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中国造纸学会第十五届学术年会

作者： HUANG Ting 黄婷陆青山 LU Qing-shan JIN Yong-can 金永灿 GU Feng 谷峰 CHANG Hou-min 张厚民 Hasan JAMEEL Hasan Jameel Richard Phillips Richard PHILLIPS LI Zhong-zheng 李忠正 Jiangsu Provincial Key Lab of Pulp and Paper Science and Technology Nanjing Forestry University Na 南京林业大学江苏省制浆造纸科学与工程重点实验室江苏南京210037 南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室江苏南京210037 Key Laboratory of Forest Genetics & Biotechnology Ministry of Education Nanjing Forestry Universit Jiangsu Provincial Key Lab of Pulp and Paper Science and Technology Nanjing Forestry University Na 南京林业大学江苏省制浆造纸科学与工程重点实验室江苏南京210037 美国北卡罗莱那州立大学林业生物材料系罗利NC 27965 Department of Forest Biomaterials North Carolina State University Raleigh NC 27965 USA 美国北卡罗莱那州立大学林业生物材料系罗利NC 27965

主要探讨在不同温度、用碱量和硫化度条件下的绿液预处理对麦草化学成分及酶水解效率的影响.木质素的脱除随着预处理用碱量和硫化度的提高而增加,但同时也加剧了碳水化合物的降解,导致预处理得率下降.绿液预处理废液的pH值小于9.5,弱碱... 详细信息

主要探讨在不同温度、用碱量和硫化度条件下的绿液预处理对麦草化学成分及酶水解效率的影响.木质素的脱除随着预处理用碱量和硫化度的提高而增加,但同时也加剧了碳水化合物的降解,导致预处理得率下降.绿液预处理废液的pH值小于9.5,弱碱介质可以减少碳水化合物的降解,同时避免禾草原料含量较高的硅溶解在黑液中.预处理后浆料用由纤维素酶、聚木糖酶和β-葡萄糖苷酶组合而成的混合酶液水解.当酶用量从5 FPU/g增加到10 FPU/g时,总糖得率及转化率显著增加.在酶用量为10 FPU/g条件下经过48 h的酶水解后,温度130℃、用碱量8％、硫化度40％条件下绿液预处理浆料的总糖得率达到最大值43％,总糖转化率为73％.研究结果证明经绿液预处理的麦草浆料酶水解效率显著提高.

关键词：造纸工业麦草化学成分酶水解糖化绿液预处理

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聚乙二醇介导鹅掌楸悬浮细胞与CdSe／ZnS量子点纳米颗粒共孵育的互作特征

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中国科学：生命科学 2011年第6期41卷 494-501页

作者：董琛施季森陆叶陈金慧夏兵南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京210037 南京林业大学理学院化学系南京210037

利用纳米材料介导的药物靶向治疗和动物细胞转基因等相关研究,日益受到人们的关注.但植物因存在细胞壁的障碍,无论原位还是离体细胞培养条件下,利用纳米技术进行基因转移均存在很大难度.因此设想,如通过纳米颗粒材料物理尺寸的改变和表... 详细信息

利用纳米材料介导的药物靶向治疗和动物细胞转基因等相关研究,日益受到人们的关注.但植物因存在细胞壁的障碍,无论原位还是离体细胞培养条件下,利用纳米技术进行基因转移均存在很大难度.因此设想,如通过纳米颗粒材料物理尺寸的改变和表面化学修饰,能改变纳米颗粒与植物细胞壁界面上的生物物理或生物化学特征,从而有利于纳米颗粒材料穿越植物细胞壁进入植物细胞,将对推动纳米技术在植物转基因领域中的应用产生重要意义.根据以上设想,研究了不同的共孵育时间和温度等条件下,杂交鹅掌楸的胚性悬浮细胞与经不同表面化学修饰的CdSe/ZnS纳米颗粒之间相互作用过程的细胞生物学特征,以及CdSe/ZnS量子点的细胞毒性.结果表明,在共孵育后3h以内,激光共聚焦显微镜和电子扫描显微镜下,均可观察到经表面后修饰带正电荷的CdSe/ZnS纳米颗粒.同时,胞吞进入细胞内部的表面携带正电荷的CdSe/ZnS纳米颗粒的量明显与共培养时间、温度有明显的依赖关系,表明它们可以通过细胞的液相胞吞作用进入杂交鹅掌楸细胞内,且不影响细胞的活性;而表面带负电荷的CdSe/ZnS纳米颗粒则主要聚集在细胞外壁附近.在培养溶液中添加20%(质量比)聚乙二醇,可进一步提高鹅掌楸细胞胞吞CdSe/ZnS纳米颗粒的量和减轻CdSe/ZnS纳米颗粒的细胞毒性.本研究表明,以表面携带正电荷的CdSe/ZnS量子点纳米材料作为基因载体,在植物悬浮细胞的转基因研究和应用中具有广泛的前景.

