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中国皮肤性病学杂志 2006年第2期20卷 97-98页

作者：李琴刘琴谢平穆会君肖琛月南京医科大学附属无锡市第一人民医院中心实验室江苏南京214002

目的了解无锡地区2001～2004年男女性生殖道感染者解脲脲原体（UU）、人型支原体（MH）、生殖支原体（MG）、肺炎支原体（MPN）感染状况。方法收集2001～2004年来无锡市第一人民医院就诊的2286例男女性生殖道感染者病灶部拭子标本（男... 详细信息

目的了解无锡地区2001～2004年男女性生殖道感染者解脲脲原体（UU）、人型支原体（MH）、生殖支原体（MG）、肺炎支原体（MPN）感染状况。方法收集2001～2004年来无锡市第一人民医院就诊的2286例男女性生殖道感染者病灶部拭子标本（男为尿道拭子，女为阴道拭子），应用套叠式聚合酶链反应（nPCR）技术进行UU，MH，MG和MPN4种支原体核酸检测。结果2286例男女性生殖道感染者UU，MH，MG和MPN4种支原体阳性率分别为37．5％，20．0％，4．7％和4．7％，支原体总阳性率达46．2％；其中女性UU，MH2种支原体的检出率明显高于男性。结论无锡地区2001～2004年男女性生殖道感染者中支原体感染率高，且已构成流行。

关键词：生殖道感染支原体分子流行病学

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粒细胞上CD59分子缺失表达在PNH特异性诊断指标的价值分析

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重庆医学 2011年第20期40卷 1991-1994,F0002页

作者：乔伟振李小雯谢平殷莹林军南京医科大学附属无锡市人民医院中心实验室江苏无锡214023 上海市第一人民医院病理科 200080

目的研究膜反应性溶解抑制物(MIRL,CD59)分子在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者和其他类型贫血患者粒细胞膜表达情况,分析CD59分子缺失表达的诊断价值。方法使用藻红蛋白(PE)荧光素标记针对CD59分子单克隆抗体,应用流式细胞术检测CD5... 详细信息

目的研究膜反应性溶解抑制物(MIRL,CD59)分子在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者和其他类型贫血患者粒细胞膜表达情况,分析CD59分子缺失表达的诊断价值。方法使用藻红蛋白(PE)荧光素标记针对CD59分子单克隆抗体,应用流式细胞术检测CD59在16例PNH、7例再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿症(AA-PNH)、33例再生障碍性贫血(AA)、29例骨髓增生异常综合征(MDS)、11例多发性骨髓瘤(MM)、10例系统性红斑狼疮(SLE)、10例急性淋巴细胞白血病(ALL)、11例急性成髓系细胞性白血病(AML)、28例巨幼红细胞性贫血(MA)、66例缺铁性贫血(IDA)和13例自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者粒细胞上表达水平。CD59-表达数据通过一维变量方差分析。结果 CD59-细胞在30例正常对照组粒细胞上表达百分比平均为1.9%,在PNH组和其他贫血组粒细胞上缺失表达百分比平均数分别为43.6%(PNH)、29.3%(AA-PNH)、17.7%(AA)、14.6%(MDS)、12.1%(MM)、12.1%(SLE)、11.7%(ALL)、33.6%(AML)、11.6%(MA)、8.0%(IDA)和11.2%(AIHA)。与正常对照组比较,PNH、AA-PNH、AA、MDS、MM、SLE、ALL、AML、MA、IDA以及AIHA组粒细胞上CD59缺失表达均有增加,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论 CD59在PNH和其他不同类型贫血患者粒细胞上都有不同程度表达缺失,CD59分子表达降低可能不是PNH特异性诊断指标。

关键词：贫血流式细胞术阵发性睡眠性血红蛋白尿症 CD59

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乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时海马腺苷A1受体表达的影响

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中华麻醉学杂志 2011年第12期31卷 1485-1488页

作者：周巧林王志萍徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室 221002 南京医科大学附属无锡市第一人民医院麻醉科

目的探讨乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时海马腺苷A1（AA1）受体表达的影响。方法健康雄性sD大鼠88只，体重280～320g，采用随机数字表法，将其随机分为7组：假手术组（s组，n=16）、缺血再灌注组（I／R组，n：16）、乳化... 详细信息

