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南京林业大学学报（自然科学版） 2021年第5期45卷 102-108页

作者：佘建炜张康郑旭赵小军程方唐罗忠南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】了解沼泽小叶桦(Betula microphylla ***)在海水处理土壤和海水处理叶片两种条件下的生长和生理响应,为耐盐树种的选择与应用提供依据。【方法】用稀释成不同盐度(含盐量)的海水对1.5年生的沼泽小叶桦扦插苗进行根系浇灌和叶片... 详细信息

【目的】了解沼泽小叶桦(Betula microphylla ***)在海水处理土壤和海水处理叶片两种条件下的生长和生理响应,为耐盐树种的选择与应用提供依据。【方法】用稀释成不同盐度(含盐量)的海水对1.5年生的沼泽小叶桦扦插苗进行根系浇灌和叶片喷雾处理。根系浇灌处理的盐度为盆栽基质质量的0%(CK)、0.2%、0.4%、0.6%(质量分数,下同);叶片喷雾处理的盐度为0(CK)、3.07、6.14、15.35 g/L。观察苗木的形态变化,并测定其生长和生理指标。【结果】当用海水处理土壤(根系浇灌)的盐度在0.6%以下、处理叶片(叶片喷雾)的盐度在6.14 g/L以下时,沼泽小叶桦苗所受盐害较小,存活率均为100%。低盐度的海水处理(0.2%)土壤能提高沼泽小叶桦叶片叶绿素含量和可溶性蛋白含量,并促进苗木生长。海水处理土壤和海水处理叶片均导致叶片相对电导率升高,且海水处理叶片的涨幅更大。海水处理土壤条件下的苗木叶片丙二醛(MDA)含量低于CK,海水处理叶片条件下的MDA含量高于CK,但差异均不显著。除高盐度的海水处理(15.35 g/L)叶片外,其他海水处理的苗木叶片SOD活性总体上均低于CK。海水处理后,苗木叶片过氧化物酶(POD)活性在处理早期高于CK,在处理后期低于CK。【结论】沼泽小叶桦能耐受盐度为0.6%的土壤海水浇灌处理或盐度为6.14 g/L的叶片海水喷雾处理,表现出较强的耐盐特性,在滨海盐碱地绿化中具有一定的应用潜力。

关键词：沼泽小叶桦盐胁迫海水处理苗木生长生理特性

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接种AMF及施氮对滨海盐土氮矿化的影响

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南京林业大学学报（自然科学版） 2021年第2期45卷 145-152页

作者：杨瑞珍张焕朝胡立煌范之馨南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】研究接种丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)以及施氮对滨海盐土氮素转化的影响,探究提高滨海盐土氮素供应能力的有效途径。【方法】以江苏北部滨海盐土为研究对象,采用室内培养试验方法,研究接种AMF以及不同施... 详细信息

【目的】研究接种丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi, AMF)以及施氮对滨海盐土氮素转化的影响,探究提高滨海盐土氮素供应能力的有效途径。【方法】以江苏北部滨海盐土为研究对象,采用室内培养试验方法,研究接种AMF以及不同施氮水平处理对土壤氮素矿化和氮素供给的影响。【结果】施氮对菌根侵染率具有显著促进作用(P<0.05),低氮处理(N1,施氮量为92mg/kg)菌根侵染率达45.22%,显著高于高氮处理(N2,施氮量为184 mg/kg)的32.44%,而不施氮处理(N0)菌根侵染率仅有16.00%。在接种AMF 1 d时,低氮处理的滨海盐土铵态氮含量显著低于高氮和不施氮处理的滨海盐土(P<0.05),说明较高的菌根侵染率更有利于植物对铵态氮的吸收与同化,施氮及接种处理显著影响了滨海盐土的氨化过程(P<0.05),但并未对其产生交互作用。硝态氮含量随施氮量的增加而升高,除培养5和10 d外,其余时间点高氮处理滨海盐土的硝态氮含量显著高于低氮以及不施氮处理(P<0.05)的滨海盐土,硝化作用受施氮和接种AMF的交互作用影响。滨海盐土净氮矿化量以及净氮矿化速率在施氮处理和接种处理下差异均不显著(P>0.05),但交互作用对其产生了极显著促进作用(P<0.001)。【结论】对于滨海盐土,添加过多的氮反而抑制丛枝菌根真菌与耐盐植物共生关系的建立;施氮有利于提高滨海盐土的氮矿化作用,施氮量过高并不能对其供氮能力产生促进作用;丛枝菌根真菌与植物共生关系的建立能有效提高氮肥利用效率。施氮和接种AMF通过一定的交互作用对滨海盐土氮矿化过程产生影响。

