检索结果-内蒙古大学图书馆

四川大学学报（医学版） 2007年第2期38卷 222-225页

作者：魏晓丽李明远李虹施桥发李婉宜蒋忠华四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041

目的探讨鼠重组beta防御素2(rmBD2)对SiHa细胞增殖的影响。方法采用脂质体转染法将真核表达质粒pcDNA3.1(+)/rmBD2转染SiHa细胞系,G418筛选出稳定表达细胞克隆。分别采用间接免疫荧光染色、RT-PCR方法检测稳定转染细胞中rmBD2蛋白和rmBD... 详细信息

目的探讨鼠重组beta防御素2(rmBD2)对SiHa细胞增殖的影响。方法采用脂质体转染法将真核表达质粒pcDNA3.1(+)/rmBD2转染SiHa细胞系,G418筛选出稳定表达细胞克隆。分别采用间接免疫荧光染色、RT-PCR方法检测稳定转染细胞中rmBD2蛋白和rmBD2 mRNA表达,并采用MTT法对稳定转染细胞株进行细胞增殖能力的测定。结果采用100μg/mL的G418浓度筛选质粒转染的SiHa细胞20d,得到了rmBD2稳定表达细胞株SiHa/rmBD2及转染pcDNA3.1(+)空质粒的对照细胞SiHa/K。免疫荧光染色显示SiHa/rmBD2细胞质中均有目的蛋白的表达,转染效率为100%。提取稳定转染4、6、8、10周SiHa/rmBD2细胞总RNA,RT-PCR反应扩增得到220bp左右的目的片段,而SiHa/K及SiHa细胞未见目的蛋白表达。细胞生长曲线显示SiHa/rmBD2细胞的生长速度低于SiHa/K及SiHa细胞(P<0.05)。结论本研究成功筛选了稳定表达rmBD2的细胞株SiHa/rmBD2,并采用间接免疫荧光染色、RT-PCR证实了rmBD2蛋白和rmBD2 mRNA的稳定表达,细胞增殖实验表明rmBD2可以明显抑制肿瘤细胞的增殖,为进一步研究rmBD2的抗肿瘤作用奠定了细胞学基础。

关键词： rmBD2稳定表达免疫荧光 RT-PCR 细胞生长曲线

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寨卡病毒与男性(雄性)生殖健康

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中国人兽共患病学报 2019年第6期35卷 545-551页

作者：杨威盛子洋吴艳花安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是一种主要经由蚊虫叮咬传播的黄病毒,于1947年分离自乌干达寨卡森林的猕猴。2013年以来,ZIKV在全球范围内大规模流行,加之孕妇在妊娠早期感染ZIKV可导致胎儿小头畸形,成人感染可导致吉兰巴雷综合征(Guillain-... 详细信息

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是一种主要经由蚊虫叮咬传播的黄病毒,于1947年分离自乌干达寨卡森林的猕猴。2013年以来,ZIKV在全球范围内大规模流行,加之孕妇在妊娠早期感染ZIKV可导致胎儿小头畸形,成人感染可导致吉兰巴雷综合征(Guillain-Barrésyndrome),因此,ZIKV受到广泛关注。随后的研究表明ZIKV可以于男性感染者的精液中长期存在,并通过性途径传播,提示该病毒可能在男性泌尿生殖系统中增殖。本文就近几年ZIKV感染与男性(雄性)生殖健康相关研究作一综述。

关键词：寨卡病毒男性生殖睾丸靶细胞

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热毒清口服液抑制呼吸道合胞病毒的体外实验研究

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中药材 2009年第4期32卷 579-581页

作者：黄升海冯晓亮刘伟安徽医科大学基础医学院微生物学教研室安徽合肥230032

目的:评价热毒清口服液体外抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的效果。方法:采用MTT法及细胞病变抑制实验,以病毒唑为阳性对照,测定热毒清口服液在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用。结果:热毒清口服液的半数... 详细信息

