检索结果-内蒙古大学图书馆

江苏农业学报 2003年第4期19卷 228-232页

作者：余向阳高蓉廖海丰刘贤进江苏省农业科学院植物保护研究所江苏南京210014 南京医科大学应用毒理研究所江苏南京210029

　采用药膜法测定17种植物次生代谢物质对韭菜根蛆幼虫的室内杀虫活性。结果表明,其中11种化合物对韭蛆有不同程度的杀虫活性,毒力大小顺序依次为:黄花碱(90 74%)、野靛碱(83 61%)、脱氢苦豆碱(79 63%)、乙酰埃克辛碱(50 00%)、草乌素(4... 详细信息

　采用药膜法测定17种植物次生代谢物质对韭菜根蛆幼虫的室内杀虫活性。结果表明,其中11种化合物对韭蛆有不同程度的杀虫活性,毒力大小顺序依次为:黄花碱(90 74%)、野靛碱(83 61%)、脱氢苦豆碱(79 63%)、乙酰埃克辛碱(50 00%)、草乌素(48 14%)、苦参碱(41 71%)、槐定碱(40 74%)、氧化苦参碱(38 07%)、脱氧乙酰乌头碱(36 78%)、查斯漫宁(35 49%)和苦豆碱(27 14%)。其中分离自批针叶黄花的黄华碱以及分离自苦豆草的野靛碱和脱氢苦豆碱对韭蛆的杀虫活性明显高于其他8种化合物,24h测定结果,对韭蛆的致死中浓度为:黄华碱243 99mg/L、野靛碱316 20mg/L、脱氢苦豆碱404 38mg/L。本文还以乙酰胆碱酯酶抑制剂的酶法筛选为例,对新型杀虫机理天然产物筛选方法进行了初步探讨。

关键词：植物次生代谢物质韭蛆毒力筛选室内杀虫活性根蛆幼虫

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测定每日尿液孕二醇-3-葡糖苷酸评价卵巢黄体功能

测定每日尿液孕二醇-3-葡糖苷酸评价卵巢黄体功能

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第四届中国新医药博士论坛

作者：陈海燕邱清宋玲徐希平王心如南京医科大学-哈佛大学公共卫生学院合作研究中心南京医科大学应用毒理江苏省重点实验室南京医科大学生殖医学江苏省重点实验室

观察正常育龄妇女尿液孕酮代谢产物孕二醇-3-葡糖苷酸(PdG)在整个月经周期的变化规律以及不同黄体功能PdG的变化。32名育龄妇女每日自我收集晨尿,至少收集1个或2个完整月经周期尿样,同时测定基础体温。利用酶免法测定每份尿样PdG、卵泡... 详细信息

观察正常育龄妇女尿液孕酮代谢产物孕二醇-3-葡糖苷酸(PdG)在整个月经周期的变化规律以及不同黄体功能PdG的变化。32名育龄妇女每日自我收集晨尿,至少收集1个或2个完整月经周期尿样,同时测定基础体温。利用酶免法测定每份尿样PdG、卵泡刺激素(FSH)并同时测定肌酐,用肌酐校正PdG、FSH以排除尿液浓缩或稀释对激素水平的影响。选择其中的月经周期长度为25～32d并有双相型基础体温15名妇女共25个月经周期作为正常周期,分析正常月经周期中每天PdG的变化曲线,同时比较不排卵、黄体功能不全、早早孕丢失、妊娠妇女个体PdG的变化。受前一周期黄体后期孕酮水平的影响,正常月经周期d1-d4 PdG逐渐回落到基础水平,其余卵泡期每天PdG处于基础水平,排卵后PdG渐升高,至月经周期d 21.7±3.2升高达高峰,峰值为11.2±5.4μg/mgCr,以后逐渐下降,黄体期维持恒定,平均13.5±1.0d。不排卵、黄体功能不全以及妊娠后个体与正常PdG变化曲线相比均有特征性的变化。酶免疫法连续测定每天尿液PdG可以用来评价卵巢黄体功能,在每个月经周期中PdG峰的高度和宽度是评价黄体功能的重要参数,其诊断标准有待建立。

