检索结果-内蒙古大学图书馆

2017年中国观赏园艺学术研讨会

作者：霍婷婷汤佳包菲张启翔北京林业大学园林学院花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室国家花卉工程技术研究中心城乡生态环境北京实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室

丁子香酚是梅花的特征香气成分之一,其合成底物乙酸松柏酯是经松柏醇乙酰转移酶的催化生成的。本试验以梅花品种‘三轮玉蝶’盛花期花朵为材料,通过touch down PCR方法克隆得到1个松柏醇乙酰转移酶基因,命名为PmCFAT2。序列分析表明,该... 详细信息

丁子香酚是梅花的特征香气成分之一,其合成底物乙酸松柏酯是经松柏醇乙酰转移酶的催化生成的。本试验以梅花品种‘三轮玉蝶’盛花期花朵为材料,通过touch down PCR方法克隆得到1个松柏醇乙酰转移酶基因,命名为PmCFAT2。序列分析表明,该基因位于梅花的第7条染色体上,基因包含长为1383 bp的完整开放阅读框,编码460个氨基酸,所编码蛋白属于不稳定的酸性蛋白。序列比对结果表明,该基因的cDNA推导的氨基酸序列在BAHD家族基因所特有的结构域HXXXD和DFGWG上具有保守性。系统进化分析显示,该基因与矮牵牛PhCFAT,拉瑞尔LtCAAT1、LtCAAT2以及拟南芥At1g78990、At5g164105具有同源性,其中与PhCFAT亲缘关系最近,初步推测PmCFAT2编码蛋白能够催化松柏醇生成乙酸松柏酯,参与了梅花丁子香酚的合成。

关键词：梅花花香松柏醇乙酰转移酶基因基因克隆

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杜仲愈伤组织诱导及胚性愈伤组织的判别

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中国农学通报 2015年第34期31卷 20-27页

作者：王燕赵健隋鑫邱小倩张金凤林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种生物工程重点开放实验室/北京林业大学生物科学与技术学院北京100083

为探索杜仲胚性愈伤组织诱导的条件,建立杜仲体细胞胚胎发生初步体系,以杜仲幼嫩叶片和未成熟合子胚为外植体、MS为基本培养基,探究外源激素配比、未成熟合子胚发育阶段与基因型对愈伤组织诱导的影响,并从形态学和细胞学对愈伤组织进行... 详细信息

为探索杜仲胚性愈伤组织诱导的条件,建立杜仲体细胞胚胎发生初步体系,以杜仲幼嫩叶片和未成熟合子胚为外植体、MS为基本培养基,探究外源激素配比、未成熟合子胚发育阶段与基因型对愈伤组织诱导的影响,并从形态学和细胞学对愈伤组织进行胚性的判断。试验结果表明:4种不同激素配比的培养基诱导出的叶片愈伤组织在形态上具有差异,MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L和MS+2,4-D2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L有利于叶片胚性愈伤组织诱导;在培养基MS+2,4-D 2 mg/L+6-BA 1 mg/L上,以未成熟合子胚为外植体诱导出4种类型愈伤组织,其中圆球形和颗粒型突起的愈伤组织具有胚性;未成熟合子胚采集时间对愈伤组织诱导率具有显著差异,6月14日采集的外植体愈伤诱导率最高,不同基因型差异不显著。

关键词：杜仲叶片未成熟胚愈伤组织胚性愈伤组织

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一种高效提取杨树发病树皮总RNA的方法及应用

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植物生理学报 2014年第2期50卷 223-228页

作者：侯佳孙丰硕吴秋明杨玉巧贺伟王延伟北京林业大学森林培育与保护教育部重点实验室北京100083 北京林业大学林木育种国家工程实验室北京100083 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室北京100083 北京林业大学国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083 濮阳市林业科学院河南濮阳457000

对杨树发病树皮总RNA的高效提取是开展杨树抗溃疡病基因表达调控的基础,为了探讨杨树发病树皮RNA的高效提取方法,本研究以欧美杨细菌性溃疡病菌侵染后的‘中林46’杨为材料,比较了包括本研究提出的RNA提取新方法(RNA试剂盒改良法)在内的... 详细信息