目的:评价热毒清口服液体外抑制呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的效果。方法:采用MTT法及细胞病变抑制实验,以病毒唑为阳性对照,测定热毒清口服液在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用。结果:热毒清口服液的半数中毒浓度(TC50)为9182.4 mg/L,抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为559.8 mg/L,治疗指数(TI)为16.4。结论:热毒清口服液在体外实验中对呼吸道合胞病毒有显著抑制作用。

关键词：热毒清口服液呼吸道合胞病毒抗病毒作用细胞病变效应

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幽门螺杆菌重组VacA蛋黄抗体的体外活性

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世界华人消化杂志 2006年第8期14卷 789-794页

作者：毛小琴杨致邦张绍兰田一玲黄进重庆医科大学基础医学院微生物学教研室重庆400016

目的:制备幽门螺杆菌(Helicobacter pylon)重组VacA的鸡蛋黄抗体IgY(VacA-IgY),了解其理化特性和生物学活性,评价其抗H pylori感染的作用．方法:以纯化的重组VacA免疫产蛋鸡,水稀释法提取蛋黄抗体(VacA-IgY),硫酸铵沉淀法纯化IgY．将一... 详细信息

目的:制备幽门螺杆菌(Helicobacter pylon)重组VacA的鸡蛋黄抗体IgY(VacA-IgY),了解其理化特性和生物学活性,评价其抗H pylori感染的作用．方法:以纯化的重组VacA免疫产蛋鸡,水稀释法提取蛋黄抗体(VacA-IgY),硫酸铵沉淀法纯化IgY．将一定浓度的VacA-IgY在不同温度的水浴中维持一定时间,评价其耐热性;在不同 pH的Tris-HCI中孵育一定时间,评价其耐酸性;加入胃蛋白酶并作用一定时间后,评价其对酶消化的耐受作用．以上评价均采用ELISA 法测定抗体效价变化．采用Hela细胞体外培养 MTT法分析VacA-IgY对H pylori细胞毒活性的中和作用．结果:本实验制备的VacA-IgY在70℃水浴 15 min后活性保持约50％;在pH≥5时,抗体活性几乎无改变,pH<5时,抗体活性下降较快,pH2．0左右,抗体活性几乎丧失;pH4．0时, 60 kU／L胃蛋白酶作用1 h,抗体活性几乎无变化,2 h后活性仍保持50％以上．VacA-IgY能浓度依赖性地中和H pylori菌体蛋白的Hela细胞毒活性．20 mg／L超声提取物即可降低1／2的 Hela细胞增殖能力,80-320 mg／L的VacA-IgY 能完全中和H pylori菌体蛋白的Hela细胞毒活性(P<0．01)．结论:成功制备了重组VacA的IgY,且具有较好的耐热性、耐胃酶消化和一定的耐酸性; 在其体外具有中和H pylori细胞毒活性的作用．

关键词：幽门螺杆菌细胞空泡毒素重组蛋白蛋黄抗体活性细胞毒性

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登革2型病毒NS3基因的酵母表达及其免疫反应性的测定

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免疫学杂志 2005年第6期21卷 482-484,488页

作者：晏辉钧江丽芳方丹云周经姣郭辉玉中山大学基础医学院微生物学教研室广州510080

目的克隆登革2型病毒(DEN2)NS3基因并用酵母真核表达,获得全长的重组NS3蛋白质,为其结构与功能的研究提供条件。方法从感染DEN2(NGC株)后病变的C6/36细胞上清液中提取RNA,通过RTPCR扩增NS3基因片段,与载体pPICZαB连接筛选得到重组质粒... 详细信息

