检索结果-内蒙古大学图书馆

北京林业大学学报 2024年第4期46卷 84-90页

作者：孙玉凤谈家金袁裕超赵晓佳叶建仁南京林业大学林草学院南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

【目的】阐明蜡样芽孢杆菌NJSZ-13中杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的杀线分子机制,构建杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的原核表达载体。【方法】克隆杀线蛋白酶编码基因atpA与clpX,利用基因工程手段对杀线蛋白酶编码基因进行PCR扩增,并与载体pET-21b... 详细信息

【目的】阐明蜡样芽孢杆菌NJSZ-13中杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的杀线分子机制,构建杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的原核表达载体。【方法】克隆杀线蛋白酶编码基因atpA与clpX,利用基因工程手段对杀线蛋白酶编码基因进行PCR扩增,并与载体pET-21b连接构建重组载体,提取重组质粒转入蛋白表达载体大肠杆菌BL21(DE3)。利用菌落PCR和测序验证转化效果。加入IPTG诱导蛋白表达,使用Ni-NTA柱进行重组蛋白的纯化,利用SDS-PAGE与Western blot验证ATP-α与ClpX纯化效果并进行杀线活性测定。【结果】菌落PCR验证和测序表明,重组载体中含有蛋白酶编码基因atpA与clpX,且基因序列与参考序列一致,证明目的基因已经成功插入BL21(DE3)表达载体中。SDSPAGE与Western blot验证表明,重组蛋白得到正确诱导与纯化,成功构建杀线蛋白酶ATP-α与ClpX的原核表达载体。杀线活性测定结果表明ATP-α与ClpX均具有较强的杀线效果。ATP-α在72 h达到66.75%的杀线率,ClpX在72 h达到75.46%的杀线率。同时,两个蛋白酶共同作用杀线能力显著增强,24 h便达到66.32%的杀线率,72 h杀线率达到91.01%。【结论】ATP-α与ClpX经原核表达及纯化后具有较高的杀线活性,且两者共同处理松材线虫,杀线效果更强,证明蛋白酶ATP-α与ClpX是重要的杀线因子,为设计和筛选杀线药物提供了新的线索和依据。

关键词：蜡样芽孢杆菌NJSZ-13 松材线虫 ATP-α ClpX 原核表达

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松材线虫高效复配制剂的药效分析

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南京林业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：张娇叶建仁陈婷婷程浩南京林业大学林草学院南方现代林业协同创新中心

【目的】研究自制一种新型复配杀线虫剂3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂，探究其对松材线虫的毒力活性以及在防治松材线虫病方面的潜力，为研发出更加高效并且具备快速输导能力的药剂提供参考。【方法】采用浸虫法测定这种新型复配微... 详细信息

【目的】研究自制一种新型复配杀线虫剂3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂，探究其对松材线虫的毒力活性以及在防治松材线虫病方面的潜力，为研发出更加高效并且具备快速输导能力的药剂提供参考。【方法】采用浸虫法测定这种新型复配微乳剂（3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂）以及另外两种市售常用药剂（5%甲维盐微乳剂和5%阿维菌素乳油）的杀线效果；以3种药剂的两种亚致死浓度(LC10和LC30)处理松材线虫来检测其对线虫繁殖能力的影响；在林间将这3种药剂进行树干注射，观察药剂的可吸收性，以及观察被树体成功吸收药剂对松树造成的敏感性状况；在注药90 d后采集注干马尾松的样本检测分析药剂在树体内的输导分布动态；并在注药后100 d对处理马尾松进行人工接种松材线虫，观察统计各药剂对松材线虫病的防治效果。【结果】3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐自配微乳剂、5%甲维盐微乳剂、5%阿维菌素乳油处理松材线虫24 h后测定的致死中浓度(LC50)数值分别为2.644 0、27.678 4、42.891 1 mg/L，3 种供试药剂中，3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂的杀线能力最强。并且经过低浓度药剂处理过的松材线虫的种群繁殖数量也均显著低于对照组。3种药剂注射7 d后，自制复配药剂和5%阿维菌素乳油能够被树体完全吸收，5%甲维盐微乳剂难以被吸收。各药剂注射180 d后，自制复配药剂对树体造成的敏感性情况轻微，注药点的木质部产生轻微的变色情况，5%阿维菌素乳油对树体造成的敏感性严重，注药点的木质部产生了严重的变色情况。在注药90 d后，在树体顶部能够检测到所有药剂的残留量。在注干点以下0.5 m位置，复配3%氟吡菌酰胺·5%甲维盐微乳剂中氟吡菌酰胺残留量达到最高，为0.13 mg/kg，甲维盐残留量0.07 mg/kg，5%阿维菌素残留量0.1 mg/kg。2种药剂残留量均在注干点以上0.5 m位置达到最高，此部位复配药剂中的氟吡菌酰胺的残留量为55.65 mg/kg，残留量显著高于其余药物。并且从整体看，复配药剂中的氟吡菌酰胺在树体内的残留量高于复配中的甲维盐的残留量以及5%阿维菌素乳油。于当年7月中旬接种松材线虫，在接种270 d后注射过药剂的马尾松均保持健康，而未经药剂处理的松树在接种后100 d出现感染迹象，所有药剂都能有效预防松材线虫病的发生。【结论】新型自制复配药剂对松材线虫的毒力效果分析表明其不仅具有较强的毒力作用，在林间对马尾松进行注射后，其可吸收性良好，对马尾松的敏感性轻微，并且在松树体内具有良好的输导能力。同时，能够预防松线虫的感染，具备良好的防效，可继续开展配方的优化以及林间的大面积应用。