关键词：尿孕二醇-3-葡糖苷酸孕酮黄体功能月经周期

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三种鬼臼毒素类似物抗甜菜夜蛾的生物活性研究

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中国卫生监督杂志 2005年第2期12卷 156-158页

作者：陈宇狄旭东高蓉田瑄肖杭江苏省卫生监督所江苏南京210029 南京医科大学应用毒理研究所江苏南京210029 兰州大学应用有机国家重点实验室甘肃兰州730000

室内测定了脱氧鬼臼毒素、β-阿朴苦鬼臼、鬼臼毒素三种鬼臼毒素类似物对3龄甜菜夜蛾幼虫的生长发育抑制和毒杀活性。结果表明:(1)两种浓度0.01mg·ml-1、0.001mg·ml-1下,脱氧鬼臼毒素、β-阿朴苦鬼臼、鬼臼毒素对甜菜夜蛾幼... 详细信息

室内测定了脱氧鬼臼毒素、β-阿朴苦鬼臼、鬼臼毒素三种鬼臼毒素类似物对3龄甜菜夜蛾幼虫的生长发育抑制和毒杀活性。结果表明:(1)两种浓度0.01mg·ml-1、0.001mg·ml-1下,脱氧鬼臼毒素、β-阿朴苦鬼臼、鬼臼毒素对甜菜夜蛾幼虫生长发育均有抑制作用,第7天时,生长发育抑制率分别为35.33%、29.33%、32.7%、9.8%、26.43%、4.6%,且生长发育抑制率之间存在显著差异。(2)三种化合物两种浓度下,对甜菜夜蛾幼虫均有毒杀作用,随观察时间延长,其死亡率增高,第17天时死亡率分别为98.33%、63.33%、76.67%、56.67%、16.67%、26.67%,与对照相比较,均有显著性差异。根据生长发育抑制、毒杀活性的试验结果分析认为:三种鬼臼毒素类似物对甜菜夜蛾的毒杀、生长发育抑制活性的差异可能与该类化合物结构有关。

关键词：鬼臼毒素类似物活性研究甜菜夜蛾幼虫生长发育生物试验结果分析显著性差异化合物结构抑制作用毒杀作用时间延长抑制活性抑制率死亡率脱氧 β- 浓度天时

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环氧化酶Ⅱ基因克隆及表达

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药物生物技术 2002年第3期9卷 137-140页

作者：汪志军张娟谢晨王旻张玉彬周建伟李爱萍张奕华中国药科大学分子生物学实验室南京210009 南京医科大学应用毒理学实验室南京210029 中国药科大学新药研究中心南京210009

利用RT-PCR技术从NIH 3T3细胞中克隆出环氧化酶ⅡcDNA,全长1815bp,测序分析表明与文献报道已知相符,构建真核表达载体。用阳离子脂质体介导转染的方法转染至宿主细胞HEK293细胞中,G418筛选出稳定转染的细胞克隆。加入底物花生四烯酸,通... 详细信息

利用RT-PCR技术从NIH 3T3细胞中克隆出环氧化酶ⅡcDNA,全长1815bp,测序分析表明与文献报道已知相符,构建真核表达载体。用阳离子脂质体介导转染的方法转染至宿主细胞HEK293细胞中,G418筛选出稳定转染的细胞克隆。加入底物花生四烯酸,通过测定PGE2含量的变化判断酶活,结果表明重组质粒能够表达环氧化酶。

关键词：基因克隆环氧化酶Ⅱ RT-PCR技术转染 PGE2 基因表达质粒

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葡萄籽原花青素对鼠伤寒沙门氏菌的抗诱变作用

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癌变．畸变．突变 2002年第3期14卷 191-194页

作者：孙志广赵万洲陆茵唐玲芳张珍玲张世玮江苏省中医院消化内科江苏南京210029 南京中医药大学中药学院南京医科大学应用毒理教研室

目的 :观察葡萄 (Vitisvinifera)籽原花青素的抗诱变作用。方法 :以SalmonellatyphimuriumTA97、TA98、TA10 0 、TA10 2作为标准试验菌株进行Ames试验。结果 :在不加S9条件下 ,原花青素能显著抑制Dexon诱发的TA97、TA98回复突变 ,叠氮... 详细信息

