检索结果-内蒙古大学图书馆

中国化学会第十三届全国分析化学年会

作者：高薇茅力练鸿振生命分析化学国家重点实验室南京大学化学化工学院南京大学现代分析中心现代毒理学教育部重点实验室南京医科大学公共卫生学院

在实际生物样品中,蛋白质常以复杂混合物的形式与基体组分共存,给蛋白质的检测带来了极大的挑战。亲水有机聚合物整体柱由亲水功能性单体、交联剂、致孔剂和引发剂等通过原位聚合得到,其制备过程简单,具有渗透性好、传质速度快、耐酸碱... 详细信息

在实际生物样品中,蛋白质常以复杂混合物的形式与基体组分共存,给蛋白质的检测带来了极大的挑战。亲水有机聚合物整体柱由亲水功能性单体、交联剂、致孔剂和引发剂等通过原位聚合得到,其制备过程简单,具有渗透性好、传质速度快、耐酸碱等优点,因此被广泛地用作固相萃取（SPE）材料,而整体柱在蛋白质、核酸等大分子快速分离方面已显示出明显的优势。本实验采用含有季铵盐正离子和磺酸根负离子的两性离子材料为单体,使用1-丙醇,1,4-丁二醇和水组成的三元致孔剂,通过"一锅法"在不锈钢管中合成亲水性整体柱,利用扫描电子显微镜（SEM）、傅立叶变换红外光谱（FT-IR）等对材料进行了表征。通过亲、疏水作用和静电作用等选择性分离富集细胞色素c（Cytc）,并对影响SPE前处理和高效液相色谱（HPLC）测定的各因素进行了考察,如溶液p H、溶液离子强度、最大吸附量等,所建立的分析方法具有富集倍数高、分离效果好等优点。

关键词：亲水作用色谱整体柱 SPE 细胞色素c

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

蛋白质组学技术研究污染物细胞毒性的时间依赖性

蛋白质组学技术研究污染物细胞毒性的时间依赖性

引用

第十次全国分析毒理学大会暨第六届分析毒理专业委员会会议

作者：赵文杰张子今郑伟娟茅力胡忻练鸿振生命分析化学国家重点实验南京大学化学化工学院南京大学现代分析中心医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院教育部现代毒理学重点实验室南京医科大学公共卫生学院

所有生物都能在一定范围内因适应性应激反应调整它们体内相关基因组或蛋白组的表达模式,对外源性污染物刺激或压力做出适应性的响应。污染物诱导基因或蛋白表达水平的时间差异可能是探索自平衡调节和防御这一响应机制的关键因素。作为... 详细信息