关键词：松材线虫病复配药剂毒力分析树干注射

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马尾松感染松材线虫后的早期诊断指标筛选

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南京林业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：郑哲李越陈凤毛李敏王梦瑶王立超南京林业大学林草学院南方现代林业协同创新中心

【目的】利用受不同线虫侵染的马尾松（Pinus massoniana）茎干部位代谢组，筛选出适合用于松材线虫病（pine wilt disease，PWD）早期诊断的代谢物指标，以有效提高对松材线虫病的防控。【方法】选择3种具有不同的致病力的线虫：强毒... 详细信息

【目的】利用受不同线虫侵染的马尾松（Pinus massoniana）茎干部位代谢组，筛选出适合用于松材线虫病（pine wilt disease，PWD）早期诊断的代谢物指标，以有效提高对松材线虫病的防控。【方法】选择3种具有不同的致病力的线虫：强毒力松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）虫株FCBX，强毒力拟松材线虫（Bursaphelenchus mucronatus）虫株BM7，无毒力拟松材线虫（Bursaphelenchus mucronatus）虫株FCBM，均于南京林业大学森林病理实验室分离和培养。将其接种生长状态相似的4年生马尾松，以验证其对马尾松的毒力，空白对照（CK）接种无菌水。利用超高效液相色谱和串联质谱（ultra-high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry， UPLC-MS/MS）测定接种3 d后马尾松茎干部位的代谢组，利用主成分分析对代谢组进行质控，通过P值和投影重要性（variable importance projection， VIP）值相结合的方法筛选出在松材线虫接种后特异性表达的代谢产物，并利用高效液相色谱仪（ultra-performance liquid chromatography， UPLC）对筛选出的特异性代谢物进行靶向检测和验证。【结果】马尾松茎干部位检测代谢产产物组的结果可靠，3种线虫对马尾松的毒力有明显差异。7-脱氢胆固醇（7-Dehydrocholesterol）是在接种不同线虫的马尾松代谢比较组中共同的差异代谢物，利用高效液相色谱测定其在马尾松接种不同线虫后3、7、21 d的含量，该物质只在接种强毒力松材线虫FCBX处理组中可以检测到，含量分别为4.09、66.77、28.8 μg/g，在无菌水对照处理组CK以及接种强毒力和无毒力两种拟松材线虫（BM7、FCBM）处理组中无法检测到7-脱氢胆固醇的存在。【结论】在马尾松代谢组中筛选出的7-脱氢胆固醇，是松材线虫早期侵染马尾松后的一种特异性代谢物，该特异性可以将松材线虫侵染与其他不同种线虫侵染的马尾松区分开，因此检测7-脱氢胆固醇含量可以用于松材线虫病早期诊断。

关键词：松材线虫病松材线虫拟松材线虫马尾松代谢组学代谢物液相色谱法病害检测

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雌雄银杏对温度变化的形态和生理响应

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南京林业大学学报（自然科学版） 2024年第4期48卷 150-158页

作者：伍长风国靖汪贵斌南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林草学院江苏南京210037

【目的】研究成年雌雄银杏(Ginkgo biloba)大树形态和生理指标与其温度适应的相关性,探究银杏对温度变化的响应机制及其性别差异【方法】通过对累年年均降水量为990~1200 mm,累年年均气温为9.8、14.4、16.3、18.0和19.8℃的5个不同地区... 详细信息

