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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第2期39卷 210-217页

作者：秦敏邵天业赵成思缪婷婷张戎邱竞帆王勇南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室南京211166

目的探讨抗弓形虫药物乙胺嘧啶对巨噬细胞叶酸水平和免疫功能的影响。方法将小鼠巨噬细胞RAW264.7(1×10^(4)个/孔)接种于96孔板中,用0(对照组)、0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00、50.00、100.00、500.00和1 000.00μmo... 详细信息

目的探讨抗弓形虫药物乙胺嘧啶对巨噬细胞叶酸水平和免疫功能的影响。方法将小鼠巨噬细胞RAW264.7(1×10^(4)个/孔)接种于96孔板中,用0(对照组)、0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00、50.00、100.00、500.00和1 000.00μmol/L的乙胺嘧啶分别处理24 h后,CCK8检测细胞活性抑制率。将RAW264.7细胞(5×10^(5)个/孔)接种于6孔板中,弓形虫RH株速殖子感染后3 h,用0(对照组)、0.10、1.00、10.00和100.00μmol/L的乙胺嘧啶分别处理24 h,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测弓形虫速殖子的二氢叶酸还原酶的表达。TRIzol试剂提取RAW264.7细胞的总RNA, qRT-PCR检测巨噬细胞二氢叶酸还原酶和炎症因子基因的表达,Western blotting检测巨噬细胞DHFR的蛋白表达,全自动化学发光免疫分析仪检测胞内活性叶酸水平。用BLAST对速殖子DHFR蛋白和小鼠巨噬细胞DHFR蛋白的氨基酸序列进行同源比对。用无叶酸培养基预处理RAW264.7细胞48 h,随后用100μmol/L的乙胺嘧啶处理24 h, qRT-PCR检测无叶酸条件下巨噬细胞炎症因子基因的表达。两组之间比较采用t检验,多重比较采用单因素方差分析。结果 CCK8检测结果显示,乙胺嘧啶的细胞活性抑制率具有剂量依赖效应,在0.01~0.10μmol/L时可促进巨噬细胞的轻度增殖,浓度高于0.10μmol/L时显示有抑制细胞增殖作用。qRT-PCR检测结果显示,0.10、1.00、10.00和100.00μmol/L组弓形虫二氢叶酸还原酶m RNA相对转录水平分别为1.190±0.054、1.460±0.206、0.468±0.077和0.399±0.073, 1μmol/L组高于对照组,10.00和100.00μmol/L组均低于对照组(P<0.01);而巨噬细胞二氢叶酸还原酶m RNA相对转录水平分别为0.789±0.505、1.820±0.119、2.120±0.140和2.080±0.189,其中1.00、10.00和100.00μmol/L组均高于对照组(P<0.05或0.01)。Western blotting分析结果显示,100.00μmol/L组巨噬细胞DHFR蛋白表达显著高于对照组。BLAST同源比对显示,速殖子DHFR蛋白和小鼠巨噬细胞DHFR蛋白的同源性仅为37.0%。化学发光免疫分析结果显示,100.00μmol/L组巨噬细胞的胞内活性叶酸水平为(10.600±2.930) nmol/L,高于对照组(P<0.01)。100μmol/L乙胺嘧啶处理后,巨噬细胞炎症相关指标TNF-α、i NOS、Arg-1和IL-1β的mRNA相对转录水平分别为2.230±0.100、11.800±1.350、3.610±0.256和7.810±0.987,均高于对照组(P<0.05或0.01)。乙胺嘧啶处理后,无叶酸培养组RAW264.7细胞TNF-α、i NOS、Arg-1和IL-1β的mRNA相对转录水平分别为2.460±0.026、1.330±0.091、0.974±0.141和0.997±0.018, i NOS、Arg-1和IL-1β低于含叶酸正常组(P<0.05或0.01), TNF-α高于含叶酸正常组(P<0.01)。结论乙胺嘧啶可以通过促进小鼠巨噬细胞二氢叶酸还原酶的表达,升高胞内活性叶酸水平,从而诱导巨噬细胞炎症因子基因表达。

