检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2006年第11期33卷 1061-1073页

作者：徐珊罗莉朱利群李卓仇黎丽陈琪徐昌芬南京医科大学江苏省人类功能基因组重点实验室南京210029 南京医科大学江苏省生殖医学重点实验室南京210029

为探讨马鞭草中4′-甲醚-黄芩素对人绒癌JAR/VP16耐药细胞株的多药耐药逆转作用及可能的逆转机制,采用四甲基偶氮唑盐比色、透射电镜观察、逆转录多聚酶链反应、流式细胞术、基因芯片以及实时定量PCR等方法,检测到4'-甲醚-黄芩素对... 详细信息

为探讨马鞭草中4′-甲醚-黄芩素对人绒癌JAR/VP16耐药细胞株的多药耐药逆转作用及可能的逆转机制,采用四甲基偶氮唑盐比色、透射电镜观察、逆转录多聚酶链反应、流式细胞术、基因芯片以及实时定量PCR等方法,检测到4'-甲醚-黄芩素对化疗药物具有协同增效作用,显著逆转耐药细胞对鬼臼乙叉甙(VP16)、甲氨蝶呤(MTX)及更生霉素(KSM)的耐药性,该药物作用后,耐药细胞超微结构呈现凋亡样改变,细胞凋亡率增高并出现明显凋亡峰.此外,耐药细胞中MDR1、MRP1、MRP2、MRP6、AHR、COMT、FGF2等耐药相关基因以及Bcl-2、BFL1、NAIP、p63等凋亡抑制基因表达降低,而Apaf-1、ASC、ATM、Bad、Bak、Bax、BimL等凋亡促进基因表达升高.上述实验结果表明:4′-甲醚-黄芩素对绒毛膜癌耐药细胞具有显著的耐药逆转作用,这种逆转作用可能是通过降低耐药基因表达、促进细胞凋亡实现的.

关键词： 4'-甲醚-黄芩素绒毛膜癌多药耐药耐药逆转细胞凋亡

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曲格列酮增强乳腺癌细胞对表阿霉素敏感性的研究

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癌症 2006年第8期25卷 960-966页

作者：孙静霞孟卓贤吕京澴孙玉洁南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室江苏南京210029

背景与目的:过氧化物酶增殖体激活受体γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorγ,PPARγ)在乳腺癌组织中呈高表达,其特异性配体噻唑烷二酮(thiazolidinediones,TZD)类药物作用于肿瘤细胞后可抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡。本研究探... 详细信息

背景与目的:过氧化物酶增殖体激活受体γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorγ,PPARγ)在乳腺癌组织中呈高表达,其特异性配体噻唑烷二酮(thiazolidinediones,TZD)类药物作用于肿瘤细胞后可抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡。本研究探讨TZD类药物曲格列酮的使用与雌激素受体(estrogenreceptor,ER)阴性乳腺癌细胞对表阿霉素化疗敏感性的关系。方法:通过MTT法和流式细胞仪检测曲格列酮、表阿霉素单独和联合使用时,对ER阴性人乳腺癌细胞系MDA-MB-435S和MDA-MB-231增殖、凋亡的影响。Westernblot和划痕实验分别检测不同药物处理下,乳腺癌细胞中Bcl-2蛋白表达水平和细胞迁移能力的变化。结果:在4～24μmol/L浓度范围内,曲格列酮与表阿霉素协同抑制乳腺癌细胞的增殖,IC50是表阿霉素单独使用时的60%。曲格列酮和表阿霉素单独作用于乳腺癌细胞时并无明显的凋亡发生,而两种药物联合作用时,MDA-MB-435S和MDA-MB-231细胞的凋亡率分别为(5.48±0.45)%、(10.08±1.89)%。联合使用曲格列酮下调了Bcl-2蛋白的表达,降低了乳腺癌细胞的迁移能力。结论:曲格列酮不仅促进了表阿霉素对乳腺癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,而且明显抑制了乳腺癌细胞的迁移能力,从而增强乳腺癌细胞对表阿霉素的敏感性。

