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南京医科大学学报（自然科学版） 2008年第7期28卷 836-840页

作者：刘丽萍孙丽洲卞智萍顾春荣杨笛张寄南南京医科大学第一附属医院妇产科江苏南京210029 南京医科大学心血管病研究所江苏南京210029

目的:建立定量检测ProMBP的双抗体夹心ELISA方法。方法:采用Protein A亲和层析法纯化自制的抗ProMBP单克隆抗体(mAb),并行SDS-PAGE和Western blot对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗ProMBP mAb进行标记辣根过氧化物(HRP)后... 详细信息

目的:建立定量检测ProMBP的双抗体夹心ELISA方法。方法:采用Protein A亲和层析法纯化自制的抗ProMBP单克隆抗体(mAb),并行SDS-PAGE和Western blot对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗ProMBP mAb进行标记辣根过氧化物(HRP)后行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度;以纯化的妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)/ProMBP抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收性实验评价ELISA方法,初步对人血清中的ProMBP水平进行检测。结果:最佳配对组合为抗ProMBP mAb 4C6E5B9和HRP标记的抗ProMBP mAb 9G4A6G10,最适工作浓度分别为2.5μg/ml和1∶3000,该方法的批内、批间变异系数分别为4.6%～6.2%和4.6%～10.5%,灵敏度达2.0ng/ml,回收率为92%～113%。正常非妊娠血清、9～11周妊娠血清、15～17周妊娠血清ProMBP水平分别为(26.37±2.90)ng/ml、(357.71±33.60)ng/ml和(1088.77±58.13)ng/ml。结论:建立了一种可用于检测ProMBP的双抗体夹心ELISA方法。

关键词：定量检测嗜酸性主要碱性蛋白前体 ELISA双抗体夹心

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定量检测人超敏C-反应蛋白双抗体夹心ELISA方法的建立及初步临床应用

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中国临床药理学与治疗学 2009年第1期14卷 84-89页

作者：沈丹丹卞智萍何国平顾春荣徐晋妉杨笛张寄南江苏大学附属武进医院心内科南京医科大学第一附属医院心血管病研究所

目的：建立定量检测人超敏C-反应蛋白（CRP）双抗体夹心EUSA方法。方法：采用Protein A亲和层析法纯化本室制备的抗CRP单克隆抗体（mAbs），并行SDS—PAGE和Western blotting对纯化抗体特性进行鉴定；利用简易过碘酸钠法对抗CRPmAbs进... 详细信息

目的：建立定量检测人超敏C-反应蛋白（CRP）双抗体夹心EUSA方法。方法：采用Protein A亲和层析法纯化本室制备的抗CRP单克隆抗体（mAbs），并行SDS—PAGE和Western blotting对纯化抗体特性进行鉴定；利用简易过碘酸钠法对抗CRPmAbs进行标记HRP后行抗体配对实验；通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度；以纯化的CRP抗原为标准品建立标准曲线；以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法。初步对人血浆中的超敏CRP水平进行检测。结果：最佳配对组合为抗CRP mAb 1C10和HRP标记的抗CRP mAb2 C11，最适工作浓度分别为10μg／mL和l：2000，该方法的批内、批间变异系数分别为3．1％～9．7％和3．6％～13．6％，灵敏度达8．3ng／mL，回收率为90％～109％。用ELISA法测定左右冠无明显狭窄者68例，狭窄小于50％者59例和狭窄大于50％患者67例的血浆***水平，冠脉狭窄小于50％组（3．7±1．2）mg／L与冠脉无狭窄组（1．8±0．7）mg／L比较明显升高（P〈0．05）；狭窄大于50％组（8．9±3．3）mg／L与狭窄小于50％组比较明显升高（P〈0．05）。结论：建立了一种可用于检测人超敏CRP的双抗体夹心ELISA方法。

关键词：定量检测超敏C-反应蛋白 ELISA双抗体夹心法

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PCR-SSCP检测肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白Ⅰ基因7号外显子突变