目的探讨乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时海马腺苷A1（AA1）受体表达的影响。方法健康雄性sD大鼠88只，体重280～320g，采用随机数字表法，将其随机分为7组：假手术组（s组，n=16）、缺血再灌注组（I／R组，n：16）、乳化异氟醚预处理组（EI组，n=16）、乳化异氟醚溶剂组（LE组，n=16）、乳化异氟醚＋AAl受体拮抗剂8-环戊基-1，3-二丙基黄嘌呤（DPCPX）组（ED组，n=8）、DPCPX组（DP组，n=8）和DPCPX溶剂二甲基亚砜组（DM组，n=8）。采用大脑中动脉阻塞法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。于缺血前24h，I／R组、EI组和LE组分别腹腔注射生理盐水、8％乳化异氟醚和脂肪乳剂10．5ml／kg，DP组和DM组分别腹腔注射DPCPX1mg／kg和二甲基亚砜2．5mg／kg，S组于相应时点腹腔注射生理盐水10．5ml／kg；ED组于腹腔注射8％乳化异氟醚前30min腹腔注射DPCPX1mg／kg。各组于再灌注24h时取8只大鼠，进行神经功能缺陷评分，然后处死，取脑组织，测定脑梗死体积；S组、I／R组、EI组和LF组于再灌注24h时处死8只大鼠，取脑组织，采用Western blot法检测海马AA1受体的表达水平。结果与s组比较，其余各组神经功能缺陷评分和脑梗死体积百分比升高，I／R组和LE组海马AAl受体表达下调，EI组海马AA1受体表达上调（P〈0．01）；与I／R组比较，EI组神经功能缺陷评分和脑梗死体积百分比降低，海马AAl受体表达上调（P〈0．05或0．01）；与EI组比较，LE组、ED组、DP组和DM组神经功能缺陷评分和脑梗死体积百分比升高（P〈0．05或0．01）。结论乳化异氟醚预处理减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的机制可能与上调海马AA1受体表达有关。

关键词：异氟醚脂肪乳剂静脉注射用受体腺苷A1 再灌注损伤脑缺血预处理海马

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乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时血小板活化因子及其受体表达的影响

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中华麻醉学杂志 2012年第2期32卷 221-224页

作者：丁兆霞史炯王志萍徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室 221002 南京医科大学附属无锡市第一人民医院麻醉科

目的探讨乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时血小板活化因子（PAF）及其受体表达的影响。方法健康成年雄性SD大鼠32只，体重250—300g，采用随机数字表法，将大鼠随机分为4组（n=8）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组... 详细信息

目的探讨乳化异氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注时血小板活化因子（PAF）及其受体表达的影响。方法健康成年雄性SD大鼠32只，体重250—300g，采用随机数字表法，将大鼠随机分为4组（n=8）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）、乳化异氟醚组（EI组）和脂肪乳组（LE组）。采用线栓阻塞大脑中动脉2h行再灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。于缺血前24h，S组和I／R组腹腔注射生理盐水10．5ml／kg，EI组和LE组分别给予8％乳化异氟醚和30％脂肪乳10．5ml／kg。再灌注12h时进行神经功能缺陷评分，随后每组处死4只大鼠，采用TIC染色法测定脑梗死体积，每组取其余4只大鼠，采集静脉血样，采用ELISA法测定血浆PAF浓度，随后处死大鼠，分离海马和皮层，采用Western blot法测定PAF受体的表达。结果与S组比较，其余3组神经功能缺陷评分评分、脑梗死体积百分比、血浆PAF浓度、海马和皮层PAF受体表达升高（P〈0．01）；与I／R组比较，EI组上述指标降低（P〈0．05），LE组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论乳化异氟醚预处理可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤，其机制与抑制PAF及其受体表达有关。

关键词：异氟醚脂肪乳剂,静脉注射用再灌注损伤血小板活化因子受体,细胞表面脑

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淋病病人5种支原体合并感染分析

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中华男科学杂志 2001年第5期7卷 343-344页

作者：黄海峰施和健缪昉李琴南京医科大学附属无锡市第一人民医院皮肤科江苏无锡214002 南京医科大学附属无锡市第一人民医院妇产科江苏无锡214002 南京医科大学附属无锡市第一人民医院性病实验室江苏无锡214002

了解淋病病人的支原体合并感染状况 ,有助于指导临床联合用药。为此 ,我们应用巢式ＰＣＲ(ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ)技术对 4 0 7例男女性淋病病人的病灶部拭子标本进行解脲脲原体 (Ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ ,Ｕｕ)、人... 详细信息

了解淋病病人的支原体合并感染状况 ,有助于指导临床联合用药。为此 ,我们应用巢式ＰＣＲ(ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ)技术对 4 0 7例男女性淋病病人的病灶部拭子标本进行解脲脲原体 (Ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ ,Ｕｕ)、人型支原体 (Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｈｏｍｉｎｉｓ,Ｍｈ)、肺炎支原体 (Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ,Ｍｐｎ)、生殖支原体 (Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇｅｎｉｔａｌｉｕｍ ,Ｍｇ)和发酵支原体 (Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｆｅｒｍｅｎｔａｎｓ ,Ｍｆ) 5种支原体核酸联合检测。现将结果报告如下。1　对象与方法1.1　对象　 4 0 7例男女性淋病病人均为 199