关键词：乙胺嘧啶巨噬细胞叶酸二氢叶酸还原酶

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后血吸虫病传播阻断阶段：肝纤维化问题

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015年第6期33卷 404-406页

作者：王勇南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室南京201129

随着我国血吸虫病流行区逐渐达到传播阻断标准、进入后传播阻断阶段,血吸虫病肝纤维化正成为不容忽视的突出问题。在实现传播阻断和传播控制的地区,应适时调整血防工作的重点,将对血吸虫病肝纤维化的监测与干预纳入常规工作,以减少晚期... 详细信息

随着我国血吸虫病流行区逐渐达到传播阻断标准、进入后传播阻断阶段,血吸虫病肝纤维化正成为不容忽视的突出问题。在实现传播阻断和传播控制的地区,应适时调整血防工作的重点,将对血吸虫病肝纤维化的监测与干预纳入常规工作,以减少晚期血吸虫病的发生。

关键词：晚期血吸虫病传播阻断肝纤维化干预

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血管紧张素转换酶对淡色库蚊生殖的影响

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中国血吸虫病防治杂志 2023年第3期35卷 251-257页

作者：王欢刘进开力买·艾尼郑俊楠沈波孙艳周丹南京医科大学基础医学院病原生物学系、江苏省现代病原生物学重点实验室江苏南京211166

目的探讨血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)在淡色库蚊(Culex pipiens pallens)生殖中的作用,为蚊媒种群控制靶标的选择提供科学依据。方法淡色库蚊于2009年采集于山东省唐口县。选择羽化后72 h雌、雄蚊,采用实时荧... 详细信息

目的探讨血管紧张素转换酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)在淡色库蚊(Culex pipiens pallens)生殖中的作用,为蚊媒种群控制靶标的选择提供科学依据。方法淡色库蚊于2009年采集于山东省唐口县。选择羽化后72 h雌、雄蚊,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time reverse transcription PCR,qPCR)技术检测雄蚊及吸血前(0 h)、吸血后(24、48、72 h)受精雌蚊全身和生殖组织中ACE基因表达水平。随后,选择羽化0~4 h的雌、雄库蚊各150只,分别分为野生(wild type,WT)组、RNA干扰-阴性对照(small interfering RNA-negative control group,siNC)组和RNA干扰-ACE(small interfering RNA-ACE group,siACE)组,每组50只。WT组淡色库蚊不作任何处理;siNC组和siACE组分别通过显微注射仪注射siNC和siACE至蚊血淋巴中,注射剂量为0.3μg/只。利用q PCR技术验证各组敲低效率,并观察各组生殖表型。结果羽化后72 h,雄蚊全身组织ACE表达量(5.467±1.006)高于雌蚊(1.199±0.241)(t=5.835,P=0.004);雄蚊生殖组织中ACE表达量最高(199.100±24.429),为剩余组织(1.057±0.340)的188.3倍(t=6.602,P=0.002)。吸血触发ACE在受精雌蚊全身组织中高表达,吸血后24 h(14.957±2.815)达到表达量高峰,为未吸血时(1.009±0.139)的14.8倍(P=0.002);雌蚊吸血后卵巢中ACE转录水平在卵黄合成期持续升高,在吸血后48 h(5.500±0.734)达高峰,是未吸血雌蚊(1.072±0.178)的5.1倍(P=0.002)。靶向ACE的小RNA干扰导致siACE组雌蚊中ACE表达量(0.430±0.070)较siNC组(1.002±0.070)降低57.2%(P=0.001),siACE组雄蚊ACE表达量(0.588±0.067)较siNC组(1.008±0.131)降低41.1%(P=0.016)。敲低ACE导致siACE组雌蚊产卵量[(94.000±27.386)只]较siNC组[(180.800±27.386)只]降低48.0%(P<0.001);与siACE组雄蚊交配的野生雌蚊产卵量[(104.500±20.965)只]较siNC组[(190.050±10.698)只]降低45.0%(P<0.001)。结论ACE表达降低可同时抑制雌、雄蚊虫生殖力,ACE可作为蚊媒种群抑制的潜在靶点。

关键词：淡色库蚊血管紧张素转换酶 RNA干扰生殖

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弓形虫感染对小鼠和人子宫自然杀伤细胞的影响

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中国血吸虫病防治杂志 2022年第2期34卷 149-157,171页

