检索结果-内蒙古大学图书馆

植物生理学报 2010年第11期46卷 1114-1120页

作者：姚娜安新民杨凯张志毅北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083 中国林业科学研究院林业研究所国家林业局林木培育重点实验室北京100091 北京农学院农业应用新技术北京市重点实验室北京102206

以毛白杨基因型TC152无菌苗为材料,研究毛白杨悬浮细胞系建立与植株再生,结果表明,通过悬浮培养和固体培养两种方法诱导毛白杨悬浮细胞分化不定芽,最终获得无菌生根苗。愈伤组织在MS+1.5mg·L-12,4-D+30g·L-1蔗糖的液体培养基... 详细信息

以毛白杨基因型TC152无菌苗为材料,研究毛白杨悬浮细胞系建立与植株再生,结果表明,通过悬浮培养和固体培养两种方法诱导毛白杨悬浮细胞分化不定芽,最终获得无菌生根苗。愈伤组织在MS+1.5mg·L-12,4-D+30g·L-1蔗糖的液体培养基中振荡培养,12d可建立悬浮细胞系;悬浮细胞系继代培养基为MS+0.8mg·L-12,4-D+30g·L-1蔗糖,继代周期为7d,悬浮细胞在MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+0.5～1.0mg·L-1ZT+30g·L-1蔗糖培养基中悬浮培养,可分化大量不定芽,每个培养瓶中可得到40～50个芽,个别不定芽玻璃化;不定芽在1/2MS+0.6mg·L-1IBA+20g·L-1蔗糖+5.5g·L-1琼脂培养基上可分化不定根。悬浮细胞通过固体平板培养增殖为愈伤组织块后,在MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA+1.0mg·L-1ZT+30g·L-1蔗糖+5g·L-1琼脂的固体培养基上,不定芽分化率可达到70.00%。

关键词：毛白杨悬浮细胞再生组织培养

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刺槐种子航天诱变生物学效应研究

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核农学报 2010年第6期24卷 1141-1147页

作者：袁存权李云路超杨敏生张玉瑶林木育种国家工程实验室/林木、花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室刊E京林业大学生物科学与技术学院北京100083 河北农业大学河北保定071001

为探讨刺槐种子航天搭载的生物学效应,利用‘实践8号’育种卫星搭载刺槐种子进行航天诱变处理,对诱变后的刺槐苗木进行了研究,分别从株高、地径、分枝数、节间距、针刺长度等生长性状以及叶绿素含量等方面分析航天诱变后的生物学效应。... 详细信息

为探讨刺槐种子航天搭载的生物学效应,利用‘实践8号’育种卫星搭载刺槐种子进行航天诱变处理,对诱变后的刺槐苗木进行了研究,分别从株高、地径、分枝数、节间距、针刺长度等生长性状以及叶绿素含量等方面分析航天诱变后的生物学效应。同时利用SSR标记技术进行了遗传多样性分析。结果表明:刺槐航天诱变群体在2年生时,株高和地径分别较地面对照低22.0%和24.1%;3年生时分别较地面对照低13.1%和22.4%。诱变初期表现出的株高抑制作用随着生长逐渐减弱,而地径的抑制作用依旧存在,且刺槐旺枝针刺长度比地面对照缩短15.6%,主干针刺长度比地面对照缩短28.6%,方差分析显示,航天诱变群体和地面对照主干针刺长度之间的这种差异达极显著水平。航天诱变对叶绿素a含量几乎没有影响,但叶绿素总量和叶绿素b含量较地面对照分别降低18.7%和9.7%,差异达显著水平。航天诱变使叶绿素a与b的比值较地面对照增加25.6%,但差异未达显著水平。航天诱变增大了部分性状的变异系数。利用SSR分子标记未检测到航天诱变刺槐群体基因组的广泛变异。

关键词：航天诱变刺槐生物学效应 SSR

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植物抗旱分子机制研究进展

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安徽农业科学 2010年第26期38卷 14198-14202,14205页

作者：朱旗徐吉臣北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木、花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