目的克隆登革2型病毒(DEN2)NS3基因并用酵母真核表达,获得全长的重组NS3蛋白质,为其结构与功能的研究提供条件。方法从感染DEN2(NGC株)后病变的C6/36细胞上清液中提取RNA,通过RTPCR扩增NS3基因片段,与载体pPICZαB连接筛选得到重组质粒,电穿孔法将重组体整合入酵母菌***,经抗生素Zeocin筛选产生的转化子进行表型鉴定,取Mut+菌诱导表达,SDSPAGE检测表达产物。结果RTPCR得到1.85kb的NS3基因片段,酶切鉴定与测序显示重组质粒含DEN2全长NS3基因;Mut+酵母转化菌可分泌表达Mr约78000的蛋白质,与DEN2多抗和登革2型病毒患者恢复期血清的免疫印迹证实它为型特异的重组NS3蛋白质。结论成功将克隆的全长DEN2NS3基因在酵母菌中表达,获得的重组NS3蛋白质具有免疫反应性。

关键词：登革2型病毒 NS3基因巴氏毕赤酵母基因表达抗体

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MicroRNAs在黏膜屏障及炎症反应中的作用

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中国免疫学杂志 2021年第19期37卷 2405-2410页

作者：谭仕廉郭乐申元英大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室大理671000

黏膜屏障是机体直接接触外源性异物的主要界面,同时也是病原体入侵机体的重要位点。因此,黏膜表面需要严格的调节以维持黏膜屏障功能或平衡黏膜炎症反应。近年来研究表明,MicroRNAs(miRNAs)在调节黏膜屏障功能和黏膜炎症反应过程中起到... 详细信息

黏膜屏障是机体直接接触外源性异物的主要界面,同时也是病原体入侵机体的重要位点。因此,黏膜表面需要严格的调节以维持黏膜屏障功能或平衡黏膜炎症反应。近年来研究表明,MicroRNAs(miRNAs)在调节黏膜屏障功能和黏膜炎症反应过程中起到重要的作用。本文综述了相关miRNAs与黏膜炎症的研究,进一步理解miRNAs参与黏膜生理和炎症过程中的作用,找到具有防治黏膜炎症的新作用靶点。

关键词： MicroRNAs 黏膜炎症屏障功能

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基于样本来源探索病原生物学实验整合课程新模式

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南方医科大学学报 2021年

作者：高剑迪丽达尔·库德热提单骄宇新疆医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室新疆医科大学基础医学院医学微生物学教研室

基于病原生物学整合课程中人体寄生虫学和医学微生物学生物学分类的绝对差异,理论教学短期内往往难以达到融合的目的,但基于传染病的样本采集与检验,病原生物学实验课程可能通过样本来源重新划分模块,并能够实现两门课程的融合。本文尝... 详细信息

基于病原生物学整合课程中人体寄生虫学和医学微生物学生物学分类的绝对差异,理论教学短期内往往难以达到融合的目的,但基于传染病的样本采集与检验,病原生物学实验课程可能通过样本来源重新划分模块,并能够实现两门课程的融合。本文尝试探讨基于样本来源探索病原生物学实验课程整合建设的立论依据和应用意义,并延伸思考虚拟实验室等多媒体教学手段对该种实验课程模式的应用。

关键词：病原生物学实验课程整合建设样本来源虚拟实验室网络课程

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嗜麦芽假单胞菌人绒毛膜促性腺激素受体表达最佳条件的研究

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华西医科大学学报 1995年第1期26卷 120-122页

作者：张传彬陈曼玲高巽坤顾淑君雷幼导王德恭华西医科大学基础医学院微生物学教研室

按正交试验设计方法，采用放射分析法对嗜麦芽假单胞菌人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）受体表达的最佳条件进行研究。结果表明，在所设的影响嗜麦芽假单胞菌特异结合百分率的因素中，其最佳条件为０．５％半乳糖３号固体培养基，培养７２... 详细信息

按正交试验设计方法，采用放射分析法对嗜麦芽假单胞菌人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）受体表达的最佳条件进行研究。结果表明，在所设的影响嗜麦芽假单胞菌特异结合百分率的因素中，其最佳条件为０．５％半乳糖３号固体培养基，培养７２小时。在此条件下嗜麦芽假单胞菌可表达出与ＨＣＧ较高的特异结合百分率。