对杨树发病树皮总RNA的高效提取是开展杨树抗溃疡病基因表达调控的基础,为了探讨杨树发病树皮RNA的高效提取方法,本研究以欧美杨细菌性溃疡病菌侵染后的‘中林46’杨为材料,比较了包括本研究提出的RNA提取新方法(RNA试剂盒改良法)在内的6种方法提取的总RNA的质量和浓度。结果显示,通过RNA试剂盒改良法提取的总RNA 28S rRNA条带亮度约为18S rRNA条带亮度的2倍且浓度高,表明该方法更适合感染欧美杨细菌性溃疡病的‘中林46’杨发病树皮总RNA的提取。为了验证RNA试剂盒改良法对健康杨树树皮及不同胁迫处理、组织RNA提取的适用性,进一步用该方法提取了‘中林46’杨、‘107’杨、‘北京’杨健康树皮,低氮、低磷处理的毛白杨组培苗以及白玉兰花的总RNA。结果表明,用RNA试剂盒改良法均能获取高质量的总RNA。所提取的总RNA已成功用于感染欧美杨细菌性溃疡病的杨树树皮转录组测序,以及低氮处理的毛白杨组培苗RT-PCR和荧光定量PCR实验,表明用RNA试剂盒改良法提取的总RNA可以用于后续分子实验。

关键词： RNA提取杨树侵染树皮

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毛白杨真菌胁迫下miRNA靶基因预测和生物信息分析

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中国细胞生物学学报 2014年第11期36卷 1506-1513页

作者：廖维华陈仲叶梅霞马焕弟高凯雷炳琪安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

目前,关于杨树在真菌胁迫下其mi RNAs对基因的调控作用研究较少。准确快速地预测并鉴定mi RNA靶基因,对揭示真菌胁迫下mi RNAs在基因调控中的作用至关重要。该文根据mi RNA的进化保守性,通过靶基因预测软件ps RNATarget,以已知的毛果杨m... 详细信息

目前,关于杨树在真菌胁迫下其mi RNAs对基因的调控作用研究较少。准确快速地预测并鉴定mi RNA靶基因,对揭示真菌胁迫下mi RNAs在基因调控中的作用至关重要。该文根据mi RNA的进化保守性,通过靶基因预测软件ps RNATarget,以已知的毛果杨mi RNAs为探针,与毛白杨真菌胁迫下转录组的基因序列比对,找到其中347个mi RNAs的772个靶基因,分别编码与植物激素信号传导、植物病原互作、谷胱甘肽代谢等与植物抗病密切相关的蛋白。mi R393通过转录后水平作用于靶基因,调节生长素信号以响应多种外界刺激。该研究发现了mi R393的11个靶基因,主要参与生长素介导的信号通路;其中6个靶基因(SD1-13、CYP83B1、AFB2、TIR1、AFB3和PSBR)存在差异表达,这些基因是研究mi R393的生物学功能的关键候选基因。

关键词：毛白杨真菌胁迫 mi R393 靶基因

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白桦OSC新基因的克隆、表达特征及遗传转化初步研究

白桦OSC新基因的克隆、表达特征及遗传转化初步研究

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全国农业生物化学与分子生物学第十四届学术研讨会

作者：尹静梁甜张梦岩詹亚光李欣王思瑶孙璐东北林业大学生命科学学院林木遗传育种与生物技术国家重点实验室东北林业大学生命科学学院

白桦三萜类成分白桦脂醇、白桦脂酸及其衍生物在抗HIV病毒和抑制肿瘤方面具有显著的疗效.白桦各种三萜成分是以乙酰辅酶A原料经甲羟戊酸途径(MVA)在细胞质中合成,均来自共同的前体物质2,3-氧化角鲨烯,在不同三萜合酶基因的调控下,沿着... 详细信息

