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中华微生物学和免疫学杂志 2004年第10期24卷 807-811页

作者：曾焱华吴移谋余敏君朱翠明曾铁兵刘安元南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001

目的　了解穿透支原体潜在的致病性和穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的分子机制。方法　用从穿透支原体提取的脂质相关膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞 ,以RT PCR和Westernblot等方法分析诱导性一氧化... 详细信息

目的　了解穿透支原体潜在的致病性和穿透支原体脂质相关膜蛋白诱导小鼠巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 (iNOS)的分子机制。方法　用从穿透支原体提取的脂质相关膜蛋白刺激小鼠巨噬细胞 ,以RT PCR和Westernblot等方法分析诱导性一氧化氮合酶的表达和NO的产生。用间接免疫荧光和Westernblot检测经穿透支原体脂质相关膜蛋白处理的小鼠巨噬细胞中NF κB的激活和NF κB抑制剂PDTC(吡咯啉烷二甲基硫脲 )对iNOS的表达和NO产生的影响。结果　穿透支原体脂质相关膜蛋白以时间和剂量依赖方式刺激小鼠巨噬细胞产生NO ,且能激活NF κB诱导巨噬细胞表达i NOS的mRNA和蛋白 ,其mRNA和蛋白的表达水平能被PDTC所抑制。结论　由于穿透支原体脂质相关膜蛋白能通过激活NF κB诱导巨噬细胞表达诱导性一氧化氮合酶 ,因而可能是一个重要的致病因素。

关键词：巨噬细胞支原体脂质表达小鼠一氧化氮合酶膜蛋白 RNA 体脂 NF-κB

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SOCS-3基因在Balb/c小鼠脑组织中的表达与脑不对称性

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生物化学与生物物理进展 2004年第8期31卷 727-730页

作者：赵丽纯苏芸李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

为探讨细胞因子信号传导抑制因子 3(suppressoofcytokinesignaling 3,SOCS 3)在Balb/c小鼠皮层、海马、下丘脑中的表达及其与脑不对称性的关系 .通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利组和右利组 ,取左、右侧皮层 ,左、右侧海马及下丘脑 ,... 详细信息

为探讨细胞因子信号传导抑制因子 3(suppressoofcytokinesignaling 3,SOCS 3)在Balb/c小鼠皮层、海马、下丘脑中的表达及其与脑不对称性的关系 .通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利组和右利组 ,取左、右侧皮层 ,左、右侧海马及下丘脑 ,以RT PCR法间接测定SOCS 3mRNA水平 .结果表明 :a 在左利鼠右侧皮层中 ,SOCS 3基因表达水平显著高于左侧皮层 (P <0 0 5 ) ;右利鼠左侧皮层SOCS 3表达显著高于左利鼠左侧皮层 (P <0 0 5 ) .b 海马中SOCS 3表达 :左利鼠右侧海马SOCS 3表达显著高于左侧海马 (P <0 0 5 ) ;右利鼠左侧海马SOCS 3表达显著高于左利鼠左侧海马 (P <0 0 5 ) .c 右利鼠下丘脑中SOCS 3显著高于左利鼠 (P<0 0 5 ) .上述研究结果提示 ,Balb/c小鼠脑中SOCS

关键词： SOCS-3基因小鼠脑组织表达脑不对称神经免疫内分泌细胞因子信号传导抑制因子

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天敌应激下小鼠血浆皮质酮、巨噬细胞产生NO、IL-1β水平与脑不对称性

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生物化学与生物物理进展 2004年第9期31卷 824-828页

作者：赵丽纯苏芸李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

为探讨天敌应激下脑不对称性对小鼠HPA轴活性及巨噬细胞功能的影响,通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利、右利、双利组,分别暴露在鼠类天敌———猫急性应激(4 5min,1次)、慢性应激(4 5min/次,每天 1次,连续 14天)刺激后,分别用EIA法... 详细信息

为探讨天敌应激下脑不对称性对小鼠HPA轴活性及巨噬细胞功能的影响,通过伸爪取食法将Balb/c小鼠分为左利、右利、双利组,分别暴露在鼠类天敌———猫急性应激(4 5min,1次)、慢性应激(4 5min/次,每天 1次,连续 14天)刺激后,分别用EIA法、硝酸还原酶法、ELISA法测定了血浆皮质酮、腹腔巨噬细胞培养上清中一氧化氮(nitricoxide,NO)、IL 1β水平.a 血浆皮质酮水平:急性应激下,右利、双利组小鼠血浆皮质酮升高,右利组更为显著,左利组呈下降趋势,右利、双利组显著高于左利组及相应正常对照组(P <0 0 5 );慢性应激下,右利、双利组显著高于相应正常对照组,左利、双利组也显著高于急性应激下相应组(P <0 0 5 ).b NO水平:急性应激下,左利组腹腔巨噬细胞培养上清中NO无显著变化,右利、双利组呈升高趋势,右利显著高于左利(P <0 0 5);慢性应激中,三组NO水平均显著高于相应正常对照组(P <0 0 5 ).c IL 1β水平:急性应激下,左利组IL 1β水平显著低于相应正常对照组,P<0 0 5;慢性应激下,左利、双利组与正常对照组相比均有所降低,但无统计学意义(P >0 0 5),右利组则显著高于相应正常对照组(P <0 0 5 ).上述研究结果提示,小鼠在暴露于天敌———猫应激下。