干旱是影响植物生长发育及作物产量的逆境因素之一,也是目前分子生物学研究中的热门领域。随着分子生物学技术的发展,有关植物抗旱性研究取得了很大的进展,已初步揭示了植物应对干旱胁迫的分子机理。笔者就植物干旱胁迫过程中,信号应答... 详细信息

干旱是影响植物生长发育及作物产量的逆境因素之一,也是目前分子生物学研究中的热门领域。随着分子生物学技术的发展,有关植物抗旱性研究取得了很大的进展,已初步揭示了植物应对干旱胁迫的分子机理。笔者就植物干旱胁迫过程中,信号应答、信号转导、基因表达调控以及相关作用基因做了综述。

关键词：植物抗旱信号转导转录因子功能基因

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染色体原位杂交技术与植物显微技术实验探索

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生物学通报 2011年第2期46卷 43-45页

作者：周燕高华高自旸高述民胡青北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 北京市园林科学研究所北京100102 北京交通大学电气工程学院北京100044

染色体原位杂交技术作为植物分子细胞遗传学研究的重要手段被广泛地应用于基因定位、染色体结构变异、物种的起源、进化和亲缘关系分析,物理图谱的构建,转基因植物的鉴定等多个方面。在植物显微技术实验中,以研究生的科研选题与兴趣为... 详细信息

染色体原位杂交技术作为植物分子细胞遗传学研究的重要手段被广泛地应用于基因定位、染色体结构变异、物种的起源、进化和亲缘关系分析,物理图谱的构建,转基因植物的鉴定等多个方面。在植物显微技术实验中,以研究生的科研选题与兴趣为主导选材进行石蜡切片、显微摄影直至获得照片;同时合理安排木材切片、压片技术、花粉在柱头上萌发和花粉管伸长、染色体原位杂交技术等多个其他实验,有的放矢、因人施教能够激发学生自主学习的兴趣,收到良好的教学效果。

关键词：显微技术染色体原位杂交实验目标

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河北杨脱水素（Phdhn1）基因的克隆与表达分析

河北杨脱水素（Phdhn1）基因的克隆与表达分析

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第九届中国林业青年学术年会

作者：任媛媛王泽亮张志毅北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

脱水素（Dehydrin）属于LEA D-II蛋白家族,在植物受到干旱、低温和高盐等引起脱水的胁迫条件下能够诱导表达,可以部分替代水分子,保持细胞液处于溶解状态,从而避免细胞结构的塌陷,稳定和保护蛋白质的结构及功能,起到了分子伴侣和亲水性... 详细信息

脱水素（Dehydrin）属于LEA D-II蛋白家族,在植物受到干旱、低温和高盐等引起脱水的胁迫条件下能够诱导表达,可以部分替代水分子,保持细胞液处于溶解状态,从而避免细胞结构的塌陷,稳定和保护蛋白质的结构及功能,起到了分子伴侣和亲水性溶质的作用。河北杨（Populus hopeiensis Hu et Chow）属于杨柳科杨属白杨派山杨亚派,是我国特有树种,广泛分布于西北、华北各省区,其根系发达,生长较快,适于生长在高寒多风地区,特别是其耐寒、耐干旱、耐瘠薄的特性,使之成为黄土高原半干旱地区少有的能够上山栽植、生长稳定、可以成材的乔木树种,在水土保持、林业生产和经营中占有重要地位。因此,开展河北杨抗逆基因的分离与鉴定研究,将有助于推进杨树乃至林木的抗性育种工作。本研究以干旱处理的河北杨为试验材料,在前期获得的一个河北杨脱水素TDF（Transcript derived fragment）片段的基础上,根据相应的毛果杨基因组序列与杨树EST序列设计引物,从河北杨中克隆获得了一个脱水素全长基因。测序结果表明该基因全长为856bp,包含一个681bp的完整的开放读码框,共编码227个氨基酸。在NCBI数据库中比对后发现所得到的河北杨基因序列与杨属植物中的*** *** Taebaek-1 dhn基因[EF639400.1]、***基因[EF639405.1]、*** dhn1基因[AJ300524.4]等脱水素基因都具有95%以上的序列一致性,故将其命名为Phdhn1基因。Phdhnl氨基酸序列包括两个重复的富含赖氨酸残基的K片段和由7个连续的丝氨酸残基组成的S片段,属于脱水素家族中典型的SKn型脱水素。K片段位于C端,它能形成双亲性的a-螺旋,是脱水素的重要功能结构,可以防止蛋白质和膜的变性:而S片段,有证据表明它的磷酸化可以使脱水素在信号肽的引导下进入细胞核,与脱水素的运转和定位有关。半定量RT-PCR分析表明Phdhnl基因在不同胁迫条件下表达有差异,其中低温、干旱及ABA处理能够诱导基因的表达。在干旱和ABA胁迫条件下该基因的表达呈现先上升后下降的趋势,分别在失水率为30%时和ABA处理2h时表达量最高;在低温胁迫下表达呈先下降再上升后下降的趋势,在处理1h时表达最低,在处理5h时表达量达到高峰,而在高温与NaCl胁迫条件下,基因转录水平基本保持不变,说明Phdhnl基因很可能参与了河北杨低温、干旱胁迫耐受性表达过程及依赖于ABA的胁迫信号转导途径。为了进一步研究Phdhnl基因的功能,通过农杆菌介导的叶盘转化法,获得了多个转基因烟草株系,转Phdhnl基因对烟草基因表达、生理生化状态及表型的影响正在进一步鉴定中。

