检索结果-内蒙古大学图书馆

中国当代儿科杂志 2023年第11期25卷 1180-1185页

作者：张佳琳姚梦梦王晶宇王秀红王偲张越李艳玮池霞南京医科大学附属妇产医院/南京市妇幼保健院儿童保健科江苏南京210004 南京医科大学生殖医学国家重点实验室江苏南京211166 南京医科大学儿科学院江苏南京211166 南京晓庄学院幼儿师范学院江苏南京211171

目的研究家庭阅读环境对儿童情绪调节能力的影响及亲子关系在二者间的中介作用。方法通过分层整群抽样法抽取南京市5所幼儿园学龄前儿童1626名,通过问卷调查收集家庭阅读环境、儿童情绪调节、亲子关系等信息,使用SPSS宏中的Process程序... 详细信息

目的研究家庭阅读环境对儿童情绪调节能力的影响及亲子关系在二者间的中介作用。方法通过分层整群抽样法抽取南京市5所幼儿园学龄前儿童1626名,通过问卷调查收集家庭阅读环境、儿童情绪调节、亲子关系等信息,使用SPSS宏中的Process程序建立中介作用模型,采用Bootstrap法检验中介效应的显著性。结果家庭阅读环境与儿童情绪调节能力(r=0.217,P<0.001)和亲子亲密性(r=0.065,P<0.01)呈正相关,与亲子冲突性呈负相关(r=-0.129,P<0.001);亲子冲突性与儿童情绪调节能力呈负相关(r=-0.443,P<0.001),亲子亲密性与情绪调节能力呈正相关(r=0.247,P<0.001)。家庭阅读环境对儿童情绪调节有显著的直接效应(β=0.162,P<0.001),亲子关系的中介效应占总效应的25.54%。结论家庭阅读环境可影响儿童情绪调节能力的发展,且亲子关系在家庭阅读环境和儿童情绪调节能力发展之间起中介作用。

关键词：家庭阅读环境情绪调节亲子关系中介作用学龄前儿童

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应用CRISPR/Cas9和Cas9-D10A建立Nsun5基因敲除小鼠模型并分析脱靶效应

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南京医科大学学报（自然科学版） 2020年第9期40卷 1275-1280页

作者：王仿竹陈红全王建瑛沈彬南京医科大学生殖医学国家重点实验室江苏南京211166 浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科浙江杭州310016

目的:为了检测CRISPR/Cas9系统的潜在脱靶效应,分别利用野生型Cas9和切口酶Cas9-D10A构建了RNA甲基转移酶Nsun5基因敲除小鼠模型,并对两种策略得到的F0小鼠进行脱靶分析,以比较两种敲除策略的特异性。方法:针对Nsun5基因第3外显子,设计1... 详细信息

目的:为了检测CRISPR/Cas9系统的潜在脱靶效应,分别利用野生型Cas9和切口酶Cas9-D10A构建了RNA甲基转移酶Nsun5基因敲除小鼠模型,并对两种策略得到的F0小鼠进行脱靶分析,以比较两种敲除策略的特异性。方法:针对Nsun5基因第3外显子,设计1对sgRNA,将野生型Cas9 mRNA和切口酶Cas9-D10A mRNA分别同这对sgRNA混合后注入小鼠一细胞期受精卵中,实现靶基因敲除,比较两种Cas9得到的F0代敲除小鼠的脱靶效应。结果:利用CRISPR/Cas9和Cas9-D10A成功建立Nsun5基因敲除小鼠模型,对两种Cas9得到的F0代突变小鼠进行潜在脱靶位点分析,均未检测到脱靶位点的存在。结论:两种策略都成功构建了不含脱靶位点的Nsun5基因敲除小鼠模型,为进一步研究Nsun5的生物学功能打下基础。

关键词： Nsun5 CRISPR/Cas9 基因敲除脱靶效应

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利用可诱导表达Cas9的HeLa细胞系进行顺铂耐药性基因筛选

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南京医科大学学报（自然科学版） 2021年第10期41卷 1432-1439,1452页

