检索结果-内蒙古大学图书馆

新疆医科大学学报 2025年第4期48卷 421-425,431页

作者：吴军范宇黎飞海李军张文宝郭宝平杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室乌鲁木齐830017 新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆地方病及分子生物学重点实验室乌鲁木齐830054

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化... 详细信息

目的构建并表达纯化细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(Eg Innexin unc9,Eg Inx)重组蛋白,制备多抗评估其诊断潜力及组织定位,为功能研究和犬用疫苗开发奠定基础。方法通过NdeI/HindⅢ双酶切构建pET-30a-Eg Inx原核表达质粒;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)在不同温度下诱导表达,利用镍亲和层析柱纯化重组Eg Inx蛋白(r Eg Inx),并通过蛋白质免疫印迹(Western blotting,WB)验证其特异性;制备多克隆抗体进行免疫组化;采用生物素-亲和素放大系统酶联免疫吸附实验(Biotin-avidin system-enzyme linked immunosorbent assay,BAS-ELISA)检测22份健康人血清及7份囊型棘球蚴病患者血清,初步评估其诊断价值。结果成功表达并纯化r Eg Inx,WB检测显示其可被组氨酸标签抗体特异性识别。免疫组化表明,在胆盐诱导后Eg Inx在原头蚴头节及体表皮层高表达,成虫则表达在生殖系统,主要位于孕节。BAS-ELISA检测敏感度为85.71%(6/7),特异度95.45%(21/22)。结论r Eg Inx具有高诊断特异性,其发育阶段差异性定位提示其参与虫体发育及繁殖调控,可作为囊型棘球蚴病(Cystic echinococcosis,CE)新型诊断标志物及犬用疫苗潜在靶点。

关键词：细粒棘球绦虫重组蛋白免疫诊断

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siRNA干扰STAT3基因对食管癌Eca-109细胞生物学特性的影响

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中国肿瘤临床 2009年第24期36卷 1420-1423页

作者：赵环宇张维铭陈锦飞南京医科大学附属南京第一医院肿瘤科南京市210006 天津医科大学分子生物学实验室

目的:探讨RNA干扰技术沉默STAT3信号传导通路对人食管癌Eca-109细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:针对人STAT3基因mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA (siRNA)的DNA模板,将其连入pRNAT-U6.1/neo质粒中,构建STAT3-siRNA表达载体,稳... 详细信息

目的:探讨RNA干扰技术沉默STAT3信号传导通路对人食管癌Eca-109细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:针对人STAT3基因mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA (siRNA)的DNA模板,将其连入pRNAT-U6.1/neo质粒中,构建STAT3-siRNA表达载体,稳定转染人食管癌Eca-109细胞,利用RT-PCR、Westernblot技术分别检测转染细胞中STAT3基因mRNA和蛋白的表达,MTT实验、流式细胞技术检测转染细胞的增殖、细胞周期和凋亡变化情况。结果:成功构建STAT3-siRNA表达载体,经测序鉴定正确。RT-PCR和Western blot结果显示,STAT3-siRNA3表达载体明显抑制了人食管癌Eca-109细胞中STAT3基因mRNA和蛋白的表达,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。MTT实验显示,稳定转染siRNA后,siRNA3实验组细胞的增殖能力明显下降,细胞生长抑制率为 35.68%,较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞技术显示,siRNA3实验组出现了细胞周期阻滞和细胞调亡,细胞周期阻滞于G_0/G_1期,细胞凋亡率为13.26%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01):结论:RNA干扰技术沉默STAT3基因可以有效地抑制STAT3基因的表达,进而抑制人食管癌Eca-109细胞的增殖,引起细胞周期G_0/G_1期阻滞,促进其凋亡。

关键词： RNA干扰 STAT3 食管癌

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细胞凋亡反应中NOXA基因启动子发挥增强子功能调节BCL2基因表达