关键词： CdSe/ZnS量子点杂交鹅掌楸聚乙二醇胞吞作用细胞毒性

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树干毕赤酵母在水解液中的驯化及木糖发酵

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林产化学与工业 2011年第6期31卷 78-82页

作者：赵晨方浩孔端男余世袁南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室江苏南京210037

通过在玉米秸秆蒸汽爆破水解液中的驯化,树干毕赤酵母(Pichia stipitis)能够在大量抑制物存在的情况下进行木糖发酵,且驯化后***的木糖利用率为94.1%,乙醇得率为82.1%。在此基础上,对初始木糖质量浓度为30、45和60 g/L的水解液进行发酵... 详细信息

通过在玉米秸秆蒸汽爆破水解液中的驯化,树干毕赤酵母(Pichia stipitis)能够在大量抑制物存在的情况下进行木糖发酵,且驯化后***的木糖利用率为94.1%,乙醇得率为82.1%。在此基础上,对初始木糖质量浓度为30、45和60 g/L的水解液进行发酵,结果显示45 g/L初始木糖发酵的平均乙醇生成速率较高,且平均光密度(OD)增长速率较低。通过碳平衡计算和碳元素流向分析,51.6 g/L木糖水解液经过36 h发酵,碳回收率为89.7%,并且有48.5%的碳元素流向乙醇。

关键词：树干毕赤酵母驯化木糖乙醇抑制物

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碳水化合物降解产物对酿酒酵母乙醇发酵的影响

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林产化学与工业 2011年第1期31卷 9-12页

作者：宋晓川储秋露朱均均徐勇余世袁勇强南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室江苏南京210037

研究了木质纤维原料预处理产生的主要碳水化合物降解产物对酿酒酵母乙醇发酵的影响,以及酿酒酵母对玉米秸秆酶水解液的乙醇发酵。碳水化合物降解产物对酿酒酵母NLH13乙醇发酵毒性依次为:甲酸>乙酸>糠醛>羟甲基糠醛,酿酒酵母NL... 详细信息

研究了木质纤维原料预处理产生的主要碳水化合物降解产物对酿酒酵母乙醇发酵的影响,以及酿酒酵母对玉米秸秆酶水解液的乙醇发酵。碳水化合物降解产物对酿酒酵母NLH13乙醇发酵毒性依次为:甲酸>乙酸>糠醛>羟甲基糠醛,酿酒酵母NLH13乙醇发酵可耐受的甲酸和乙酸质量浓度分别为1和4 g/L,酿酒酵母NLH13在2～10 g/L范围内对糠醛和羟甲基糠醛有较强的耐受力。葡萄糖浓度为184.90 g/L的玉米秸秆酶水解液经酿酒酵母NLH13发酵24 h,糖利用率98.30%、乙醇质量浓度81.95 g/L和乙醇得率为88.41%。

关键词：碳水化合物降解产物发酵抑制物乙醇蒸汽爆破

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培养基组成对里氏木霉合成纤维素酶的影响

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林产化学与工业 2011年第3期31卷 55-59页

作者：李志和张丽李鑫朱均均余世袁勇强南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室江苏南京210037

研究了碳源种类及比例、氮源种类及比例、碳氮比和添加物等对里氏木霉合成纤维素酶的影响。里氏木霉以含纤维素质量比为4∶6的蒸汽爆破玉米秸秆和微晶纤维素为碳源,含氮素质量比为5∶2的硫酸铵-尿素为氮源,C/N为6,添加4 g/L黄豆粉和10 ... 详细信息