作者：陈红全王建瑛浙江大学医学院附属邵逸夫医院检验科浙江杭州310016 南京医科大学生殖医学国家重点实验室江苏南京211166

目的:利用PiggyBac转座子系统,构建可诱导表达Cas9的稳定HeLa细胞系,并针对人核受体基因构建sg RNA文库,进行顺铂耐药性基因筛选。方法:构建PB-TRE-Cas9-NLS-IRES-hrGFP-Zeo载体,与PB-CAG-rtTA以及转座酶载体一同电转到HeLa细胞中,通过... 详细信息

目的:利用PiggyBac转座子系统,构建可诱导表达Cas9的稳定HeLa细胞系,并针对人核受体基因构建sg RNA文库,进行顺铂耐药性基因筛选。方法:构建PB-TRE-Cas9-NLS-IRES-hrGFP-Zeo载体,与PB-CAG-rtTA以及转座酶载体一同电转到HeLa细胞中,通过药筛和挑选单克隆得到稳定细胞系;构建核受体基因sgRNA病毒文库,并感染可诱导表达Cas9的HeLa细胞系,筛选对顺铂具有抵抗性的克隆,并进行目的基因的测序鉴定。结果:挑选出可诱导表达Cas9的8E单克隆细胞株,在5个基因位点上可以进行高效编辑;感染sgRNA文库之后,挑选顺铂耐药的克隆,并鉴定出大部分克隆含有VDR sg RNA,经测序发现这些克隆中的VDR基因发生突变。结论:利用PiggyBac转座子系统,构建了可诱导表达Cas9的稳定HeLa细胞系,利用这个细胞系可以在多位点进行高效基因编辑,并可用于高通量文库筛选顺铂耐药性基因。

关键词： CRISPR/Cas9 PiggyBac转座子可诱导表达文库筛选

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云端信息平台在中国国家出生队列建设与研究中的应用

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中华流行病学杂志 2021年第4期42卷 586-590页

作者：杜江波陶诗瑶林苑赵杨吕红夏彦恺陆春城吴炜马红霞靳光付胡志斌沈洪兵南京医科大学公共卫生学院流行病学系 211166 南京医科大学生殖医学国家重点实验室全球健康研究中心 211166 南京医科大学公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学系 211166 南京医科大学公共卫生学院生物统计学系 211166 南京医科大学公共卫生学院教育部现代毒理学重点实验室 211166

大型出生队列是持续、动态地收集个体生命早期暴露信息,探讨暴露与生命远期健康结局因果关联的一种重要的队列研究类型。但由于其设计复杂、实施难度大,如何保证出生队列建设的高质量高效率是国内外流行病学研究者面临的主要挑战。2016... 详细信息

大型出生队列是持续、动态地收集个体生命早期暴露信息,探讨暴露与生命远期健康结局因果关联的一种重要的队列研究类型。但由于其设计复杂、实施难度大,如何保证出生队列建设的高质量高效率是国内外流行病学研究者面临的主要挑战。2016年,国家重点研发计划资助的中国国家出生队列(China National Birth Cohort)建设正式启动。该队列在设计实施过程中,不断积累经验,充分运用网络和信息化手段,探索并建立了一套“云端信息平台”,以支撑覆盖全国16家单位的出生队列建设。经过四年的发展,该系统平台在“出生队列人群招募和随访管理、数据的实时交互、队列质量控制、多级权限管理和职能划分”等多个方面已经发展出一整套完善的建设方案。该平台的设计框架和功能要素对于我国今后出生队列乃至大型人群研究的信息化建设具有重要的参考意义。

关键词：出生队列信息化平台质量控制

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用于深部组织微创及无创连续监测的柔性电子器件

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中国科学：化学 2022年第11期52卷 2027-2044页

作者：袁月辉唐文杰吴昊陈士晟任雪洋胡本慧顾宁南京医科大学生物医学工程与信息学院南京211166 东南大学生物科学与医学工程学院生物电子学国家重点实验室江苏省生物材料与器件重点实验室南京210096

深部组织信号与疾病间有着强烈的相关性,临床上对深部组织的检测诊断一般依赖于医学影像设备等大型仪器,成本高昂且不利于长期监测.不同于笨重的大型设备,微创及无创的柔性电子器件可以在体长期佩戴,实现深部组织信号的连续采集,有助于... 详细信息

深部组织信号与疾病间有着强烈的相关性,临床上对深部组织的检测诊断一般依赖于医学影像设备等大型仪器,成本高昂且不利于长期监测.不同于笨重的大型设备,微创及无创的柔性电子器件可以在体长期佩戴,实现深部组织信号的连续采集,有助于疾病的早期诊断,进行精准化、个性化治疗.在本综述中,我们讨论了深部组织的生理、生化信号的检测机制,重点分析器件的制备方法、关键性能指标以及数据无线传输技术.最后提出了该领域存在的挑战和可能的解决策略.