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遗传 2020年第11期42卷 1110-1121页

作者：秦中勇石晓曹平平褚鹰管蔚杨楠程禾孙玉洁南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室南京211166 南京医科大学细胞生物学系南京211166 南京医科大学生物化学与分子生物学系南京211166 南京医科大学第一附属医院南京210029

真核生物基因的转录受到近端启动子和远端增强子的共同调控,部分基因的启动子可兼具有增强子的活性。NOXA与BCL2分别是BCL2蛋白家族促凋亡和抗凋亡成员。本课题组前期研究发现,NOXA基因启动子与BCL2基因启动子在染色质三维空间结构上存... 详细信息

真核生物基因的转录受到近端启动子和远端增强子的共同调控,部分基因的启动子可兼具有增强子的活性。NOXA与BCL2分别是BCL2蛋白家族促凋亡和抗凋亡成员。本课题组前期研究发现,NOXA基因启动子与BCL2基因启动子在染色质三维空间结构上存在相互作用,且NOXA基因启动子区兼有启动子和增强子特征性的组蛋白修饰标记。为进一步探究NOXA启动子是否具有增强子活性、能否在细胞凋亡过程中作为增强子调控BCL2基因表达,本研究利用染色质构象捕获(chromosome conformation capture,3C)、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和荧光素酶报告基因等检测技术在喜树碱诱导的MCF-7细胞凋亡模型中证实,NOXA启动子兼具增强子活性,并可通过形成染色质环结构远程调控BCL2基因表达。NOXA启动子的调控属性与凋亡信号强弱密切相关,在较弱凋亡信号刺激下(1μmol/L喜树碱处理),NOXA启动子主要发挥增强子功能;随着凋亡刺激信号的加强(10μmol/L喜树碱处理),NOXA启动子活性增强,主要调控其基因自身的表达,促进细胞凋亡。染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)证实NOXA启动子区启动子活性和增强子活性的动态变化与其组蛋白修饰标志一致。本研究为进一步探讨BCL2家族成员对细胞凋亡刺激做出协同反应的机制提供了新的线索。

关键词： NOXA启动子增强子双重调控功能 BCL2基因细胞凋亡

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间歇性注射重组甲状旁腺激素对去卵巢大鼠骨组织形态计量学的影响(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2002年第7期23卷 85-88页

作者：张克勤陈家伟李青南李光富田小芸黄莲芳包丽华王美莲中国 210002 南京 210002 南京军区军事医学研究所分子生物学研究室南京军区实验动物中心南京医科大学第一附属医院内分泌科南京医科大学第一附属医院内分泌科南京 210029 广东医学院骨生物研究室湛江 524023

目的:观察甲状旁腺激素(PTH)间歇注射对月龄较老的去卵巢大鼠骨组织形态计量学的影响.方法:6月龄雌性SD大鼠被随机分成5组:(1)假手术基础组(ShamB),(2)去卵巢基础组(OVXB),(3)假手术终点组(ShamE),(4)去卵巢终点组(OVXE),(5)去卵巢后PT... 详细信息

目的:观察甲状旁腺激素(PTH)间歇注射对月龄较老的去卵巢大鼠骨组织形态计量学的影响.方法:6月龄雌性SD大鼠被随机分成5组:(1)假手术基础组(ShamB),(2)去卵巢基础组(OVXB),(3)假手术终点组(ShamE),(4)去卵巢终点组(OVXE),(5)去卵巢后PTH治疗组(OVXE).ShamB和OVXB组大鼠于术后3个月、ShamE及OVXE和OVXEP组大鼠在术后4.5个月时处死并取骨.在术后3—4.5个月时给OVXE组大鼠每日皮下注射1次(6次/周)rhPTH1-84,给ShamE和OVXE组大鼠则注射rhPTH1-84溶剂.对大鼠近端胫骨进行不脱钙切片以观察其骨组织形态计量学指标的变化.结果:OVXE组骨小梁面积百分比(TbAr)明显高于OVXE组(P<0.05),与OVXB组相似(P>0.05),但仍低于ShamE组(P<0.05);OVXE组的骨小梁厚度(TbTh)高于任何其他各组(P<0.05),其骨小梁数量(TbN)仅比OVXE组略高,其标记周长百分比(LPm)、矿化沉积率(MAR)和骨形成率(BFR/BV)均分别高于OVXE和ShamE组(P<0.01),而其破骨细胞数量(N of Oc)与后二组相似(P>0.05).结论:去卵巢后3个月的9月龄大鼠短期间歇注射rhPTH1-84能阻止其骨量进一步减少,其作用机制是间歇注射PTH能增加TbTh而不明显改变TbN,能促进成骨活性而不影响破骨活性.