【目的】研究成年雌雄银杏(Ginkgo biloba)大树形态和生理指标与其温度适应的相关性,探究银杏对温度变化的响应机制及其性别差异【方法】通过对累年年均降水量为990~1200 mm,累年年均气温为9.8、14.4、16.3、18.0和19.8℃的5个不同地区的同龄成年实生银杏大树生长指标、解剖结构和代谢产物含量进行分析,探究雌雄银杏在野外条件下对温度变化的响应。【结果】在适生条件下,随年均气温的升高,银杏叶面积、树高和胸径逐渐增加,净光合速率随之提高,萜内酯和聚戊烯醇含量逐渐增加,但总黄酮、多酚、多糖和可溶性糖含量却有所降低,表明一定程度的升温有利于银杏的生长和光合作用,提高萜内酯和聚戊烯醇等主要代谢产物的含量,但不利于抗氧化代谢产物的积累。同地区雄株银杏树高、叶面积、总黄酮、多酚、多糖和可溶性糖含量均显著高于雌株。【结论】自然条件下,银杏会根据不同的温度条件来调整自身形态特征、光合作用效率和代谢产物的含量来保证个体的正常生长,累年年均气温16.3~18.0℃是最适宜银杏生长的环境温度。银杏对气温的适应存在性别差异,雄株能更好地适应环境变化。

关键词：银杏雌雄株温度叶形态光合特性代谢指标

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植物干旱和盐胁迫响应相关miRNA研究进展

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南京林业大学学报（自然科学版） 2024年第4期48卷 1-11页

作者：宋子荷甄艳南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林草学院江苏南京210037

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是一类由生物基因组转录产生但不编码蛋白质的遗传信息分子,作为表观遗传学研究的主要内容,曾一度被视为基因组中的“暗物质”或“转录噪音”。最广为人知的微小RNA(microRNA,miRNA)是在进化上高度保守... 详细信息

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是一类由生物基因组转录产生但不编码蛋白质的遗传信息分子,作为表观遗传学研究的主要内容,曾一度被视为基因组中的“暗物质”或“转录噪音”。最广为人知的微小RNA(microRNA,miRNA)是在进化上高度保守的一类长20~24个核苷酸的短链非编码小分子RNA,通过与靶位点碱基互补配对切割降解靶基因转录本或抑制其翻译,从而实现对生物体生长发育等过程的调控。随着小RNA测序和降解组测序等miRNA研究手段的发展,越来越多的miRNA及其生物学功能在动植物中被相继报道,揭示了miRNA在逆境响应过程中的重要调控作用。笔者较为系统地论述了植物miRNA的特征、合成过程、作用方式及其在抗旱耐盐方面的研究进展,以期揭示植物抗旱耐盐的miRNA调控机理,为创制抗旱耐盐新种质提供依据。

关键词：非编码RNA 盐胁迫干旱胁迫小RNA测序降解组

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注干施用3种药剂防治松材线虫病研究

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南京林业大学学报(自然科学版) 2024年

作者：向帆叶建仁张婉君南京林业大学林草学院南方现代林业协同创新中心

【目的】确定不同药剂注干后在松树体内的输导残留情况及防病效果，筛选出持效性强，防治效果好的树干注射剂，为树干注射预防松材线虫病提供基础数据。【方法】采用浸虫法测定5%(体积分数，下同)甲维盐可溶性液剂、5%阿维菌素乳油和1%... 详细信息