关键词：柔性电子器件深部组织感知健康监测

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微生物药物在神经系统疾病中的研究进展

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生命科学 2023年第3期35卷 296-306页

作者：李烨王晓艺刘星吟南京医科大学基础医学院病原生物系生殖医学国家重点实验室江苏省现代病原重点实验室南京211166 南京医科大学第一附属医院临床医学研究院公共实验中心南京211166

最近大量的研究表明,肠道微生物与帕金森病、抑郁症、孤独症谱系障碍和阿尔茨海默症等神经系统疾病的发生发展密切相关。其中涉及神经内分泌代谢、神经和免疫等途径,肠道微生物稳态经由以上途径参与大脑功能的维持与调控。反之,脑功能... 详细信息

最近大量的研究表明,肠道微生物与帕金森病、抑郁症、孤独症谱系障碍和阿尔茨海默症等神经系统疾病的发生发展密切相关。其中涉及神经内分泌代谢、神经和免疫等途径,肠道微生物稳态经由以上途径参与大脑功能的维持与调控。反之,脑功能的紊乱也会破坏微生物组成以及肠道屏障的完整性。“肠-微生物-脑轴”近年来成为神经科学研究的焦点。肠道微生物产生的代谢产物可从肠腔进入人体血液循环系统,通过靶向特定器官、调控信号通路以及配-受体结合等方式,调控神经系统疾病的发生与发展。针对“肠-微生物-脑轴”所研发的多种微生物药物为治疗神经系统疾病打开了新的窗口,然而其具体作用机制仍不明确。本综述介绍微生物药物在神经系统疾病治疗方面的最新研究进展,解析其可能的作用机制,并对未来的研究方向进行展望。

关键词：肠道微生物代谢物微生物药物肠-微生物-脑轴神经系统疾病

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FAAH在小鼠精原干细胞中的表达研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2016年第7期36卷 778-782页

作者：高亭亭邵彬彬张茜蔡金洋黄晓燕南京医科大学生殖医学国家重点实验室组织胚胎学系江苏南京211166 南京医科大学第二附属医院妇产科江苏南京210011

目的 :验证脂肪酰胺水解酶(fatty acid amide hydrolase,FAAH)在小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cell,SSCs)中的表达。方法:构建稳定的小鼠SSCs培养平台,Western blot法检测FAAH在小鼠各组织脏器和SSCs的表达,免疫荧光法检测FAAH... 详细信息

目的 :验证脂肪酰胺水解酶(fatty acid amide hydrolase,FAAH)在小鼠精原干细胞(spermatogonial stem cell,SSCs)中的表达。方法:构建稳定的小鼠SSCs培养平台,Western blot法检测FAAH在小鼠各组织脏器和SSCs的表达,免疫荧光法检测FAAH在睾丸组织及SSCs中的定位情况。结果:Western blot结果表明FAAH在睾丸组织高表达。免疫荧光显示FAAH定位于小鼠SSCs的细胞膜并且与已知的分选标记神经胶质细胞源性的神经营养因子(GDNF)家族受体α1(GDNF family receptor alpha-1,GFRα1)共定位。结论:FAAH可作为一个新的SSCs分选富集的表面分子标记,为进一步研究FAAH在精子发生的作用打下基础。

关键词：精原干细胞脂肪酰胺水解酶细胞分选

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mTOR通路抑制剂对卵丘扩展与体外受精的影响

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中国医学前沿杂志（电子版） 2016年第7期8卷 45-49页

作者：公绪红时兰英苏友强南京医科大学生殖医学国家重点实验室南京211166

目的研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路抑制剂对卵丘及卵母细胞发育潜能的影响。方法收集小鼠较大有腔卵泡中卵丘-卵母细胞复合体(cumulusoocyte complexes,COCs)作为体外培养的研究对象,在培养液中... 详细信息

