检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2021年第10期46卷 1145-1150页

作者：石松薛殿婷张培石静孙达权黔东南苗族侗族自治州人民医院重症医学科贵州凯里556000 贵州医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室贵州贵阳550025

目的探讨人丝裂原激活蛋白激酶3(MAPK3)基因原核表达载体的构建及鉴定。方法取对数生长期正常人肝细胞系HL-7702细胞,采用TRIzol法抽提细胞总RNA,以此为模板用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)反转录扩增MAPK3基因的蛋白编码区,脱氧核糖核... 详细信息

目的探讨人丝裂原激活蛋白激酶3(MAPK3)基因原核表达载体的构建及鉴定。方法取对数生长期正常人肝细胞系HL-7702细胞,采用TRIzol法抽提细胞总RNA,以此为模板用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)反转录扩增MAPK3基因的蛋白编码区,脱氧核糖核苷酸(DNA)测序鉴定后插入原核表达载体pGEX-4t-1中构建重组原核表达质粒(命名为pGEX-MAPK3_(GST));将pGEX-MAPK3_(GST)导入细菌Rosetta(DE3)中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达MAPK3融合蛋白(GST-MAPK3),采用Sepharose 4B亲和层析法纯化MAPK3融合蛋白(GST-MAPK3),采用考马斯亮蓝染色和蛋白免疫印迹分析GST-MAPK3的蛋白纯度和验证目的蛋白。结果RT-PCR法成功克隆了人MAPK3基因的蛋白编码区,DNA测序结果显示该片段无任何突变;用克隆获得的基因片段成功构建了pGEX-MAPK3_(GST),通过原核表达的方式获得了GST-MAPK3,并通过亲和层析纯化了GST-MAPK3。结论成功克隆人MAPK3基因并获得MAPK3蛋白,可用于体外研究MAPK3对细胞角蛋白18(CK18)的磷酸化作用。

关键词：丝裂原激活蛋白激酶类丝裂原激活蛋白激酶3 基因克隆载体构建原核表达亲和层析蛋白纯化

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PBL在医学生物化学实验教学中的设计

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教育教学论坛 2020年第39期 381-382页

作者：文红波曹运长南华大学衡阳医学院生化与分子生物学实验中心湖南衡阳421001 桂林医学院生物技术学院生化与分子生物学教研室广西桂林541199

生物化学在医学院校是一门专业基础课,主要研究组成人体化学物质的化学结构与功能,及其在体内的化学反应过程,概念较多且较抽象,教学内容枯燥,大部分只能靠识记,导致学生的学习难度大,学习的积极性和主动性不够。生物化学实验课是生物... 详细信息

生物化学在医学院校是一门专业基础课,主要研究组成人体化学物质的化学结构与功能,及其在体内的化学反应过程,概念较多且较抽象,教学内容枯燥,大部分只能靠识记,导致学生的学习难度大,学习的积极性和主动性不够。生物化学实验课是生物化学课程的重要组成部分,通过多年的实验教学,我们将PBL教学法贯穿临床医学专业生物化学实验教学的全过程,不但巩固了所学的理论知识,以提高学生的学习兴趣,而且还大大地激发了学生的科研思维和创新精神,取得了较好的教学效果。

关键词： PBL教学法生物化学实验临床医学专业教学设计

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干扰乳酸脱氢酶A表达对ErbB2高表达乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响

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四川大学学报（医学版） 2019年第1期50卷 55-60页

作者：贺丽李梦龙申越马雪娇余蓉赵玉华四川大学华西药学院微生物与生化药学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院人体解剖学教研室成都610041

目的探讨体外干扰乳酸脱氢酶A(LDHA)表达对人类表皮生长因子受体2(ErbB2)高表达乳腺癌SK-BR-3和MDA-MB-453细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法用si LDHA转染(以转染scramble siRNA为阴性对照)SK-BR-3和MDA-MB-453细胞干扰LDHA的表... 详细信息

目的探讨体外干扰乳酸脱氢酶A(LDHA)表达对人类表皮生长因子受体2(ErbB2)高表达乳腺癌SK-BR-3和MDA-MB-453细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法用si LDHA转染(以转染scramble siRNA为阴性对照)SK-BR-3和MDA-MB-453细胞干扰LDHA的表达;Western blot法检测LDHA蛋白表达水平;Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞的LDH活性;采用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分别测定培养基中的葡萄糖浓度和乳酸浓度,计算细胞对葡萄糖的摄取量和乳酸生成量。结果与阴性对照组比较,si LDHA下调SK-BR-3和MDA-MB-453细胞LDHA的蛋白水平(P<0.01);降低细胞的迁移和侵袭能力(P<0.001);下调SK-BR-3细胞的LDH活性,减少两种细胞葡萄糖摄取量和乳酸生成量,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论干扰LDHA表达通过降低糖酵解从而抑制ErbB2高表达乳腺癌细胞的迁移和侵袭。