目的 :观察葡萄 (Vitisvinifera)籽原花青素的抗诱变作用。方法 :以SalmonellatyphimuriumTA97、TA98、TA10 0 、TA10 2作为标准试验菌株进行Ames试验。结果 :在不加S9条件下 ,原花青素能显著抑制Dexon诱发的TA97、TA98回复突变 ,叠氮钠诱发的TA10 0 回复突变 ,丝裂霉素C诱发的TA10 2 回复突变 ;在不加S9条件下 ,原花青素能显著抑制 2 氨基芴诱发的TA97、TA98及TA10 0 回复突变 ,而对 1,8 二羟基蒽醌诱发的TA10 2 回复突变抑制作用较强。结论

关键词：原花青素葡萄 Ames试验诱变剂伤寒沙门氏菌抗诱变作用

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JWA参与调节N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍诱导的HBE细胞凋亡

JWA参与调节N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍诱导的HBE细胞凋亡

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第五节全国环境与职业医学研究生学术研讨会

作者：徐艳琼李爱萍陈瑞周建伟 210029 南京江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室南京医科大学公共卫生学院

[目的]探讨JWA在化学致突变物N-甲基-N‘-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HBE细胞凋亡中的作用及可能机制. [方法]用MTT法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Westernblot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检... 详细信息

[目的]探讨JWA在化学致突变物N-甲基-N‘-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HBE细胞凋亡中的作用及可能机制. [方法]用MTT法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Westernblot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检测JWA基因近端启动子的结合蛋白. [结果]MNG处理HBE细胞24h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系;MNNG诱导HBE细胞凋亡过程中伴随着JWA蛋白表达升高.进一步用2μg/mlMNNG处理HBE细胞24h后,用Southwestern方法从HBE细胞核蛋白中检测出一与JWA近端启动子能特异性结合的转录因子. [结论]MNNG激活HBE细胞中核转录因子与JWA近端启动子结合后可能激活了细胞内凋亡信号通路.

关键词： HBE细胞凋亡 JWA基因核转录因子信号通路 MNNG激活

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甲钴胺对脑缺血再灌注损伤大鼠细胞凋亡及细胞色素C表达的影响

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中华老年心脑血管病杂志 2015年第11期17卷 1193-1196页

作者：苏建华陈玉芳丁新生唐金荣肖杭林伟江苏大学附属金坛医院神经内科 213200 常州市第四人民医院病理科南京医科大学第一附属医院神经内科南京医科大学应用神经毒理研究所

目的探讨甲钴胺对脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞色素C表达的影响。方法选择Wistar大鼠132只,随机分为假手术组(24只)、模型组(27只)、尼莫地平组(27只)、甲钴胺低剂量组(27只)、甲钴胺高剂量组(27只)。采用改良线栓法栓塞大脑中动脉3h制... 详细信息

目的探讨甲钴胺对脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞色素C表达的影响。方法选择Wistar大鼠132只,随机分为假手术组(24只)、模型组(27只)、尼莫地平组(27只)、甲钴胺低剂量组(27只)、甲钴胺高剂量组(27只)。采用改良线栓法栓塞大脑中动脉3h制作大鼠脑缺血再灌注模型;分别于6、12、24h用TUNEL法检测大脑皮质细胞凋亡、Western blot检测大脑皮质细胞色素C蛋白的表达。结果尼莫地平组、甲钴胺低、高剂量组6、12、24h阳性细胞数较模型组明显降低(P<0.01);模型组6、12、24h细胞色素C表达较假手术组明显升高(P<0.05,P<0.01);尼莫地平组、甲钴胺低、高剂量组6、12、24h细胞色素C表达较模型组明显降低(P<0.05,P<0.01);甲钴胺高剂量组6、12h细胞色素C表达较甲钴胺低剂量组明显降低(0.466±0.046 vs 0.617±0.033,P<0.01;0.163±0.081 vs 0.552±0.132,P<0.05)。结论甲钴胺对脑缺血再灌注损伤保护机制可能与抑制细胞色素C蛋白表达有关,以高剂量效果较好。