作者：张戎邵天业邵晨璐邱竞帆王勇南京医科大学基础医学院基础医学实验教学中心江苏南京211166 南京医科大学基础医学院病原生物学系、江苏省现代病原生物学重点实验室江苏南京211166

目的观察弓形虫感染对小鼠和人子宫自然杀伤细胞(uterine natural killer cells,uNK cells)比例、数量、分化和功能的影响,探讨uNK细胞在弓形虫感染致早孕流产中的作用。方法妊娠第6.5天给予孕鼠腹腔注射弓形虫速殖子,建立孕早期弓形虫... 详细信息

目的观察弓形虫感染对小鼠和人子宫自然杀伤细胞(uterine natural killer cells,uNK cells)比例、数量、分化和功能的影响,探讨uNK细胞在弓形虫感染致早孕流产中的作用。方法妊娠第6.5天给予孕鼠腹腔注射弓形虫速殖子,建立孕早期弓形虫感染致流产小鼠模型,妊娠第9.5天分离小鼠子宫淋巴细胞。取人正常妊娠孕早期流产新鲜蜕膜组织,分离人子宫淋巴细胞,与弓形虫RH株速殖子体外共培养48 h(弓形虫与子宫淋巴细胞比例分别为0.5∶1、1∶1、2∶1)。采用流式细胞术检测小鼠u NK细胞表型(CD122、NK1.1、DX5)、人u NK细胞表型(CD3、CD56、CD11b、CD27)及胞内细胞因子γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平。磁珠分选小鼠和人uNK细胞,以小鼠YAC-1或人K562细胞作为靶细胞、以小鼠或人uNK细胞作为效应细胞,采用乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法检测效应细胞/靶细胞比例分别为1∶1、5∶1、10∶1、20∶1时uNK细胞的杀伤功能。结果妊娠第9.5天,弓形虫感染组小鼠流产率较对照组显著上升(83.02%vs.3.51%;χ^(2)=71.359,P<0.001)。与对照组比较,弓形虫感染组小鼠uNK细胞绝对数量显著降低[(4547±1610)个/只vs.(8978±3339)个/只;U=2.000,P<0.05]、细胞表面NK1.1表达水平显著下降[(74.53±8.37)%vs.(93.00±1.11)%;U=0.000,P<0.05]、NK1.1;DX5;细胞比例显著上升[(20.10±8.03)%vs.(5.04±0.68)%;U=0.000,P<0.05]、NK1.1;DX5;细胞比例显著下降[(21.70±12.48)%vs.(45.75±2.26)%;U=0.000,P<0.05]、IFN-γ表达水平显著升高[(16.74±1.36)%vs.(8.13±1.90)%;U=0.000,P<0.05],但TNF-α表达水平无显著改变[(67.98±9.20)%vs.(52.93±10.42)%;U=2.000,P>0.05]。弓形虫感染组小鼠uNK细胞表现出较强杀伤能力,且杀伤作用随着效应细胞/靶细胞比例升高逐渐增强;效应细胞/靶细胞比例为1∶1、5∶1、10∶1、20∶1时,感染组uNK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性分别为2.30%、4.32%、8.12%和12.65%,对照组分别为1.21%、1.63%、2.51%和3.22%。将人子宫淋巴细胞与弓形虫RH株速殖子共培养48 h后,弓形虫感染组人uNK细胞在子宫淋巴细胞中所占比例较对照组显著降低[弓形虫2∶1组vs.对照组:(6.61±1.75)%vs.(17.48±4.81)%;F=7.307,P<0.01]、绝对数量显著减少[弓形虫2∶1组vs.对照组:(12104±5726)个/孔vs.(65285±21810)个/孔;H=11.540,P<0.01]。弓形虫感染组uNK细胞中,CD56^(bright)CD16^(+)调节型NK细胞亚群比例较对照组减少(弓形虫2∶1组vs.对照组:(25.25±5.90)%vs.(36.03±4.51)%;F=3.213,P>0.05]、CD56^(dim)CD16^(+)杀伤型NK细胞亚群比例增加[弓形虫2∶1组vs.对照组:(11.15±2.15)%vs.(7.09±2.24)%,F=2.992,P>0.05],两者比值显著降低[弓形虫2∶1组vs.对照组:(2.37±0.92)vs.(5.58±2.39);H=8.228,P<0.05];CD11b^(+)CD27^(+)细胞比例显著上升[弓形虫2∶1组vs.对照组:(30.28±6.91)%vs.(17.48±4.67)%;H=6.556,P<0.05],IFN-γ[弓形虫2∶1组vs.对照组:(14.13±1.28)%vs.(15.19±1.64)%;F=1.639,P>0.05]、TNF-α表达水平无显著改变[弓形虫2∶1组vs.对照组:(54.76±10.02)%vs.(50.33±3.67)%;F=0.415,P>0.05]。弓形虫感染组人uNK细胞具有较强杀伤能力,且杀伤作用随着效应细胞/靶细胞比例升高逐渐增强;效应细胞/靶细胞比例为1∶1、5∶1、10∶1、20∶1时,感染组uNK细胞对K562细胞的杀伤活性分别为11.90%、28.11%、49.91%和73.35%,对照组分别为11.21%、21.63%、33.51%和48.22%。结论弓形虫感染对小鼠和人u NK细胞