研究了碳源种类及比例、氮源种类及比例、碳氮比和添加物等对里氏木霉合成纤维素酶的影响。里氏木霉以含纤维素质量比为4∶6的蒸汽爆破玉米秸秆和微晶纤维素为碳源,含氮素质量比为5∶2的硫酸铵-尿素为氮源,C/N为6,添加4 g/L黄豆粉和10 g/L麸皮为主要成分的培养基合成纤维素酶,纤维素酶活力在培养132 h达到最大,滤纸酶活力和β-葡萄糖苷酶活力分别为8.37 FPIU/mL和1.61 IU/mL。

关键词：里氏木霉纤维素酶培养基

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杨树微卫星序列对基因表达频率的影响及表达序列中微卫星特征的分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2011年第1期35卷 11-14页

作者：刘菁菁戴晓港王洁李淑娴尹佟明南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室江苏省杨树种质创新与品种改良重点实验室

微卫星是真核生物基因组中的一类高度重复的序列,一般分布在内含子区和基因间隔区中,但基因编码区也含有一定数量的微卫星。为探讨含有微卫星的基因表达频率是否偏低,对NCBI公共数据库中的421725条杨树EST序列进行了分析,结果发现:其中5... 详细信息

微卫星是真核生物基因组中的一类高度重复的序列,一般分布在内含子区和基因间隔区中,但基因编码区也含有一定数量的微卫星。为探讨含有微卫星的基因表达频率是否偏低,对NCBI公共数据库中的421725条杨树EST序列进行了分析,结果发现:其中53524条EST序列中含有微卫星,含微卫星的EST序列比例是12.69%;而杨树基因组注释的45555个基因中,有6953个基因含有微卫星,含微卫星的基因占基因总数的比例为15.26%。对两样本频率进行差异显著性检验,结果显示微卫星在表达序列中的发生频率显著低于在注释基因中的发生频率(p<0.01),这说明含有微卫星的基因总体上表达水平偏低。而对表达序列中微卫星的特征进行分析的结果显示,三碱基重复微卫星含量最丰富。在此,笔者提出了基因组中含有微卫星的基因可能总体表达水平偏低的假说,并利用杨树公共数据库中海量DNA序列对这一假说进行了验证。

关键词：杨树基因区微卫星基因表达基因存活

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纤维素酶液中β-葡萄糖苷酶的分离纯化

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南京林业大学学报(自然科学版) 2011年第4期35卷 111-116页

作者：宋娜娜宋向阳连之娜勇强余世袁南京林业大学化学工程学院林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

通过(NH4)2SO4分级沉淀、HiPrep 26/10 Desalting脱盐柱、Source15Q阴离子交换柱、Source 15 S阳离子交换柱、HiTrap 16/60 Sephacryl S-200 HR凝胶过滤等技术,分离纯化3种来源里氏木霉、黑曲霉、里氏木霉与黑曲霉混合纤维素酶液中的β... 详细信息

通过(NH4)2SO4分级沉淀、HiPrep 26/10 Desalting脱盐柱、Source15Q阴离子交换柱、Source 15 S阳离子交换柱、HiTrap 16/60 Sephacryl S-200 HR凝胶过滤等技术,分离纯化3种来源里氏木霉、黑曲霉、里氏木霉与黑曲霉混合纤维素酶液中的β-葡萄糖苷酶。结果表明,经SDS-PAGE电泳鉴定均为电泳纯,测得黑氏木霉、黑曲霉单独培养β-葡萄糖苷酶相对分子质量分别为68、129 ku,而混合菌培养分离得到两种β-葡萄糖苷酶分子质量大小分别为66.2、134 ku。与单独培养的β-葡萄糖苷酶相似。3种来源的β-葡萄糖苷酶经多步分离纯化后的纯化倍数分别为37.25、40.21、30.12,酶活回收率分别为20.1 2%、23.21%、28.56%。

关键词：里氏木霉黑曲霉纤维素酶 β-葡萄糖苷酶分离纯化

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稀酸预处理对玉米秸秆纤维组分及结构的影响

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中国粮油学报 2011年第6期26卷 13-19页

作者：陈尚钘勇强徐勇朱均均余世袁江西农业大学林学院南昌330045 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室南京林业大学南京210037

研究了稀硫酸预处理对玉米秸秆化学组成变化及纤维素酶水解得率的影响,并采用扫描电镜(SEM)、X射线衍射仪(XRD)、红外光谱(IR)和热重分析(TG)对玉米秸秆纤维结构特性进行了分析。结果表明随着硫酸浓度的增大、温度的升高和时间的延长,... 详细信息