关键词：河北杨脱水素胁迫处理 RT-PCR

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毛白杨病程相关蛋白基因的克隆与分析

毛白杨病程相关蛋白基因的克隆与分析

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第九届中国林业青年学术年会

作者：雷杨林善枝郑会全刘文凤安新民张志毅北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

病程相关蛋白（Pathogenesis related proteins,PRs/PRP）是植物在发病或病理相关环境下诱导产生并积累的一类蛋白质的总称,它们组成了植物抗病免疫反应的一道重要防线。杨树作为木本模式植物,其抗病研究一直是林木抗逆性育种研究热点... 详细信息

病程相关蛋白（Pathogenesis related proteins,PRs/PRP）是植物在发病或病理相关环境下诱导产生并积累的一类蛋白质的总称,它们组成了植物抗病免疫反应的一道重要防线。杨树作为木本模式植物,其抗病研究一直是林木抗逆性育种研究热点。毛白杨（Populus tomentosa Carr.）是我国特有的白杨派乡土树种,具有分布广、速生、抗逆性强、材质优良等特性,克隆获得毛白杨病程相关蛋白基因并对其结构与功能以及表达模式进行分析显然具有重要的理论意义与应用价值。因此,本研究以毛白杨为试材,首先分离获得了3个编码病程相关蛋白,分别命名为PtPR-1、PtPR-5与PtPR-10。其中,PtPR-1基因（GenBank Accession ***589199）具有一个大小为486-bp的开放阅读框,编码了一个含有161个氨基酸的前体蛋白,该蛋白含有3个α螺旋以及4个β折叠结构;而PtPR-5基因（GenBank Accession ***589200）包含的开放阅读框大小为678-bp,编码了一个225氨基酸前体蛋白序列。生物信息学分析结果表明,PtPR-5蛋白具有17个卷曲和6个β折叠亚结构。另外,PtPR-10基因（GenBank Accesion ***589201）开放阅读框为483-bp,编码了一个160氨基酸的蛋白,蛋白主体结构为7个β折叠,2个α螺旋以及1个二硫键。为分析PtPR-1、PtPR-5与PtPR-10基因的诱导表达特性及其时间模式,本研究首先对毛白杨植株分别进行SA与MeJA诱导处理,并提取叶片组织总RNA,同时采用qRT-PCR定量分析了PR-1、PR-5和PR-10基因的表达以及在SA与MeJA诱导处理0-48h的表达模式。结果表明,在SA诱导下,PR-1表达水平先是缓慢增长,而后迅速升高约200倍:PR-5的表达呈先高后低再正常的波动特点;而PR-10表达量呈先升高后缓慢递减趋势。而MeJA处理下,PR-1表达量表现为升高-下降-升高的特点:PR-5的表达先下调后恢复正常:在MeJA诱导下,PR-10表达水平不断升高,这与PR-1受SA诱导表达模式相似。这些结果说明,病程相关蛋白PtPR-1、PtPR-5和PtPR-10对SA和MeJA信号途径均有响应,暗示了病程相关蛋白作为防卫反应效应基因,与抗病信号通路密不可分。上述研究结果为进一步分析毛白杨病程相关蛋白的功能及毛白杨抗病改良提供了重要基础。

