检索结果-内蒙古大学图书馆

中国菌物学会2018年学术年会

作者：龙南彪曾利平乔善磊李磊仲国维湖南邵阳学院医学检验学院南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室南京医科大学公共卫生学院卫生检验学系现代毒理学教育部重点实验室

侵袭性曲霉病（Invasive Aspergillosis, IA）感染的发生呈现上升趋势,仅次于假丝酵母（Candida）引起的真菌感染,病死率达60%-100%。烟曲霉是所有曲霉引起的感染中最常见的致病菌。治疗深部曲霉感染的临床应用一线药物是三唑类抗真菌药... 详细信息

侵袭性曲霉病（Invasive Aspergillosis, IA）感染的发生呈现上升趋势,仅次于假丝酵母（Candida）引起的真菌感染,病死率达60%-100%。烟曲霉是所有曲霉引起的感染中最常见的致病菌。治疗深部曲霉感染的临床应用一线药物是三唑类抗真菌药物,然而已经发现越来越多的临床分离菌对唑类药物产生耐药性,还有高比例的菌株出现多药耐药性。本项目从根癌农杆菌诱导的烟曲霉随机突变库2000株菌中筛选到8株三唑类药物耐药菌,对其中1株分离鉴定到基因Afssn3,该基因在烟曲霉中被预测作为RNA聚合酶II的转录辅因子并对基因的转录起负调控作用。通过构建荧光蛋白标记菌株我们确定了AfSSN3-GFP是定位在细胞核中发挥功能的。通过基因敲除我们发现相比野生株,?Afssn3敲除株最小抑菌浓度MIC值有2倍升高,生物量和扫描电镜的检测发现是生物膜增多导致的,所以我们设计了一系列实验检测生物膜相关成分的改变以解析其造成耐药的机制。首先通过气质联用GC-MS的方法对敲除株和野生株进行早期代谢差异物质进行普筛,发现相比于野生型,?Afssn3细胞内葡萄糖和各种氨基酸都大量减少。其次我们通过液质联用LC-MS的方法对敲除菌株和野生株进行晚期期代谢差异物质进行了普筛,分析发现相比于野生型,?Afssn3细胞内主要有两大类物质积累量增多:（1）鞘脂代谢中间产物的积累量增多;（2）葡萄糖和半乳糖组成的多糖结构增多。由此我们推测:（1）?Afssn3利用了大量葡萄糖半乳糖等单糖参与合成了胞外多糖物质;（2）消耗利用的氨基酸中丝氨酸+辅酶a参与了合成积累了鞘脂中间产物。进一步通过葡萄糖添加和氨基酸添加验证了该推测。最后我们通过转录组测序发现?Afssn3细胞中有4个药物外排泵基因有上调趋势。综上,我们推测?Afssn3通过大量合成并胞外多糖、鞘脂合成通路中间物质的累积和药泵基因上调而实现的生物膜耐药。

关键词：烟曲霉 Afssn3基因生物膜胞外多糖鞘脂合成中间产物药物外排泵

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后血吸虫病传播阻断阶段：肝纤维化问题

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015年第6期33卷 404-406页

作者：王勇南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室南京201129

随着我国血吸虫病流行区逐渐达到传播阻断标准、进入后传播阻断阶段,血吸虫病肝纤维化正成为不容忽视的突出问题。在实现传播阻断和传播控制的地区,应适时调整血防工作的重点,将对血吸虫病肝纤维化的监测与干预纳入常规工作,以减少晚期... 详细信息

随着我国血吸虫病流行区逐渐达到传播阻断标准、进入后传播阻断阶段,血吸虫病肝纤维化正成为不容忽视的突出问题。在实现传播阻断和传播控制的地区,应适时调整血防工作的重点,将对血吸虫病肝纤维化的监测与干预纳入常规工作,以减少晚期血吸虫病的发生。

关键词：晚期血吸虫病传播阻断肝纤维化干预

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基于颜色判定的RT-LAMP技术检测HCoV-NL63冠状病毒基因

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病毒学报 2016年第1期32卷 56-61页

作者：耿合员汪圣强谢晓谦肖雨张汀谭文杰苏川无锡出入境检验检疫局中国检验检疫科学研究院(无锡)人体携带病原体研究室无锡214101 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒病应急技术中心北京102206 南京医科大学基础医学院江苏省现代病原生物学重点实验室南京210029