白桦三萜类成分白桦脂醇、白桦脂酸及其衍生物在抗HIV病毒和抑制肿瘤方面具有显著的疗效.白桦各种三萜成分是以乙酰辅酶A原料经甲羟戊酸途径(MVA)在细胞质中合成,均来自共同的前体物质2,3-氧化角鲨烯,在不同三萜合酶基因的调控下,沿着各自的代谢方向进行生物合成,这就导致几种产物之间产生竞争同一前体,并相互抑制合成. 本研究利用同源序列PCR方法克隆获得白桦OSC-香树脂醇合酶新基因，暂命名BpDS，序列长度2636bp OSC基因，与日本白桦的一功能未知的OSC基因BPD相似度较高，为92％，与人参、辽东楹木、梅花等多种植物的Beta-香树脂醇合成酶(β-AS)氨基酸序列具有66%~71%的相似性。该基因开放读码框(ORF)序列长2211bp，编码736个氨基酸，第98~725 aa位置具有一个Isoprenoid_C2_like超家族，包含鲨烯环化酶结构域(SQCY_1)保守区和一个异戊烯转移酶和鲨烯氧化酶的重复序列，编码的蛋白为不稳定蛋白，具有亲水性。运用Blast2go分析结果显示，该蛋白参与五环三萜类化合物的生物合成，同时具有角鲨烯合成酶活性、分子内转移酶活性、异构酶活性催化活性。系统进化树分析显示BpDS编码的氨基酸序列同日本白桦OSC BPD(BAB83089.1)亲缘关系最近，而与其他物种的beta-香树脂醇合成酶的亲缘关系较远。白桦组培苗的根、茎和叶中BpDS基因的相对表达量结果显示，茎中BpDS基因表达量最低，根和叶中BpDS基因表达量分别是茎中BpDS基因表达量的4倍和3.5倍。表明，白桦BpDS基因的表达受季节、激素诱导调控，并具有组织特异性。将成功构建的白桦pBI1303-BpDS RNAi载体，通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法遗传转化白桦无性系，初步筛选抗性植株20株，经PCR,Southern印迹鉴定和GFP荧光检测，确定获得4株转基因白桦组培苗。实时荧光定量PCR检测显示，转基因株系Y1和B3的BpDS基因表达量是对照的92%和58%，而BPY基因的表达量分别为对照的2%和9%。该研究结果为进一步通过基因工程手段对白桦三萜代谢途径遗传改良奠定了基础。

关键词：白桦三萜化合物香树脂醇合酶基因克隆表达特征遗传转化药理活性

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拟南芥转录因子WRKY18在花粉发育中的功能分析

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电子显微学报 2014年第2期33卷 156-162页

作者：荀志丽李雪萍张丹丹陆海刘頔北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083 河南科技大学林学院河南洛阳471003

WRKY蛋白是近年来在植物中发现的一类转录因子家族,本研究从拟南芥中克隆得到转录因子WRKY18的DNA序列,利用荧光体式显微镜观察酵母单杂交菌落,确定了该转录因子与DNA序列TTGACT结合。分别通过半定量、实时荧光定量PCR技术检测其在不同... 详细信息

WRKY蛋白是近年来在植物中发现的一类转录因子家族,本研究从拟南芥中克隆得到转录因子WRKY18的DNA序列,利用荧光体式显微镜观察酵母单杂交菌落,确定了该转录因子与DNA序列TTGACT结合。分别通过半定量、实时荧光定量PCR技术检测其在不同组织及花药发育不同时期的表达,发现该转录因子为组成型表达。该基因在成熟拟南芥根、茎、叶、花的各个组织中均有表达,而在花药发育的9、10时期表达量显著高于其它时期。分别使用扫描电子显微镜和光学显微镜观察比较突变体与野生型植株的花粉形态差异和花粉萌发情况,发现WRKY18对拟南芥花粉发育有重要影响,WRKY18缺失造成拟南芥花粉外形异常、花粉萌发率降低。本研究对进一步分析转录因子WRKY18在拟南芥花粉发育过程中的表达与调控作用具有一定的基础意义。

关键词：拟南芥转录因子 WRKY18 表达分析花粉发育

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河北省华北落叶松天然群体遗传多样性分析

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植物遗传资源学报 2014年第3期15卷 465-471页

作者：范英明张登荣于大德张炎董明亮张鸿景张金凤林木育种国家工程实验室/林木、花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室/北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 四川省西昌市凉北林业局西昌615000 河北省林业科学研究院石家庄050061

以来自河北8个群体共312个华北落叶松天然个体为材料,利用10对SSR引物对群体进行扩增,所得数据用于其遗传多样性和遗传结构的研究。结果表明：10对SSR位点共检测到42个位点,平均每个位点有4.2个等位基因,位点的等位基因数（Na）为2～6... 详细信息

以来自河北8个群体共312个华北落叶松天然个体为材料,利用10对SSR引物对群体进行扩增,所得数据用于其遗传多样性和遗传结构的研究。结果表明：10对SSR位点共检测到42个位点,平均每个位点有4.2个等位基因,位点的等位基因数（Na）为2～6个。群体平均等位基因数为3.36,Shannon指数（I）平均为0.749,观察杂合度Ho为0.405、期望杂合度He为0.423,来自河北北部的围场台子水和吉字以及兴隆雾灵山的多样性水平最高,南部的阜平群体多样性水平最低。AMOVA分子差异分析显示3%的遗传变异存在于群体间,97%的遗传变异则存在于群体内,基因分化系数Gst仅为0.028,表明华北落叶松在河北的群体分化很低。聚类结果表明河北围场两个群体为一类,蔚县、隆化和涿鹿为一类,阜平和赤城为一类,兴隆雾灵山群体距离其他较远。多样性北部群体较高,南部较低,表明华北落叶松可能的衍化方向是从北向南,印证了北部可能是起源中心的结论。

