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中国毒理学会第八次全国毒理学大会

作者：汪玲玲胡维岳管权权杜桂珍陈婷吴炜汪云王心如夏彦恺南京医科大学生殖医学国家重点实验室南京211100 南京医科大学公共卫生学院教育部现代毒理学重点实验室南京211100 南京医科大学附属南京市妇幼保健院南京210004 南京医科大学附属苏州医院苏州215000

[目的]母亲孕期暴露于室内空气环境污染对新生儿出生体重的影响已经被广泛研究。鉴于中国饮食的特色，室内的烹饪油烟已经成为室内环境污染的一个重要组成部分。然而，中国母亲孕期暴露于烹饪油烟是否会对新生儿的出生体重产生影响目前... 详细信息

[目的]母亲孕期暴露于室内空气环境污染对新生儿出生体重的影响已经被广泛研究。鉴于中国饮食的特色，室内的烹饪油烟已经成为室内环境污染的一个重要组成部分。然而，中国母亲孕期暴露于烹饪油烟是否会对新生儿的出生体重产生影响目前还未被报道。本研究旨在探讨母亲孕期暴露于烹饪油烟与子代出生体重的关联。[材料与方法]本研究基于南京医科大学前瞻性母婴队列研究。

关键词：烹饪油烟孕期暴露出生体重大于胎龄儿母婴队列

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空气颗粒物致心肺损害的基础研究

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中华预防医学杂志 2016年第8期50卷 747-752页

作者：袁晶韩斌陈仁杰宋伦张正东张晓敏徐东刚王以美于典科杜江波白志鹏阚海东彭双清陈卫红沈洪兵邬堂春华中科技大学同济医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系环境与健康教育部重点实验室国家环境保护部环境与健康重点实验室武汉430030 中国环境科学研究院环境基准与风险评估国家重点实验室复旦大学公共卫生学院环境卫生教研室军事医学科学院基础医学研究所南京医科大学公共卫生学院教育部现代毒理学重点实验室军事医学科学院疾病预防控制所毒理学评价研究中心中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所南京医科大学公共卫生学院流行病学系

中国工业化和城镇化的不协调发展对生态环境造成了巨大压力，并威胁着国民的健康。据报道，我国每年因室外空气污染所致的过早死亡人数约35~50万例[1]，而颗粒物是我国城市大气首要污染物，其污染水平已远超全球平均水平。据WHO估计，... 详细信息

中国工业化和城镇化的不协调发展对生态环境造成了巨大压力，并威胁着国民的健康。据报道，我国每年因室外空气污染所致的过早死亡人数约35~50万例[1]，而颗粒物是我国城市大气首要污染物，其污染水平已远超全球平均水平。据WHO估计，全球每年有240万人的过早死归因于室内外空气颗粒物的暴露，其中65%的过早死亡者分布在中国以及其他颗粒物污染较重的亚洲国家和地区[2]。

关键词：颗粒物心脏损伤肺损伤高通量技术流行病学

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肥胖可加重双酚A致雄性精液质量下降的效应

肥胖可加重双酚A致雄性精液质量下降的效应

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：胡维岳陈敏健董天宇夏彦恺王心如南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系现代毒理学教育部重点实验室生殖医学国家重点实验室

【目的】双酚A(BisphenolA,BPA)是一种人类生活和工作环境中广泛存在的环境内分泌干扰物,其对于男性生殖系统的潜在损害作用不容忽视。在社会经济高速发展的今天,超重和肥胖的患病率不断上升,由此所引起的一系列健康问题正日益受到重视... 详细信息