关键词：人绒毛膜促腺性激素嗜麦芽假单胞菌受体表达

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新城疫病毒对人NK细胞表达TRAIL的促进作用

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肿瘤 2012年第12期32卷 974-981页

作者：殷君王立芳樊晓晖梁莹肖庆宋德志高灵茜赖振屏广西医科大学基础医学院微生物学教研室广西南宁530021

目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)刺激自然杀伤(natural killer,NK)细胞产生肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的作用机制。方法:采用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法,分离得到高纯度的NK细胞;乳酸脱氢酶释放法检测NDV激活的NK细胞对人肝癌HepG2细胞的杀伤作用;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测NDV刺激NK细胞4h后对TRAILmRNA表达水平的影响;FCM检测NDV刺激NK细胞16h时TRAIL蛋白的表达情况;ELISA法检测NDV刺激NK细胞后对其分泌干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的影响;最后采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,再采用FCM检测NDV刺激的NK细胞中TRAIL蛋白的表达情况。结果:FCM检测结果显示,分离得到的NK细胞的纯度达(90.60±1.15)%;NDV刺激NK细胞16h后,明显增强NK细胞的杀伤肿瘤作用,NDV效价为204.8HU刺激组的杀伤率达到(22.28±0.84)%;RFQ-PCR及FCM检测结果显示,不同效价的NDV刺激NK细胞后,NK细胞中TRAILmRNA及蛋白表达水平均明显升高;ELISA检测结果显示,NDV刺激NK细胞后IFN-γ的分泌水平明显增加,在NDV效价为25.6HU刺激16h时达到峰值(796.47±37.87)pg/mL;采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,NK细胞中TRAIL蛋白表达水平明显下降。结论:NDV刺激NK细胞后可增强IFN-γ的分泌水平,进而通过IFN-γ上调TRAIL的表达,此途径为NDV刺激NK细胞表达TRAIL的机制之一。此外,NDV直接刺激NK细胞表达TRAIL是另一条重要的途径。

关键词：肝肿瘤,实验性新城疫病毒免疫疗法 TNF相关凋亡诱导配体自然杀伤细胞

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束缚应激对S180荷瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子及肿瘤生长的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2003年第6期19卷 525-527页

作者：王济顾立刚彭桂英王庆国北京中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室北京100029

目的:观察束缚应激对荷S180瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子及肿瘤生长的影响。方法:取腹腔传代第7天的肿瘤细胞S180,调细胞密度至1×1010/L,注射于昆明小鼠右腋皮下,每只0.2 mL。接种后束缚限制活动,8 h/d,并设单纯束缚组、单纯肿瘤组和... 详细信息

目的:观察束缚应激对荷S180瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子及肿瘤生长的影响。方法:取腹腔传代第7天的肿瘤细胞S180,调细胞密度至1×1010/L,注射于昆明小鼠右腋皮下,每只0.2 mL。接种后束缚限制活动,8 h/d,并设单纯束缚组、单纯肿瘤组和正常对照组。10 d后处死小鼠,剥取肿瘤称瘤重,计算胸腺指数,分别采用MTT比色法和丝裂原激活淋巴母细胞法检测脾T细胞增殖及产生Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的能力,并取血清用ELISA法检测Th2型细胞因子IL-4、IL-10的含量。结果:束缚应激可明显增加荷瘤小鼠的瘤重(P<0.01),降低小鼠胸腺指数和脾T细胞的增殖能力(P值分别<0.01),降低荷瘤小鼠脾细胞产生IL-2和IFN-γ的能力(P值分别<0.01),并可使小鼠血清IL-4、IL-10的含量明显增加(P值分别<0.01和<0.05)。结论:束缚应激可显著抑制荷瘤小鼠的细胞免疫功能,使产生Th1型细胞因子的功能减弱,Th2型细胞因子的含量增加,导致Th1/Th2细胞的平衡进一步向Th2细胞漂移。这可能是其促进肿瘤生长的重要机制。

关键词：束缚应激肿瘤细胞免疫细胞因子

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