关键词：刚地弓形虫子宫自然杀伤细胞母胎界面流产妊娠

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吡喹酮对日本血吸虫急性感染小鼠肾脏功能损伤的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年第2期39卷 200-209页

作者：赵成思秦敏谭明娟缪婷婷邵天业刘新建王勇南京医科大学病基础医学院原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室南京211166 南京医科大学附属南京医院(南京市第一医院)检验科南京210006

目的研究日本血吸虫感染急性期小鼠肾脏炎症的发生、发展进程,评价吡喹酮对急性期感染小鼠肾脏功能损伤的治疗效果。方法取55只C57BL/6J雌性小鼠,随机分为健康对照组(20只)、健康对照给吡喹酮组(5只)、感染组(20只)、感染给吡喹酮组(5只... 详细信息

目的研究日本血吸虫感染急性期小鼠肾脏炎症的发生、发展进程,评价吡喹酮对急性期感染小鼠肾脏功能损伤的治疗效果。方法取55只C57BL/6J雌性小鼠,随机分为健康对照组(20只)、健康对照给吡喹酮组(5只)、感染组(20只)、感染给吡喹酮组(5只)和吡喹酮杀虫组(5只)等5组,其中后3组每只小鼠均经腹部皮肤感染(14±2)条日本血吸虫尾蚴。感染后第6周开始给予吡喹酮治疗,健康对照给吡喹酮组和感染给吡喹酮组给药剂量为300 mg/kg,每12小时给一次药,连续给药2周;吡喹酮杀虫组给药剂量为250mg/kg,连续给药3天。健康对照组和感染组小鼠在感染后第1、3、6和8周各剖杀5只,健康对照给吡喹酮组、感染给吡喹酮组和吡喹酮杀虫组在感染后第8周剖杀,收集各组各时间点小鼠的尿样和血样,检测尿蛋白和血清肌酐水平,以评价肾功能变化。取小鼠肾脏,制备病理切片,经HE染色后,观察各组小鼠肾脏组织病理学改变;经F4/80免疫组化染色,观察各组小鼠肾脏中巨噬细胞浸润情况。分别用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blotting检测各组小鼠肾脏炎症相关因子(TNF-α、TGF-β、IL-1β、IL-6)和巨噬细胞趋化因子(CCL2)的mRNA相对转录水平和蛋白表达水平。结果感染后第1、3、6和8周,感染组小鼠的尿蛋白含量分别为(1.67±0.52)、(2.17±0.41)、(3.00±0.89)和(4.00±0.63) g/L,均高于健康对照组小鼠(P<0.01);感染组小鼠的血清肌酐水平分别为(10.01±1.45)、(13.00±2.12)、(14.33±1.21)和(19.00±2.54)μmol/L,均高于健康对照组小鼠(P>0.05或P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示,感染组小鼠的炎症因子TNF-αmRNA相对转录水平分别为2.47±0.51、3.14±1.43、1.83±0.31和7.48±5.54, TGF-βm RNA相对转录水平分别为0.94±0.24、2.80±1.07、2.72±0.88和3.03±0.36, IL-1βmRNA相对转录水平分别为1.49±0.28、4.32±1.85、2.08±0.69和2.81±0.73, IL-6 mRNA相对转录水平分别为1.96±0.31、1.48±0.35、2.38±1.17和2.85±1.32,均高于对应时间点的健康对照组小鼠(P<0.05或P<0.01)。Western blotting分析结果显示,感染组小鼠的TNF-α和IL-1β蛋白表达水平均较健康对照组升高。