关键词：细胞色素C类细胞凋亡尼莫地平脑缺血再灌注损伤甲钴胺

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JWA编码区PKC磷酸化位点突变对TPA诱导MCF-7细胞分化的影响

JWA编码区PKC磷酸化位点突变对TPA诱导MCF-7细胞分化的影响

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第一届劳动卫生职业病与环境医学学术研讨会

作者：叶健李爱萍秋雯周进红周建伟 210029 南京医科大学公共卫生学院江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室

目的:探讨JWA蛋白PKC磷酸化位点对TPA诱导的MCF-7细胞分化的影响。方法:利用连续PCR引入点突变技术构建JWA编码区PKC磷酸化位点1、2以及两位点同时突变的三种pEGFP.N1载体，脂质体稳定转染获得相应的三种MCF-7细胞株，油红O染色观... 详细信息

目的:探讨JWA蛋白PKC磷酸化位点对TPA诱导的MCF-7细胞分化的影响。方法:利用连续PCR引入点突变技术构建JWA编码区PKC磷酸化位点1、2以及两位点同时突变的三种pEGFP.N1载体，脂质体稳定转染获得相应的三种MCF-7细胞株，油红O染色观察细胞分化状态。结果:20 nmol/LTPA处理MCF-7-N1(稳定转染pEGFP-N1载体的MCF07细胞)、MCF-7-JWA(稳定转染pEGFP-N1-JWA载体的MCF-7细胞)、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞2d后，油红O染色阳性细胞百分比分别为48％、67％、69％、67％、70％。与MCF-7-N1相比，TPA诱导MCF-7-JWA、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞分化率(油红O染色阳性细胞百分比)显著升高(P＜0.05)，但MCF-7-JWA、MCF-7-JWA-1、MCF-7-JWA-2、MCF-7-JWA-1+2细胞分化率无显著差异(P＜0.05)。结论:稳定转染JWA能增强TPA诱导的MCF-7细胞分化;JWA编码区PKC磷酸化位点突变并不影响TPA诱导MCF-7细胞分化。可能存在其他的分子机制。

关键词：细胞分化 TPA诱导 JWA蛋白 PKC磷酸化

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丁咯地尔对大鼠坐骨神经损伤后背根神经元凋亡及Caspase-3、Bcl-2表达的影响

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广西医科大学学报 2010年第6期27卷 855-857页

作者：苏建华章莉萍陈玉芳唐金荣肖杭包德诚江苏大学附属金坛医院神经内科金坛213200 江苏常州市第四人民医院病理科南京医科大学第一附属医院神经内科南京医科大学应用神经毒理研究所

目的:研究丁咯地尔对大鼠坐骨神经损伤后背根神经元凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Bcl-2表达的影响。方法:将48只成年健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、丁咯地尔组,预处理14 d后制作坐骨神经损伤动物模型,分别在... 详细信息

目的:研究丁咯地尔对大鼠坐骨神经损伤后背根神经元凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Bcl-2表达的影响。方法:将48只成年健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、丁咯地尔组,预处理14 d后制作坐骨神经损伤动物模型,分别在模型制备后12,24,72 h与7 d各组提取L1～5背根神经节,用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL法)检测神经细胞的凋亡水平和用免疫组化方法计数Caspase-3、Bcl-2阳性细胞表达数,并加以组间比较。结果:正常组大鼠背根神经细胞凋亡和Caspase-3阳性细胞较少;而模型组在坐骨神经损伤后12 h,神经细胞凋亡及Caspase-3阳性表达数明显增多,72 h达高峰,7 d表达减弱;丁咯地尔组在坐骨神经损伤后12 h,神经细胞凋亡及Caspase-3阳性表达数也增多,但较模型组减少(P<0.05),24 h至7 d均较同期模型组明显减少(P<0.01);丁咯地尔组于模型制备后12 h Bcl-2即有明显表达,72 h达高峰,7 d时与模型组比较仍有明显差异(P<0.05)。结论:坐骨神经损伤后背根神经元存在广泛的细胞凋亡现象,丁咯地尔通过抑制Caspase-3蛋白表达,上调Bcl-2表达,从而抑制细胞凋亡来发挥其神经保护作用。