关键词：氮矿化施氮丛枝菌根真菌滨海盐土硝态氮铵态氮土壤改良

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仁扇舟蛾幼虫肠道可培养细菌群落结构分析

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南京林业大学学报（自然科学版） 2021年第2期45卷 171-176页

作者：朱晗郝德君魏原芝孙丽昕文全民南京林业大学林学院南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

【目的】了解仁扇舟蛾(Clostera restitura)肠道共生细菌的主要类群及其群落结构特征,明确仁扇舟蛾幼虫前、中和后肠可培养细菌的种类及群落结构组成,为进一步研究特异功能细菌的生理生化特征和功能提供基础。【方法】选取仁扇舟蛾5龄... 详细信息

【目的】了解仁扇舟蛾(Clostera restitura)肠道共生细菌的主要类群及其群落结构特征,明确仁扇舟蛾幼虫前、中和后肠可培养细菌的种类及群落结构组成,为进一步研究特异功能细菌的生理生化特征和功能提供基础。【方法】选取仁扇舟蛾5龄幼虫进行肠道解剖,分离前、中和后肠不同肠段,研磨稀释10^(-1)~10^(-6),分别涂布于NA和LB固体培养基上,每个处理重复3次,28℃培养72 h。后对前、中和后肠可培养细菌进行分离纯化培养,提取细菌基因组DNA,利用16S rDNA基因序列分析和PCR扩增技术,获得细菌基因组序列,后与NCBI GenBank数据库进行Blast同源性比对,参考序列相似度98%以上近缘序列的物种信息,结合菌落形态特征和生理生化特性鉴定细菌种类,利用MEGA 7.0软件,采用邻接法(Neighbor-Joining)构建系统进化树。【结果】从仁扇舟蛾5龄幼虫的前、中和后肠中共分离获得22株可培养细菌,分属于变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria),共13个属,22个种。其中:假单胞菌属(Pseudomonas)4株,罗尔斯通菌属(Ralstonia)3株,芽孢杆菌属(Bacillus)3株,嗜麦芽寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)2株,气球菌属(Aerococcus)2株,其余微小杆菌属(Exiguobacterium)、微球菌属(Micrococcus)、短小杆菌属(Curtobacterium)、伯克氏菌属(Burkholderia)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、节杆菌属(Arthrobacter)、短状杆菌属(Brachybacterium)和两面神菌属(Janibacter)各1株。细菌的种类存在差异,前、中和后肠不同肠段的细菌种类分别为5、10和7种。3个肠段共有的细菌种类是皮氏罗尔斯菌(Ralstonia pickettii)和斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)。【结论】仁扇舟蛾5龄幼虫肠道的可培养细菌种类较为丰富,其中以变形菌门和厚壁菌门为优势菌群。不同肠段中可培养细菌的多样性和群落结构存在差异,其中以中肠可培养细菌种类较为丰富。此次从仁扇舟蛾肠道中分离到与单宁降解相关的细菌,分析表明仁扇舟蛾肠道菌群与宿主的取食习性有关,肠道细菌可能在克服植物次生代谢物质的化学防御上发挥作用。

关键词：仁扇舟蛾肠道细菌可培养细菌 16S rDNA基因序列群落结构

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盐胁迫对大花四照花种子萌发与幼苗生长的影响

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南京林业大学学报（自然科学版） 2020年第3期44卷 89-94页

作者：王昊伟杨玲鲁强洑香香南京林业大学林学院南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

【目的】探究盐胁迫对大花四照花种子萌发及幼苗生长的影响,为大花四照花在滨海地区的推广提供理论依据。【方法】对大花四照花种子采取两种预处理:T1处理为用清水配制500 mg/L的GA3浸泡3 d,并进行低温层积;T2处理用4种浓度盐溶液(质量... 详细信息