关键词：毛白杨病程相关蛋白基因诱导处理 qRT-PCR

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葡萄VJyGST全长cDNA克隆及其在果实着色过程中的表达

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果树学报 2010年第6期27卷 887-891页

作者：于淼刘海峰杨成君王军东北林业大学林学院林木遗传育种与生物技术教育部重点实验室哈尔滨150040 中国农业大学食品科学与营养工程学院葡萄酒研究中心北京100083

以京优葡萄果皮为试材,利用RT-PCR、SMARTTMRACE技术克隆了1个全长为851bp的GST基因,Genebank的登录号为GU370062,命名为VJyGST。该基因包括开放阅读框(ORF)642bp,编码213个氨基酸,推导其分子量为24.25ku,等电点为5.52。氨基酸同源性分... 详细信息

以京优葡萄果皮为试材,利用RT-PCR、SMARTTMRACE技术克隆了1个全长为851bp的GST基因,Genebank的登录号为GU370062,命名为VJyGST。该基因包括开放阅读框(ORF)642bp,编码213个氨基酸,推导其分子量为24.25ku,等电点为5.52。氨基酸同源性分析表明,VJyGST与山葡萄GST(FJ645770)、甜橘GST(DQ198153)、荔枝GST(EF613493)相似性分别达到了99%、77%、67%。实时荧光定量PCR分析显示,在果实着色过程中,GST基因在果肉中表达较低且相对稳定;在果皮中表达较高,表达量随花色苷的合成递增,90%着色时到达最高,表明GST的表达与花色苷生物合成密切相关。

关键词：葡萄谷胱甘肽转移酶(GST) 全长cDNA

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四川乡土杨树种质资源收集和优树选择

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四川农业大学学报 2010年第4期28卷 432-437页

作者：万雪琴张帆钟宇王长亮丁云海钱忠亮胡庭兴四川农业大学林学院四川雅安625014 长江上游林业生态工程四川省重点实验室四川雅安625014 林木育种国家工程实验室北京100091 林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100091 四川稻城县林业局四川稻城627750

西南地区丰富而独特的乡土杨树基因资源对杨树中长期遗传改良具有重要的意义。为有效保护和开发利用该区乡土杨树资源,对四川7个行政市(州)的共计31个县的乡土杨树种质资源进行了调查和收集,获得包括18个种及3个天然杂交种在内的乡土杨... 详细信息

西南地区丰富而独特的乡土杨树基因资源对杨树中长期遗传改良具有重要的意义。为有效保护和开发利用该区乡土杨树资源,对四川7个行政市(州)的共计31个县的乡土杨树种质资源进行了调查和收集,获得包括18个种及3个天然杂交种在内的乡土杨树单株材料1 560多份。根据该区乡土杨树多为异龄林的特点,在五株大树选优法基础上,制定了适用于异龄林的选优方法,获得乡土杨优树64株。结合林分优势木生长情况,制定了适合散生木选优的树高和胸径生长量标准。两种选优方法可供类似生态区的乡土杨树优树选择提供参考。

关键词：乡土杨树基因资源优树四川

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黄连木LEC1转录因子基因的克隆及表达分析

黄连木LEC1转录因子基因的克隆及表达分析

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第十二届中国科协年会第9分会场——非粮生物质能源与高技术产业化研讨会

作者：林善枝张志翔侯路王涛侯琦孙润泽北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室中国林业科学研究院林业研究所