关键词：丁咯地尔大鼠坐骨神经损伤后背神经元凋亡 Caspase-3蛋白表达 Bcl-2表达神经细胞凋亡损伤动物模型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶背根神经元表达数阳性细胞抑制细胞凋亡脱氧核糖核酸神经保护作用免疫组化方法转移酶介导尿苷三磷酸背根神经节制备

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DNA修复蛋白JWA对DEN致肝损伤的作用和机制研究

DNA修复蛋白JWA对DEN致肝损伤的作用和机制研究

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：黄瑜琳熊建平王章定周建伟南京医科大学公共卫生学院职业与环境卫生学系江苏省应用毒理学重点实验室现代毒理学教育部重点实验室

【目的】环境中常见能引起肝脏损伤的毒物有黄曲霉毒素,藻毒素,亚硝胺类等,其中二乙基亚硝胺（DEN）作为化学诱导剂,可引起肝脏损伤并能诱导肝癌发生。JWA作为环境应答基因,广泛参与细胞对多种环境理化因素的应答反应,是典型的DNA修复... 详细信息

【目的】环境中常见能引起肝脏损伤的毒物有黄曲霉毒素,藻毒素,亚硝胺类等,其中二乙基亚硝胺（DEN）作为化学诱导剂,可引起肝脏损伤并能诱导肝癌发生。JWA作为环境应答基因,广泛参与细胞对多种环境理化因素的应答反应,是典型的DNA修复蛋白并作为BER复合物中新的分子参与DNA的单链损伤修复过程。本研究旨在初步阐明JWA调控的DNA修复信号网络对DEN致肝损伤的保护作用及其分子机制。【材料和方法】细胞实验:人正常肝细胞L02经不同浓度及时间的DEN处理后,检测JWA表达水平变化并观察细胞损伤及凋亡情况,确定IC50值。同时应用JWA的siRNA及高表达质粒处理L02细胞,选取适当剂量DEN处理,蛋白免疫印迹（WB）和免疫荧光（IF）检测改变JWA表达水平后DEN致DNA损伤及相应修复分子表达,同时应用TUNEL实验和流式细胞仪检测细胞凋亡水平。动物实验:建立JWA和JWA小鼠JWADEN体内亚急性染毒模型,每组5只,DEN处理剂量为100 mg/kg体重,以生理盐水为对照,观察肝脏损伤,检测体内氧化水平;首次腹腔注射48小时后后剖杀小鼠,收集肝脏及血清进行相关指标测定。【结果】DEN能明显诱导L02细胞DNA损伤及细胞凋亡并伴随JWA表达升高,均呈时间-和剂量-效应关系;高表达JWA的L02细胞对于DEN诱导的DNA损伤敏感性明显降低,细胞成活率明显高于对照组;而JWA表达缺陷的L02细胞对DEN更敏感,DNA损伤加重,凋亡增多。高表达丁WA后,DNA损伤减轻,凋亡减少;IF检测γH2AX和8-OHdg结果显示高表达JWA相较于对照组能减轻DEN诱导的DNA单链损伤及DNA双链损伤,JWA缺陷的L02细胞相较于对照组DEN诱导的DNA损伤明显加重;JWA是通过碱基切除修复通路中的XRCC1及Polyβ两个关键分子参与DEN诱导L02细胞DNA损伤修复过程;DEN体内亚急性染毒结果显示对比JWA小鼠,JWA小鼠体重丢失增加,肝组织损伤更重,γH2AX表达增加,肝组织病理切片HE染色JWA小鼠肝损伤明显重于JWA小鼠。【结论】DEN处理引起明显的人正常肝L02细胞DNA损伤及细胞凋亡,以及诱导小鼠发生肝损伤;DNA修复蛋白JWA可通过碱基切除修复通路减轻DEN诱导的肝损伤。

关键词：二乙基亚硝胺(DEN) JWA 肝损伤碱基切除修复通路

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