【目的】双酚A(BisphenolA,BPA)是一种人类生活和工作环境中广泛存在的环境内分泌干扰物,其对于男性生殖系统的潜在损害作用不容忽视。在社会经济高速发展的今天,超重和肥胖的患病率不断上升,由此所引起的一系列健康问题正日益受到重视。本研究结合人群数据与动物染毒结果,拟初步探讨BPA和肥胖间交互作用对雄性精液质量的影响。【材料和方法】研究纳入357名男性志愿者,收集体重指数(BMI)和精液质量信息,通过超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)测定尿液BPA含量,并利用广义线性模型对BPA和肥胖间交互作用与精子总数、精液量、精液浓度、精子活力等参数的关联进行统计分析。同时,采用2×3析因设计,模拟BPA的低剂量长期积累效应模型,将84只成年雄性ICR小鼠随机分成6组(对照组、高脂饮食组(HFD)、BPA0.25组(0.25ug/kg bw per day)、BPA25组(25ug/kg bw per day)、BPA0.25+HFD组、BPA25+HFD组),连续染毒13周后处死,测定睾丸等脏器系数并取附睾进行精液质量检测,对BPA与肥胖间的交互作用进行验证。【结果】人群线性回归分析发现,肥胖者的尿液BPA含量与精子总数和精液浓度具有负向关联,β系数分别为-34.62和-9.712。并且,BMI与BPA间具有协同作用,表现为BMI越高时,BPA致精子浓度下降越显著,交互作用P值为0.017。而小鼠的实验结果显示,第四周开始,HFD处理组体重显著高于对照组,肥胖造模成功。肥胖可引起睾丸系数下降,其中,BPA0.25+HFD组和BPA25+HFD组的睾丸系数显著低于对照组。进一步分析发现,肥胖与BPA间的交互作用可对精子总数产生影响,表现为HFD处理组的精子总数随BPA染毒剂量增大而减少,剂量效应关系具有统计学意义。【结论】BPA具有致雄性精液质量下降的潜在生殖毒性,而肥胖可能加重这一不利影响。

关键词：双酚A 肥胖精液质量

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雄性生殖细胞暴露于三手烟后的代谢改变

雄性生殖细胞暴露于三手烟后的代谢改变

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：徐菠陈敏健姚梦梦嵇晓丽王心如夏彦恺南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系现代毒理学教育部重点实验室生殖医学国家重点实验室毒理研究所

【目的】研究雄性生殖细胞系暴露于三手烟后的代谢改变。【材料和方法】三手烟样本的制作过程如下:将3M公司的色谱纸放入一个6立方米的不锈钢密闭室连续20天以上,总暴露时间为32小时,总烟雾接触量为545 mg。将富集三手烟的暴露纸称重并... 详细信息

【目的】研究雄性生殖细胞系暴露于三手烟后的代谢改变。【材料和方法】三手烟样本的制作过程如下:将3M公司的色谱纸放入一个6立方米的不锈钢密闭室连续20天以上,总暴露时间为32小时,总烟雾接触量为545 mg。将富集三手烟的暴露纸称重并切成小块,每0.15g纸加3ml无血清的培养基提取三手烟溶液。检测不同浓度的三手烟溶液染毒小鼠雄性生殖细胞系(小鼠精母细胞系、小鼠睾丸支持细胞)后的细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期,高内涵分析系统检测三手烟染毒小鼠雄性生殖细胞系后的多参数细胞毒性;用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测;气相色谱法检测三手烟染毒小鼠雄性生殖细胞系后的代谢小分子物质的改变。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测代谢小分子相关代谢酶的表达。【结果】不同浓度的三手烟溶液染毒小鼠雄性生殖细胞系后,发现50μg/ml的三手烟不影响细胞活力,此剂量的尼古丁、可替宁和NNK的含量分别为84.0μg/ml,7.3μg/ml和0.16μg/ml。三手烟(50μg/ml)染毒两种小鼠雄性生殖细胞系后,细胞周期、细胞凋亡和多参数细胞毒性都没有明显改。三手烟染毒小鼠精母细胞系后,正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)显示染毒组与对照组能明显分开,谷胱甘肽(GSH)和甘氨酸的浓度在三手烟处理组显著高于对照组。流式细胞技术未观察到活性氧含量的改变。进一步探讨谷胱甘肽通路发现谷胱甘肽合成酶(GSS)的mRNA水平上升,γ-谷氨酰转移酶(GGT)的mRNA水平下降。三手烟染毒小鼠睾丸支持细胞系后,正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)显示染毒组与对照组能明显分开,核酸代谢相关的小分子(尿嘧啶、胸腺嘧啶、脱氧胸苷一磷酸(DTMP)、丙二酸、亚精胺和腺苷),氨代谢相关的小分子(羟胺和谷氨酰胺)发生改变。这些代谢通路相关的酶,如胸苷激酶(TK),精胺合酶(SMS),谷氨酸-氨连接酶酶(glnA)的mRNA水平都发生下降。【结论】低剂量、无细胞毒性的三手烟可以显著改变两种雄性生殖细胞系的代谢,提示三手烟对雄性生殖细胞系有潜在毒性。