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江苏医药 2008年第9期34卷 903-905页

作者：万文辉吴恒芳张寄南南京军区南京总医院老年医学科 210002 南京医科大学第一附属医院心血管病研究所

目的研究聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)法检测肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因7号外显子突变的可行性。方法肥厚型心肌病患者59例(2例曾直接测序证实7号外显子Arg145Trp突变),PCR扩增cTnI基因7号外显子,予PCR-SSCP检测突... 详细信息

目的研究聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)法检测肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因7号外显子突变的可行性。方法肥厚型心肌病患者59例(2例曾直接测序证实7号外显子Arg145Trp突变),PCR扩增cTnI基因7号外显子,予PCR-SSCP检测突变,与直接测序结果进行比较。结果2例Arg145Trp突变者均有异常条带,余未证实突变者未见阳性条带。结论PCR-SSCP检测肥厚型心肌病cTnI基因Arg145Trp突变具有良好的检出性,可作为大规模人群筛查的工具。

关键词：肥厚型心肌病心肌肌钙蛋白I 突变单链构象多态性

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低流量预适应心肌保护的实验研究

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临床心血管病杂志 2000年第8期16卷 369-370页

作者：唐建伟杨辰垣周俊安南京医科大学附属南京第一医院心胸外科南京210006 同济医科大学心血管病研究所心外科深圳市卫生局

目的 :探讨低流量预适应对缺血心肌的保护作用。方法 :采用离体大鼠工作心模型 ,大鼠共 32只 ,随机分成两组。实验以低流量缺血预适应结合冷晶体停搏 ,行心肌保护研究 (预适应组 ) ,并与单纯冷晶体停搏、低温保存之心肌 (对照组 )进行... 详细信息

目的 :探讨低流量预适应对缺血心肌的保护作用。方法 :采用离体大鼠工作心模型 ,大鼠共 32只 ,随机分成两组。实验以低流量缺血预适应结合冷晶体停搏 ,行心肌保护研究 (预适应组 ) ,并与单纯冷晶体停搏、低温保存之心肌 (对照组 )进行对比研究。每组中各半数 (8只 )在缺血末测心肌 ATP含量。结果 :预适应组心肌缺血后心功能的恢复、ATP的含量均明显高于对照组 ,且心肌超微结构损害较轻 ,心肌酶释放明显减少。结论

关键词：低流量缺血预适应冷晶体停搏心肌缺血

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血清肌钙蛋白I测定对暴发型流脑并发心肌损伤的研究

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江苏医药 2002年第6期28卷 417-419,I002页

作者：徐东杰徐晋丹卞智萍陈相健殷国庆张寄南南京医科大学第一附属医院心内科心血管病研究所210029 南京市第二医院

目的　探讨暴发型流行性脑脊髓膜炎 (流脑 ,FMM )患者并发的心肌损伤。方法　 1 6例生前有心功能不全病史的暴发型流脑患者 ,分别在入院时及出现临床心力衰竭或中枢神经系统症状时抽血测定血清肌钙蛋白I(cTnI)浓度 ,部分病例死亡后立即... 详细信息

目的　探讨暴发型流行性脑脊髓膜炎 (流脑 ,FMM )患者并发的心肌损伤。方法　 1 6例生前有心功能不全病史的暴发型流脑患者 ,分别在入院时及出现临床心力衰竭或中枢神经系统症状时抽血测定血清肌钙蛋白I(cTnI)浓度 ,部分病例死亡后立即穿刺心室肌 ,制成超薄切片后电镜观察超微结构改变。结果　 1 6例患者临床症状明显时血清cTnI浓度均明显增高 (P <0 0 0 1 ) ,电镜示有心肌细胞变性坏死及肌丝破坏。结论　暴发型流脑常并发心肌损伤。

关键词：暴发型流行性脑脊髓膜炎血清肌钙蛋白I 测定并发症心肌损伤研究

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培哚普利对慢性心力衰竭大鼠心肌能量代谢及超微结构的影响

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中华急诊医学杂志 2011年第9期20卷 955-959页

作者：李兵陈香健朱舒舒秦历杰楚英杰河南省人民医院急诊医学部郑州450002 南京医科大学第一附属医院心血管病研究所

目的研究培哚普利对异丙肾上腺素（ISO）诱导的慢性心力衰竭（CHF）大鼠心肌能量代谢和超微结构的影响。方法55只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为对照组（C组）和模型组。模型制备采用皮下多点注射ISO法，4周后模型组再随机（随机数... 详细信息

