检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：叶金海吴煜农赵凌研陈洁张陈平高隽南京医科大学附属口腔医院口腔颌面外科口腔医学研究所上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科南京大学模式动物研究所神经生物实验室

目的:本实验观察了培养的人舌鳞癌细胞（TCa8113）上瞬时受体势M7（TRPM7）的电生理学特性和分子生物学特性。方法:采用了全细胞膜片钳记录、免疫组化、RT-PCR及细胞培养的方法。结果:TRP通道是一种跨膜离子通道蛋白,被激活后可以非选... 详细信息

目的:本实验观察了培养的人舌鳞癌细胞（TCa8113）上瞬时受体势M7（TRPM7）的电生理学特性和分子生物学特性。方法:采用了全细胞膜片钳记录、免疫组化、RT-PCR及细胞培养的方法。结果:TRP通道是一种跨膜离子通道蛋白,被激活后可以非选择性通透包括Ca在内的阳离子。到目前为止,已有超过30个的TRP通道家族成员在哺乳动物中被克隆。其中TRPM只在哺乳动

关键词：人舌鳞癌细胞(TCa8113) 瞬时受体势M7(TRPM7) 全细胞膜片钳技术免疫组化 RT-PCR技术

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脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系

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中华劳动卫生职业病杂志 2010年第10期28卷 740-743页

作者：孙芹许鹏王立山胡凡程洁肖杭高蓉南京医科大学现代毒理学教育部重点实验室神经毒理研究室 210029 连云港中医药高等职业技术学校

目的研究脱氧鬼臼毒素（deoxypodophyllotoxin,DOP）对美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系.方法分别用终浓度为1、5、25、125μmol/L的DOP作用于荧光染料DiBAC4（3）标记的美洲大蠊背侧不成对中间神经元,在... 详细信息

目的研究脱氧鬼臼毒素（deoxypodophyllotoxin,DOP）对美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系.方法分别用终浓度为1、5、25、125μmol/L的DOP作用于荧光染料DiBAC4（3）标记的美洲大蠊背侧不成对中间神经元,在激光共聚焦显微镜上检测神经元膜电位的实时动态变化,并观察钠通道阻断剂河豚毒素（tetrodotoxin,TTX）对DOP膜电位效应的影响.结果加入DOP后美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位呈去极化改变,5 min后达到最大水平,8 min内趋于稳定.1、5、25、125 μmol/L的DOP作用5 min后,所测得的荧光强度值分别为69.6±3.0、72.1±2.7、77.8±3.6、86.2±3.1,DOP处理组和空白对照组相比,差异均有统计学意义（P＜0.01）.1μmol/L TTX与美洲大蠊背侧不成对中间神经元共孵育20 min后再加入25 μmol/L DOP,神经元内荧光强度与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）,说明钠通道是DOP的作用靶标,DOP的膜电位效应可被TFX完全抑制.结论 DOP可引起美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位去极化,且其效应在1～125 μmol/L范围内随浓度增加而增大,钠通道可能参与了这一过程.

关键词：脱氧鬼臼毒素中间神经元膜电位钠通道

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生殖毒性化学物的筛检模型——Ogg1睾丸微环境敲减小鼠

生殖毒性化学物的筛检模型——Ogg1睾丸微环境敲减小鼠

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2010年全国药物毒理学学术会议

作者：顾爱华吉贵祥王心如南京医科大学毒理研究所

研究目的环境中有害物质长期接触可损伤生殖细胞,引起生殖毒性。在雄性表现为:睾丸生精细胞受损,精液质量下降、精子DNA损伤等。精子DNA损伤不仅是引起不育的重要原因,也是辅助生育治疗失败的重要因素,且携有DNA损伤的精子可将遗传缺陷... 详细信息