所有生物都能在一定范围内因适应性应激反应调整它们体内相关基因组或蛋白组的表达模式,对外源性污染物刺激或压力做出适应性的响应。污染物诱导基因或蛋白表达水平的时间差异可能是探索自平衡调节和防御这一响应机制的关键因素。作为毒理学研究的一种有效策略,蛋白质组学被认为是研究细胞对环境污染物响应行为的强有力工具。蛋白质组学旨在从细胞水平及整体水平研究蛋白质的组成及其动态变化规律,从而深入认识有机体的各种生理和病理过程。虽然蛋白质组学在生物标志物研究方面应用日益增多,但对于应用蛋白质组学技术对环境样品进行毒性和风险评估（环境蛋白质组学）的了解还非常有限。我们运用2DE-MS蛋白组学的方法描绘了A549细胞内可溶性全蛋白组表达模式对外源性必需金属元素锌和毒性金属元素镉刺激产生的时间依赖性响应,并采用RT-PCR和Western blot等技术研究了A549细胞中金属离子自平衡调节和细胞毒性关键蛋白质的转录和表达响应金属离子暴露时所展现出的时间依赖性变化,进而结合ICP-MS和共聚焦显微成像等技术探索了这种时间依赖性响应的过程机制。研究了锌平衡信号通路中关键蛋白质金属转录因子MTF-1、金属硫蛋白MT-1以及Zn转运子ZnT-1和ZIP-1在mRNA和蛋白质水平对外源锌刺激时间依赖性的差异表达,发现了它们所具有的对外源锌刺激产生时间依赖性表达的特性。呈现了外源锌刺激A549细胞不同时间后细胞全蛋白的差异表达谱,发现了差异表达蛋白组4种表达模式、差异变化的保守性和随着刺激时间的延长蛋白表达量主要表现为降低等表达规律。运用共聚焦技术研究了自由Zn在细胞中的含量和分布时间依赖性的变化情况,进一步验证和探索了细胞对外源锌刺激因适应性反应表现出的时间依赖性响应的特性和调节细胞内锌平衡的信号转导过程;研究了外源镉刺激A549细胞后的细胞全蛋白差异表达谱和相关差异蛋白质对外源金属离子刺激的时间依赖性响应的规律和主要表达模式,发现了四种与Zn响应显著不同的特异性Cd响应时间依赖性细胞核蛋白组表达模式和规律,这可能与Cd和Zn具有不同的毒性特点和作用机理相呼应。我们同样以A549细胞系为细胞模型,运用基于iTRAQ的蛋白组学技术,研究了A549暴露于亚细胞毒性浓度的纳米氧化锌不同时间后细胞内蛋白质组的响应模式,再通过Western blot技术,研究相关细胞信号通路中的重要蛋白质。同时,采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS水平,并测定细胞内总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽的含量,用以评估细胞内的氧化压力。发现nZnO与Zn尽管在低浓度下表现出非常相似的细胞毒性,但是在高浓度下的细胞毒性有较大差异,表明nZnO的毒性机理与Zn并不完全相同。通过iTRAQ方法检测细胞蛋白质组,我们发现刺激9小时后发生差异表达的蛋白远远多于24小时后,并且大部分蛋白的变化趋势是先发生下调然后逐渐上调,揭示了刺激时间在研究nZnO毒性机理中的重要性。Western blot结果中,NF-κB p65与PNPase的表达在刺激9小时后的显著上升进一步证明纳米颗粒对毒性产生的贡献。另一方面,HSP90的表达在刺激9小时后上升而在24小时后降低至未受刺激的水平,表明细胞对nZnO整体毒性的响应已经使细胞内稳态基本达到平衡。根据实验结果推测,纳米粒子的毒性应该由颗粒和解离出的离子共同构成,在较低的浓度下,细胞短期内会受到颗粒与离子共同产生的毒性,而随着时间推移,细胞会自发调节自身稳态平衡,纳米颗粒产生的毒性会较快的被减弱或者清除,而对于解离出的离子细胞需要较长的时间去平衡,因此金属离子产生的毒性会占据主要地位。这一结果揭示了在对纳米粒子的毒性机理研究中控制刺激时间的必要性。综上,研究结果表明对于外源污染物刺激,细胞及其蛋白质呈现出的时间依赖性响应和表达具有一定的普遍性和特异性,进一步证明了适应性应激反应引起的时间特异性响应和表达在蛋白组研究和信号机制研究中的重要作用和意义。

关键词：蛋白质组学时间依赖性响应信号转导重金属纳米氧化物

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于抗体芯片的肝癌血清蛋白表达图谱分析和应用

引用

军事医学 2018年第12期42卷 903-909页

作者：许萌王红叶代佳宇赵晓航牟劲松刘伟孙薇许丹科于晓波南京大学化学化工学院生命分析化学国家重点实验室南京210023 军事科学院军事医学研究院生命组学研究所国家蛋白质科学中心(北京)北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室北京102206 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 解放军总医院第五医学中心ICU 北京100039 北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所肝胆胰外一科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室北京100142

目的基于高密度抗体芯片技术检测肝癌(肝细胞癌,HCC)血清的蛋白表达图谱和潜在生物标志物。方法运用由1000个血清蛋白抗体组成的抗体芯片结合生物素标记血清的策略,对健康人和乙型肝炎、肝硬化、HCC[甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)阴性]... 详细信息

目的基于高密度抗体芯片技术检测肝癌(肝细胞癌,HCC)血清的蛋白表达图谱和潜在生物标志物。方法运用由1000个血清蛋白抗体组成的抗体芯片结合生物素标记血清的策略,对健康人和乙型肝炎、肝硬化、HCC[甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)阴性]4组样本的血清蛋白表达图谱进行检测,通过one-way ANOVA统计方法分析差异蛋白,用实验室点制的小型芯片对检测的差异蛋白进行验证。结果该抗体芯片技术可用于HCC血清蛋白表达图谱的检测,且有很好的重复性和特异性。通过小型芯片的验证发现了AFP、癌胚抗原125(CA125)、Myc诱导核抗原(MINA)和D-二聚体(D-dimer) 4个潜在生物标志物,其中MINA和D-dimer分别与肝硬化和HCC密切相关(P≤0. 01)。另外,生存曲线分析发现MINA和D-dimer对HCC可能具有一定的预后价值(P≤0. 05)。结论通过抗体芯片的方法可初步筛选出具有临床诊断意义的HCC血清标志物,为进一步开展临床验证奠定基础。