感染组小鼠的巨噬细胞趋化因子CCL2 mRNA相对转录水平为1.84±0.17、3.42±0.85、3.03±1.00和2.63±0.43,均高于健康对照组小鼠(P<0.01)。肾脏病理切片HE染色结果显示,感染组小鼠肾脏组织中大量炎性细胞浸润,肾小球增大,肾小球系膜细胞增生。免疫组化分析结果显示,感染组小鼠肾脏F4/80阳性区域面积为(1.99±0.49)%、(4.27±0.90)%、(6.71±1.38)%和(9.83±1.91)%,均高于健康对照组(P<0.01)。经吡喹酮2周疗程治疗后,感染给吡喹酮组小鼠的肾脏组织损伤减轻,肾小球系膜细胞增生缓解。与感染组比较,感染给吡喹酮组小鼠的尿蛋白含量[(2.67±0.52) g/L]减少,血清肌酐水平[(14.17±2.88)μmol/L]下降,F4/80阳性区域面积[(5.92±1.81)%]减少,TGF-β(0.99±0.23)和IL-6(1.24±0.53)m RNA相对转录水平下降(P<0.05或P<0.01), TNF-α和IL-1β的蛋白表达减少;而吡喹酮杀虫组与感染组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与感染组(5.29±2.98、2.81±0.73、2.63±0.43)比较,感染给吡喹酮组(0.98±0.36、0.95±0.33、0.80±0.27)和吡喹酮杀虫组的TNF-α(1.56±0.66)、IL-1β(1.76±0.76)和CCL2mRNA(1.41±0.48)相对转录水平均下降(P<0.05或P<0.01)。结论日本血吸虫感染小鼠在感染初期和急性期发生肾脏炎症,肾脏组织中伴有巨噬细胞浸润,肾小球和肾功能损伤。吡喹酮2周疗程治疗可明显改善急性日本血吸虫感染小鼠的肾脏炎症和肾功能。

关键词：日本血吸虫肾损伤炎症吡喹酮巨噬细胞

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“虚实结合”实验教学新模式在《人体寄生虫学》教学中的应用——以“血吸虫综合实验”为例

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中国血吸虫病防治杂志 2023年第2期35卷 180-183,216页

作者：陈晓军周莎邱竞帆陈琳徐志鹏季旻珺郭静张戎南京医科大学基础医学院病原生物学系、江苏省现代病原生物学重点实验室江苏南京211166 南京医科大学人事处江苏南京211166 南京医科大学基础医学院基础医学实验教学中心江苏南京211166

“新医科”背景下,信息技术已成为推动高等教育发展的重要驱动力之一。南京医科大学基础医学实验教学中心联合基础医学院病原生物学系将信息技术与实验教学相融合,设计和构建了“虚实结合”实验教学新模式,并应用于《人体寄生虫学》教学... 详细信息

“新医科”背景下,信息技术已成为推动高等教育发展的重要驱动力之一。南京医科大学基础医学实验教学中心联合基础医学院病原生物学系将信息技术与实验教学相融合,设计和构建了“虚实结合”实验教学新模式,并应用于《人体寄生虫学》教学,取得了良好的教学效果。该模式有助于学生加深对人体寄生虫学基础知识的理解,锻炼实践操作技能,培养医学生道德素养和综合能力。本文以“血吸虫综合实验”为例,对教学方案和实施、教学效果和评价、教学体会等进行了总结。

关键词：人体寄生虫学血吸虫虚实结合实验教学混合式教学

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吡喹酮对日本血吸虫急性感染小鼠肾脏炎症损伤的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2021年