关键词：乳腺癌小干扰RNA 乳酸脱氢酶A 糖酵解迁移与侵袭

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重组凋亡素组合肽(B9)的纯化及抗U251胶质瘤活性的研究

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医学分子生物学杂志 2020年第3期17卷 207-213页

作者：郭帅利陈奕冰董兴丽刘兴汉张丽秋王志国哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学基础医学院实验教学中心哈尔滨市150081

目的构建凋亡素组合肽(B 9)基因工程菌,建立重组凋亡素组合肽的纯化方法,在细胞水平上研究重组凋亡素组合肽抗U 251胶质瘤细胞活性。方法以PE T 28a质粒为表达载体构建凋亡素组合肽基因工程菌;经过等电点沉淀、PA A沉淀和阳离子交换层... 详细信息

目的构建凋亡素组合肽(B 9)基因工程菌,建立重组凋亡素组合肽的纯化方法,在细胞水平上研究重组凋亡素组合肽抗U 251胶质瘤细胞活性。方法以PE T 28a质粒为表达载体构建凋亡素组合肽基因工程菌;经过等电点沉淀、PA A沉淀和阳离子交换层析纯化重组凋亡素组合肽;获得的充足凋亡素组合肽处理U 251细胞,检测细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭。结果建立了以等电点沉淀、PA A沉淀和阳离子交换层析为核心技术的纯化重组凋亡素组合肽的方法,纯化的凋亡素组合肽纯度达到了电泳纯。重组的凋亡素组合肽能诱导U 251细胞凋亡,抑制U 251细胞的增殖、迁移和侵袭。结论建立了纯化重组凋亡素组合肽的实验方法,重组凋亡素组合肽在细胞水平上诱导U 251细胞凋亡,抑制U 251细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词：凋亡素组合肽聚丙烯酸离子交换层析 251胶质瘤细胞

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PEP06肽的成胶性及其解决方法的初步研究

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医学分子生物学杂志 2020年第2期17卷 135-141页

作者：陈奕冰郭帅利董兴丽刘兴汉王志国张丽秋哈尔滨医科大学药学院药理学教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学药学院生物制药教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室哈尔滨市150081 哈尔滨医科大学基础医学院实验教学中心哈尔滨市150081

目的开发一种避免PEP06肽形成凝胶从而消除药物凝胶有害作用的优化方法。方法选用不同溶剂研究溶剂对PEP06肽溶解性的影响;将PEP06肽放入装有氨水和浓盐酸容器内,研究pH对pEP06肽成胶性的影响;改变溶液的浓度,研究浓度对PETO6肽成胶性... 详细信息

目的开发一种避免PEP06肽形成凝胶从而消除药物凝胶有害作用的优化方法。方法选用不同溶剂研究溶剂对PEP06肽溶解性的影响;将PEP06肽放入装有氨水和浓盐酸容器内,研究pH对pEP06肽成胶性的影响;改变溶液的浓度,研究浓度对PETO6肽成胶性的影响;通过阳离子交换层析去除PEP06肽中的促成胶物质,解决PEP06的成胶问题。结果溶剂的种类影响PEP06肽的溶解性,在偏碱性的PBS缓冲液(pH=6.45)中药物的溶解性较差,在酸性的2%醋酸(pH=3.01)中溶解较好,溶剂对PEP06肽溶解性的影响可能与pH有关。溶液浓度与成胶性正相关,随着溶液浓度的增加,溶液逐渐地变得黏稠,直至形成凝胶。阳离子交换层析后的PEP06肽不再形成凝胶,推测影响PEP06肽成胶性的因素除了PEP06肽自身结构和上述因素外,溶液中可能还有一种能促进PEP06肽形成凝胶的物质,该物质能通过阳离子交换层析去除。结论确定了溶剂、浓度和pH对PEP06肽成胶性的影响;建立了通过阳离子交换层析解决PEP06肽的黏稠和成胶问题的方法,使得高浓度PEP06肽溶液能够通过微孔滤膜过滤,为大规模生产提供了技术支撑。

关键词： PEP06肽蛋白的成胶性阳离子交换层析

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胸腔积液中IL-27和IFN-γ检测对结核性胸膜炎的诊断价值

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吉林大学学报（医学版） 2019年第2期45卷 353-358页