研究目的环境中有害物质长期接触可损伤生殖细胞,引起生殖毒性。在雄性表现为:睾丸生精细胞受损,精液质量下降、精子DNA损伤等。精子DNA损伤不仅是引起不育的重要原因,也是辅助生育治疗失败的重要因素,且携有DNA损伤的精子可将遗传缺陷传递给子代。因此探索一种检测方法和手段,能够快速、准确评估化学物的雄性生殖毒性、特别是对精子DNA的危害,已经成为环境科学、医学、药理和毒理学领域迫切需要解决的问题。通常,机体通过修复机制来修复精子DNA损伤、维持遗传稳定。我们前期发现,DNA损伤修复基因oggl可保护生殖细胞免受化学物所致损伤。由此建立了睾丸oggl敲减的小鼠模型,以增加对损伤的易感性,来实现快速、灵敏的检测环境中生殖毒物。方法

关键词：生殖毒性化学物微环境

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丁咯地尔对坐骨神经损伤大鼠背根神经元凋亡及caspase-3表达的影响

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中国新药与临床杂志 2010年第5期29卷 369-372页

作者：苏建华章莉萍陈玉芳唐金荣肖杭包德诚江苏大学附属金坛医院神经内科江苏金坛213200 常州市第四人民医院病理科江苏常州213001 南京医科大学第一附属医院神经内科江苏南京210029 南京医科大学应用神经毒理研究所江苏南京210029

目的研究丁咯地尔对大鼠坐骨神经损伤后背根神经元凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达的影响。方法将84只成年健康Sprague-Dawley大鼠随机分为3组(n=28),除正常组外,模型组和丁咯地尔组大鼠分别腹腔注射生理盐水和丁咯地尔40... 详细信息

目的研究丁咯地尔对大鼠坐骨神经损伤后背根神经元凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达的影响。方法将84只成年健康Sprague-Dawley大鼠随机分为3组(n=28),除正常组外,模型组和丁咯地尔组大鼠分别腹腔注射生理盐水和丁咯地尔40 ***-1.d-1,共14 d,然后制作坐骨神经损伤动物模型。分别在手术后6、12、24、48、72、96 h和7 d提取L1-5背根神经节。用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)标记法(TUNEL法)检测神经细胞的凋亡水平,用免疫组化方法检测caspase-3阳性表达细胞。结果正常组大鼠背根神经细胞凋亡和caspase-3阳性细胞较少;而模型组在坐骨神经损伤后12 h,出现大量神经细胞凋亡及caspase-3阳性表达(P<0.01),72 h达高峰,96 h后有下降趋势;丁咯地尔组在坐骨神经损伤后12 h也出现大量神经细胞凋亡及caspase-3阳性表达(P<0.01),但较同期模型组明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论坐骨神经损伤后背根神经元存在广泛的细胞凋亡现象,丁咯地尔通过抑制caspase-3蛋白表达从而抑制细胞凋亡,发挥其神经保护作用。

关键词：丁咯地尔坐骨神经神经节,脊细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

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miR-181a和miR-181b抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭

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中华神经外科杂志 2010年第4期26卷 365-368页

作者：石磊钱进程子昊王栋张军霞李瑞康春生浦佩玉尤永平傅震南京医科大学第一附属医院神经外科 210029 天津医科大学总医院神经外科、天津市神经病学研究所神经肿瘤实验室

目的探讨miR-181a和miR-181b对胶质瘤细胞增殖和侵袭等影响。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-181a和miR-181b在胶质瘤组织和细胞株中的表达情况。我们合成miR-181a和miR-181b寡聚核苷酸及构建pre—miR-181a和pre—miR-181b表达载体，... 详细信息

目的探讨miR-181a和miR-181b对胶质瘤细胞增殖和侵袭等影响。方法通过实时荧光定量PCR检测miR-181a和miR-181b在胶质瘤组织和细胞株中的表达情况。我们合成miR-181a和miR-181b寡聚核苷酸及构建pre—miR-181a和pre—miR-181b表达载体，转染胶质瘤细胞，通过MTF、Transwell实验、流式检测和软琼脂实验，观察上调miR-181a和miR-181b表达后对胶质瘤细胞增殖、侵袭、转化能力和细胞凋亡的影响。结果miR-181a和miR-181b在胶质瘤组织和细胞株较正常脑组织均呈过低表达；miR-181a表达水平与胶质瘤等级呈负相关。上调miR-181a和miR-181b表达能有效抑制胶质瘤细胞生长，降低其转化和侵袭能力，诱导凋亡。结论胶质瘤中异常低表达的miR-181a和miR-181b可能发挥着肿瘤抑制因子作用。

