检索结果-内蒙古大学图书馆

实验动物与比较医学 2006年第3期26卷 131-133,139页

作者：王昌松高晓华陆亮龚伟程洁高蓉肖杭南京医科大学应用毒理省重点实验室南京210029 江苏省疾病控制中心南京210009

目的研究记录小鼠生精细胞上表皮钠通道电流。方法应用机械分离获得小鼠单个生精细胞,采用全细胞膜片钳技术记录上皮钠离子通道电流。结果当钳制电位在-50mV、指令电压-100～+40mV、步阶电压10mV,测试脉冲为200ms时,可记录到一快速激活... 详细信息

目的研究记录小鼠生精细胞上表皮钠通道电流。方法应用机械分离获得小鼠单个生精细胞,采用全细胞膜片钳技术记录上皮钠离子通道电流。结果当钳制电位在-50mV、指令电压-100～+40mV、步阶电压10mV,测试脉冲为200ms时,可记录到一快速激活并且不失活的电流。细胞外液中加入1μmol/L的阿米诺利能显著性抑制该电流,并呈现出两类不同的作用(抑制率分别为58.49±9.82%,31.44±5.69%)。结论电流特性和阿米诺利敏感性特征表明,生精细胞上所记录到的电流是上皮钠通道电流。

关键词：生精细胞全细胞膜片钳技术上皮钠通道小鼠

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阿米诺利敏感的小鼠生精细胞离子电流

阿米诺利敏感的小鼠生精细胞离子电流

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第九届华东地区实验动物科学学术交流会

作者：王昌松高晓华陆亮龚伟程洁高蓉肖杭南京医科大学应用毒理省重点实验室南京210029 江苏省疾病控制中心南京210009

目的研究记录小鼠生精细胞上表皮钠通道电流.方法应用机械分离获得小鼠单个生精细胞,采用全细胞膜片钳技术记录上皮钠离子通道电流.结果当钳制电位在-50 mV、指令电压-100～+40 mV、步阶电压10 mV,测试脉冲为200 ms时,可记录到一快... 详细信息

目的研究记录小鼠生精细胞上表皮钠通道电流.方法应用机械分离获得小鼠单个生精细胞,采用全细胞膜片钳技术记录上皮钠离子通道电流.结果当钳制电位在-50 mV、指令电压-100～+40 mV、步阶电压10 mV,测试脉冲为200 ms时,可记录到一快速激活并且不失活的电流.细胞外液中加入1 μmol/L的阿米诺利能显著性抑制该电流,并呈现出两类不同的作用(抑制率分别为58.49±9.82％,31.44±5.69％).结论电流特性和阿米诺利敏感性特征表明,生精细胞上所记录到的电流是上皮钠通道电流.

关键词：生精细胞全细胞膜片钳技术上皮钠通道小鼠

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JWA参与调节N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍诱导的HBE细胞凋亡

JWA参与调节N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍诱导的HBE细胞凋亡

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第五节全国环境与职业医学研究生学术研讨会

作者：徐艳琼李爱萍陈瑞周建伟 210029 南京江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室南京医科大学公共卫生学院

[目的]探讨JWA在化学致突变物N-甲基-N‘-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HBE细胞凋亡中的作用及可能机制. [方法]用MTT法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Westernblot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检... 详细信息

[目的]探讨JWA在化学致突变物N-甲基-N‘-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HBE细胞凋亡中的作用及可能机制. [方法]用MTT法检测细胞生长抑制率,用Hoechst染色法检测细胞凋亡,用Westernblot法检测JWA蛋白表达,用Southwestern印迹分析法检测JWA基因近端启动子的结合蛋白. [结果]MNG处理HBE细胞24h均可诱导细胞发生凋亡,并呈现明显的剂量-效应关系;MNNG诱导HBE细胞凋亡过程中伴随着JWA蛋白表达升高.进一步用2μg/mlMNNG处理HBE细胞24h后,用Southwestern方法从HBE细胞核蛋白中检测出一与JWA近端启动子能特异性结合的转录因子. [结论]MNNG激活HBE细胞中核转录因子与JWA近端启动子结合后可能激活了细胞内凋亡信号通路.

