半胱氨酸在百草枯诱导A549细胞转分化过程中的保护作用

引用

中华急诊医学杂志 2019年第6期28卷 712-716页

作者：宋扬孙昊余国琴张晓敏吴雨璇王军张劲松南京医科大学第一附属医院急诊医学科 210029 南京医科大学第一附属医院神经内科 210029 南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系现代毒理学教育部重点实验室211166

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-Acetyl-cysteine, NAC)在百草枯(paraquat, PQ)诱导人非小细胞肺癌细胞(A549细胞)发生上皮间充质细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的保护作用以及机制。方法利用A549细胞暴露于不同... 详细信息

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(N-Acetyl-cysteine, NAC)在百草枯(paraquat, PQ)诱导人非小细胞肺癌细胞(A549细胞)发生上皮间充质细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的保护作用以及机制。方法利用A549细胞暴露于不同浓度的PQ溶液,构建拟肺泡上皮细胞EMT模型。分别于第0,2,4,6天收获细胞。观察NAC干预效果时,在PQ暴露前2 h加入10 mmol/L NAC孵育细胞。光镜下观察A549细胞的形态学改变,实时定量PCR(Real-time quantitative PCR, RT-qPCR)和Western-blotting技术检测EMT标记物E-cadherin和α-SMA的表达变化以及TGF-β1的表达水平。结果30 μmol/L PQ染毒A549细胞4 d后建立EMT模型,与对照组相比,PQ组A549细胞表现出典型的形态学改变,细胞由鹅卵石样的上皮细胞外观特征向纺锤形的间质细胞样外观特征改变。Western-blotting结果表明PQ组的A549细胞的TGF-β1、α-SMA蛋白水平表达明显高于对照组,E-cadherin蛋白水平表达低于对照组(均P<0.05)。10 mmol/L NAC预孵育可以有效逆转PQ暴露引起的上述改变,表现为EMT指标E-cadherin升高而α-SMA下降(均P<0.05),且形态学也发现在应用NAC后,纺锤形的间质细胞样的细胞减少且细胞数量有所增加。结论通过细胞实验证明,PQ暴露可以引起上皮细胞发生上皮间充质细胞转分化,NAC在此过程中具有细胞保护作用。

关键词：百草枯 N-乙酰半胱氨酸 TGF-β1 上皮间充质细胞转分化

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