关键词： miR-181a miR-181b 增殖侵袭神经胶质瘤

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PC12细胞缺血预处理模型建立及NO保护作用研究

PC12细胞缺血预处理模型建立及NO保护作用研究

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中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会

作者：蒋雷王军肖杭张劲松南京医科大学第一附属医院南京医科大学公共卫生学院神经毒理研究室

目的建立体外脑缺血预处理(ischemicprecondition,IPC)细胞模型,初步探讨No在预处理脑保护中的作用。

关键词：缺血预处理模型建立

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IP3Rs在GC-2std细胞中的表达及对其增殖作用机制研究

IP3Rs在GC-2std细胞中的表达及对其增殖作用机制研究

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中华医学会急诊医学分会第十三次全国急诊医学学术年会

作者：蒋雷王军肖杭张劲松南京医科大学第一附属医院南京医科大学公共卫生学院神经毒理研究室

目的观察IPRs（1,4,5三磷酸肌醇受体）在GC-2std（GC-2）细胞中的表达情况并且探讨IPRs在GC-2细胞增殖中的作用。

关键词：作用机制研究 APB GC-2std IP3Rs

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甲钴胺对大鼠坐骨神经损害后背根神经元Bcl-2、Bax表达的影响

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江苏大学学报（医学版） 2010年第2期20卷 145-147,152,I0002页

作者：苏建华林伟张俊华唐金荣肖杭包德诚江苏大学附属金坛医院神经内科江苏金坛213200 南京医科大学第一附属医院神经内科江苏南京210029 南京医科大学应用神经毒理研究所江苏南京210029

目的:探讨甲钴胺对坐骨神经损害后背根神经元保护作用机制。方法:采用SD大鼠,随机分为正常组、模型组和甲钴胺组,预处理14d后制作坐骨神经损害动物模型,分别在模型制备后12h、24h、48h、72h、5d、7d各组提取L1-5背根神经节,免疫组化染... 详细信息

目的:探讨甲钴胺对坐骨神经损害后背根神经元保护作用机制。方法:采用SD大鼠,随机分为正常组、模型组和甲钴胺组,预处理14d后制作坐骨神经损害动物模型,分别在模型制备后12h、24h、48h、72h、5d、7d各组提取L1-5背根神经节,免疫组化染色计算Bcl-2、Bax阳性细胞表达数。结果:甲钴胺组于模型制备后12hBcl-2即有明显表达,24～48h达高峰,持续至7d时与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);甲钴胺组Bax表达与同期模型组比较均有不同程度降低,7d时表达水平最低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:甲钴胺的神经元保护作用与其上调Bcl-2蛋白、抑制Bax蛋白的表达有关。

关键词：甲钴胺神经元 B细胞淋巴瘤/白血病-2 Bcl-2相关X蛋白大鼠

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丁咯地尔对大鼠坐骨神经损伤后背根神经元凋亡及Caspase-3、Bcl-2表达的影响

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广西医科大学学报 2010年第6期27卷 855-857页

作者：苏建华章莉萍陈玉芳唐金荣肖杭包德诚江苏大学附属金坛医院神经内科金坛213200 江苏常州市第四人民医院病理科南京医科大学第一附属医院神经内科南京医科大学应用神经毒理研究所

目的:研究丁咯地尔对大鼠坐骨神经损伤后背根神经元凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Bcl-2表达的影响。方法:将48只成年健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、丁咯地尔组,预处理14 d后制作坐骨神经损伤动物模型,分别在... 详细信息