目的研究培哚普利对异丙肾上腺素（ISO）诱导的慢性心力衰竭（CHF）大鼠心肌能量代谢和超微结构的影响。方法55只雄性SD大鼠随机（随机数字法）分为对照组（C组）和模型组。模型制备采用皮下多点注射ISO法，4周后模型组再随机（随机数字法）分为未治疗组（M组）和培哚普利治疗组（P组）。平均治疗5周后进行二维心脏超声检查，测定心肌组织中ATP、ADP、AMP、乳酸（LA）含量、肌浆网Ca^2＋．ATP酶（SERCA）活性以及进行病理形态学的观察。结果与未治疗组相比，培哚普利治疗组大鼠左室射血分数（EF）、左室短轴缩短率（FS）分别提高了3．25％和7．33％。光镜和电镜结果显示，培哚普利治疗组心肌损伤程度较模型组明显减轻。与对照组相比，未治疗组大鼠心肌ATP、AMP、TAN（总腺苷）和LA含量均显著下降（P〈0．05），但培哚普利治疗组大鼠心肌ADP、AMP、ATP／ADP和TAN（总腺苷）含量与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。与未治疗组相比，培哚普利治疗组大鼠心肌SERCA活性提高了16．41％（P〉0．05）。结论培哚普利能够改善心力衰竭大鼠心肌能量代谢、病理和超微结构。

关键词：心力衰竭异丙肾上腺素能量代谢培哚普利

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黄芪总皂苷对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用

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中国药学杂志 2006年第17期41卷 1313-1316页

作者：冯琳孟丹陈相健杨笛张寄南南京医科大学第一附属医院心血管病研究所南京210029 中国科学院上海生命科学研究院营养研究所上海200031

目的研究黄芪总皂苷(astragalosides,AS)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)致大鼠心肌损伤的影响及机制。方法用AS(5mg·kg-1·d-1×7d,ip)或曲美他嗪(10mg·kg-1·d-1×7d,ip)等治疗ISO(5mg·kg-1·d... 详细信息

目的研究黄芪总皂苷(astragalosides,AS)对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)致大鼠心肌损伤的影响及机制。方法用AS(5mg·kg-1·d-1×7d,ip)或曲美他嗪(10mg·kg-1·d-1×7d,ip)等治疗ISO(5mg·kg-1·d-1×2d,sc)心肌损伤大鼠,观察心肌组织病理改变并测定心肌组织乳酸、丙二醛及高能磷酸化物ATP,ADP和AMP含量。结果AS组心肌组织病理分级接近曲美他嗪对照治疗组,心肌乳酸和丙二醛含量较模型组显著降低(分别为P<0·05,P<0·01),ATP含量增加(P<0·05),ADP含量降低(P<0·05),AMP含量有增加趋势,以上治疗指标与曲美他嗪组比较无显著差异(P>0·05)。结论AS可拮抗ISO引起的大鼠心肌损伤,其机制与改善心肌能量代谢、抑制脂质过氧化有关。

关键词：黄芪总皂苷异丙肾上腺素心肌缺血能量代谢脂质过氧化

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斑点追踪显像技术评价心肌扭转与心肌梗死范围相关性的实验研究

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中华超声影像学杂志 2011年第3期20卷 249-252页

作者：吴志明舒先红史钧青董丽莉潘翠珍樊冰陈绍良南京医科大学附属南京第一医院心内科 210006 复旦大学附属中山医院上海市心血管病研究所心超室

目的应用斑点追踪显像技术评价急性心肌梗死（AMI）再灌注前、后左室心肌扭转，借以比较多个常规扭转指标与梗死范围的相关性，找出最能反映梗死范围的扭转指标。方法小型猪15只，结扎左前降支120min，分别检测结扎前、结扎后120rain、... 详细信息