【目的】确定不同药剂注干后在松树体内的输导残留情况及防病效果，筛选出持效性强，防治效果好的树干注射剂，为树干注射预防松材线虫病提供基础数据。【方法】采用浸虫法测定5%(体积分数，下同)甲维盐可溶性液剂、5%阿维菌素乳油和1%甲维盐-9%吡虫啉可溶性液剂3种药剂对松材线虫的室内毒杀效果；将3种药剂的LC20亚致死浓度喷洒至灰葡萄孢上，接种松材线虫来检测其对线虫取食繁殖的影响；在林间用3种药剂进行树干注射，分析注干1年和660天后药剂在马尾松体内输导残留情况。于注干后次年六月对注干马尾松进行人工接种松材线虫，观察统计注干1年后对松材线虫病的防病效果。【结果】5%甲维盐可溶性液剂、5%阿维菌素乳油和1%甲维盐-9%吡虫啉可溶性液剂3种药剂处理线虫24 h后的LC50分别为10.879 8、57.008 7 、93.693 9 mg/L。在喷洒了LC20亚致死浓度药剂的灰葡萄孢上接种线虫，3种药剂均能显著抑制线虫的取食速率，还能显著降低线虫的种群数量(分别333、466和500，与对照47 766条/皿)，其差异显著。3种药剂注干1年后，均由注药点位置往上输导，除5%阿维菌素乳油外，其他两种均能在顶梢检测到药剂的存在，其中5%甲维盐可溶性液剂残留量为0.006 3 mg/kg，复配药剂中吡虫啉含量最高，为0.213 0 mg/kg，甲维盐含量为0.082 3 mg/kg。甲维盐与复配药剂中的吡虫啉分别在注干点2.0 m与0.5 m处存在药量的蓄积，含量远远高出其他部位，其残留含量分别为12.863 6，128.395 2 mg/kg。注干660天后，树体内各药剂残留含量较上年有所减少，但各药剂均在顶枝能检测到残留，其中复配药剂残留总量最高为0.125 1 mg/kg，甲维盐可溶性液剂残留含量为0.074 1 mg/kg，阿维菌素乳油残留含量为0.012 4 mg/kg。与注干1年时的结果相比，随着高度的增加，甲维盐可溶性液剂与复配药剂不再出现某个部位药量最高的情况，而是残留含量逐渐减少。对注干450天后的松树人工接种松材线虫，枝条接种75天后调查，在5%甲维盐可溶性液剂，5%阿维菌素乳油和1%甲维盐-9%吡虫啉可溶性液剂注干的松树上，防病效果均为100%。继续观察发现，5%阿维菌素乳油的预防效果明显更好。【结论】5%甲维盐可溶性液剂、5%阿维菌素乳油和1%甲维盐-9%吡虫啉可溶性液剂3种药剂对松材线虫不仅具有较强的毒杀能力，而且注干后在松树体内具有良好的输导性和持久性。同时，在预防松材线虫感染方面，注干第2年都仍然具有较好的预防性效果。在本试验的3种药剂中，又以5%阿维菌素乳油有更好的林间防效，可在大面积林区内进行推广和应用。

关键词：松材线虫病树干注射药剂残留防病效果

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基于EST-SSR标记的南方型黑杨主栽无性系鉴定及亲缘关系分析

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植物研究 2019年第5期39卷 770-778页

作者：袁佳秋田野洑香香南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

以南方型黑杨引进后主栽区重点推广栽植的12个无性系为研究对象,利用EST-SSR分子标记进行多态性分析,并建立无性系鉴定的指纹图谱,为优良黑杨无性系的推广提供依据。用EST-trimmer对NCBI数据库中的EST序列进行分析、MISA软件找出SSR位... 详细信息

以南方型黑杨引进后主栽区重点推广栽植的12个无性系为研究对象,利用EST-SSR分子标记进行多态性分析,并建立无性系鉴定的指纹图谱,为优良黑杨无性系的推广提供依据。用EST-trimmer对NCBI数据库中的EST序列进行分析、MISA软件找出SSR位点后运用primer3在线设计获得的30对EST-SSR引物,对12个黑杨无性系进行PCR扩增。经过筛选获得18对多态性引物,对12个黑杨无性系进行扩增获得88个等位基因,多态率为70.5%,平均观察等位基因数为2.1463,平均Shannon’s多样性指数为0.5927。通过5对引物组合(EU147、EU43、EU11、EU164和EU81)可以将12个黑杨无性系进行区分,并在此基础上构建指纹图谱。亲缘关系分析发现无性系间的遗传相似系数为0.6020~0.9040,平均值为0.7691;无性系间的遗传距离较近,与其均来源于美洲黑杨和欧美杨的相似遗传背景有关。总之,EST-SSR标记可以对南方型黑杨主栽无性系进行有效鉴定。

关键词：南方型杨树 EST-SSR标记无性系鉴定多态性

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银杏生物量分配格局及异速生长模型

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北京林业大学学报 2017年第4期39卷 12-20页

作者：刘坤曹林汪贵斌曹福亮南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

以苏北地区银杏人工林为研究对象,选取13株进行整株挖掘,分析不同器官生物量的分配格局,以及地上和地下生物量之间的关系;再分别以胸径(D)、树高(H)、D^2H、D^aH^b为自变量建立银杏各器官生物量模型,选择调整决定系数(R2adj)、残差平方... 详细信息