关键词：天敌应激,脑不对称皮质酮一氧化氮 IL-1β

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蛋白激酶C在脂多糖诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ表达中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第3期29卷 198-203页

作者：贲志云程纯孙晓雷钱佶肖锋张冬梅季玉红南通大学医学院免疫学与微生物学教研室 226001

目的研究蛋白激酶C（PKC）对脂多糖（LPS）诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1，4-galactosyltransferase-Ⅰ，β-1，4-GaIT-Ⅰ）表达的调节作用，以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响。方法分别用PKC激动剂或几种... 详细信息

目的研究蛋白激酶C（PKC）对脂多糖（LPS）诱导内皮细胞β-1，4-半乳糖基转移酶-Ⅰ（β-1，4-galactosyltransferase-Ⅰ，β-1，4-GaIT-Ⅰ）表达的调节作用，以及对内皮细胞骨架结构改变及其黏附能力的影响。方法分别用PKC激动剂或几种不同类型的PKC抑制剂预处理人脐静脉内皮细胞（HUVECs）30rain，LPS刺激HUVECs4h后，RT-PCR、Western blot方法检测β-1，4-GaIT-Ⅰ表达变化，细胞荧光染色观察β-1，4-GaIT-Ⅰ催化的糖链表达变化及细胞骨架结构的改变，通过内皮-单核细胞黏附试验观察HUVECs黏附能力的改变。结果儿种不同类型的PKC抑制剂均能不同程度地抑制LPS刺激HUVECs引起的β-1，4-GaIT-Ⅰ表达的上调，PKC激动剂能够使上调的β-1，4-GAIT-Ⅰ的表达进-步增加；在HUVECs中β-1，4-GaIT-Ⅰ与细胞骨架有共同定位，PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮细胞骨架蛋白的重构和β-1，4-GaIT-Ⅰ细胞内的再分布；PKC抑制剂显著抑制LPS诱导的内皮-单核细胞黏附能力的上调。结论PKC可能参与调节LPS诱导的HUVECs β-1，4-GaIT-Ⅰ的表达，可能多种类型的PKC参与了这一调节过程；PKC可能通过对β-1，4-GaIT-Ⅰ的调节进而影响炎症过程中内皮细胞骨架蛋白的重构及内皮细胞与单核细胞的黏附能力。

关键词： β-1 4-半乳糖基转移酶-Ⅰ 蛋白激酶C 内皮细胞脂多糖

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不同T细胞亚群对超抗原SEA反应性的差异

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复旦学报（医学版） 2002年第6期29卷 437-439页

作者：张瑞华陈露秋储以微刘瑞梓王缨熊思东复旦大学医学院免疫学系上海200032 东京女子医科大学微生物学与免疫学教研室

目的　在体内和体外研究SEA再次刺激后Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群的免疫反应 ,探讨CD4+ 和CD8+ T细胞亚群对超抗原SEA反应性的差异。方法　分离小鼠超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)应答性Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ 两个T细胞亚... 详细信息

目的　在体内和体外研究SEA再次刺激后Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群的免疫反应 ,探讨CD4+ 和CD8+ T细胞亚群对超抗原SEA反应性的差异。方法　分离小鼠超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)应答性Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ 两个T细胞亚群 ,检测其对SEA再次刺激的增殖反应及产生IL 2活性。结果　Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群对SEA再次刺激所诱导的增殖反应以及产生IL 2活性的能力有显著差异 (P <0 .0 1)。结论　SEA单次刺激时Vβ3+ CD4+ 和Vβ3+ CD8+ T细胞亚群反应性相似 ,再次刺激时Vβ3+ CD8+ 呈显著低反应性。

关键词： T细胞亚群超抗原SEA 反应性差异

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湖南衡阳地区呼吸道感染革兰阴性杆菌的菌群分布及耐药性分析

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中国抗生素杂志 2009年第12期34卷 759-763页

作者：任林陈超群张秋桂谭波南华大学附属第一医院衡阳421001 南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001

目的了解本院近2年呼吸道感染革兰阴性杆菌菌群分布及常见致病菌的耐药情况。方法收集本院2006年10月～2008年10月临床送检的5914份痰标本，采用API鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验。结果共分离出1386株革兰阴性杆菌，最常见的呼吸道革... 详细信息