作者：赵成思秦敏谭明娟缪婷婷邵天业刘新建王勇南京医科大学病基础医学院原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室南京医科大学附属南京医院(南京市第一医院)检验科

目的研究日本血吸虫感染急性期小鼠肾脏炎症的发生、发展进程,评价吡喹酮对急性期小鼠肾脏炎症损伤的治疗效果。方法取55只C57BL/6J雌性小鼠,随机分为健康对照组(20只)、健康对照给吡喹酮组(5只)、感染组(20只)、感染给吡喹酮组(5只)... 详细信息

目的研究日本血吸虫感染急性期小鼠肾脏炎症的发生、发展进程,评价吡喹酮对急性期小鼠肾脏炎症损伤的治疗效果。方法取55只C57BL/6J雌性小鼠,随机分为健康对照组(20只)、健康对照给吡喹酮组(5只)、感染组(20只)、感染给吡喹酮组(5只)和吡喹酮杀虫组(5只)等5组,其中后3组每只小鼠均经腹部皮肤感染(14±2)条日本血吸虫尾蚴。感染后第6周开始给予吡喹酮治疗,健康对照给吡喹酮组和感染给吡喹酮组给药剂量为300 mg/kg,每12小时给一次药,连续给药两周;吡喹酮杀虫组给药剂量为250 mg/kg,连续给药3天。健康对照组和感染组小鼠在感染后第1、3、6和8周各剖杀5只,健康对照给吡喹酮组、感染给吡喹酮组和吡喹酮杀虫组在感染后第8周剖杀,收集各组各时间点的小鼠尿样和血样,检测尿蛋白和血清肌酐水平,以评价肾功能变化。取小鼠肾脏,制备病理切片,经HE染色后,观察各组小鼠肾脏组织病理学变化;经F4/80免疫组化染色,观察各组小鼠肾脏中巨噬细胞浸润情况。分别用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western blotting检测各组小鼠肾脏炎症相关因子TNF-α、TGF-β、IL-1β、IL-6和巨噬细胞趋化因子CCL2的mRNA相对转录水平和蛋白表达水平。结果感染后第1、3、6和8周,感染组小鼠尿蛋白含量分别为(0.25±0.08)、(0.42±0.29)、(1.43±1.25)和(2.17±1.60) g/L,均高于健康对照组(P<0.01);感染组的血清肌酐水平分别为(10.01±1.45)、(13.00±2.12)、(14.33±1.21)和(19.00±2.54)μmol/L,均高于健康对照组(P>0.05或P<0.01)。qRT-PCR检测结果显示,感染组的炎症因子TNF-αmRNA相对转录水平分别为2.47±0.51、3.14±1.43、1.83±0.31和7.48±5.54,TGF-βmRNA相对转录水平分别为0.94±0.24、2.80±1.07、2.72±0.88和3.03±0.36,IL-1βmRNA相对转录水平分别为1.49±0.28、4.32±1.85、2.08±0.69和2.81±0.73,IL-6 mRNA相对转录水平分别为1.96±0.31、1.48±0.35、2.38±1.17和2.85±1.32,均高于对应时间点的健康对照组(P<0.05或P<0.01)。Western blotting分析结果显示,感染组的TNF-α和IL-1β蛋白表达均较健康对照组增加。感染组的巨噬细胞趋化因子CCL2 mRNA相对转录水平为1.84±0.17、3.42±0.85、3.03±1.00和2.63±0.43,均高于健康对照组(P<0.01)。肾脏病理切片HE染色结果显示,感染组小鼠大量炎性细胞浸润,肾小球增大,肾小球系膜细胞增生。免疫组化结果显示,感染组小鼠肾脏F4/80阳性区域面积为(1.99±0.49)%、(4.27±0.90)%、(6.71±1.38)%和(9.83±1.91)%,均高于健康对照组(P<0.01)。经吡喹酮两周疗程治疗后,感染给吡喹酮组小鼠的肾脏组织损伤减轻,肾小球系膜细胞增生缓解。与感染组比较,感染给吡喹酮组的尿蛋白含量[(1.33±0.52) g/L]减少、血清肌酐水平[(14.17±2.88)μmol/L]下降、F4/80阳性区域面积[(5.92±1.81)%]减少、TGF-β(0.99±0.23)和IL-6 (1.24±0.53) mRNA相对转录水平下降(P <0.05或P <0.01)、TNF-α和IL-1β的蛋白表达减少;而吡喹酮杀虫组与感染组差异无统计学意义(P>0.05)。与感染组(5.29±2.98、2.81±0.73、2.63±0.43)比较,感染给吡喹酮组(0.98±0.36、0.95±0.33、0.80±0.27)和吡喹酮杀虫组的TNF-α(1.56±0.66)、IL-1β(1.76±0.76)和CCL2 mRNA (1.41±0.48)相对转录水平均下降(P<0.05或P<0.01)。结论日本血吸虫病小鼠在感染初期和急性期发生肾脏炎症,肾脏组织中伴有巨噬细胞浸润,肾小球和肾功能损伤。吡喹酮两周疗程治疗可明显改善急性日本血吸虫病小鼠肾脏炎症和肾功能。