关键词：三手烟雄性生殖细胞代谢组

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孕前炔雌醇暴露引起子代糖代谢受损并改变下丘脑ARC区瘦素/NPY通路蛋白表达

孕前炔雌醇暴露引起子代糖代谢受损并改变下丘脑ARC区瘦素/NPY通...

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：徐凯旋王心如夏彦恺吴笛南京医科大学公共卫生学院毒理系生殖医学国家重点实验室现代毒理学教育部重点实验室江苏省应用毒理学重点实验室

【目的】炔雌醇被很多育龄妇女用于调节生理周期,但孕前炔雌醇暴露对子代的影响仍需进一步探索。本研究以SD大鼠为模型,观察孕前炔雌醇暴露后引起的子代糖代谢变化及大脑代谢中心ARC区瘦素/NPY(neuropeptide,神经肽)通路关键蛋白表达的... 详细信息

【目的】炔雌醇被很多育龄妇女用于调节生理周期,但孕前炔雌醇暴露对子代的影响仍需进一步探索。本研究以SD大鼠为模型,观察孕前炔雌醇暴露后引起的子代糖代谢变化及大脑代谢中心ARC区瘦素/NPY(neuropeptide,神经肽)通路关键蛋白表达的改变,为炔雌醇孕前暴露提供基线资料。【方法】SD雌性大鼠52只,随机分为4组【对照组(芝麻油)、EE 50组(EE 50 ug/kg)、EE 200组(EE 200 ug/kg)和EE 800组(EE 800ug/kg)】,连续15天灌胃暴露后受孕。在子鼠PND 21进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT),在PND25时对子代进食量进行观察并检测下丘脑ARC区中LEP、LEPR、NPY、NPYR、POMC mRNA相对表达水平。【结果】与对照组比,EE 200和EE 800组子代雌鼠PND 21空腹血糖和OGTT中90min、120min时的血糖水平均显著下降(p<0.05),EE 50和EE 200组子代雄鼠PND21空腹血糖和OGTT中60min、120min时的血糖水平均显著下降(p<0.05);EE 50、EE 200和EE 800组子代PND 25进食量与对照相比均显著增高(p<0.05),且EE 800组进食量最高;子代PND 25下丘脑ARC区中,EE 200和EE 800组的NPY、LEPR mRNA表达显著高于对照(p<0.05),而LEP、NPYR、POMC mRNA表达显著低于对照(p<0.05)。【结论】综上所述,孕前炔雌醇暴露会导致子代空腹血糖变化和糖耐量受损、增大进食量。这很可能是由于孕前炔雌醇暴露会影响子代下丘脑的正常发育,引起下丘脑ARC区瘦素/NPY通路受损,进而导致糖代谢失衡及进食量的改变。

关键词：炔雌醇糖代谢失衡下丘脑瘦素/NPY

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miR-98及其宿主基因Huwe1调控纳米二氧化硅所致的小鼠精母细胞凋亡

miR-98及其宿主基因Huwe1调控纳米二氧化硅所致的小鼠精母细胞凋亡

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：徐菠冒志磊嵇晓丽姚梦梦陈敏健王心如夏彦恺南京医科大学公共卫生学院卫生毒理系现代毒理学教育部重点实验室生殖医学国家重点实验室毒理研究所