关键词：淋病支原体巢式PCR 感染

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DCC基因201密码子突变与胃癌相关性的研究

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外科理论与实践 2002年第1期7卷 46-48页

作者：张浩刘晓蒋志阳黄燮民唐建英南京医科大学附属无锡第一医院无锡市第一人民医院普通外科 214002 南京医科大学附属无锡第一医院无锡市第一人民医院中心实验室 214002

目的 :研究胃癌组织中是否存在大肠癌缺失 (deletedincolorectalcancer,DCC)基因 2 0 1密码子点突变及其与胃癌临床病理因素的相关性。方法 :取 5 4例胃癌病人的胃癌组织和癌旁黏膜组织及非胃癌病人的正常胃黏膜组织标本 30份 ,行PCR +... 详细信息

目的 :研究胃癌组织中是否存在大肠癌缺失 (deletedincolorectalcancer,DCC)基因 2 0 1密码子点突变及其与胃癌临床病理因素的相关性。方法 :取 5 4例胃癌病人的胃癌组织和癌旁黏膜组织及非胃癌病人的正常胃黏膜组织标本 30份 ,行PCR +限制性片段长度多态性 (restrictionfragmentlengthpolymorphism ,RFLP)分析。结果 :胃癌组织、癌旁黏膜及正常胃黏膜中DCC基因 2 0 1密码子点突变率分别为 5 9.3%、5 3.7%和 10 %,胃癌组织与癌旁黏膜两者的突变率都明显高于正常胃黏膜 (P <0 .0 5 ) ,胃癌组织中以纯合突变为主 ,而癌旁黏膜中以杂合突变为主(P <0 .0 5 )。此外 ,2 0 1密码子的突变与胃癌的浸润深度、淋巴结转移和TNM分期存在正相关。结论 :DCC基因2 0 1密码子突变是胃癌发生的一个早期基因事件 ,并且该突变参与胃癌的进展和转移。临床上可以根据这一特点 ,对胃镜活检标本进行DCC基因 2 0 1密码子突变的分析 ,以筛选出可能发生胃癌的高危人群。

关键词： DCC基因基因突变胃癌限制性片段长度多态性 201密码子相关性

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男性性传播疾病病人阴道加德纳菌、支原体感染调查

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中华男科学杂志 2002年第6期8卷 459-459,462页

作者：李琴谢平肖琛月王志荣南京医科大学附属无锡市第一人民医院中心实验室江苏无锡214002 南京医科大学附属无锡市第一人民医院泌尿外科江苏无锡214002

阴道加德纳菌(Gardmerella vaginalis,Gv)和支原体(My-coplasma,M)是女性细菌性阴道病(Becterial Vafinosis)常见病原体群[1].

关键词：男性性传播疾病阴道加德纳菌支原体

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亚低温对脑出血大鼠神经细胞凋亡及神经功能缺损的影响

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中风与神经疾病杂志 2012年第7期29卷 618-621页

作者：党静静王志萍徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室江苏徐州221002 南京医科大学附属无锡市第一人民医院麻醉科江苏无锡214023

目的研究延迟性亚低温对大鼠脑出血后神经细胞凋亡及神经功能缺损的动态影响。方法将大鼠随机分为正常组(N),假手术组(S),脑出血组(M),延迟12h亚低温组(HT12)和延迟24h亚低温组(HT24)。应用立体定向技术将Ⅳ型胶原酶注入大鼠尾壳核制作... 详细信息

目的研究延迟性亚低温对大鼠脑出血后神经细胞凋亡及神经功能缺损的动态影响。方法将大鼠随机分为正常组(N),假手术组(S),脑出血组(M),延迟12h亚低温组(HT12)和延迟24h亚低温组(HT24)。应用立体定向技术将Ⅳ型胶原酶注入大鼠尾壳核制作脑出血模型,模型制备后于12h及24h点将大鼠放入冷室降温,维持肛温在(33±1)℃,均持续12h,各组在模型制作后12h、24h、36h、3d、7d记录大鼠神经功能缺损评分及死亡率。大鼠脑组织做HE染色及TUNEL染色,流式细胞技术观察神经细胞凋亡数目的变化。结果亚低温(HT12,HT24)可减少脑出血后大鼠各时间点的TUNEL染色的阳性细胞数(P<0.05);与模型组相比,3d时亚低温组(HT12,HT24)神经细胞凋亡率及大鼠7d的死亡率明显降低(P<0.05),差别有统计学意义;延迟24h的亚低温可降低大鼠7d的NDS评分(P<0.05),而12h的延迟治疗无此作用(P>0.05)。结论延迟的亚低温治疗可减少大鼠脑出血后神经细胞的凋亡,降低死亡率,发挥脑保护作用。