【目的】探究盐胁迫对大花四照花种子萌发及幼苗生长的影响,为大花四照花在滨海地区的推广提供理论依据。【方法】对大花四照花种子采取两种预处理:T1处理为用清水配制500 mg/L的GA3浸泡3 d,并进行低温层积;T2处理用4种浓度盐溶液(质量分数分别为0.20%、0.30%、0.40%和0.45%)配制的500 mg/L GA3浸泡3 d,低温层积。层积2个月后进行发芽、幼苗形态和生理指标测定。发芽基质(沙)和水分管理:T1处理种子分别采用5个盐浓度水平[0(CK)、0.20%.0.30%.0.40%和0.45%]进行处理,而T2处理种子则采用与预处理相一致的盐浓度水平。【结果】盐胁迫极显著降低了大花四照花种子的发芽率(GR)、发芽势(GE)、发芽指数(GI)和成苗率,并且使其盐害率极显著上升(P<0.01)o相对于T1处理,T2处理对各指标的影响更大,尤其当盐溶液质量分数≥0.3%时,各处理水平的GI在2个处理间差异显著。盐胁迫对幼苗生长指标的影响主要体现在苗高上,其次是根长、相对含水量、鲜质量和干质量。同时,丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和脯氨酸(Pro)含量均随着盐浓度的上升而显著增加,而可溶性糖(SSC)含量在盐溶液质量分数为0.40%时达到最高,然后开始下降;盐胁迫对K+含量的影响显著(P<0.05),且随着盐浓度的增加而下降,但对Na+含量的影响不显著。【结论】盐胁迫抑制了大花四照花种子的发芽,加盐预处理加剧了抑制作用,而且显著地影响了幼苗的生长指标、生理指标和对离子的吸收。综合来看,大花四照花种子和幼苗可在0.30%的盐胁迫条件下正常萌发和生长,因此可作为滨海地区潜在的候选观赏树种,但需要进一步的试验性栽培来验证。

关键词：大花四照花盐胁迫种子发芽指标生化指标

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植物根际益生细菌代表性菌株贝莱斯芽孢杆菌FZB42对松材线虫的抑杀性

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微生物学报 2021年第5期61卷 1287-1298页

作者：张文博李昱龙周蕾沈东霞朱丽华樊奔南京林业大学林学院南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

【目的】由松材线虫导致的松树萎蔫病是松树的毁灭性病害,也是我国最主要的林业病害之一。本研究测评了在农业上广泛使用的、我国微生物肥料行业主要菌种资源之一——贝莱斯芽孢杆菌,对松材线虫的潜在抑杀性能。【方法】选用贝莱斯芽孢... 详细信息

【目的】由松材线虫导致的松树萎蔫病是松树的毁灭性病害,也是我国最主要的林业病害之一。本研究测评了在农业上广泛使用的、我国微生物肥料行业主要菌种资源之一——贝莱斯芽孢杆菌,对松材线虫的潜在抑杀性能。【方法】选用贝莱斯芽孢杆菌的代表性菌株FZB42为材料,测定对不同条件下的菌液上清、不同菌株的菌液上清、细菌素plantazolicin的提取物以及菌体直接接触等方式,对松材线虫死亡率/存活率的影响,并构建FZB42生物膜合成缺损菌株,测定比较其对松材线虫存活率的影响。【结果】相比于Landy培养基,使用LB培养基得到的菌液上清,对松材线虫具有明显抑杀性,培养48 h的菌液上清比培养24 h的菌液上清抑杀性更强,同时,菌液上清的抑杀效能随浓度升高及处理时间增长而有所增加。其中,使用培养48 h后收集的LB菌液上清处理48 h,松材线虫死亡率可高达约50%。之前报道对秀丽隐杆线虫有杀线虫活性的细菌素plantazolicin,经不同突变株上清以及plantazolicin提取物测试,被证实对松材线虫无抑制作用。直接接触实验表明,尽管FZB42的生物膜形成作用会刺激松材线虫提高抗胁迫能力,但整体而言,菌体接触对松材线虫亦有明显抑杀效果。【结论】本研究通过严格细致的测试证明,贝莱斯芽孢杆菌FZB42对松材线虫具有抑杀性,该抑杀作用的分子基础和作用机理有待深入挖掘,但其与plantazolicin无关。作为安全性好、研究开发程度高的一类生防菌株,贝莱斯芽孢杆菌在防治松材线虫病方面的潜在价值值得关注。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌 FZB42 松材线虫杀线虫活性 plantazolicin

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柳杉花粉母细胞减数分裂进程及异常行为

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南京林业大学学报（自然科学版） 2019年第3期43卷 45-50页

作者：赵慧莫家兴华慧郭臻昊徐进南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】观察柳杉花粉母细胞减数分裂进程及染色体的变化和异常行为,为进一步开展柳杉的生殖生物学与分子细胞遗传学研究提供参考。【方法】以柳杉的雄球花(小孢子叶球)为材料,采用压片法研究柳杉花粉母细胞减数分裂的变化规律。【结果... 详细信息