研究了稀硫酸预处理对玉米秸秆化学组成变化及纤维素酶水解得率的影响,并采用扫描电镜(SEM)、X射线衍射仪(XRD)、红外光谱(IR)和热重分析(TG)对玉米秸秆纤维结构特性进行了分析。结果表明随着硫酸浓度的增大、温度的升高和时间的延长,纤维素和木质素含量有所增加,而半纤维素含量大幅度降低,且预处理后纤维素酶水解得率也逐渐增大。当处理条件为硫酸质量分数0.75%、温度150℃、时间80 min时,半纤维素降解率为98.02%,所得固体渣纤维素酶水解得率为66.95%(纤维素酶用量20 FPUI/g纤维素)。稀酸预处理后玉米秸秆纤维表面和细胞壁受到不同程度的破坏,表面积增大,孔洞增加,纤维素的结晶度降低,有利于纤维素酶水解作用的进行。

关键词：玉米秸秆稀酸预处理纤维素酶水解化学组成纤维结构

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添加外源物对蒸汽爆破玉米秸秆酶水解性能的影响

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南京林业大学学报(自然科学版) 2011年第6期35卷 81-85页

作者：陈牧连之娜徐勇欧阳嘉勇强余世袁南京林业大学化学工程学院林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

研究了8种添加物辅助单、双酶水解蒸汽爆破玉米秸秆的效果和规律。结果表明,在8种外源物中,添加Tween-80对β-葡萄糖苷酶和纤维素酶水解的促进作用最佳,可显著提高酶水解得率和酶活的稳定性。在底物纤维素质量浓度为50 g/L、纤维素酶用... 详细信息

研究了8种添加物辅助单、双酶水解蒸汽爆破玉米秸秆的效果和规律。结果表明,在8种外源物中,添加Tween-80对β-葡萄糖苷酶和纤维素酶水解的促进作用最佳,可显著提高酶水解得率和酶活的稳定性。在底物纤维素质量浓度为50 g/L、纤维素酶用量为15.0μmol/(min.g)、β-葡萄糖苷酶用量为30.0μmol/(min.g)的条件下,添加4.0 g/L Tween-80反应48 h,纤维素水解生成葡萄糖和总还原糖的酶解得率分别达到86.85%和93.45%,较空白对照分别提高了7.34%和9.59%,其中可发酵性葡萄糖占总还原糖的92.94%。进一步考察该酶解条件下的蛋白质和酶活回收率,结果表明:添加Tween-80后可溶性总蛋白质的回收率提高了56.83%,β-葡萄糖苷酶和纤维素酶酶活回收率分别提高了16.87%和40.04%。

关键词：蒸汽爆破玉米秸秆纤维素酶水解外源添加物酶回收

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液态混合菌发酵优化纤维素酶组分

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南京林业大学学报(自然科学版) 2011年第2期35卷 78-82页

作者：宋向阳方浩欧阳嘉李鑫勇强南京林业大学化学工程学院林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

在里氏木霉和黑曲霉液态混合条件下培养纤维素酶,分析两个菌种的接种比和延迟黑曲霉的接种时间对产酶的影响,探讨两个菌种发挥协同作用的最佳条件。结果表明:黑曲霉延迟接种48 h及里氏木霉与黑曲霉接种质量比1∶1时,所产纤维素酶的滤纸... 详细信息

在里氏木霉和黑曲霉液态混合条件下培养纤维素酶,分析两个菌种的接种比和延迟黑曲霉的接种时间对产酶的影响,探讨两个菌种发挥协同作用的最佳条件。结果表明:黑曲霉延迟接种48 h及里氏木霉与黑曲霉接种质量比1∶1时,所产纤维素酶的滤纸酶活为1.163μmol/(***);β-葡萄糖苷酶活为0.606μmol/(***),β-葡萄糖苷酶活与滤纸酶活比值为0.521,比单一里氏木霉产纤维素酶的酶活高,并在后续的酶解效果对比中表现最佳。48 h时的酶解得率为65.61%,高于里氏木霉单一培养时所产纤维素酶的得率53.91%和商品纤维素酶的得率49.64%。说明通过混合发酵,纤维素酶的组分得到了优化。

关键词：里氏木霉黑曲霉混合培养纤维素酶组分优化

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