【目的】研究miR-98及其宿主基因Huwel在纳米二氧化硅所致的小鼠雄性生殖细胞凋亡中的作用。【方法】用纳米粒度仪检测纳米二氧化硅在培养基中的表征（Zeta电位及水合粒径）;透射电镜观察纳米二氧化硅在两种雄性生殖细胞系中的分布和定... 详细信息

【目的】研究miR-98及其宿主基因Huwel在纳米二氧化硅所致的小鼠雄性生殖细胞凋亡中的作用。【方法】用纳米粒度仪检测纳米二氧化硅在培养基中的表征（Zeta电位及水合粒径）;透射电镜观察纳米二氧化硅在两种雄性生殖细胞系中的分布和定位;检测不同浓度纳米二氧化硅染毒两种小鼠雄性生殖细胞系（小鼠精母细胞和小鼠睾丸支持细胞）后的细胞活力;流式细胞仪检测纳米二氧化硅染毒两种雄性生殖细胞系的细胞周期、细胞凋亡;高内涵分析系统检测纳米二氧化硅染毒两种细胞系后的多参数细胞毒性;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫印迹实验（Western blot）检测凋亡相关因子的改变;通过多种软件TargetScan（http://***）,miRanda（http://***/mirnaviewer）,PicTar（http://***/）和RNA22（http://***/***）预测调控凋亡基因的miRNA及其宿主基因。构建质粒,通过转染实验和双荧光素酶报告基因实验验证miRNA对基因的直接调控。【结果】纳米二氧化硅在培养基中的水合粒径为161±2 nm,Zeta电位为-9±1 mV,透射电镜结果显示纳米二氧化硅颗粒定位在细胞的溶酶体内,细胞核内没有发现,不影响细胞核膜的完整性;纳米二氧化硅（100μg/mL）不影响细胞活力;纳米二氧化硅（100μg/mL）引起小鼠精母细胞凋亡;高内涵分析系统结果显示纳米二氧化硅（100μg/mL）会引起小鼠精母细胞膜通透性增加、线粒体膜电势下降,但不影响细胞色素C的含量;RT-PCR和Western blot结果显示纳米二氧化硅（100μg/mL）染毒小鼠精母细胞后,凋亡相关因子（Bax,Caspase-3 and Caspase-9）显著增加,Bcl-2显著下降。纳米二氧化硅（100μg/mL）染毒小鼠精母细胞后,调控Caspase-3的miR-98显著下降,miR-98的宿主基因Huwel显著下降。Pearson相关分析显示miR-98与Caspase-3成负相关（R=0.7809,p<0.001）,miR-98与Huwel成正相关（R=0.3838,p<0.001）;转染miR-98 mimics后,Caspase-3的mRNA和蛋白水平显著下降;共转染miR-98 mimics和pGL3-Caspase-3-miR-98-WT质粒后,双荧光素酶报告基因结果显示miR-98直接调控Caspase-3的表达。【结论】纳米二氧化硅颗粒会引起小鼠精母细胞系的细胞膜通透性升高,线粒体膜电势下降,Caspases的激活。此外,我们发现miR-98可以直接调控Caspase-3的表达,miR-98及其宿主基因Huwel可以调控纳米二氧化硅所致的小鼠精母细胞凋亡。

关键词：纳米二氧化硅 Caspase-3 miR-98 线粒体膜电势雄性生殖细胞

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纳米金棒对小鼠TM-4细胞中印记基因表达水平的影响

纳米金棒对小鼠TM-4细胞中印记基因表达水平的影响

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：顾颢徐菠汤秋勤吴炜稽晓丽夏彦恺王心如南京医科大学毒理学研究所生殖医学国家重点实验室南京医科大学公共卫生学院教育部现代毒理学重点实验室东南大学附属江阴医院南京医科大学附属南京妇幼保健院生殖医学国家重点实验室

