检索结果-内蒙古大学图书馆

西北植物学报 2013年第2期33卷 254-260页

作者：王鹏凯吕伟光胡雪怡陈金慧施季森南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

以鹅掌楸属植物北美鹅掌楸的悬浮细胞和组培苗叶片为材料,对北美鹅掌楸原生质体分离、纯化与培养条件进行研究。结果表明:叶片和悬浮细胞用含有0.1%2-吗啉乙磺酸(MES)和0.6mol/L甘露醇的Cell ProtoplastWash(60M-CPW)溶液25℃预处理1h... 详细信息

以鹅掌楸属植物北美鹅掌楸的悬浮细胞和组培苗叶片为材料,对北美鹅掌楸原生质体分离、纯化与培养条件进行研究。结果表明:叶片和悬浮细胞用含有0.1%2-吗啉乙磺酸(MES)和0.6mol/L甘露醇的Cell ProtoplastWash(60M-CPW)溶液25℃预处理1h效果最好;悬浮细胞最佳酶解液为60M-CPW+1%纤维素酶+1%半纤维素酶+0.2%果胶酶Y-23+0.1%MES,每克材料25℃酶解6h有效原生质体产量可以达到3×106个;叶片最佳酶解液为60M-CPW+2%纤维素酶+1%半纤维素酶+0.2%果胶酶Y-23+0.1%MES,每克材料25℃酶解10h有效原生质体产量可以达到11×106个;悬浮细胞原生质体易于培养,在KM8p+1.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L 6-BA培养基中培养25d可形成肉眼可见的愈伤组织。

关键词：北美鹅掌楸原生质体酶解条件愈伤组织

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麝香百合及东方百合品种核型分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第1期37卷 67-70页

作者：房磊姜珊席梦利施季森傅伟杨斌南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

以麝香百合‘白狐狸’(‘White Fox’)和‘雷山’(‘Lei Shan’)、东方百合‘水晶布兰卡’(‘Crystal Blanca’)和‘康斯坦撒’(‘Constansa’)的试管苗根尖为研究材料,用环己酰亚胺预处理,然后卡诺氏固定液固定,纤维素酶和果胶酶解离... 详细信息

以麝香百合‘白狐狸’(‘White Fox’)和‘雷山’(‘Lei Shan’)、东方百合‘水晶布兰卡’(‘Crystal Blanca’)和‘康斯坦撒’(‘Constansa’)的试管苗根尖为研究材料,用环己酰亚胺预处理,然后卡诺氏固定液固定,纤维素酶和果胶酶解离后采用涂片法制片,对4种观赏百合进行核型分析。结果表明,‘白狐狸’核型为3A,‘雷山’、‘水晶布兰卡’和‘康斯坦撒’的核型均为3B。核型公式分别为:‘白狐狸’2n=2x=24=4m+4st(2SAT)+16t,‘雷山’2n=2x=24=2m+2sm+10st(2SAT)+10t,‘水晶布兰卡’2n=2x=24=4m+10st+10t,‘康斯坦撒’2n=2x=24=4m(1SAT)+10st+10t。‘白狐狸’、‘雷山’、‘水晶布兰卡’及‘康斯坦撒’的核不对称系数分别为83.11%、82.78%、79.75%、81.22%。

关键词：麝香百合东方百合核型分析

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东方百合SRAP体系优化及引物筛选

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第3期37卷 6-10页

作者：邱帅丁信誉席梦利施季森林木遗传和生物技术省部共建教育部重点实验室南京林业大学

以东方百合商品种‘索蚌’(‘Sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘Constantsa’)及其F1代杂交群体为实验材料,从100对SRAP引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对PCR反应体系进行了优化。采用正交设计,对Mg2+、dNTPs、Ta... 详细信息