目的了解本院近2年呼吸道感染革兰阴性杆菌菌群分布及常见致病菌的耐药情况。方法收集本院2006年10月～2008年10月临床送检的5914份痰标本，采用API鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验。结果共分离出1386株革兰阴性杆菌，最常见的呼吸道革兰阴性杆菌是铜绿假单胞菌（31．0％），其次是鲍曼不动杆菌（14．2％）、大肠埃希菌（12．6％）、肺炎克雷伯菌（11．3％）、阴沟肠杆菌（8．4％）、产酸克雷伯菌（7．6％）与嗜麦芽寡养单胞菌（4．6％）。主要革兰阴性杆菌均对头孢哌酮／舒巴坦敏感，且除嗜麦芽寡养单胞菌外对亚胺培南和美罗培南也均敏感。各主要致病革兰阴性菌对替卡西林、替卡西林／克拉维酸、头孢他啶、环丙沙星、头孢吡肟、哌拉西林／三唑巴坦、哌拉西林、庆大霉素与妥布霉素均耐药。产酸克雷伯菌产ESBLs的菌株高达52．8％，大肠埃希菌为46．0％，肺炎克雷伯菌为38．5％，肠杆菌科中产ESBLs菌株对青霉素类和头孢类抗生素耐药率明显高于非产ESBLs菌株。产ESBLs和非产ESBLs肠杆菌科细菌均对替卡西林、头孢噻吩、复方磺胺甲嗯唑与阿莫西林耐药，而对亚胺培南、美罗培南与头孢哌酮／舒巴坦均敏感。结论呼吸道分离的革兰阴性杆菌均存在严重耐药问题，及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要。

关键词：呼吸道感染革兰阴性菌耐药性

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湖南衡阳地区医院常见病原菌分布及其耐药性分析

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中国抗生素杂志 2008年第5期33卷 303-306,316页

作者：任林陈超群张秋桂刘双全王巧珍南华大学附属第一医院衡阳421001 南华大学医学院微生物学与免疫学教研室衡阳421001

目的了解南华大学附属第一医院近9年常见病原菌分布及近1年常见致病菌的耐药情况。方法用API半自动微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验。结果13942份临床标本中共分离出病原菌3723株,阳性率26.7%,检出病原菌分布于38个属,107个种。革兰... 详细信息

目的了解南华大学附属第一医院近9年常见病原菌分布及近1年常见致病菌的耐药情况。方法用API半自动微生物鉴定系统进行鉴定及药敏试验。结果13942份临床标本中共分离出病原菌3723株,阳性率26.7%,检出病原菌分布于38个属,107个种。革兰阴性菌构成比高于革兰阳性菌,最常见的病原菌是凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)菌,占15.7%,其次是金葡菌、大肠埃希菌、假单胞菌属、不动杆菌属。葡萄球菌对万古霉素、奎奴普丁/达福普汀、呋喃妥因、米诺环索、夫西地酸、替考拉宁及利福平敏感,但对青霉素、苯唑西林和红霉素耐药率高达80%以上。肠球菌及链球菌耐药情况严重,对多种抗生素耐药,其中对红霉素及氯林可霉素耐药率高达88%以上。但对万古霉素最敏感。各主要致病革兰阴性菌对亚胺培南、美洛培南及阿米卡星(沙门菌除外)均敏感,但对庆大霉素、头孢噻吩及头孢呋辛耐药率均在60%以上。沙门菌属则对多种抗生素敏感。结论临床病原菌以革兰阴性菌为主。检出菌中除沙门菌外,均存在严重耐药问题,及时监测病原菌变化及耐药趋势以指导临床用药至关重要。

关键词：病原菌细菌分布耐药性

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小鼠血浆TNF-α、NO、NOS水平与脑不对称的关系

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生理学报 2002年第6期54卷 513-518页

作者：付清玲李康生汕头大学医学院微生物学与免疫学教研室汕头515031

研究脑不对称对单核巨噬细胞 (Mo/MФ)的影响。选用雌性 4周龄Balb/c健康小鼠 ,用伸爪取食法根据右利分将小鼠区分为左利、右利和双利三组。细菌脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)腹腔注射两小时后取血浆检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)... 详细信息