建立了一种适合于国境口岸简便、快速、灵敏和特异检测人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)的核酸检测方法。通过建立基于颜色判定的逆转录环介导等温扩增(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)技术,针对HCoV-NL63核衣壳蛋白(Nucleocapsid,N)基因序列设计出6条特异性引物,在等温条件下(63℃)进行扩增反应60min,在扩增前加入钙黄绿素作为反应指示剂,并结合浊度仪进行实时监测,以最终反应颜色变化作为结果判断标准。利用该方法对同种属其他人冠状病毒、诺如病毒、流感病毒进行检测,以分析该方法的诊断特异性。应用该方法对梯度稀释的HCoV-NL63病毒RNA进行检测,以分析该方法的诊断灵敏性,并与常规real-time RT-PCR方法进行比较。结果显示,本研究建立的基于颜色判定的RT-LAMP方法在短时间内(40min)即可达到对HCoV-NL63的快速检测。该检测方法与加入其它病毒RNA模板溶液颜色均不产生改变,具有较高的检测特异性。检测灵敏性最低检测下限为1 600拷贝/反应。本研究建立的基于颜色判定的RT-LAMP方法可实现对HCoV-NL63冠状病毒现场快速检测,具有在国境口岸以及基层医疗机构和疫区现场推广应用的潜力。

关键词： HCoV-NL63 RT-LAMP 快速检测

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吡喹酮对日本血吸虫感染鼠脾脏巨噬细胞功能的影响

吡喹酮对日本血吸虫感染鼠脾脏巨噬细胞功能的影响

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十五次全国学术会议暨第六次国际寄生虫学学术研讨会

作者：王伟周春雷刘劲峰孔德龙郭宏飞王勇南京医科大学基础医学院病原生物学系江苏省现代病原生物学重点实验室

目的:脾脏肿大及脾功能亢进是日本血吸虫病慢性期后常见的体征,对此目前尚无有效的内科治疗方法。脾脏免疫细胞功能改变是导致脾脏肿大的关键因素。吡喹酮作为经典的抗血吸虫药物,过去人们主要关注其杀血吸虫作用;脾脏巨噬细胞作为介导... 详细信息

目的:脾脏肿大及脾功能亢进是日本血吸虫病慢性期后常见的体征,对此目前尚无有效的内科治疗方法。脾脏免疫细胞功能改变是导致脾脏肿大的关键因素。吡喹酮作为经典的抗血吸虫药物,过去人们主要关注其杀血吸虫作用;脾脏巨噬细胞作为介导脾脏炎症和脾功能亢进病理过程的重要细胞亚群,吡喹酮是否能影响其数量和功能进而缓解脾肿大及脾功能亢进,尚未见详细研究报道。本研究从脾脏巨噬细胞入手,观察血吸虫感染及吡喹酮治疗前后脾脏巨噬细胞数量及功能变化情况,以期揭示吡喹酮治疗血吸虫感染后脾脏肿大及脾功能亢进的作用和机制。材料与方法:我们建立日本血吸虫感染12周小鼠模型,分别采用吡喹酮3天化疗、持续4周化疗及相同疗程甲氟喹对照等干预,观察吡喹酮对脾脏肿大的治疗效果;采用流式分析治疗前后脾脏F4/80+CD11b+巨噬细胞数量变化,及F4/80+CD11b+CD16/32+和F4/80+CD11b+CD206+巨噬细胞的比例变化。结果:感染血吸虫16周小鼠经吡喹酮持续4周化疗后,肿大的脾脏明显缩小,因炎症损伤而破坏的脾脏组织结构得以明显改善。并且,吡喹酮持续4周化疗显著下调感染血吸虫16周鼠脾脏的巨噬细胞数量,对其分泌炎性因子有一定抑制作用。吡喹酮持续4周化疗使感染血吸虫16周鼠脾脏的M1型巨噬细胞比例下调。而甲氟喹治疗对照组无相应作用。结论及意义:脾脏是人体重要的免疫器官,脾脏肿大和脾功能亢进是血吸虫病的主要病理损伤。本研究发现,血吸虫感染慢性期小鼠肿大的脾脏中,巨噬细胞数量明显增多,且脾脏呈现以M1型巨噬细胞为主炎性应答状态。吡喹酮持续4周化疗具有恢复脾脏肿大、改善脾脏组织结构和下调M1型巨噬细胞比例作用,且效果比吡喹酮3天杀虫治疗组显著。本研究为血吸虫病防治中拓展吡喹酮的使用提供了依据。鉴于多种病因可导致的脾脏肿大及脾功能亢进,因此,本研究结果也为血吸虫感染以外的其他病因所致的脾脏肿大伴脾功能亢进的治疗,提供了可资参考的资料。

关键词：血吸虫病脾脏肿大巨噬细胞吡喹酮

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