关键词：肝癌抗体芯片生物学标记蛋白表达图谱甲胎蛋白类癌胚抗原

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

亲水作用色谱柱用于亲水化合物正辛醇-水分配系数的研究

亲水作用色谱柱用于亲水化合物正辛醇-水分配系数的研究

引用

第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会

作者：梁超高薇乔俊琴茅力练鸿振生命分析化学国家重点实验室南京大学化学化工学院和现代分析中心现代毒理学教育部重点实验室南京医科大学公共卫生学院

正辛醇-水分配系数(logP)是表征物质疏水性的一种重要参数,常被用于研究药物在生物体内的吸收、分布、代谢、排泄、毒性(ADMET)过程,在药物设计中有很重要的参考价值。logP对应化合物中性状态,当化合物在溶液中发生离解时,则常常用表观... 详细信息

正辛醇-水分配系数(logP)是表征物质疏水性的一种重要参数,常被用于研究药物在生物体内的吸收、分布、代谢、排泄、毒性(ADMET)过程,在药物设计中有很重要的参考价值。logP对应化合物中性状态,当化合物在溶液中发生离解时,则常常用表观正辛醇-水分配系数或分配系数(logD)来表征疏水性。logD可以由样品pKa和溶液pH计算获得。摇瓶法(SFM)和反相液相色谱法(RPLC)是OECD推荐的logP/logD测定方法。相比SFM,RPLC法测定logP/logD操作简便

关键词：亲水作用色谱(HILIC) 亲水化合物正辛醇-水分配系数(logP)

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

亲水作用色谱柱用于亲水化合物正辛醇-水分配系数的研究

亲水作用色谱柱用于亲水化合物正辛醇-水分配系数的研究

引用

第21届全国色谱学术报告会

作者：梁超高薇乔俊琴茅力练鸿振生命分析化学国家重点实验室南京大学化学化工学院和现代分析中心南京210023 现代毒理学教育部重点实验室南京医科大学公共卫生学院南京211166

正辛醇-水分配系数(logP)是表征物质疏水性的一种重要参数,常被用于研究药物在生物体内的吸收、分布、代谢、排泄、毒性(ADMET)过程,在药物设计中有很重要的参考价值.logP对应化合物中性状态,当化合物在溶液中发生离解时,则常常用表观... 详细信息

正辛醇-水分配系数(logP)是表征物质疏水性的一种重要参数,常被用于研究药物在生物体内的吸收、分布、代谢、排泄、毒性(ADMET)过程,在药物设计中有很重要的参考价值.logP对应化合物中性状态,当化合物在溶液中发生离解时,则常常用表观正辛醇-水分配系数或分配系数(logD)来表征疏水性.亲水作用色谱(HILIC)与RPLC的流动相类似但保留模式相反，特别适合用于亲水化合物的分离分析。

关键词：亲水化合物正辛醇水分配系数亲水作用色谱柱

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Cpt1b通过增强脂肪酸氧化促进重编程

Cpt1b通过增强脂肪酸氧化促进重编程

引用

中国细胞生物学学会2017年全国学术大会

作者：林兆宇刘飞史培良宋安营邹达远李建新高翔南京大学模式动物研究所生物医药国家重点实验室疾病动物模型教育部重点实验室遗传与发育协同创新中心中国江苏省南京市学府路12号南京大学化学化工学院生命分析化学国家重点实验室中国江苏省南京市汉口路22号210093

代谢途径活性与偏好的改变是体细胞向诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)重编程过程中的关键步骤之一。尽管优化代谢变化能够促进重编程,但是具体的代谢变化和机制仍不明确。通过分析重编程过程中间态细胞、体细胞... 详细信息

代谢途径活性与偏好的改变是体细胞向诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)重编程过程中的关键步骤之一。尽管优化代谢变化能够促进重编程,但是具体的代谢变化和机制仍不明确。通过分析重编程过程中间态细胞、体细胞和iPSCs的基因表达,我们发现脂肪酸氧化中的速度限制酶Cpt1b在重编程早期显著上调。而在重编程过程中分别添加Cpt1b介导的脂肪酸氧化代谢的初产物软脂酰肉毒碱(palmitoylcarnitine)和终产物乙酰辅酶A(acetyl-CoA)都能够提高重编程效率。我们还证明了这些代谢产物是在重编程早期通过增强氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OX-PHOS)和抑制蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)。本研究揭示了Cpt1b介导的脂肪酸氧化对重编程效率有重要影响。

关键词： Cpt1b 重编程软脂酸肉毒碱氧化磷酸化蛋白激酶C

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

A549细胞的锌刺激响应蛋白组表达图谱和MTF-1调节蛋白表达的时间依赖性研究

A549细胞的锌刺激响应蛋白组表达图谱和MTF-1调节蛋白表达的时间...