研究脑不对称对单核巨噬细胞 (Mo/MФ)的影响。选用雌性 4周龄Balb/c健康小鼠 ,用伸爪取食法根据右利分将小鼠区分为左利、右利和双利三组。细菌脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)腹腔注射两小时后取血浆检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)、一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)水平。结果显示 :( 1)各组间血浆TNF α和NO、NOS水平的变化 :正常生理组NO水平为双利组高于左利组 (P <0 0 5 ) ;LPS刺激后双利组和右利组血浆TNF α水平高于左利组 (P <0 0 5 ) ,NO水平为双利组高于右利组 (P <0 0 1)和左利组 (P <0 0 5 ) ,NOS水平在三组小鼠间无明显差别。 ( 2 )血浆TNF α、NO、NOS与右利分有一定的相关关系 ,各项指标随右利分的变化趋势多为双利>右利和左利 ,形成一以双利分段 (右利分为 2 1～ 2 9)为高峰的弓形向上的曲线 ,随右利分的增加或减少曲线向两侧延伸和下降。上述结果提示 ,脑不对称小鼠单核 /巨噬细胞功能存在差异。脑不对称对免疫功能的影响程度与右利分有关。

关键词：小鼠血浆TNF-α NO NOS 脑不对称关系免疫调控肿瘤坏死因子α 一氧化氮一氧化氮合酶巨噬细胞

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细胞因子在登革病毒感染人皮肤成纤维细胞中的作用

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第7期25卷 583-587页

作者：江振友温筱芸暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室广州510632

目的探讨登革病毒(denguevirus,DV)对人皮肤成纤维细胞(HSF)的感染性和细胞因子在DV感染HSF中的作用。方法采用微量病毒空斑法检测登革Ⅱ型病毒(denguetype-2virus,DV2)感染HSF后病毒繁殖动态变化,间接免疫荧光法检测HSF内DV抗原。透射... 详细信息

目的探讨登革病毒(denguevirus,DV)对人皮肤成纤维细胞(HSF)的感染性和细胞因子在DV感染HSF中的作用。方法采用微量病毒空斑法检测登革Ⅱ型病毒(denguetype-2virus,DV2)感染HSF后病毒繁殖动态变化,间接免疫荧光法检测HSF内DV抗原。透射电镜观察病毒感染细胞的超微结构改变。用不同浓度的IL-6、TNF-α、GM-CSF分别作用于DV2感染HSF的不同环节(病毒吸附时和病毒吸附后),于感染后48h收集感染上清,测病毒滴度;用DV2感染HSF后,于不同时间收集感染上清,用ELISA法定量测定IL-6、TNF-α的含量。结果病毒感染后24h即可在培养上清中测出病毒,病毒滴度在48h达到高峰,以后逐渐下降。用间接免疫荧光法证明感染的HSF胞浆及胞膜上携带DV抗原。在光镜和电镜下,感染细胞均未见明显的形态和结构改变。在病毒吸附时10ng/ml浓度的IL-6能显著提高病毒产量;在病毒吸附时和吸附后100ng/ml浓度的TNF-α能抑制病毒的产量。GM-CSF对DV感染HSF无明显影响。DV感染能促进HSF分泌IL-6;对TNF-α的分泌无明显影响。结论HSF是DV的允许性细胞。HSF可能是蚊叮咬后在原位组织中首先支持DV感染的细胞之一;细胞因子在DV感染HSF的致病和免疫过程中起重要作用。

关键词：登革病毒人皮肤成纤维细胞细胞因子免疫学登革病毒感染间接免疫荧光法 GM-CSF TNF-α 超微结构改变病毒感染细胞

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HCMV pp150抗原基因在蚕豆中的遗传转化及鉴定

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1150-1154页

作者：严华李国才焦红梅陈红菊扬州大学医学院微生物学和免疫学教研室 225001

目的研制人巨细胞病毒(HCMV)口服疫苗。方法根据HCMV基质磷蛋白PP150基因序列设计引物,PCR法从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码PP150抗原决定簇区域的基因片段。将Kozak序列插入pp150基因的起始密码子的上游,3′端引入了内质网滞留信... 详细信息

目的研制人巨细胞病毒(HCMV)口服疫苗。方法根据HCMV基质磷蛋白PP150基因序列设计引物,PCR法从HCMV AD169株基因组DNA中扩增出编码PP150抗原决定簇区域的基因片段。将Kozak序列插入pp150基因的起始密码子的上游,3′端引入了内质网滞留信号KDEL序列,将修饰后的基因片段克隆进载体pBI121,构建了带潮霉素(Hyg)选择抗性基因的植物表达载体pCAM- BIA1300/pp150和根癌农杆菌工程菌EHA105;采用叶盘法转化蚕豆,获得了5株抗性植株,通过PCR、Southern blot和RNA dot blot分析鉴定,确认了3株为转基因植株。通过ELISA和Western blot对这3株的蛋白萃取物进行分析,以鉴定其免疫学活性。结果这3株转基因植株表达的PP150蛋白具有免疫原活性。结论这些转基因植株为HCMV口服疫苗的研究提供了条件。

关键词：人巨细胞病毒 pp150 口服疫苗转基因蚕豆

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