关键词：日本血吸虫肾损伤炎症吡喹酮巨噬细胞

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淡色库蚊自然种群沃尔巴克氏体感染致细胞质不亲和相关基因初探

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中国血吸虫病防治杂志 2020年第5期32卷 517-521页

作者：王英藩何坤郭蔚王海防张东辉公茂庆季旻珺陈琳南京医科大学基础医学院南京211166 南京医科大学影像学院山东省医学科学院、山东省寄生虫病防治研究所南京医科大学国际教育学院南京医科大学病原生物学系、江苏省现代病原生物学重点实验室

目的探讨我国东部地区3个地理种群淡色库蚊由沃尔巴克氏体导致细胞质不亲和的相关基因,为制定基于沃尔巴克氏体的蚊媒病防制措施提供参考。方法采用正反交实验确定江苏南京、江苏无锡和山东唐口3个淡色库蚊自然种群间细胞质不亲和,应用... 详细信息

目的探讨我国东部地区3个地理种群淡色库蚊由沃尔巴克氏体导致细胞质不亲和的相关基因,为制定基于沃尔巴克氏体的蚊媒病防制措施提供参考。方法采用正反交实验确定江苏南京、江苏无锡和山东唐口3个淡色库蚊自然种群间细胞质不亲和,应用PCR技术检测淡色库蚊沃尔巴克氏体感染情况,采用荧光定量PCR法检测沃尔巴克氏体wsp基因和沃尔巴克氏体基因组中Octomom增殖区域WD0513基因表达水平。结果江苏南京与无锡淡色库蚊自然种群双向亲和(t=0.57、0.15,P均>0.05),山东唐口和江苏无锡淡色库蚊自然种群双向不亲和(t=63.81、43.51,P均<0.01),江苏南京和山东唐口淡色库蚊自然种群双向不亲和(t=39.62、43.12,P均<0.01)。3个地理种群淡色库蚊基因组均扩增出wsp基因条带。荧光定量PCR检测发现,3个自然种群淡色库蚊感染的沃尔巴克氏体wsp基因表达水平不同,但差异无统计学意义(F=2.15,P>0.05)。山东唐口与江苏南京、山东唐口与江苏无锡淡色库蚊自然种群WD0513基因表达水平间差异均有统计学意义(q=8.42、7.84,P均<0.05),但江苏南京与江苏无锡淡色库蚊自然种群WD0513基因表达水平间差异无统计学意义(q=0.40,P>0.05)。结论江苏南京、江苏无锡和山东唐口3个地理种群淡色库蚊所感染沃尔巴克氏体数量不同,淡色库蚊自然种群感染沃尔巴克氏体导致的细胞质不亲和可能与WD0513基因表达量相关。

关键词：淡色库蚊沃尔巴克氏体细胞质不亲和 WD0513基因

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日本血吸虫成虫抗原通过ROS诱导人LX-2肝星状细胞NLRP3炎症小体活化和胶原表达

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寄生虫与医学昆虫学报 2018年第2期25卷 71-79页

作者：朱燕楠缪婷婷王伟陆忠奎刘劲峰王勇南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室江苏南京211100