关键词： HBE细胞凋亡 JWA基因核转录因子信号通路 MNNG激活

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苯并(a)芘作用下人胚肺细胞JWA基因的表达及其与DNA损伤修复的关系

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中华预防医学杂志 2005年第3期39卷 187-190页

作者：顾灯安李爱萍朱婷叶健周建伟南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室 210029

目的研究苯并(a)芘诱导人胚肺(ccc HPF1)细胞DNA损伤修复中基因JWA和热休克蛋白(hsp70)的表达规律,探讨JWA基因参与细胞DNA损伤修复的作用和可能机制。方法建立ccc HPF1细胞DNA损伤模型,在S9活化状态下分别以10～100μmol/L苯并(a)芘处... 详细信息

目的研究苯并(a)芘诱导人胚肺(ccc HPF1)细胞DNA损伤修复中基因JWA和热休克蛋白(hsp70)的表达规律,探讨JWA基因参与细胞DNA损伤修复的作用和可能机制。方法建立ccc HPF1细胞DNA损伤模型,在S9活化状态下分别以10～100μmol/L苯并(a)芘处理细胞3h收获细胞或再恢复24h,用碱性单细胞凝胶电泳鉴定DNA损伤和修复情况,免疫印迹方法检测JWA和hsp70的表达水平。结果在DNA损伤模型中,苯并(a)芘活跃地调节JWA的表达,50μmol/L和100μmol/L处理组JWA和hsp70明显上调,在恢复期内10～100μmol/L处理组两者都处于较高的表达水平并且JWA和hsp70的表达规律几乎完全一致。结论JWA是一个有效的环境应答基因,活跃地参与细胞应答与DNA切除修复有关的信号通路。

关键词：苯并(a)芘人胚肺细胞 JWA基因基因表达 DNA损伤 DNA修复

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新的环境应答蛋白JWA在MCF-7细胞应答氧化应激中的表达

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中华劳动卫生职业病杂志 2005年第2期23卷 122-124,i002页

作者：朱婷陈瑞李爱萍顾灯安刘起展周建伟南京医科大学公共卫生学院江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室分子毒理研究室 210029

目的　研究氧化应激诱导MCF 7 细胞氧化损伤过程中,JWA表达的调节规律及其作用,尤其是与热休克蛋白(HSPs)间的关系。方法　以不同浓度的H2O2(0.01、0.10、1.00 mmol/L)分别处理MCF 7细胞10、30、60、180 min,建立MCF 7细胞氧化损伤模型... 详细信息

目的　研究氧化应激诱导MCF 7 细胞氧化损伤过程中,JWA表达的调节规律及其作用,尤其是与热休克蛋白(HSPs)间的关系。方法　以不同浓度的H2O2(0.01、0.10、1.00 mmol/L)分别处理MCF 7细胞10、30、60、180 min,建立MCF 7细胞氧化损伤模型并用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定;用四唑蓝(MTT)法分析H2O2 对MCF 7细胞的相对细胞增殖率和细胞毒性的影响;采用Western blot方法检测JWA、HSP70、HSP27和热休克转录因子(HSF1)蛋白表达水平的变化。结果　H2O2 对MCF 7细胞的增殖抑制和细胞毒性呈时间和剂量依赖关系,MCF 7细胞在最高剂量、最长处理时间(1.00 mmol/L、180 min)时,细胞增殖几乎完全受抑制。H2O2 活跃地调节JWA的表达,氧化损伤使JWA、HSP70 和HSF1表达上调并呈剂量依赖关系,而且JWA、HSP70和HSF1的表达规律相似,而HSP27 表达似乎与氧化应激的信号调节无关。结论　在H2O2 致MCF 7 细胞氧化应激时,JWA作为有效的环境应答蛋白,其与HSP70共同参与的信号通路可能受HSF1调控。

关键词： JwA基因氧化性应激热休克蛋白质类肿瘤发生机制

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过氧化氢处理K562细胞中JWA基因的表达及其与DNA损伤和凋亡的关系

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中华预防医学杂志 2005年第3期39卷 182-186页