引用

第十届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会

作者：赵文杰宋群王燕虹李柯锦茅力胡忻练鸿振郑伟娟华子春生命分析化学国家重点实验室南京大学化学化工学院医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院现代毒理学教育部重点实验室南京医科大学公共卫生学院

锌在许多生物过程中发挥着关键作用[1,2]。然而,它在高浓度是有毒的,其在细胞内的平衡严格受到金属反应转录因子(MTF-1)和许多其他蛋白质的调节,以避免它对细胞产生金属毒性和氧化压力[3,4]。我们首先研究了外源锌刺激对A549细胞的细胞... 详细信息

锌在许多生物过程中发挥着关键作用[1,2]。然而,它在高浓度是有毒的,其在细胞内的平衡严格受到金属反应转录因子(MTF-1)和许多其他蛋白质的调节,以避免它对细胞产生金属毒性和氧化压力[3,4]。我们首先研究了外源锌刺激对A549细胞的细胞周期和细胞内锌离子分布的影响,并比较了它对乳腺癌细胞MDA-MB-231、肝癌细胞Hep G2和人肾上

关键词：时间依赖性外源锌 MTF-1 刺激响应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

锌胁迫响应蛋白组及其调控蛋白的时间依赖性表达

锌胁迫响应蛋白组及其调控蛋白的时间依赖性表达

引用

第八届全国分析毒理学大会暨中国毒理学会分析毒理专业委员会第五届会员代表大会

锌在许多生物过程中发挥着关键作用[1]。然而,锌在高浓度是有毒的,它在细胞内的平衡严格受到金属反应转录因子(MTF-1)和许多其他蛋白质的调节,以避免它对细胞产生金属毒性和氧化压力[2]。我们前期研究了外源锌刺激对A549细胞的细胞周期... 详细信息

锌在许多生物过程中发挥着关键作用[1]。然而,锌在高浓度是有毒的,它在细胞内的平衡严格受到金属反应转录因子(MTF-1)和许多其他蛋白质的调节,以避免它对细胞产生金属毒性和氧化压力[2]。我们前期研究了外源锌刺激对A549细胞的细胞周期和细胞内锌离子分布的影响,并比较了它对乳腺癌细胞MDA-MB-231、肝癌细胞HepG2和人肾上皮细胞293T的细胞周期、凋亡和活性的相同或不同的影响[3]。在认识了外源锌刺激对细胞基本作用的基础之上,我们进一步通过高分辨二维凝胶电泳(2DE)展现了在外源锌刺激A549细胞24 h后细胞中可溶性全蛋白质组表达模式的变化;运用MALDITOF/TOF和Mascot数据库搜索、分析并鉴定出18个差异蛋白质点和其他68个蛋白质点,并对差异蛋白质进行了功能分类分析。结果表明,已鉴定的差异蛋白质主要涉及到细胞的代谢、生长、转运和分化过程。此外,我们运用Western blot和RT-PCR分析了由MTF-1调节的蛋白质,包括金属结合蛋白MT-1、锌排出蛋白ZnT-1和锌流入蛋白ZIP-1,在蛋白表达水平和mRNA水平对外源锌刺激响应的时间依赖性表达。结果表明,其mRNA和蛋白水平的变化与它们各自为了维持细胞内锌平衡所表现的独特的生物功能相一致。然而,在外源锌刺激细胞相同时间段内,ZIP-1蛋白水平明显上调的同时,其mRNA水平的转录却呈现出显著下调的趋势。这可能是由于ZIP-1在外源性刺激的环境下参与了协同作用的多个信号通路这一复杂的锌调控机制。值得注意的是,我们观察到在外源锌刺激细胞后,MTF-1调节的上述蛋白质在10 h左右其蛋白水平的表达或mRNA水平的转录均呈现出最大的变化,而在经常被用于2DE分析的时间点24 h时蛋白水平的表达或mRNA水平的转录的变化显得微不足道。因此,对A549细胞锌响应的时间依赖性的研究有助于了解细胞对锌胁迫响应的动态特性,我们的研究结果将为锌调控的细胞信号通路、锌的生理活性以及毒性的深入研究提供一定的基础信息。