为了探讨日本血吸虫成虫抗原(SWA)对LX-2细胞NLRP3炎症小体活化和纤维化相关基因表达的影响,以及活性氧(ROS)在其中的作用,本文首先采用不同浓度(0、25、50、100μg/m L)的SWA刺激LX-2细胞,通过实时荧光定量PCR (Real-time PCR)和Wester... 详细信息

为了探讨日本血吸虫成虫抗原(SWA)对LX-2细胞NLRP3炎症小体活化和纤维化相关基因表达的影响,以及活性氧(ROS)在其中的作用,本文首先采用不同浓度(0、25、50、100μg/m L)的SWA刺激LX-2细胞,通过实时荧光定量PCR (Real-time PCR)和Western blot检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA和ColⅠ的基因和蛋白表达, ELISA检测细胞IL-1β的分泌水平;同时使用CCK-8 (Cell Counting Kit-8)法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞LDH的释放;流式细胞术检测SWA刺激对LX-2细胞中ROS产生的影响;之后使用ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)处理细胞,检测NLRP3、IL-1β、Caspase-1、α-SMA、ColⅠ基因和蛋白的表达水平。结果显示,当SWA的浓度达100μg/m L时,LX-2细胞内NLRP3、Caspase-1、IL-1β、α-SMA和ColⅠ的m RNA的表达与对照组相比均明显升高,同时相关蛋白的表达和IL-1β的分泌也显著升高。流式检测结果显示,SWA刺激LX-2细胞后能显著增加细胞内ROS的生成,并在NAC处理后,可见明显抑制细胞内ColⅠ和炎症小体活化相关的基因和蛋白的表达。结果提示,SWA可以诱导LX-2细胞内炎症小体活化和胶原表达,并且ROS反应可能在介导NLRP3活化中发挥重要的作用。

关键词： LX-2细胞 SWA NLRP3炎症小体 ROS 肝纤维化

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紫苏精油纳米乳液对非成虫期淡色库蚊杀灭活性的初步探讨

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寄生虫与医学昆虫学报 2024年第2期31卷 104-110页

作者：张文星张颖张瑞敏李瑞沈波南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室南京211166 南京医科大学药学院南京211166

目的探讨紫苏精油及紫苏精油纳米乳液对淡色库蚊Culex pipiens pallens幼虫、蛹的毒性活性,为开发安全有效的植物源杀蚊剂提供科学依据。方法测定紫苏精油和纳米乳液对淡色库蚊幼虫和蛹的杀灭活性、持效性以及对非靶标生物的毒性。结果... 详细信息

目的探讨紫苏精油及紫苏精油纳米乳液对淡色库蚊Culex pipiens pallens幼虫、蛹的毒性活性,为开发安全有效的植物源杀蚊剂提供科学依据。方法测定紫苏精油和纳米乳液对淡色库蚊幼虫和蛹的杀灭活性、持效性以及对非靶标生物的毒性。结果紫苏精油对一龄、二龄、三龄幼虫LC_(50)分别为25.4、43.0、46.6 mg/L;紫苏精油纳米乳液对一龄、二龄、三龄幼虫的LC_(50)分别为<25.0、35.1、38.1 mg/L。在幼虫的各阶段中,同等浓度下,纳米乳液的杀灭活性明显强于纯精油;在蛹期,同一浓度下,24、48 h精油组死亡率分别为1.3%、2.0%,而精油纳米乳组分别为34.7%、40%。在高浓度下,精油杀蚊幼活性仅维持1~2 d,而纳米乳液的杀灭活性可延长至5 d;精油和纳米乳对于常见水生植物是无毒的;对于水中的鱼类,纳米乳包裹精油后毒性大幅度降低。结论与紫苏精油纯液相比,纳米乳液制剂更加稳定,对淡色库蚊幼虫、蛹的杀灭活性增高,对非靶标生物毒性减弱。紫苏精油纳米乳液有望作为一种绿色、可持续、有效的杀蚊剂,应用于现场非成虫期蚊媒控制。

关键词：淡色库蚊紫苏精油纳米乳液杀幼剂蚊媒防制

来源：评论

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