以东方百合商品种‘索蚌’(‘Sorbonne’)和‘康斯坦撒’(‘Constantsa’)及其F1代杂交群体为实验材料,从100对SRAP引物中筛选出59对扩增产物丰富、具有较高多态性的引物,同时对PCR反应体系进行了优化。采用正交设计,对Mg2+、dNTPs、Taq聚合酶及引物浓度进行4因素4水平优化,并在此基础上对Mg2+、引物浓度和退火温度进行了单因素优化。结果表明,东方百合SRAP的最佳体系为:1×Buffer,Mg2+浓度2.7 mmol/L,dNTPs浓度0.25 mmol/L,引物浓度0.8μmol/L,Taq聚合酶1.5μmol/min,模板DNA 60～100 ng。SRAP两步反应最佳退火温度为第1步35℃,第2步退火59.3℃。最后用‘索蚌’、‘康斯坦撒’和部分F1植株对优化体系进行稳定性检测,发现所筛选出的59对引物在优化的体系下均有稳定的扩增产物。

关键词：东方百合序列相关扩增多态性分子标记体系优化引物筛选

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柳杉SSR引物的筛选及反应体系的优化

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第6期37卷 17-21页

作者：徐进刘子梁南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

利用正交设计方法对柳杉SSR反应体系中的Mg2+、DNA模板、聚合酶、dNTP、引物等5个反应因子进行了优化,同时对反应程序中的退火温度进行筛选。结果表明:(1)柳杉10μL的SSR反应体系的最优条件为Mg2+浓度2.0 mmol/L、4种dNTP浓度均为0.15 m... 详细信息

利用正交设计方法对柳杉SSR反应体系中的Mg2+、DNA模板、聚合酶、dNTP、引物等5个反应因子进行了优化,同时对反应程序中的退火温度进行筛选。结果表明:(1)柳杉10μL的SSR反应体系的最优条件为Mg2+浓度2.0 mmol/L、4种dNTP浓度均为0.15 mmol/L、正反引物均为0.3μmol/L、Taq聚合酶为0.5μmol/min、DNA模板为20 ng;(2)从柳杉属植物的106对SSR引物中筛选出了多态性高,稳定性好的26对引物;(3)优化了筛选出的26对引物的退火温度。

关键词：柳杉 SSR引物引物筛选体系优化

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植物的胚形态建成及其基因调控机制研究进展

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第5期37卷 134-138页

作者：王鹏凯施季森张艳娟吴霜陈金慧南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

胚形态建成是植物生长发育的基础,是单细胞发育成功能性多细胞有机体的过程。高等植物在胚形态建成过程中首先确立极性随后形成轴性结构,为后续的胚形态建成和生长发育建立了空间坐标体系。笔者以模式植物拟南芥为例介绍了植物胚形态建... 详细信息

胚形态建成是植物生长发育的基础,是单细胞发育成功能性多细胞有机体的过程。高等植物在胚形态建成过程中首先确立极性随后形成轴性结构,为后续的胚形态建成和生长发育建立了空间坐标体系。笔者以模式植物拟南芥为例介绍了植物胚形态建成过程和基因调控机制,其中包括:MPK/GRD信号途径控制的合子伸长和极性化;WOX8、WOX9、WOX2指导合子不均等分裂和基顶轴方向确定;生长素信号、WOX5调控网络指导的根端分生组织确立、WUS/CLV3、STM调控网络指导顶端分生组织确立;以子叶形成为代表的侧生器官发生和近远轴发育模式的确立需要生长素信号控制和TCP/CUC基因的表达拮抗;SCR/SHR调控途径参与胚基部径向发育过程机理等。认为对胚形态建成过程中基因调控机理的研究有助于从一个全新的角度认识植物生长发育过程。

关键词：胚形态建成生长素信号基因调控顶端分生组织

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野百合与金佛山百合的核型分析及45S rDNA在其染色体上的物理定位

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南京林业大学学报(自然科学版) 2013年第6期37卷 153-156页