目的:研究丁咯地尔对大鼠坐骨神经损伤后背根神经元凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Bcl-2表达的影响。方法:将48只成年健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、丁咯地尔组,预处理14 d后制作坐骨神经损伤动物模型,分别在模型制备后12,24,72 h与7 d各组提取L1～5背根神经节,用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL法)检测神经细胞的凋亡水平和用免疫组化方法计数Caspase-3、Bcl-2阳性细胞表达数,并加以组间比较。结果:正常组大鼠背根神经细胞凋亡和Caspase-3阳性细胞较少;而模型组在坐骨神经损伤后12 h,神经细胞凋亡及Caspase-3阳性表达数明显增多,72 h达高峰,7 d表达减弱;丁咯地尔组在坐骨神经损伤后12 h,神经细胞凋亡及Caspase-3阳性表达数也增多,但较模型组减少(P<0.05),24 h至7 d均较同期模型组明显减少(P<0.01);丁咯地尔组于模型制备后12 h Bcl-2即有明显表达,72 h达高峰,7 d时与模型组比较仍有明显差异(P<0.05)。结论:坐骨神经损伤后背根神经元存在广泛的细胞凋亡现象,丁咯地尔通过抑制Caspase-3蛋白表达,上调Bcl-2表达,从而抑制细胞凋亡来发挥其神经保护作用。

关键词：丁咯地尔大鼠坐骨神经损伤后背神经元凋亡 Caspase-3蛋白表达 Bcl-2表达神经细胞凋亡损伤动物模型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶背根神经元表达数阳性细胞抑制细胞凋亡脱氧核糖核酸神经保护作用免疫组化方法转移酶介导尿苷三磷酸背根神经节制备

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ERα基因敲除小鼠的繁育及子代小鼠基因型的鉴定

ERα基因敲除小鼠的繁育及子代小鼠基因型的鉴定

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华东地区第十一届实验动物科学学术交流会暨实验动物规范化、标准化研讨会

作者：王强钱文溢刘景丽朱勤环飞程洁王宇丁海霞肖杭南京医科大学公共卫生学院神经毒理研究室南京 210029 南京医科大学公共卫生学院神经毒理研究室南京 210029 江苏省医药动物实验基地南京 210029 江苏省医药动物实验基地南京 210029

目的：探讨雌激素受体α(ERα)基因敲除小鼠的优化繁育方法及ERα基因敲除小鼠子代鼠的鉴定方法,建立ERα基因敲除小鼠模型,为进一步研究ERα蛋白的功能奠定基础。方法：用4种不同的交配方式观察子代鼠的各表型比率及雌、雄性ERα... 详细信息

目的：探讨雌激素受体α(ERα)基因敲除小鼠的优化繁育方法及ERα基因敲除小鼠子代鼠的鉴定方法,建立ERα基因敲除小鼠模型,为进一步研究ERα蛋白的功能奠定基础。方法：用4种不同的交配方式观察子代鼠的各表型比率及雌、雄性ERα基因突变纯合子小鼠的繁殖能力;从子鼠鼠尾中提取基因组DNA,用PCR方法扩增ERα基因片段,琼脂糖凝胶电泳后观察结果。HE染色观察雌、雄性ERaα-/-小鼠生殖系统表型变化。结果： WT、ERα+/-、ERα-/-各表型小鼠互交繁殖结果基本符合孟德尔遗传规律,且雌、雄性ERα-/-小鼠无繁殖能力。与WT比较,雄性ERα-/-小鼠睾丸脏器系数降低,睾丸病理变化表现为生精小管官腔膨胀,生精细胞层变薄,且排列不规则;雌性ERα-/-小鼠子宫脏器系数降低,子宫和卵巢病变明显,表现为：子宫浆膜膜、肌层、内膜细胞排列不规则,卵巢有囊性病变,充血,无黄体。结论：雌、雄性ERα+/-小鼠交配是繁育ERα-/-小鼠的较好方法;实验所用PCR方法能够精确鉴定ERα-/-小鼠,为ERa蛋白功能的实验研究提供了较理想的动物模型。

关键词：雌激素受体α 基因敲除繁育方法

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