关键词：曲格列酮表阿霉素乳腺癌细胞系增殖凋亡迁移

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专家专题报告8：CASK激酶与胰岛β细胞功能

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中华内分泌代谢杂志 2015年第9期31卷 834-835页

作者：韩晓南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室 210029

胰岛素是机体内调节血糖稳态、促进合成代谢、调节细胞分化生长的重要激素，其释放过程受到葡萄糖、氨基酸、神经递质、激素等的精确调控。胰岛β细胞功能损伤是各种类型糖尿病发病的基本环节．其确切分子机制至今尚未完全阐明。

关键词：胰岛β细胞功能专题报告激酶专家调节细胞分化调节血糖合成代谢神经递质

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DNA甲基化异常与肿瘤耐药

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遗传 2014年第5期36卷 411-419页

作者：司鑫鑫孙玉洁江苏省人类功能基因组学重点实验室南京医科大学基础医学院细胞生物学系南京210029

肿瘤耐药是导致肿瘤化疗失败的主要原因,其产生机制复杂多样,是多种因素共同作用的结果。近年来,表观遗传改变在肿瘤耐药中的作用日益受到关注。DNA甲基化是一种重要的表观遗传修饰,在调节基因表达和维持基因组稳定性中扮演着重要角色... 详细信息

肿瘤耐药是导致肿瘤化疗失败的主要原因,其产生机制复杂多样,是多种因素共同作用的结果。近年来,表观遗传改变在肿瘤耐药中的作用日益受到关注。DNA甲基化是一种重要的表观遗传修饰,在调节基因表达和维持基因组稳定性中扮演着重要角色。原发性或获得性耐药的肿瘤细胞大多伴随DNA异常甲基化,越来越多的证据显示,DNA甲基化异常是肿瘤细胞耐药表型产生的重要机制。文章就DNA甲基化异常与肿瘤细胞耐药的关系及相关作用机制进行了综述。

关键词：肿瘤耐药 DNA甲基化基因组稳定性基因表达

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表观基因组学研究方法进展与评价

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遗传 2009年第1期31卷 3-12页

作者：谭建新孙玉洁南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室南京医科大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学系南京210029

表观遗传学是指基于非基因序列改变所致基因表达水平的变化,如DNA甲基化和组蛋白修饰等;表观基因组学则是在基因组水平上对表观遗传学改变的研究。DNA甲基化已经成为表观遗传学和表观基因组学的重要研究内容,人类表观基因组计划的最终... 详细信息

表观遗传学是指基于非基因序列改变所致基因表达水平的变化,如DNA甲基化和组蛋白修饰等;表观基因组学则是在基因组水平上对表观遗传学改变的研究。DNA甲基化已经成为表观遗传学和表观基因组学的重要研究内容,人类表观基因组计划的最终目标是绘制出人类基因组中甲基化可变位点图谱。随着研究的不断深入,各种研究方法被开发出来以满足不同类型研究的需要。文章主要介绍目前已有的表观基因组学研究方法,并对其进行简要分析和总结。

关键词：表观遗传学表观基因组学 DNA甲基化研究方法

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小鼠PPA1重组腺病毒的构建及在胰岛β细胞中的表达

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南京医科大学学报（自然科学版） 2014年第8期34卷 1019-1024页

作者：郑月张许韩晓南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室江苏南京210029

目的:构建小鼠PPA1重组腺病毒,观察重组腺病毒在小鼠胰岛和β-TC6细胞中的表达,以及对脂肪酸引起的胰岛β细胞凋亡的影响。方法:将目的基因PPA1插入到腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV中,质粒经PCR鉴定正确后用PmeⅠ酶切线性化,转到含有腺病... 详细信息