【目的】观察柳杉花粉母细胞减数分裂进程及染色体的变化和异常行为,为进一步开展柳杉的生殖生物学与分子细胞遗传学研究提供参考。【方法】以柳杉的雄球花(小孢子叶球)为材料,采用压片法研究柳杉花粉母细胞减数分裂的变化规律。【结果】柳杉花粉母细胞减数分裂的胞质分裂类型为同时型,其进程一般开始于10月中下旬并持续到11月上旬。观察发现柳杉雄球花外观颜色的变化与减数分裂进程有关,同一侧枝上柳杉雄球花的发育不一致,同一花序中的不同小孢子叶球的花粉母细胞减数分裂进程也不同步。通过观察柳杉的花粉母细胞减数分裂过程,发现存在单价染色体、不等价二价体、滞后染色体、分裂不同步、不均等分裂、异常四分体等异常现象。【结论】柳杉雄球花外观颜色的变化与减数分裂进程密切相关,其减数分裂过程中染色体存在异常现象。

关键词：柳杉雄球花花粉母细胞减数分裂

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杨小舟蛾MtroOBP1基因的克隆、序列分析及表达

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南京林业大学学报（自然科学版） 2020年第5期44卷 215-221页

作者：张雨丰凯汤方南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)是一种嗅觉相关的蛋白,该蛋白参与大多数气味分子的识别过程,并与气味分子相结合。获得杨小舟蛾[Micromelalopha troglodyta (Graeser)]OBPs以明确其特性。【方法】选择羽化后健康... 详细信息

【目的】气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)是一种嗅觉相关的蛋白,该蛋白参与大多数气味分子的识别过程,并与气味分子相结合。获得杨小舟蛾[Micromelalopha troglodyta (Graeser)]OBPs以明确其特性。【方法】选择羽化后健康的杨小舟蛾触角为模板,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术克隆杨小舟蛾MtroOBP1基因,利用生物信息学分析软件研究其基因序列和蛋白结构,运用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究MtroOBP1的组织表达模式。【结果】利用RT-PCR技术从杨小舟蛾触角总RNA中扩增得到MtroOBP1基因(GenBank登录号:MN056510),序列分析表明,MtroOBP1开放阅读框为777 bp,一共编码了258个氨基酸残基,且翻译的氨基酸序列仅含有4个保守的半胱氨酸位点,表明得到的OBP基因的编码蛋白不属于典型气味结合蛋白家族,而是属于Minus-C家族。蛋白质理化性质预测显示:MtroOBP1蛋白的分子量为29 66457 u,等电点为6.23,有18个潜在的磷酸化位点,没有明显的跨膜区,疏水指数为-2.011~3.078,有一个由19个氨基酸组成的信号肽,说明为分泌型蛋白。组织表达模式表明MtroOBP1在杨小舟蛾的各部位都表达,但在触角中表达量最高。【结论】首次克隆得到杨小舟蛾MtroOBP1基因,在触角中高表达,推测其蛋白具有运输气味分子的功能,在杨小舟蛾的嗅觉识别中起着至关重要的作用。

关键词：杨小舟蛾 MtroOBP1基因基因克隆嗅觉系统组织表达谱

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面向植物抗旱性研究的多源表型信息采集和分析技术

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农业机械学报 2022年第2期53卷 203-211页

作者：张慧春杨琨琪李杨先边黎明郝明灼南京林业大学机械电子工程学院南京210037 南京林业大学林学院南京210037 南方现代林业协同创新中心南京210037

利用表型信息采集系统获取不同生长环境下的植物形态结构和生理生化数据,研究植物体对不同胁迫的反应,从而进行抗性育种和筛选优质良种。本文构建了一套由双CCD相机、热成像仪、水分控制模块、称量模块、光源等组成的多源表型信息采集系... 详细信息

利用表型信息采集系统获取不同生长环境下的植物形态结构和生理生化数据,研究植物体对不同胁迫的反应,从而进行抗性育种和筛选优质良种。本文构建了一套由双CCD相机、热成像仪、水分控制模块、称量模块、光源等组成的多源表型信息采集系统,采用YOLO v3目标检测算法和图像处理算法提取了植物投影叶面积、株高、叶片数量、冠层温度等表型参数。以簸箕柳作为研究对象,开展了干旱胁迫试验,并进行关联分析。结果表明干旱胁迫下簸箕柳株高、投影叶面积、日耗水量、水分利用效率都随时间推移显著低于正常施水情况。通过相关性分析可得,簸箕柳投影叶面积与鲜质量及干质量都呈现线性正相关,决定系数分别为0.89和0.78;植株鲜质量和植株干质量之间呈正相关,决定系数为0.76;扦插后时间与平均冠层温差之间呈正相关,决定系数为0.79;日耗水量差与扦插后时间呈一定的正相关,决定系数为0.84;平均冠层温差与平均日耗水量差呈正相关,决定系数为0.85。通过多源采集植物表型参数信息并进行关联分析,为植物在干旱胁迫下的长势相关参数的实时、连续评估提供了可行性技术,并可指导抗性育种中水分的施用和抗旱基因型的快速筛选。