关键词：脑出血亚低温凋亡神经功能缺损

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体外扩增的CD4＋CD25＋调节性T细胞过继转输对自然流产模型妊娠预后的影响

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现代免疫学 2010年第2期30卷 132-137页

作者：印永祥韩晓枫施勤赵益明何杨南京医科大学附属无锡市妇幼保健院病理科无锡214002 南京医科大学基础医学院南京210029 苏州大学附属第一人民医院骨科实验室苏州215006 江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室苏州215006

为了观察体外扩增的CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg)对不明原因复发性流产(RSA)妊娠预后的影响并探讨其作用机制。以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,磁珠分选雌性CBA/J... 详细信息

为了观察体外扩增的CD4^+CD25^+调节性T细胞(CD4^+CD25^+Treg)对不明原因复发性流产(RSA)妊娠预后的影响并探讨其作用机制。以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,磁珠分选雌性CBA/J小鼠脾脏CD4^+CD25^+Treg并流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞纯度。妊娠第14天的CBA/J雌鼠(与雄性DBA/2J交配)为流产组;妊娠第14天的CBA/J雌鼠(与雄性BALB/c交配)为正常妊娠组;处女型CBA/J雌鼠脾CD4^+CD25^+Treg过继转输到孕4 d(着床期)CBA/J雌鼠(与雄性DBA/2J交配)体内为对照组;经体外培养扩增4 d的脾CD4^+CD25^+Treg过继转输到孕4 d(着床期)CBA/J雌鼠(与雄性BALB/c交配)体内为治疗组。分别于孕14 d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率并测定宿主血清细胞因子IFN-γ/IL-10/TGF-β1表达水平和脾细胞叉状头转录因子Foxp3 mRNA相对含量。结果与对照组比较,过继转输体外扩增的CD4^+CD25^+Treg的宿主孕鼠的胚胎吸收率(11.32%)显著下降;治疗组中血清IL-10/IFN-γ、TGF-β1/IFN-γ比例有显著升高,外周血细胞因子IFN-γ有显著升高,细胞因子IL-10、TGF-β1无显著差异;Foxp3 mRNA相对表达量显著升高。孕早期经体外扩增的CD4^+CD25^+Treg疗法能诱导妊娠免疫耐受,有利于向妊娠维持的Th2、Th3、Tr1细胞偏移,叉状头转录因子Foxp3在妊娠免疫耐受上起着重要作用。

关键词： CD4+CD25+调节性T细胞体外扩增胚胎吸收率细胞因子 Foxp3

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PTD-p53融合蛋白的表达、纯化及其对肝癌细胞的转导活性

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东南大学学报（医学版） 2007年第3期26卷 194-197页

作者：丁忠阳蔡兵穆会君孙力俞悦高云南京医科大学附属无锡市第一人民医院肝胆外科江苏无锡214002 南京医科大学附属无锡市第一人民医院中心实验室江苏无锡214002 南京医科大学附属江苏省人民医院肝脏外科江苏南京210029

目的:原核表达野生型p53与PTD的融合蛋白,检测PTD介导p53进入肝癌细胞的效率。方法:利用RT-PCR方法从A549细胞系中分离野生型p53基因,将该基因分别克隆入pTATHA和pET32 a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)LysS内诱导表达并进行纯化。以... 详细信息

目的:原核表达野生型p53与PTD的融合蛋白,检测PTD介导p53进入肝癌细胞的效率。方法:利用RT-PCR方法从A549细胞系中分离野生型p53基因,将该基因分别克隆入pTATHA和pET32 a原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)LysS内诱导表达并进行纯化。以纯化的p53蛋白经腹腔免疫BALB/c小鼠,制备高效价的抗血清。将PTD-p53融合蛋白加入HepG2细胞培养上清,利用间接免疫荧光法检测PTD-p53融合蛋白导入HepG2细胞的效率。结果:成功地构建了含有野生型p53基因的原核表达载体,表达纯化了p53融合蛋白及p53蛋白,证实PTD-p53可以高效地转入HepG2细胞。结论:PTD-p53融合蛋白的表达纯化及活性分析,为应用PTD-p53蛋白治疗肝癌的实验研究奠定了理论基础。

关键词： PTD-p53融合蛋白表达纯化肝癌

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