以苏北地区银杏人工林为研究对象,选取13株进行整株挖掘,分析不同器官生物量的分配格局,以及地上和地下生物量之间的关系;再分别以胸径(D)、树高(H)、D^2H、D^aH^b为自变量建立银杏各器官生物量模型,选择调整决定系数(R2adj)、残差平方和(SSE)、平均偏差(ME)、平均绝对偏差(MAE)和平均相对误差(MPE)作为选择最优模型的检验指标,根据检验结果筛选出各器官的最优模型。结果表明:13株银杏的整株生物量变化范围为28.50~320.27 kg,树干生物量占总生物量的49.4%~56.6%,树枝生物量占总生物量的12.1%~18.9%,树叶生物量占总生物量的3.8%~5.5%,根生物量占总生物量的26%;地上部分生物量与地下生物量线性方程的斜率为0.35,具有显著的线性相关性(P<0.01);枝和叶生物量都集中于树冠中部,树冠上层和下层的枝、叶生物量明显低于树冠中层生物量(P<0.05),上层和下层生物量之间差异不显著(P>0.05),70%根生物量集中0~1.0 m的土层;枝水平上,基于基径和枝长的枝生物量模型解释量超过95%;在各器官生物量最优模型选择上,以D为自变量的W=a Db的叶、枝、地上部分生物量模型要优于其他模型;树干、根和全株生物量则是以W=a D^bH^c模型最优。银杏各器官生物量表现为干>根>枝>叶,枝和叶生物量垂直分配上,中冠层占最大比例;基于树高和胸径的相对生长模型可以实现对银杏各器官生物量的准确拟合,银杏生物量及碳储量的有效估算。

关键词：生物量分配格局异速生长模型银杏人工林

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菊方翅网蝽在南京分布及其对中国的风险分析

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南京林业大学学报（自然科学版） 2020年第1期44卷 125-130页

作者：程强吴小芹叶建仁林司曦南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】了解菊方翅网蝽在南京的分布及危害情况,并确定其在中国的潜在适生分布区和风险大小,为菊方翅网蝽的防控提供参考。【方法】采用实地踏查的方式对南京市8个主城区的公园、广场、绿道等进行调查;采用MaxEnt生态位模型,结合地理... 详细信息

【目的】了解菊方翅网蝽在南京的分布及危害情况,并确定其在中国的潜在适生分布区和风险大小,为菊方翅网蝽的防控提供参考。【方法】采用实地踏查的方式对南京市8个主城区的公园、广场、绿道等进行调查;采用MaxEnt生态位模型,结合地理信息系统(ArcGIS)预测菊方翅网蝽在中国的潜在适生区;采用多指标综合评价法,从传入的可能性、定殖的可能性、扩散的可能性、受害寄主的经济重要性和危险性管理难度方面,对菊方翅网蝽在中国的入侵风险进行定量和定性分析。【结果】在南京8个主城区均发现有菊方翅网蝽入侵,主要危害菊科杂草,在菊花上危害较轻;预测菊方翅网蝽在中国的潜在适生区约占中国国土面积的40%;菊方翅网蝽在外来入侵有害生物多指标综合评价体系中得分为2.05,属高度风险有害生物。【结论】菊方翅网蝽在南京市已普遍发生,中国潜在适生范围广、风险较大,应加强对该虫的监测,避免进一步扩散。

关键词：菊方翅网蝽生物入侵适生区预测定量分析入侵风险南京

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基于SNP标记的广东省松材线虫种群分化研究

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南京林业大学学报（自然科学版） 2019年第6期43卷 25-31页

作者：黄金思奚晓桐丁晓磊叶建仁南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院

【目的】运用SNP标记研究中国广东省松材线虫虫株SNP位点多样性,从分子角度探讨广东省不同地区松材线虫种群的亲缘关系,为松材线虫病的疫源追溯提供基础。【方法】收集来自于广东省各地区松材线虫虫株共30株,提取DNA并进行基因组重测序... 详细信息

【目的】运用SNP标记研究中国广东省松材线虫虫株SNP位点多样性,从分子角度探讨广东省不同地区松材线虫种群的亲缘关系,为松材线虫病的疫源追溯提供基础。【方法】收集来自于广东省各地区松材线虫虫株共30株,提取DNA并进行基因组重测序;利用生物信息学软件分析广东省松材线虫的SNPs位点信息及基因型类型,依据以上信息进行种群聚类分析。【结果】对30株松材线虫虫株SNPs数据进行统计分析,发现GD01、GD09、GD12、GD20、GD22、GD24、GD25这7株虫株的SNP数量、纯合子数量都明显少于其余23株虫株;对基因型类型进行统计分析发现,以上7株虫株出现频率较高的基因型为A->G、C->G、G->C、T->C;其余23株虫株则是A->G、C->T、G->A、T->C这4种基因型出现的频率较高。而通过主成分和聚类分析可将这30株虫株分为3类。【结论】广东省松材线虫种群遗传多样性较高,聚类分析表明其具有不同的传播来源。

关键词：松材线虫高通量测序 SNP 聚类分析广东省

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