作者：李芳张坚郝雪琦申思季凯孙玉宁宁夏医科大学总医院呼吸与危重症医学科宁夏银川750004 宁夏人民医院呼吸内科宁夏银川750000 宁夏医科大学临床医学院宁夏银川750004 宁夏医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室宁夏银川750004

目的:检测胸腔积液中白细胞介素27 (IL-27)和γ-干扰素(IFN-γ)水平,探讨IL-27和IFN-γ对结核性胸膜炎的诊断价值。方法:选择以胸腔积液就诊的患者88例,按诊断结果分为结核性胸腔积液(TPE)组44例、恶性胸腔积液组20例、类肺炎性胸腔积液... 详细信息

目的:检测胸腔积液中白细胞介素27 (IL-27)和γ-干扰素(IFN-γ)水平,探讨IL-27和IFN-γ对结核性胸膜炎的诊断价值。方法:选择以胸腔积液就诊的患者88例,按诊断结果分为结核性胸腔积液(TPE)组44例、恶性胸腔积液组20例、类肺炎性胸腔积液组12例和漏出性胸腔积液组12例。检测各组患者胸腔积液中IL-27、IFN-γ和腺苷脱氨酶(ADA)水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,根据敏感度、特异度和准确度等指标评价其对结核性胸膜炎的诊断价值。结果:TPE组患者胸腔积液中IL-27和IFN-γ水平明显高于其他3组(P<0.05)。胸腔积液中IL-27、IFN-γ和ADA诊断结核性胸膜炎的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.96、0.79和0.92,敏感度分别为100.0%、61.4%和78.6%,特异度分别为94.4%、89.5%和92.1%;IL-27、IFN-γ和ADA三者联合检测时,特异度(97.4%)高于单独检测。结论:胸腔积液中IL-27、IFN-γ和ADA检测可作为鉴别结核性胸膜炎的有效方法。单独检测时胸腔积液IL-27对结核性胸膜炎诊断价值高于IFN-γ和ADA,联合检验对诊断结核性胸膜炎具有重要价值。

关键词：结核性胸膜炎白细胞介素27 γ-干扰素腺苷脱氨酶

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miRNA与肿瘤转移的研究进展

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南昌大学学报（医学版） 2018年第3期58卷 77-81页

作者：李淑英万福生南昌大学基础医学院生化与分子生物学教研室南昌330006

介绍微小RNA(miRNA)与肿瘤转移的关系,简述miRNA如何通过肿瘤干细胞、血管再生、肿瘤相关巨噬细胞和上皮间质转化等途径影响肿瘤转移,并提出miRNA通过上述途径调控肿瘤转移可能成为今后肿瘤治疗的新方向,可望为肿瘤治疗提供有益的参考... 详细信息

介绍微小RNA(miRNA)与肿瘤转移的关系,简述miRNA如何通过肿瘤干细胞、血管再生、肿瘤相关巨噬细胞和上皮间质转化等途径影响肿瘤转移,并提出miRNA通过上述途径调控肿瘤转移可能成为今后肿瘤治疗的新方向,可望为肿瘤治疗提供有益的参考或启示。

关键词：微小RNA 肿瘤转移肿瘤干细胞上皮间质转化血管再生肿瘤相关巨噬细胞

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血浆microRNA-21水平与左室射血分数保留的心力衰竭相关性肺高压的关系

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中国病理生理杂志 2018年第10期34卷 1784-1789页

作者：吴美华曾建斌熊向阳江西省人民医院心内科江西中医药大学附属医院南昌大学基础医学院生化与分子生物学教研室江西南昌330006

目的:探讨血浆微小RNA-21(miR-21)水平与左室射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)相关性肺高压(PH-HFpEF)的关系。方法:选择2014年1月～2017年2月在江西省人民医院心内科就诊的HFpEF患者102例,通过三尖瓣反流压差法估测肺动脉收缩压(pulmonar... 详细信息