目的:构建小鼠PPA1重组腺病毒,观察重组腺病毒在小鼠胰岛和β-TC6细胞中的表达,以及对脂肪酸引起的胰岛β细胞凋亡的影响。方法:将目的基因PPA1插入到腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV中,质粒经PCR鉴定正确后用PmeⅠ酶切线性化,转到含有腺病毒骨架pAdeasy-1的BJ5183细菌中进行同源重组,重组成功的质粒经PacⅠ酶切线性化后转染QBI-293A细胞,经包装得到Ad-PPA1腺病毒。根据绿色荧光蛋白(GFP)检测病毒滴度和感染效率。用病毒感染小鼠胰岛和β-TC6细胞,以Western blot法检测PPA1蛋白表达水平。Hoechst染色法检测PPA1对细胞凋亡的影响。结果:重组腺病毒载体pAdeasyPPA1经酶切鉴定确认构建成功,将pAdeasy-PPA1转染QBI-293A细胞,观察细胞病变效应提示病毒成功包装。重组腺病毒能够有效感染小鼠胰岛和β-TC6细胞并成功过表达PPA1蛋白。Hoechst染色结果表明过表达PPA1可保护脂肪酸引起的胰岛β细胞凋亡。结论:成功构建携带小鼠PPA1基因的重组腺病毒,并证实过表达PPA1具有抗凋亡的作用,为进一步研究PPA1在胰岛β细胞中的功能奠定了基础。

关键词： PPA1 腺病毒载体胰岛β细胞

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DNMT3a通过提升基因内部甲基化介导紫杉醇诱导的LINE-1异常表达

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遗传 2020年第1期42卷 100-111页

作者：王昕源张雨杨楠程禾孙玉洁南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室南京211166 南京医科大学细胞生物学系南京211166

药物诱导的长散在重复序列LINE-1异常激活可促进细胞基因组不稳定,而基因组不稳定是促进肿瘤发生发展和耐药表型形成的重要因素。因此,探索LINE-1异常激活的分子机制具有重要的理论和临床意义。DNA甲基化是调控基因表达的重要方式,已知... 详细信息

药物诱导的长散在重复序列LINE-1异常激活可促进细胞基因组不稳定,而基因组不稳定是促进肿瘤发生发展和耐药表型形成的重要因素。因此,探索LINE-1异常激活的分子机制具有重要的理论和临床意义。DNA甲基化是调控基因表达的重要方式,已知DNA甲基转移酶家族成员DNMT3a不仅能通过促进基因启动子甲基化抑制基因表达,还可通过增强基因内部甲基化上调基因表达。本实验室前期研究发现,将乳腺癌细胞暴露于化疗药物可诱导LINE-1异常高表达,但LINE-1启动子甲基化水平并无显著改变。本研究进一步探讨了在化疗药物压力下DNMT3a是否可通过增强LINE-1基因内部甲基化水平促进LINE-1在乳腺癌细胞中的异常高表达。ChIP实验和甲基分析结果显示,用化疗药物紫杉醇(PTX)处理乳腺癌细胞,不仅可以诱导DNMT3a表达,而且可以促进DNMT3a与LINE-1基因内部区域的结合,提升其基因内部甲基化水平,进而上调LINE-1的表达水平。利用表达载体增加细胞内DNMT3a的表达水平,可显著上调LINE-1基因内部的甲基化及基因的表达水平,而下调DNMT3a的表达可有效抑制LINE-1表达。上述研究结果表明,DNMT3a介导的基因非启动子区甲基化在药物诱导的LINE-1异常激活中发挥重要作用,为认识LINE-1在乳腺癌化疗耐药性形成过程中异常激活的机制提供了新思路。

关键词：乳腺癌 LINE-1异常激活基因内部DNA甲基化 DNMT3a

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鉴定定量PCR不同引物对的扩增效率

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南京医科大学学报（自然科学版） 2006年第8期26卷 645-648页