关键词：甲状旁腺激素类 Sprague-Dawley大鼠骨质疏松骨骼组织学

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喉鳞癌中内皮细胞特异性分子1的表达及临床意义

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江苏医药 2008年第5期34卷 454-456页

作者：曹峰徐洁洁乔明哲陈曦陆美萍汪渊南京医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科 210029 安徽医科大学分子生物学实验室

目的探讨喉鳞癌组织中内皮细胞特异性分子1（ESM-1）表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法对50例喉鳞癌组织和40例癌旁对照组织ESM-1蛋白表达情况进行检测。同时采用Westernblot检测20例喉鳞癌及15例癌旁新鲜标本中ESM-1蛋白的表达... 详细信息

目的探讨喉鳞癌组织中内皮细胞特异性分子1（ESM-1）表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法对50例喉鳞癌组织和40例癌旁对照组织ESM-1蛋白表达情况进行检测。同时采用Westernblot检测20例喉鳞癌及15例癌旁新鲜标本中ESM-1蛋白的表达。结果两种方法检测结果均显示喉鳞癌组织中ESM-1表达显著高于癌旁对照组织（P〈0.01）。Ⅲ～Ⅳ期喉鳞癌组织ESM-1的表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期的表达;伴有颈淋巴结转移的喉鳞癌组织的ESM-1表达明显高于无淋巴结转移组。结论ESM-1在喉鳞癌组织中高表达,并且其表达程度与喉鳞癌的分期及是否存在淋巴结转移有关,提示ESM-1的表达与喉鳞癌的发生、发展可能相关。

关键词：喉癌鳞状细胞癌内皮细胞特异性分子1

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X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌细胞增殖、凋亡的影响

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中国癌症杂志 2009年第11期19卷 836-841页

作者：赵环宇张维铭陈锦飞南京医科大学附属南京第一医院肿瘤科江苏南京210006 天津医科大学分子生物学实验室天津300070

背景与目的:STAT3是近期研究较多的一类癌基因,在多种实体瘤如头颈部鳞癌、食管癌、前列腺癌等中均有异常表达和活性增强。本研究探讨X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌Eca-109细胞增殖、凋亡的影响。方法:针对STAT3 mRNA序列设计... 详细信息

背景与目的:STAT3是近期研究较多的一类癌基因,在多种实体瘤如头颈部鳞癌、食管癌、前列腺癌等中均有异常表达和活性增强。本研究探讨X线照射联合RNA干扰STAT3基因对人食管癌Eca-109细胞增殖、凋亡的影响。方法:针对STAT3 mRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pRNAT-U6.1-siRNA-STAT3重组质粒,转染Eca-109细胞,G418筛选获得阳性克隆,分别用RT-PCR和Western blot方法检测细胞STAT3 mRNA和蛋白表达。转染细胞分别接受0、2、4、6和8GyX线照射,平板克隆形成实验检测细胞存活分数,流式细胞仪检测4GyX线照射的细胞凋亡。结果:成功构建了pRNAT-U6.1-siRNA-STAT3重组质粒,经测序鉴定正确;RT-PCR和Western blot检测显示,STAT3-siRNA有效地抑制了肿瘤细胞STAT3 mRNA和蛋白表达;平板克隆形成实验和流式细胞仪分析表明,不同剂量X线照射联合STAT3-siRNA可抑制肿瘤细胞增殖,4GyX线照射可诱导肿瘤细胞凋亡。结论:X线照射联合RNA干扰STAT3基因表达可抑制人食管癌Eca-109细胞增殖,诱导细胞凋亡。