黄连木(Pistacia chinensis Bunge)是一种重要的木本油料树种,其种子含油量高、出油率高,是制备生物柴油的优质原料。本研究以黄连木种子为试材,利用简并RT-PCR和RACE方法首次成功克隆得到黄连木LEC1转录因子基因的cDNA序列(命名为PcLEC... 详细信息

黄连木(Pistacia chinensis Bunge)是一种重要的木本油料树种,其种子含油量高、出油率高,是制备生物柴油的优质原料。本研究以黄连木种子为试材,利用简并RT-PCR和RACE方法首次成功克隆得到黄连木LEC1转录因子基因的cDNA序列(命名为PcLEC1,GenBank上登记号为HM627254),该序列长988bp,包括741bp完整的开放阅读框,编码247个氨基酸;该基因的核酸序列及其编码的氨基酸序列与已报道其他物种的LEC1基因具有较高相似性;同时,对PcLEC1基因编码蛋白进行生物信息学分析,结果表明,PcLEC1蛋白为亲水性蛋白,pI为6.235,二级结构主要为α螺旋和无规则卷曲,三级结构含有histone fold结构。无信号肽和跨膜区域,定位于细胞核,含有CBFD NFYB HMF功能结构域和NFYBAP3保守位点,存在多个潜在的磷酸化位点和其它修饰位点,并具有转录因子活性。另外,通过对黄连木PcLEC1及其他植物来源的LEC1蛋白序列的比对后发现,植物LEC1蛋白的B区序列高度保守,其它区域氨基酸序列差异非常大;进化树分析表明,与黄连木PcLEC1亲缘关系最近的是拟南芥和油菜。在此基础上,开展黄连木PcLEC1基因的原核及真核表达载体构建及表达研究,结果表明,在37℃条件下,1mM IPTG诱导4h,融合蛋白表达量较大;目前已成功获得转PcLEC1基因的烟草植株,转基因烟草种籽的含油量及油质质量分析正进行中。上述研究结果可为黄连木LEC1转录因子基因PcLEC1的应用奠定重要基础,具有广泛的应用前景。

关键词：黄连木 LEC1转录因子基因克隆生物信息学表达分析

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美洲黑杨木质素生物合成转录因子PdLiml基因的克隆、表达及植物表达载体构建

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北京林业大学学报 2009年第6期31卷 1-8页

作者：王璐李百炼张金凤张德强北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室 100083

在植物体内,Liml基因与木质素生物合成酶基因启动子区域富含AC的Pal盒结合,转录调控木质素的生物合成过程.该研究组合利用生物信息学和realtime PCR方法,首次从美洲黑杨形成层cDNA中分离出PdLimlcDNA全长,并进行了测序和序列分析.结果表... 详细信息

在植物体内,Liml基因与木质素生物合成酶基因启动子区域富含AC的Pal盒结合,转录调控木质素的生物合成过程.该研究组合利用生物信息学和realtime PCR方法,首次从美洲黑杨形成层cDNA中分离出PdLimlcDNA全长,并进行了测序和序列分析.结果表明,克隆的美洲黑杨PdLimlcDNA片段总长为952 bp,基因内部含有完整的开放阅读框架,大小为594 bp,可编码长度为197个氨基酸残基的蛋白质,所推导的蛋白质氨基酸序列与拟南芥AtLiml和水稻OsLiml蛋白的同源性分别为82.1%和78.2%.组织特异性realtime PCR结果显示,PdLiml基因在场树根、茎、叶片和顶端分生组织中均有表达,但其表达模式却不同:PdLiml在成熟叶片和成熟木质部中表达丰度最高,在树皮、根部、韧皮部和形成层表达丰度较高,在未成熟木质部有少量表达,在顶端分生组织中表达丰度最低.在此基础上,以pBI121为表达载体,构建了在CaMV35S启动子驱动下,PdLiml基因的正义(pBI121-CaMV35S-sensePdLiml)和反义(pBI121-CaMV35S-antisense PdLiml)类型的双元植物表达载体.该研究为杨树PdLiml的基因工程改良木材纤维品质性状提供了重要的理论依据,具有潜在的应用价值.

关键词：杨树 Liml转录因子术质素生物合成 realtime PCR 植物表达载体

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