作者：席梦利房磊张晓玲辛昊阳高婷婷施季森南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

采用涂片法和45S rDNA荧光原位杂交技术,对野百合(Lilium brownii)和金佛山百合(***)进行了核型分析和45S rDNA在其染色体上的物理定位。核型分析结果表明:野百合的核型为3B,金佛山百合核型为3A;野百合的核型公式为2n=2x=24=4m+8st(4SAT... 详细信息

采用涂片法和45S rDNA荧光原位杂交技术,对野百合(Lilium brownii)和金佛山百合(***)进行了核型分析和45S rDNA在其染色体上的物理定位。核型分析结果表明:野百合的核型为3B,金佛山百合核型为3A;野百合的核型公式为2n=2x=24=4m+8st(4SAT)+12t,金佛山百合的核型公式为2n=2x=24=4m+8st+12t;野百合和金佛山百合的核不对称系数分别为82.12%和82.65%。荧光原位杂交结果表明:野百合有6个45S rDNA位点,它们分别位于3、6、9号染色体上;金佛山百合有8个45S rDNA位点,它们分别位于1、3、6、8号染色体上。

关键词：野百合金佛山百合核型分析荧光原位杂交

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三种常用亲本分析软件效率的比较——以鹅掌楸属树种控制授粉子代亲本分析为例

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分子植物育种 2013年第2期11卷 241-248页

作者：李博潘文婷李康琴李火根南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

在亲本分析中,常用基于最大似然法的软件(如CERVUS,COLONY和PAPA)进行亲本推定,但不同软件各有其特点,其分析结果与亲本推定效率有时相差较大。为比较三种常用亲本分析软件(CERVUS3.0,COLONY2.0和PAPA2.0)的效率及特点,本文以包含278个... 详细信息

在亲本分析中,常用基于最大似然法的软件(如CERVUS,COLONY和PAPA)进行亲本推定,但不同软件各有其特点,其分析结果与亲本推定效率有时相差较大。为比较三种常用亲本分析软件(CERVUS3.0,COLONY2.0和PAPA2.0)的效率及特点,本文以包含278个鹅掌楸潜在亲本及90个鹅掌楸已知亲本的子代群体为材料,利用13对EST-SSR位点信息,分析子代亲本并与其真实亲本进行对照,进而评价三种亲本分析软件的效率,期望为林木亲本分析软件选择提供参考。研究结果表明,13个SSR位点在实验群体中检测出的等位基因数(A)、观测杂合度(Ho)及Shannon多样性指数(I)平均值分别为5.23,0.4766和1.4636,表明该批引物多态性高,适合用于亲本分析。就亲本分析效率而言,总体上看,谱系清楚的子代远高于谱系不清的子代,单亲分析远高于双亲分析。三种软件的分析效率及特点各有差别。对于谱系不清的林下更新子代苗木,双亲分析时,三种软件的分析效率差别不大。但单亲分析时,CERVUS与COLONY软件分析效率较高,其亲本推定的准确率分别为78.87%和69.90%,高于PAPA软件的分析效率。而对于谱系清楚的控制授粉子代,双亲分析时,采用PAPA软件对异交子代亲本推定准确率为34.72%,高于CERVUS及COLONY软件;而CERVUS与COLONY软件则适合于自交子代的亲本分析,其亲本推定的准确率分别可达83.33%及81.2%,远高于PAPA软件。

关键词：亲本分析 CERVUS COLONY PAPA 效率鹅掌楸属

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南林895杨离体培养及耐盐基因GmNHX1的转化

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南方农业学报 2013年第8期44卷 1237-1242页

作者：孙伟博杨立恒诸葛强南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

摘要：【目的】建立南林895杨杂交无性系最适遗传转化体系，为创新耐盐南林895杨种质资源奠定基础。【方法】以南林895杨叶片和茎段为外植体，对其再生体系和耐盐基因GmNHX1遗传转化的部分影响因子进行分析。【结果】使用NaClO消毒处理1... 详细信息

