钙调素(Calmodulin,CaM)是细胞内Ca2+信号的主要受体,能够与靶蛋白相互结合调节靶蛋白的活性,在细胞增殖、分化、凋亡、迁移等过程中都起着重要作用。荧光共振能量转移(f luorescence resonance energy transfer,FRET)技术是目前研究蛋...
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钙调素(Calmodulin,CaM)是细胞内Ca2+信号的主要受体,能够与靶蛋白相互结合调节靶蛋白的活性,在细胞增殖、分化、凋亡、迁移等过程中都起着重要作用。荧光共振能量转移(f luorescence resonance energy transfer,FRET)技术是目前研究蛋白质相互作用比较成熟的方法之一。作者通过Cre-loxP位点特异性重组技术构建了带有CFP荧光蛋白标记的文库,与YFP-CaM共同转染HEK293细胞,应用荧光共振能量转移技术(FRET)进行检测,挑取发生FRET作用的单个细胞,并进行单细胞PCR检测。由此扩增出的片段通过测序和蛋白序列数据库NCBI进行序列比对后,筛选出与CaM产生相互作用的蛋白。目前,已经通过这种方法成功地筛选到了一些与CaM相结合的蛋白,从而为进一步研究CaM蛋白在生理环境下的作用提供有利条件。
在几乎所有生物体中,生物钟和细胞周期两个最重要的有节律事件。生物钟掌握着时间信息并且使生物体维持24小时的生理周期,而细胞周期主要影响生长和分裂。生物钟对细胞分裂的影响,在各种生物中都观察到。然而,这种作用是否影响哺乳类的生理还未知。时钟蛋白PER2上的一个突变（S662G）是引起家族性早睡早起综合症（FASPS）的原因,该综合症的表现是病人在傍晚就要睡觉,早上很早就要起床。这篇文章中,我们的证据表明PER2突变能抵抗X-射线诱导凋亡,并增加E1A和RAS介导的肿瘤转化。与此相一致的,在肿瘤敏感的p53小鼠背景上,PER2突变能够影响肿瘤发生。通过分析时钟控制的细胞周期基因p21,c-Myc,Cyclin D1和p27,我们发现p21 and Cyclin D的相对表达相位在PER2突变的MEFs中有明显的变化。我们相信,这种由Per2介导的p21的相位变化是细胞周期和肿瘤发生的新机制。
前期相关工作表明,MRG(Myostatin Related Gene)作为TGF-β超家族Myostatin的下游靶基因,在Myostatin处理的鸡原代成肌细胞中表达上调;Myostatin是成肌细胞增殖和分化的负调控因子,而MRG的功能目前知之甚少,在细胞中过表达MRG可以抑制...
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前期相关工作表明,MRG(Myostatin Related Gene)作为TGF-β超家族Myostatin的下游靶基因,在Myostatin处理的鸡原代成肌细胞中表达上调;Myostatin是成肌细胞增殖和分化的负调控因子,而MRG的功能目前知之甚少,在细胞中过表达MRG可以抑制肌细胞和几种其它非肌细胞包括癌细胞的增殖过
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