关键词：照射 RNA干扰 STAT3 食管癌

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系统性鉴定长非编码RNA MALAT1调控的微小RNA

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中国肺癌杂志 2016年第5期19卷 247-251页

作者：张海天王国祥尹荣邱满堂许林徐州医科大学临床医学系徐州221004 徐州医科大学附属医院心胸外科徐州221000 南京医科大学附属江苏省肿瘤医院胸外科/江苏省恶性肿瘤分子生物学及转化医学重点实验室南京210009

背景与目的长非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)在肿瘤的发生、侵袭转移等过程中发挥着重要的调控作用。本研究通过实验和生物信息学手段系统性研究lnc RNA MALAT1调控的微小RNA(micro RNA,miRNA)。方法设计特异性敲减MALAT1的反... 详细信息

背景与目的长非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)在肿瘤的发生、侵袭转移等过程中发挥着重要的调控作用。本研究通过实验和生物信息学手段系统性研究lnc RNA MALAT1调控的微小RNA(micro RNA,miRNA)。方法设计特异性敲减MALAT1的反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASO),在A549细胞中敲减MALAT1,通过Tqa Man Low Density Array(TLDA)芯片研究敲减MALAT1后miRNA表达变化;使用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)方法分析敲减MALAT1之后差异表达基因,寻找富集的miRNA。结果 ASO有效降低了MALAT1表达,敲减MALAT1之后153个miRNA表达显著变化,其中131个miRNA表达上调,22个miRNA表达下调。在A549细胞中敲减MALAT1后,458个基因发生显著差异表达,GSEA分析发现多个miRNA在差异表达基因中被显著富集。对TLDA和GSEA数据取交集并进一步分析确认28个被MALAT1调控的miRNA。结论本研究系统鉴定了MALAT1对miRNA的调控,为进一步研究提供了基础。

关键词：长非编码RNA MALAT1 microRNA 生物信息学

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胰岛素样生长因子Ⅰ受体与细胞凋亡信号转导

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国外医学（生理病理科学与临床分册） 2002年第5期22卷 445-447页

作者：王俊宏南京医科大学第一附属医院临床分子生物学实验室江苏南京210029

胰岛素样生长因子Ⅰ 受体 (IGF ⅠR)是一种跨膜受体 ,属于酪氨酸激酶受体家族 ,与胰岛素受体有高度的同源性。在接受其相应的配体刺激后 ,IGF ⅠR可以激活包括IRS 1,IRS 2 ,shc和PI3 激酶等多种胞内亚单位 ,产生级联信号转导反应 ,通过... 详细信息

胰岛素样生长因子Ⅰ 受体 (IGF ⅠR)是一种跨膜受体 ,属于酪氨酸激酶受体家族 ,与胰岛素受体有高度的同源性。在接受其相应的配体刺激后 ,IGF ⅠR可以激活包括IRS 1,IRS 2 ,shc和PI3 激酶等多种胞内亚单位 ,产生级联信号转导反应 ,通过启动相关的信号转导通路来发挥抗细胞凋亡的生物学作用。

关键词：胰岛素样生长因子I 胰岛素样生长因子I受体信号转导凋亡

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高通量转录组测序技术研究过表达GPC5对A549细胞基因表达影响