作者：朱婷李爱萍刘起展王心如周建伟南京医科大学公共卫生学院分子毒理研究室江苏省人类功能基因组学和应用毒理学重点实验室 210029

目的研究过氧化氢(H2O2)诱导K562细胞氧化应激过程中,JWA蛋白、热休克蛋白(hsp70和hsp27)和p53蛋白的表达特点,探讨JWA参与细胞应答氧化应激的作用和可能机制。方法用0.01、0.1、1mmol/L的H2O2处理K562细胞10、30、60、180min建立氧化... 详细信息

目的研究过氧化氢(H2O2)诱导K562细胞氧化应激过程中,JWA蛋白、热休克蛋白(hsp70和hsp27)和p53蛋白的表达特点,探讨JWA参与细胞应答氧化应激的作用和可能机制。方法用0.01、0.1、1mmol/L的H2O2处理K562细胞10、30、60、180min建立氧化损伤模型;用0.1mmol/LH2O2处理不同时间(6～48h)和不同浓度(0.5～1000μmol/L)的H2O2处理48h分别诱导K562细胞凋亡,然后用DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA损伤和凋亡,用免疫印迹方法检测热休克蛋白(hsp70和hsp27)、p53以及JWA的蛋白表达水平。结果在DNA损伤模型中,H2O2活跃地调节JWA的表达,JWA对氧化应激的应答比热休克蛋白更快速,JWA和hsp70的表达规律相似;在低剂量H2O2(0.01mmol/L)处理时,JWA和热休克蛋白的表达均显著增高;在细胞凋亡模型中,JWA、hsp70、hsp27和p53的表达均显著增高,其中,JWA、hsp70和p53三者的表达规律相似。结论JWA是一个有效的环境应答基因并活跃地参与细胞应答氧化应激所致的DNA损伤和细胞凋亡的信号通路,其介导的信号通路可能与hsp70和p53有关。

关键词：过氧化氢 K562细胞 JWA基因基因表达 DNA损伤细胞凋亡

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BmKNJX10对大鼠背根神经节神经元外向钾电流的影响

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医学研究生学报 2005年第2期18卷 97-100页

作者：赵丽萍冯荦吴乐高蓉丛宁程洁肖杭南京医科大学应用毒理省重点实验室江苏南京210029

目的:作者运用柱层析和高效液相色谱的方法,从东亚钳蝎毒素中分离纯化获得一个长链组分BmKNJX10, 质谱报告结果显示其相对分子质量为7214。本文研究其对神经元钾电流的影响。　方法:采用全细胞膜片钳技术,观察了BmKNJX10对大鼠背... 详细信息

目的:作者运用柱层析和高效液相色谱的方法,从东亚钳蝎毒素中分离纯化获得一个长链组分BmKNJX10, 质谱报告结果显示其相对分子质量为7214。本文研究其对神经元钾电流的影响。　方法:采用全细胞膜片钳技术,观察了BmKNJX10对大鼠背根神经节(DRG)神经元外向钾电流(IK)的作用。　结果:BmKNJX10以浓度依赖的方式对IK有明显的促进作用。在刺激电压为+20mV时,10mg/L、30mg/L、50mg/L和70mg/LBmKNJX10对 IK的增大率分别为(17.1±3.9)%(n=4)、(25.1±6.2)%(n=4)、(45.3±2.8)%(n=5)和(70.2±11.1)%(n= 3)。　结论:BmKNJX10具有开放钾通道的功能,可能属于一个新的钾通道毒素多肽。

关键词：东亚钳蝎毒素大鼠背根神经节外向钾电流全细胞膜片钳技术

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JWA基因下调减弱三氧化二砷诱导的细胞生长抑制、DNA损伤和细胞凋亡

JWA基因下调减弱三氧化二砷诱导的细胞生长抑制、DNA损伤和细胞凋...