作者：张静静马长艳孙玉洁南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室江苏南京210029

目的:采用载体构建及荧光定量PCR的方法比较BCL2等位基因不同部位PCR引物在定量分析中的扩增效率,判断其用于不同等位基因转录活性分析的可靠性。方法:用PCR扩增包含定量PCR目的片段的序列,然后将扩增产物分别插入pGEM-TEasy载体中,构建... 详细信息

目的:采用载体构建及荧光定量PCR的方法比较BCL2等位基因不同部位PCR引物在定量分析中的扩增效率,判断其用于不同等位基因转录活性分析的可靠性。方法:用PCR扩增包含定量PCR目的片段的序列,然后将扩增产物分别插入pGEM-TEasy载体中,构建TA3重组载体,再以TA3载体为模板,采用荧光定量PCR方法比较引物对之间扩增效率。结果:定量PCR结果显示引物对之间扩增效率无明显差异。结论:所检测的PCR引物对之间的扩增效率一致,可用于比较分析mbr+/mbr-Nalm-6杂合子细胞系中两个等位基因表达活性。

关键词： PCR 引物扩增效率

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JWA在N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍诱导的人支气管上皮细胞凋亡中的作用

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中华劳动卫生职业病杂志 2006年第4期24卷 205-208页

作者：徐艳琼李爱萍陈瑞周建伟南京医科大学公共卫生学院江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室 210029

目的探讨JWA在化学致突变物烷化剂N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导人支气管上皮(HBE)细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Western blot法检测JWA蛋白表达,用Sou... 详细信息

目的探讨JWA在化学致突变物烷化剂N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导人支气管上皮(HBE)细胞凋亡中的作用及其可能机制。方法用噻唑蓝(MTT)法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Western blot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检测JWA基因近端启动子的结合蛋白。结果MNNG处理HBE细胞24 h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系；MNNG诱导HBE细胞凋亡过程中伴随着JWA蛋白表达升高。进一步用2．0μg/ml MNNG处理HBE细胞24h后,用Southwestern方法从HBE细胞核蛋白中检测出一与JWA近端启动子能特异性结合的转录因子。结论MNNG激活HBE细胞中核转录因子与JWA近端启动子结合后可能激活了细胞内凋亡的信号通路。

关键词：基因,JWA 细胞凋亡烷化剂转录因子

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浅谈染色质高级结构与基因转录的远程调控

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中国细胞生物学学报 2014年第11期36卷 1460-1469页

作者：孙鸾孙玉洁江苏省人类功能基因组学重点实验室南京医科大学基础医学院细胞生物学系南京210029

精确的基因表达调控是细胞分化、个体发育和细胞维持正常生命活动的必要条件,转录调控是真核细胞基因表达调控最关键的环节,其神秘和精深吸引着无数科学家为之奋斗不已。染色质构象捕获及其衍生技术的建立和2003年启动的"DNA元件... 详细信息

精确的基因表达调控是细胞分化、个体发育和细胞维持正常生命活动的必要条件,转录调控是真核细胞基因表达调控最关键的环节,其神秘和精深吸引着无数科学家为之奋斗不已。染色质构象捕获及其衍生技术的建立和2003年启动的"DNA元件百科全书"计划,将人们对基因转录调控的认识从二维层面推向三维空间。基因组中分布着众多调控元件,它们与所调控的靶基因间可相距几万甚至几十万个核苷酸,可以与靶基因位于相同或不同的染色体上。依据染色质环模型,调控元件可通过染色质环高级结构,与靶基因在空间上充分接近并相互作用,发挥其调控功能。同一个调控元件可以调控不同的靶基因,而相同的基因亦可能受不同调控元件的调节,由此细胞在染色质高级结构层面形成了一个复杂的调节基因转录活性的三维网络。该文分别从基因远程调控现象的发现、研究方法、相关机制及面临的挑战等方面作一简要综述。

关键词：基因转录远距离调控染色质高级结构

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