关键词：锌离子双向电泳 MTF-1 时间依赖性表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

不同锌形态刺激对MDAMB231细胞的影响

不同锌形态刺激对MDAMB231细胞的影响

引用

中国化学会第29届学术年会

作者：王燕虹赵文杰李柯锦茅力胡忻练鸿振郑伟娟生命分析化学国家重点实验室南京大学化学化工学院和现代分析中心医药生物技术国家重点实验室南京大学生命科学学院现代毒理学教育部重点实验室南京医科大学公共卫生学院

细胞内通常含有痕量的金属元素,不同的金属元素在细胞或组织中的分布不同,金属形态的差异可能差异性诱导某些生化过程[1]。锌作为一种广泛分布的丰富的重要微量元素参与众多生物过程[2]。我们首先研究了不同形态的锌,包括无机锌ZnSO4、... 详细信息

细胞内通常含有痕量的金属元素,不同的金属元素在细胞或组织中的分布不同,金属形态的差异可能差异性诱导某些生化过程[1]。锌作为一种广泛分布的丰富的重要微量元素参与众多生物过程[2]。我们首先研究了不同形态的锌,包括无机锌ZnSO4、有机锌葡萄糖酸锌和生物锌杆菌肽锌在不同浓度条件下对人乳腺癌细胞（MDAMB231）内自由锌离子分布的影响。接着,我们还研究了它们对MDAMB231细胞的活性、周期和凋亡的影响。结果表明:MDAMB231细胞内自由锌离子的含量随着外源锌浓度的增加而增加,在相同浓度的条件下ZnSO4和葡萄糖酸锌比杆菌肽锌致使更多的自由锌离子分布在细胞内;此外,MDAMB231细胞的活性、周期、凋亡和死亡对不同形态的锌元素压力具有不同的响应。ZnSO4和葡萄糖酸锌分别在浓度不低于50μM和150μM时即对细胞的活性和周期、凋亡等具有显著性的影响,而细胞对实验浓度内杆菌肽锌的刺激没有显著性的影响。最后,MDAMB231细胞中细胞周期蛋白Cyclin B1和Cyclin D1和细胞凋亡蛋白Caspase-8和Caspase-9在锌处理前后表达量的变化验证了我们的结论。

关键词：锌形态人乳腺癌细胞（MDAMB231）细胞活性细胞周期细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

磁固相萃取与ICP-MS联用用于水中痕量锑的形态分析

磁固相萃取与ICP-MS联用用于水中痕量锑的形态分析

引用

第三届全国原子光谱及相关技术学术会议

作者：李彭胡忻陈逸珺茅力练鸿振生命分析化学国家重点实验室南京大学化学化工学院和现代分析中心汉口路22号南京210093 现代毒理学教育部重点实验室南京医科大学公共卫生学院天元东路818号南京211166

锑是一种广泛存在于环境中的有毒元素,美国环境保护署建议饮用水中可允许的最大浓度值为0.006 mg L-1,欧盟和我国规定饮用水中锑的限值为0.005 mg L-1[1].在环境水体中锑主要以Sb(Ⅲ)和Sb(Ⅴ)的形态存在,研究表明锑的毒性不仅与其总量有... 详细信息

锑是一种广泛存在于环境中的有毒元素,美国环境保护署建议饮用水中可允许的最大浓度值为0.006 mg L-1,欧盟和我国规定饮用水中锑的限值为0.005 mg L-1[1].在环境水体中锑主要以Sb(Ⅲ)和Sb(Ⅴ)的形态存在,研究表明锑的毒性不仅与其总量有关,更重要的是取决于其存在形态[2],其中无机形态的锑危害最大,因此开展锑的形态分析研究显得十分必要.磁性材料,尤其是超顺磁的Fe3O4 纳米材料,由于其具有快速分离,操作简单,富集倍数高以及方法廉价等特点,近年来作为固相材料广泛应用在各个研究领域.对Fe3O4 纳米材料修饰具有一定选择性作用的有机官能团,可以应用于痕量元素及其形态分析等领域[3].本论文建立了一种磁固相萃取与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用的方法用于水中锑的形态分析(Fig.1).利用吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(APDC)与锑络合,在不同Ph范围时,辛烷基修饰的磁性四氧化三铁(C8-Fe3O4@SiO2)纳米材料(Fig.2)能够选择性地萃取溶液中Sb(Ⅲ)和总Sb 的APDC 络合物,从而实现对Sb(Ⅲ)和Sb(Ⅴ)的分别测定.对于影响磁固相萃取和ICP-MS 测定的各个因素进行了考察,如溶液Ph(Fig.3),APDC 浓度,洗脱溶剂和超声时间等.最终建立的方法可成功用于实际水样中锑形态的测定.

关键词：锑形态分析磁固相萃取 ICP-MS

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：