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海峡两岸第三届毒理学研讨会

作者：叶健刘祖荣李爱萍刘起展周建伟南京医科大学公共卫生学院分子毒理室江苏省应用毒理重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理室江苏省应用毒理重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理室江苏省应用毒理重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理室江苏省应用毒理重点实验室南京医科大学公共卫生学院分子毒理室江苏省应用毒理重点实验室

目的:探讨环境应答基因JWA在三氧化二砷诱导的细胞生长抑制、DNA损伤和细胞凋亡中的作用。方法:利用体外培养MCF-7和HeLa细胞模型,三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)处理;G418筛选JWA-knock-down稳定表达细胞株;Western blot检测JWA蛋... 详细信息

目的:探讨环境应答基因JWA在三氧化二砷诱导的细胞生长抑制、DNA损伤和细胞凋亡中的作用。方法:利用体外培养MCF-7和HeLa细胞模型,三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)处理;G418筛选JWA-knock-down稳定表达细胞株;Western blot检测JWA蛋白水平的表达:MTT 检测细胞的生长抑制;Hoechst染色、Flow cytometry检测细胞凋亡和周期变化;Comet assay检测DNA损伤。结果:

关键词： JWA 三氧化二砷凋亡 DNA损伤

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JWA基因启动子-76G→C多态性和膀胱癌易感性关系的配对研究

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中华医学遗传学杂志 2005年第6期22卷 648-652页

作者：吴为李春平陈瑞曹兴江李爱萍王玉杨克虎钱立新刘起展李芝兰周建伟兰州大学公共卫生学院 730000 南京医科大学公共卫生学院江苏省人类功能基因组学重点实验室江苏省应用毒理学重点实验室分子毒理研究室兰州大学循证医学中心 730000 江苏省人民医院泌尿外科

目的检测JWA启动子单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),探讨其对基因转录活性的影响和与膀胱癌遗传易感性的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性和DNA测序的方法,检测了155例膀胱癌病例和155例非肿瘤对照... 详细信息

目的检测JWA启动子单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),探讨其对基因转录活性的影响和与膀胱癌遗传易感性的相关性。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性和DNA测序的方法,检测了155例膀胱癌病例和155例非肿瘤对照人群的JWA基因启动子多态性位点;构建启动子多态性片段氯霉素乙酰转移酶报告基因重组质粒,瞬时转染NIH-3T3细胞,检测启动子多态性片段对基因转录活性的影响。结果检测到一个新SNP-76G→C;C等位基因和GC基因型频率在膀胱癌病例组为10·00%、20.00%,比正常对照组(5.16%、10.32%)高,差异有统计学意义(P<0.05);与GG基因型相比,GC基因型启动子的转录活性显著降低(P<0.01)。Logistic多元回归分析结果(P<0.05,OR=2.05)显示这一多态性可能是形成膀胱癌新的独立危险因素。结论JWA基因启动子-76G→C多态性可能影响JWA基因转录和表达,从而增加膀胱癌易感性。

关键词： JWA基因膀胱癌聚合酶链反应-单链构象多态性单核苷酸多态性启动子

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亚砷酸钠所致HLF细胞增殖兴奋效应与活性氧的关系

亚砷酸钠所致HLF细胞增殖兴奋效应与活性氧的关系

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海峡两岸第三届毒理学研讨会

作者：杨萍刘起展李爱萍李婷洪霞周建伟江苏省应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院江苏省应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院江苏省应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院江苏省应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院江苏省应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院江苏省应用毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院

目的探讨亚砷酸钠(Na2AsO2)所致人胚肺成纤维(HLF) 细胞增殖兴奋效应与ROS及脂质过氧化的关系。方法0.0、0.1、0.5、1.0、5.0和10μmol/L Na2AsO2处理HLF细胞24h或4h后,检测不同浓度Na2AsO2对HLF细胞增殖率、细胞中活性氧(ROS)水平、丙... 详细信息

目的探讨亚砷酸钠(Na2AsO2)所致人胚肺成纤维(HLF) 细胞增殖兴奋效应与ROS及脂质过氧化的关系。方法0.0、0.1、0.5、1.0、5.0和10μmol/L Na2AsO2处理HLF细胞24h或4h后,检测不同浓度Na2AsO2对HLF细胞增殖率、细胞中活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和还原性谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响。结果0.1和0.5μmol/L Na2AsO2

关键词：砷酸钠兴奋效应活性氧脂质过氧化

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