目的应用斑点追踪显像技术评价急性心肌梗死（AMI）再灌注前、后左室心肌扭转，借以比较多个常规扭转指标与梗死范围的相关性，找出最能反映梗死范围的扭转指标。方法小型猪15只，结扎左前降支120min，分别检测结扎前、结扎后120rain、解除结扎后30min、60min、90min、12h各时间点常规超声指标以及扭转数据并进行比较。氯化硝基四氮唑蓝染色后计算心肌梗死范围。结果AMI后心尖及左室各旋转／扭转角度指标均显著下降，再灌注12h无明显改善。AMI即刻，左室整体扭转角度峰值及心尖整体旋转角度峰值与梗死范围的相关性明显优于同期其他扭转指标，相关系数分别为-0．81和-0．69（P均〈0.01）；再灌注12h相关性依然较好。结论在AMI即刻及再灌注12h内，左室整体扭转角度峰值及心尖整体旋转角度峰值是反映心肌梗死范围最敏感的扭转指标。

关键词：超声心动描记术心肌梗死扭转斑点追踪显像

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实验性心肌损伤大鼠血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的检测

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南京医科大学学报（自然科学版） 2004年第5期24卷 477-479页

作者：卞智萍杨笛冯振卿张寄南南京医科大学第一附属医院心血管病研究所江苏南京210029 南京医科大学病理学系江苏南京210029

目的应用抗人cTnI单克隆抗体检测大鼠血清cTnI。方法SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素8mg/kg,对照组大鼠注射等体积的生理盐水,4h后处死,观察心肌组织病理改变;应用2株抗人cTnI单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清cTnI。结果大鼠注... 详细信息

目的应用抗人cTnI单克隆抗体检测大鼠血清cTnI。方法SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素8mg/kg,对照组大鼠注射等体积的生理盐水,4h后处死,观察心肌组织病理改变;应用2株抗人cTnI单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法检测大鼠血清cTnI。结果大鼠注射异丙肾上腺素后心肌呈散在局灶性病变,表现为心肌纤维呈波浪样改变,部分心肌纤维断裂,心肌间质内炎细胞浸润、水肿。血清cTnI(OD值)明显高于对照组大鼠(1.28±0.78∶0.30±0.22,P<0.01)。结论本实验建立了大鼠血清cTnI双抗体夹心ELISA方法。血清cTnI能反映大鼠心肌病理变化,可作为诊断大鼠心肌损伤的一个可靠指标。

关键词：心肌损伤心肌肌钙蛋白Ⅰ 单克隆抗体 ELISA

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环孢菌素A对肾性高血压大鼠心肌MAPKs的影响

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天津医药 2005年第11期33卷 722-724页

作者：盛红专朱健华吴晓晖杨笛张寄南南通大学附属医院心内科 226001 南京医科大学第一附属医院心血管病研究所

目的:研究钙调神经磷酸酶(CaN)与丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs,包括ERK1/2、JNK和p38)间的关系。方法:制备两肾一夹肾性高血压大鼠模型熏术后2个月始给予钙调神经磷酸酶抑制剂——环孢菌素A(CsA)治疗1个月。观察大鼠心肌肥厚程度和MAPKsmRN... 详细信息

目的:研究钙调神经磷酸酶(CaN)与丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs,包括ERK1/2、JNK和p38)间的关系。方法:制备两肾一夹肾性高血压大鼠模型熏术后2个月始给予钙调神经磷酸酶抑制剂——环孢菌素A(CsA)治疗1个月。观察大鼠心肌肥厚程度和MAPKsmRNA表达的改变。结果:大鼠左室质量与胫骨长度比值、光镜下心肌细胞横截面积、左室后壁和室间隔厚度在手术组增加,大于假手术组(P<0.05),在CsA组下降,低于手术组术后3个月时(P<0.05),与假手术组差异无统计学意义。大鼠左室心肌JNKmRNA表达在手术后2个月时上调,高于假手术组(P<0.05),在CsA组下降。各组ERK1/2和p38mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:JNK参与肾性高血压大鼠心肌肥厚进展,CaN与JNK信号通路间存在相互作用,CsA通过抑制CaN和JNK信号通路逆转肥厚。

关键词：有丝分裂素激活蛋白激酶类心肌病,肥厚性高血压,肾性大鼠环孢菌素肾性高血压大鼠模型 MAPKs 环孢菌素A 大鼠心肌钙调神经磷酸酶

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