关键词：植物表型信息多源采集系统干旱胁迫关联分析

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入侵昆虫菊方翅网蝽卵到成虫期的超微结构

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环境昆虫学报 2024年第2期46卷 540-550页

作者：朱玺张家璇李宁宁孟昶君高翠青南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林草学院南京210037

外来入侵害虫菊方翅网蝽Corythucha marmorata Uhler, 1878(半翅目:网蝽科)自传入我国后分布范围迅速扩张。本文利用扫描电子显微镜对菊方翅网蝽的外部形态进行了深入研究,重点关注了卵、若虫到成虫在个体发育过程中超微结构的变化。卵... 详细信息

外来入侵害虫菊方翅网蝽Corythucha marmorata Uhler, 1878(半翅目:网蝽科)自传入我国后分布范围迅速扩张。本文利用扫描电子显微镜对菊方翅网蝽的外部形态进行了深入研究,重点关注了卵、若虫到成虫在个体发育过程中超微结构的变化。卵表面光滑,卵盖具蜂窝状小室。1~3龄若虫触角3节,4龄若虫至成虫,鞭节分为2节;在触角上发现了5类感器:2类毛形感器(Sensilla Trichodea)和3类锥形感器(Sensilla Basiconica);在若虫阶段发现了4种类型的体表突起:鳞片状突起、三角形突起、棒状突起和短柄蘑菇状突起,在发育过程中数量增加;1龄若虫体表瘤突简单,与2~5龄不同,后者瘤突结构保持不变,但分枝变多、变长。研究结果有助于入侵害虫菊方翅网蝽的早期识别,并为相关类群的系统发育分析提供更多数据。

关键词：入侵昆虫形态个体发育胚后发育异翅亚目

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一株分离自黑翅土白蚁的粘质沙雷氏菌的鉴定及特性

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南京林业大学学报（自然科学版） 2019年第1期43卷 76-82页

作者：傅仁杰祁雪连丰凯夏馨蕊汤方南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院江苏南京210037

【目的】为了对白蚁进行有效防治,对获得的1株对白蚁具有毒杀作用的菌株进行鉴定与分析。【方法】从感染死亡的黑翅土白蚁上筛选出1株产红色素的菌株。划线分离、纯化后得到较纯的菌株,命名为SM1,将其接种于健康的黑翅土白蚁上,可以使... 详细信息

【目的】为了对白蚁进行有效防治,对获得的1株对白蚁具有毒杀作用的菌株进行鉴定与分析。【方法】从感染死亡的黑翅土白蚁上筛选出1株产红色素的菌株。划线分离、纯化后得到较纯的菌株,命名为SM1,将其接种于健康的黑翅土白蚁上,可以使健康的白蚁身体变红死亡。根据菌株SM1形态学特性、生理生化性质、红色色素及16S r DNA的同源性,对其进行了鉴定。【结果】在基础培养基上,菌落呈圆形,易挑起,有轻微臭味,边缘整齐光滑黏稠; SM1直径为1～3 mm,中间朱红色不透明,呈隆起状。菌株SM1经10项生理生化指标测定,确定此菌为粘质沙雷氏菌。此外,克隆得到此菌的16S r DNA片段大小为1 418 bp,与粘质沙雷氏菌的同源性为99%,因此进一步判定该菌为粘质沙雷氏菌。通过超声波辅助丙酮浸提发酵液,可以得到较高纯度的红色色素。将色素溶于乙醇溶液后,用紫外全波长扫描分析。色素在535 nm左右处存在一个明显吸收峰,确定该红色色素是灵菌红素,从而进一步判定该菌为粘质沙雷氏菌。【结论】从黑翅土白蚁上筛选的SM1菌株为粘质沙雷氏菌,研究结果为白蚁的生物防治奠定了理论基础。

关键词：白蚁生理生化 16S rDNA 粘质沙雷氏菌灵菌红素

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