摘要：【目的】建立南林895杨杂交无性系最适遗传转化体系，为创新耐盐南林895杨种质资源奠定基础。【方法】以南林895杨叶片和茎段为外植体，对其再生体系和耐盐基因GmNHX1遗传转化的部分影响因子进行分析。【结果】使用NaClO消毒处理10～15min的外植体褐化率和污染率均较低；以叶片为外植体产生的不定芽状态良好，而茎段分化的不定芽容易白化死亡。PCR检测结果表明，转GmNHX1基因植株可扩增获得符合大小的特异性条带（1641bp）；通过荧光显微镜能够观察到转基因植株中的SGFP激发出的绿色荧光，证明GmNHX1基因已经高效整合到南林895杨的基因组中。【结论】叶片是南林895杨离体培养再生体系的最佳外植体来源，其离体培养所得的植株完全可以满足根癌农杆菌介导基因转化对受体的要求，可用于耐盐基因GmNHX1的遗传转化。

关键词：南林895杨离体培养再生体系耐盐基因GmNHX1 转化

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‘南林895杨’遗传转化体系的优化

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林业科技开发 2013年第6期27卷 85-88页

作者：孙伟博于娟潘惠新诸葛强南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037

以‘南林895杨’为研究材料,采用正交设计方法,对以农杆菌介导法转基因过程中的几个关键因素进行了筛选比较。并利用GUS染色对转化效果进行统计分析,发现‘南林895杨’合适的遗传转化体系为:预培养3 d,菌液浓度OD600值为0.8,侵染8 min,... 详细信息

以‘南林895杨’为研究材料,采用正交设计方法,对以农杆菌介导法转基因过程中的几个关键因素进行了筛选比较。并利用GUS染色对转化效果进行统计分析,发现‘南林895杨’合适的遗传转化体系为:预培养3 d,菌液浓度OD600值为0.8,侵染8 min,共培养3 d。通过抗性筛选确定卡那霉素在分化阶段的筛选浓度为20 mg/L,在生根阶段的筛选浓度为10 mg/L,头孢霉素浓度为100 mg/L。优化了‘南林895杨’遗传转化体系,为利用转基因技术开展杨树的遗传改良研究奠定了基础。

关键词： '南林895杨’ 遗传转化体系优化农杆菌介导

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马尾松转录组测序和分析

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分子植物育种 2013年第3期11卷 385-392页

作者：王晓锋何卫龙蔡卫佳阮倩倩潘婷季孔庶林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京林业大学南京210037

本研究首次构建了马尾松均一化cDNA文库,采用Illumina高通量测序技术对转录组进行了测序,利用生物信息学方法开展基因表达谱的研究、功能基因的预测。EST序列拼接获得83680个contig,其中33772个contig被注释为相应的331669对生物学功能,... 详细信息

本研究首次构建了马尾松均一化cDNA文库,采用Illumina高通量测序技术对转录组进行了测序,利用生物信息学方法开展基因表达谱的研究、功能基因的预测。EST序列拼接获得83680个contig,其中33772个contig被注释为相应的331669对生物学功能,10647个contig被注释具有酶功能。根据KEGGpathway数据库,对马尾松转录组的contig进行Pathway生物学通路的注释和预测,共识别出10647个contig具有对应的1029种酶功能,并关联到135条生物学通路。SSR查找发现,从83680个contig中找到889个SSR位点,占contig总数的比例为1.06%。其中,三核苷酸重复所占比例最高,达到48.37%,其次是六核苷酸重复,为19.12%,比例最低的是四核苷酸重复,仅为4.72%,二核苷酸重复和五核苷酸重复基本相同,分别为14.62%和13.16%。SSR不同重复基元类型中,出现频率最高的为AT/AT,其次是AGC/CTG和AAG/CTT。

关键词：马尾松转录组测序 Ⅲumina高通量测序技术 SSR

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