目的:探讨血浆微小RNA-21(miR-21)水平与左室射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)相关性肺高压(PH-HFpEF)的关系。方法:选择2014年1月～2017年2月在江西省人民医院心内科就诊的HFpEF患者102例,通过三尖瓣反流压差法估测肺动脉收缩压(pulmonary artery systolic pressure,PASP),并按PASP分为PH-HFpEF组(n=36,PASP≥50 mmHg)和HFpEF组(n=40,PASP <50 mmHg),另选年龄和性别相应的同期健康体检者作为对照组(n=36),比较各组患者的临床资料,血浆miR-21水平与临床资料的相关性用Spearman相关分析,血浆miR-21水平预测PH-HFpEF准确性用受试者工作特征(ROC)曲线分析。多因素logistic回归分析与PH-HFpEF相关的危险因素。结果:PH-HFpEF组患者年龄、血浆内皮素1(ET-1)、血浆白细胞介素6(IL-6)、脑钠尿肽(BNP)和左房直径(LAD)均高于HFpEF组(P <0. 05)。PH-HFpEF组血浆miR-21表达明显高于HFpEF组及健康对照组(P <0. 05)。Spearman相关分析显示,血浆miR-21与PASP (r=0. 267,P=0. 000)、血浆IL-6 (r=0. 302,P=0. 013)和左心室重量指数(LVMI)(r=0. 515,P=0. 036)相关;血浆IL-6与ET-1正相关(r=0. 622,P=0. 002);PASP分别与血浆IL-6 (r=0. 36,P=0. 023)、ET-1 (r=0. 76,P=0. 004)、BNP (r=0. 43,P=0. 031)及LAD (r=0. 39,P=0. 044)正相关。血浆miR-21诊断PH-HFpEF的ROC曲线分析显示,曲线下面积为0. 8。多因素logistic回归分析显示,血浆miR-21相对表达水平、LAD、BNP与HFpEF患者肺高压相关。结论:血浆miR-21水平与PHHFpEF呈正相关,是HFpEF患者出现肺高压的独立预测因素。血浆miR-21可能是PH-HFpEF的标志物。

关键词：微小RNA-21 左室射血分数心力衰竭肺动脉高压

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2-脱氧葡萄糖对乳腺癌MCF7/ErbB2细胞增殖迁移和侵袭的影响

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西部医学 2018年第11期30卷 1564-1569页

作者：申越贺丽李华陈璟若徐硕赵玉华四川大学华西基础医学与法医学院人体解剖学教研室四川成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学教研室四川成都610041 四川大学华西药学院微生物与生化药学教研室四川成都610041

目的探讨糖酵解抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-Deoxy-D-glucose,2-DG)对乳腺癌MCF7/ErbB2细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法用不同浓度的2-DG(0,0.5,1,2,4,8,16,32mM)处理MCF7/ErbB2细胞48h后,用MTS试剂盒测定细胞的增殖;用Transwell实验检测不同浓度2-DG(0,0.5,1,2mM)对MCF7/ErbB2细胞的迁移和侵袭的影响;用不同浓度2-DG(0,0.5,1,2mM)处理MCF7/ErbB2细胞48h后,用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分别测定培养基中的葡萄糖浓度和乳酸浓度,并计算细胞对葡萄糖的摄取量和乳酸生成量;用1mM 2-DG处理MCF7/ErbB2细胞0、4、8、12、24h后,用Western blot检测己糖激酶II(hexokinase II,HKII)蛋白表达水平。结果与2-DG未处理组比较,2-DG(0.5~32mM)能抑制MCF7/ErbB2细胞的增殖;2-DG(0.5,1,2mM)能显著抑制MCF7/ErbB2细胞的迁移和侵袭(P<0.001),同时显著降低葡萄糖摄取量和乳酸生成量(P<0.001),而且上述抑制作用均表现出对2-DG剂量的依赖性;1mM 2-DG显著下调MCF7/ErbB2细胞中HKII的蛋白水平。结论 2-DG通过下调HKII蛋白表达降低糖酵解水平,从而抑制乳腺癌MCF7/ErbB2细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词： 2-脱氧葡萄糖乳腺癌增殖迁移侵袭糖酵解

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蜱唾液腺抗止血分子及研究进展

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中国媒介生物学及控制杂志 2017年第4期28卷 400-404页

作者：杨晓红孟浩齐莉莉刘敬泽河北医科大学基础医学院病原生物学教研室石家庄050017 河北省动物生理生化与分子生物学重点实验室河北师范大学生命科学学院石家庄050024

蜱为专性吸血的体外寄生虫,可传播多种病原体,严重威胁人类健康和畜牧业发展。蜱唾液腺分泌多种抗止血分子,在蜱类吸血及传播病原体的过程中发挥重要作用。蜱唾液腺分泌的抗止血分子可分为抗血小板聚集分子、血管扩张分子和抗凝血分子3... 详细信息

蜱为专性吸血的体外寄生虫,可传播多种病原体,严重威胁人类健康和畜牧业发展。蜱唾液腺分泌多种抗止血分子,在蜱类吸血及传播病原体的过程中发挥重要作用。蜱唾液腺分泌的抗止血分子可分为抗血小板聚集分子、血管扩张分子和抗凝血分子3类。通过对蜱类唾液腺抗止血分子及其研究进展进行综述,为深入研究蜱类与宿主的相互作用关系及功能分子药物开发奠定基础。

关键词：蜱唾液腺抗止血功能分子

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