关键词：华北落叶松 SSR分子标记遗传多样性群体结构

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油松端粒酶活性的测定方法

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中国农学通报 2014年第13期30卷 10-14页

作者：任兰芳慕莹荀志丽胡旭东要笑云陆海李凤兰刘頔北京林业大学生物科学与技术学院/林木育种国家工程实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

端粒酶具有修复延伸端粒的功能,对于维持真核生物染色体的完整性至关重要,因此对其活性的测定有着重要意义。通过大量的摸索实验,将常用于动物细胞端粒酶活性检测的端粒末端重复序列扩增法(TRAP法)运用到对植物材料的检测中来,对北方常... 详细信息

端粒酶具有修复延伸端粒的功能,对于维持真核生物染色体的完整性至关重要,因此对其活性的测定有着重要意义。通过大量的摸索实验,将常用于动物细胞端粒酶活性检测的端粒末端重复序列扩增法(TRAP法)运用到对植物材料的检测中来,对北方常见木本植物油松进行了端粒酶活性测定。基于TRAP法的原理,对体外延伸、引物选择、退火温度、电泳检测等实验条件进行优化。结果表明,油松端粒酶活性测定的最佳体外延伸条件为30℃延伸1 h,最适前导链引物和反向引物分别为TS21和ACX,PCR退火温度为61.8℃,电泳检测使用Gene Finder核酸染料染色效果更好,建立了一种有效测定木本植物油松松针叶端粒酶活性的测定方法。

关键词：油松端粒酶 TRAP法优化

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月季育种技术研究进展

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中国农学通报 2015年第13期31卷 130-134页

作者：范莉娟周燕高述民北京林业大学生物科学与技术学院北京100083 北京市园林科学研究院绿化植物育种北京市重点实验室北京100102

月季育种技术近年来有了长足的发展并取得了丰硕的成果,通过对引种筛选育种、杂交育种、芽变育种、诱变育种、分子育种等主要育种技术近年来国内外研究成果的报道,总结了各育种技术的特点及应用情况,并进行了展望,提出将分子育种技术的... 详细信息

月季育种技术近年来有了长足的发展并取得了丰硕的成果,通过对引种筛选育种、杂交育种、芽变育种、诱变育种、分子育种等主要育种技术近年来国内外研究成果的报道,总结了各育种技术的特点及应用情况,并进行了展望,提出将分子育种技术的先进手段与传统的杂交育种技术相结合,并且注重国际交流以学习先进技术和经验,同时深入对月季发育的细胞学及分子生物学机理的研究,才能更有效地获得新品种的观点,以期为月季育种工作提供参考,缩小与国际先进水平的差距。

关键词：月季育种技术杂交育种分子育种

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毛果杨PtrAP1-2基因启动子的克隆及其瞬时表达分析

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植物生理学报 2013年第6期49卷 591-597页

作者：陈仲王佳安新民北京林业大学林木育种国家工程实验室林木花卉遗传育种教育部重点实验室国家林业局树木花卉育种与生物工程重点开放实验室北京100083

为了研究杨树AP1同源基因的表达规律,利用PCR技术从毛果杨基因组DNA中克隆出PtrAP1-2基因上游一段2103bp序列。联合使用PLACE和PlantCARE在线软件分析序列,结果表明该序列含有TATA-box和CAAT-box启动子基本元件,另外含有MRE、GT1-motif... 详细信息

为了研究杨树AP1同源基因的表达规律,利用PCR技术从毛果杨基因组DNA中克隆出PtrAP1-2基因上游一段2103bp序列。联合使用PLACE和PlantCARE在线软件分析序列,结果表明该序列含有TATA-box和CAAT-box启动子基本元件,另外含有MRE、GT1-motif、AE-box、TCT-motif和Box4多种光响应元件,因此,PtrAP1-2可能与植物开花过程紧密相关。在序列分析的基础上,构建了PtrAP1-2基因启动子驱动GUS报告基因的植物表达载体,命名为PtrAP1-2pro::GUS。利用农杆菌介导的瞬时表达法转化烟草,结果表明PtrAP1-2启动子可以驱动GUS基因在烟草萼片和花瓣中特异表达,在根、茎、叶、雄蕊和心皮等其他组织部位里没有GUS表达活性,这表明PtrAP1-2pro为花器官特异表达启动子。

关键词：毛果杨 AP1 启动子 GUS 瞬时表达

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