【目的】实验室前期研究发现,使用10nM纳米金棒对小鼠TM-4细胞染毒24小时和48小时后均不引起细胞增殖毒性,因此本研究目的是研究纳米金棒(Goldnanorods)染毒处理后,小鼠TM-4细胞中的44个人鼠同源的印记基因表达水平变化情况。【材料和... 详细信息

【目的】实验室前期研究发现,使用10nM纳米金棒对小鼠TM-4细胞染毒24小时和48小时后均不引起细胞增殖毒性,因此本研究目的是研究纳米金棒(Goldnanorods)染毒处理后,小鼠TM-4细胞中的44个人鼠同源的印记基因表达水平变化情况。【材料和方法】所选择的纳米金棒水合粒径为(9-11)nm×(34-42)nm。我们选择了10nM对小鼠TM-4细胞进行染毒24小时处理。对照组除了未用纳米金棒染毒以外,其余操作均与染毒组保持一致。TM-4细胞经纳米金棒染毒处理24小时后,收集对照组与染毒组的细胞RNA,逆转录后采用实时定量PCR技术,对两组细胞中的44个人鼠同源的印记基因表达水平进行检测,并比较其表达水平在两组中的变化情况。【结果】在所选择的44个人鼠同源的印记基因中,有11个印记基因(Cdkn1c,Hymai,Igf2,Magel2,Mest,Ndn,Ppp1r9a,Sgce,Slc22a3,Snurf和Zim2)在两组中均不表达。4个印记基因(Anol,Nap1l5,Peg3和Slc22a2)在对照组中有表达,而在染毒组中未见表达。此外,Plagl1在染毒组中有表达,而在对照组中未见表达。其余28个印记基因在对照组和染毒组中均有表达,并且在这28个均表达的印记基因中,Gtl2,Kcnq1,Ntm,Peg10,Pwcr1和Slc22a18的表达水平在两组间存在显著差异,且这6条印记基因在染毒组中均表达下调。在对照组和染毒组中未共同表达的5条印记基因中,Nap1l5,Peg3和Slc22a2在对照组中显著高表达,而Plagl1在染毒组中显著高表达。这些差异表达的印记基因中,并未观察到等位基因频率之间的差异。【结论】低剂量的纳米金棒对小鼠TM-4细胞染毒后,可以显著改变部分人鼠同源的印记基因的表达水平。这提示我们异常表达的印记基因可能是纳米金棒引起生殖毒性的潜在机制。

关键词：纳米金棒印记基因雄性生殖生殖毒性 TM-4支持细胞

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HSD11B1和H6PD基因多态性与中国人群多囊卵巢综合症的相关性研究

HSD11B1和H6PD基因多态性与中国人群多囊卵巢综合症的相关性研究

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中华医学会第五次全国绝经学组学术会议

作者：居蓉吴炜唐秋琴吴迪夏彦恺吴洁王心如南京医科大学附属南京江宁医院南京医科大学公共卫生学院毒理学研究所南京医科大学现代毒理学重点实验室(教育部) 南京医科大学公共卫生学院毒理学研究所南京医科大学现代毒理学重点实验室(教育部) 南京医科大学附属南京市妇幼保健院生殖医学国家重点实验室南京医科大学第一附属医院

目的评估HSD11B1 (rs846908)和H6PD (rs6688832和rs17368528)基因多态性与中国人群多囊卵巢综合症相的关性研究.方法本研究中观察组335名PCOS患者,对照组为354名正常受孕妇女,利用Taqman基因分型技术(AD)方法对这两组人群中HSD11B1 (r...

目的评估HSD11B1 (rs846908)和H6PD (rs6688832和rs17368528)基因多态性与中国人群多囊卵巢综合症相的关性研究.方法本研究中观察组335名PCOS患者,对照组为354名正常受孕妇女,利用Taqman基因分型技术(AD)方法对这两组人群中HSD11B1 (rs846908)和H6PD(rs6688832 and rs17368528)基因多态性进行检测,同时测定PCOS患者基础状态下内分泌相关指标,包括促卵泡生成激素(FSH)、促黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、泌乳素(PRL)、空腹血糖(Fasting glucose)、空腹胰岛素(Fasting insulin)、硫酸脱氢表雄酮(DH EAS),并进行分析.