目的研究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)通路抑制剂对卵丘及卵母细胞发育潜能的影响。方法收集小鼠较大有腔卵泡中卵丘-卵母细胞复合体(cumulusoocyte complexes,COCs)作为体外培养的研究对象,在培养液中加入不同浓度的mTOR通路抑制剂(雷帕霉素、Torin1),分析mTOR通路抑制剂对卵丘及卵母细胞发育潜能的影响。结果雷帕霉素、Torin1可以有效抑制COCs中mTOR信号通路,Torin1有明显影响卵丘细胞扩展的作用,使卵母细胞受精及着床前胚胎发育潜能下降。结论 mTOR信号通路抑制剂有明显降低卵母细胞质量的效应,是维持COCs活性及促进卵丘和卵母细胞的发育潜能所必需。

关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白雷帕霉素 Torin1 卵母细胞卵丘细胞

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利用cDNA微阵列技术筛选和鉴定NYD-SP9基因

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科学通报 2002年第4期47卷 293-297页

作者：肖俊华尹岚岚李健民周作民朱虎沙家豪赵白鸽南京医科大学生殖医学江苏省重点实验室南京210029 国家计划生育委员会北京100088

运用cDNA微阵列杂交技术从人睾丸cDNA文库中筛选出人蛋白激酶基因,命名为***-SP9在成人睾丸中的表达水平比胚胎睾丸高10倍.Southern印迹杂交结果表明,这一基因高表达于睾丸,而低表达于卵巢.cDNA序列的蛋白质基序磷酸化位点分析也进一步... 详细信息

运用cDNA微阵列杂交技术从人睾丸cDNA文库中筛选出人蛋白激酶基因,命名为***-SP9在成人睾丸中的表达水平比胚胎睾丸高10倍.Southern印迹杂交结果表明,这一基因高表达于睾丸,而低表达于卵巢.cDNA序列的蛋白质基序磷酸化位点分析也进一步提示,它有可能参与精子发生中的信号转导过程.由于这些磷酸化位点的位置彼此很接近,在这些位点之间可能存在相互作用以调控精子发生.该基因含有一个保守的穿膜功能结构域,提示经翻译后为一跨膜蛋白.以上实验结果表明,蛋白激酶基因NYD-SP9可能在男性生殖细胞分化过程中发挥一定作用.

关键词： cDNA微阵列技术筛选鉴定 NYD-SP9基因人睾丸差异表达精子发生

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Emx2和Emx2OS在小鼠胚胎生殖嵴中的表达

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生殖与避孕 2014年第6期34卷 437-443页

作者：周吉沈聪霍然南京医科大学南京210029 南京医科大学生殖医学国家重点实验室南京210029

目的：探讨转录因子Emx2和Emx2反义非编码长链RNA（EMX2 opposite strand／antisenseRNA，Emx2OS）在小鼠生殖嵴发育过程中的表达模式以及对原始生殖细胞发育的作用。方法：分别收集孕11．5-14．5d小鼠的生殖嵴，通过原位杂交、qRT-PCR... 详细信息

目的：探讨转录因子Emx2和Emx2反义非编码长链RNA（EMX2 opposite strand／antisenseRNA，Emx2OS）在小鼠生殖嵴发育过程中的表达模式以及对原始生殖细胞发育的作用。方法：分别收集孕11．5-14．5d小鼠的生殖嵴，通过原位杂交、qRT-PCR和免疫荧光方法，观察分析Emx2和Emx2OS在生殖嵴中的表达定位及其表达水平的变化。结果：在孕11．5-14．5d雌性和雄性小鼠胚胎生殖嵴中均检测到Emx2OS的表达，而且其表达模式与Emx2高度一致；在小鼠胚胎原始生殖细胞减数分裂的启动以及性别决定的时间点（孕12．5d），雌性胎小鼠生殖嵴中Emx2和Emx2OS的表达量都显著上调（P〈0．001）。结论：Emx2和Emx2OS在胎小鼠生殖嵴中呈同步表达模式，并可能参与调控原始生殖细胞减数分裂的启动。

关键词： Emx2 Emx2OS 生殖嵴减数分裂

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