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中国肺癌杂志 2016年第8期19卷 545-549页

作者：张海天王国祥杨欣邱满堂许林徐州医科大学临床医学系徐州221004 徐州医科大学附属医院心胸外科徐州221000 常州市第一人民医院肿瘤内科常州213003 南京医科大学附属江苏省肿瘤医院胸外科/江苏省恶性肿瘤分子生物学及转化医学重点实验室南京210009

背景与目的磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(glypican-5,GPC5)是一个重要的抑癌基因,然而GPC5对肺腺癌细胞增殖能力和基因表达的影响目前研究甚少。本研究拟在肺腺癌A549细胞中过表达GPC5以研究细胞增殖能力和基因表达变化情况。方法通过慢病毒载... 详细信息

背景与目的磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(glypican-5,GPC5)是一个重要的抑癌基因,然而GPC5对肺腺癌细胞增殖能力和基因表达的影响目前研究甚少。本研究拟在肺腺癌A549细胞中过表达GPC5以研究细胞增殖能力和基因表达变化情况。方法通过慢病毒载体构建稳定过表达GPC5的A549细胞株,通过Cell Counter Kit 8(CCK8)、平板克隆和Ed U实验检测细胞增殖能力;通过高通量转录组测序研究基因表达变化。结果相对于空白载体组,CCK8实验发现过表达GPC5可以明显抑制A549细胞的增殖速率;平板克隆实验结果显示,过表达GPC5之后A549细胞克隆形成能力下降(181±17 vs 278±23);Ed U染色结果显示过表达GPC5后阳性染色细胞比例下降。转录组测序结果提示过表达GPC5之后,2,108个基因表达发生明显变化,其中具有正性调节细胞增殖作用的基因明显下调。结论过表达GPC5可以明显抑制肺腺癌细A549的增殖能力,而且过表达GPC5后具有正性调节细胞增殖作用的基因表达下调。

关键词：磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5 A549 增殖基因表达

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细粒棘球绦虫TAK1基因ORF的克隆及其蛋白生物信息学分析

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中国病原生物学杂志 2022年第12期17卷 1392-1398页

作者：刘丽英李军张文宝吴军杨梅新疆医科大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生教研室新疆乌鲁木齐830011 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院省部共建中亚高发病成因与防治国家重点实验室新疆医科大学新疆地方病分子生物学重点实验室

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用... 详细信息

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件分别对EgTAK1的理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、N-糖基化位点、亲/疏水性、保守结构域、跨膜结构域、信号肽序列进行预测;采用MEGA 7.0软件对不同物种来源的TAK1蛋白进行多序列比对并构建系统进化树。采用实时荧光定量PCR检测细粒棘球绦虫在不同发育阶段TAK1基因mRNA的相对表达量。结果EgTAK1基因ORF全长1116 bp,编码371个氨基酸,理论等电点为5.97,不稳定指数为49.59,属于不稳定蛋白;脂肪系数为87.22,总平均亲水系数为-0.291,为亲水性蛋白;EgTAK1蛋白含有64个磷酸化位点,3个O-糖基化潜在位点,4个N-糖基化位点;EgTAK1蛋白属于蛋白激酶C类似(PKC-like)家族;无跨膜结构和信号肽,亚细胞可能定位于细胞膜、细胞质及细胞核内。该蛋白含有7个优势B细胞抗原表位,具有良好的免疫原性。二级结构包含34.77%的α-螺旋,5.12%的β-转角,40.97%的无规卷曲,19.14%的延伸链。TAK1蛋白同源序列比对中与多房棘球绦虫的TAK1同源性最高为83%。实时荧光定量PCR显示,细粒棘球绦虫在不同发育阶段EgTAK1表达有差异,成虫阶段相对表达量最高。结论基因EgTAK1可能是细粒棘球绦虫发育分化的重要调控基因,预测该基因编码的蛋白含有B细胞抗原表位,有可能成为包虫病免疫学预防及药物研制的靶标抗原。

关键词：细粒棘球绦虫 TAK1 生物信息学分析 PCR

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