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尿液代谢生物标志物关联普通环境条件下砷暴露的氧化胁迫和男性不育风险:汉族人群的一个病例-对照研究

尿液代谢生物标志物关联普通环境条件下砷暴露的氧化胁迫和男性不...

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环境与健康——从科研到政策国际论坛暨中国环境科学学会环境医学与健康分会2013年会

作者：申河清徐伟攀张洁 Minjian Chen Francis L Martin 夏彦恺刘良坡中国科学院城市环境和健康重点实验室中国科学城市环境研究所生殖医学国家重点实验室毒理学研究所南京医科大学公共卫生学院现代毒理学教育部重点实验室南京医科大学公共卫生学院 Centre for Biophotonics Lancaster Environment Centre Lancaster University Lancaster LA1 4YQ UK

背景和方法为了验证普通环境条件下(非地质因素)的砷暴露损害男性生育能力的假设,我们设计了一个病例-对照实验,研究了人群尿液中的砷形态、尿液中的代谢生物标志物以及寡精子症为特征的男性不育风险的相关性.

关键词：

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8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1基因(ogg1)在保护斑马鱼胚胎心脏祖细胞功能中的作用

8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1基因(ogg1)在保护斑马鱼胚胎心脏祖细胞功...

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中国毒理学会第六届全国毒理学大会

作者：严丽锋周勇余山河吉贵祥王磊刘微顾爱华南京医科大学生殖医学国家重点实验室南京医科大学公共卫生学院教育部现代毒理学重点实验室中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所干细胞生物学重点实验室和发育与疾病实验室上海交通大学医学院瑞金医院上海血液研究所环境保护部南京环境科学研究所/农药环境评价与污染控制重点实验室

目的利用斑马鱼模型,研究ogg1基因在心脏发育中的功能及其对心脏祖细胞的调控机制进行研究。方法采用斑马鱼模型对ogg1功能进行可视化研究及基因调控分析。运用吗啉代技术（MO）在胚胎显微注射敲除ogg1。通过原位杂交、心跳计数、心肌... 详细信息

目的利用斑马鱼模型,研究ogg1基因在心脏发育中的功能及其对心脏祖细胞的调控机制进行研究。方法采用斑马鱼模型对ogg1功能进行可视化研究及基因调控分析。运用吗啉代技术（MO）在胚胎显微注射敲除ogg1。通过原位杂交、心跳计数、心肌细胞计数等评价心脏形态及功能缺陷,利用p53突变鱼系、Brdu抗体荧光染色等描述:ogg1缺失后,发生于心脏发育中的DNA损伤,增殖及凋亡的分子机制。通过基因芯片信息学分析及原位杂交检测,探讨相关信号通路调节。结果原位杂交结果显示ogg1基因主要表达于前侧板中胚层、原始心管以及胚胎心肌层。ogg1缺失导致严重的心脏形态及功能缺陷,包括:心脏长度缩短、心律不齐、心肌细胞以及nkx2.5标志的祖细胞数量减少。这些心脏的表型可能是由ogg1缺失引起的凋亡增加、增殖抑制所致。芯片分析结果显示,ogg1缺失后,参与胚胎心管形态和心脏结构形成的基因的表达情况发生改变。其中,叉头转录因子H1（foxh1）是ogg1参与心脏发育过程中DNA损伤应答的共同基因。结论 ogg1在斑马鱼心脏祖细胞和心脏发育中发挥着重要作用。该发现有助于探讨ogg1不足所致的心脏发育易损性的病因学基础,或可为心脏发育异常的治疗提供了新的策略。

关键词：心脏祖细胞心脏发育斑马鱼胚胎羟基鸟嘌呤糖苷酶 DNA

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