检索结果-内蒙古大学图书馆

临床与病理杂志 2014年第3期34卷 234-237页

作者：韩瑛陈志军唐伟军龙石银卢新华邓华菲王岐本田英湘南学院基础医学部机能学实验室湖南郴州423000 湘南学院南岭药用资源研究所湖南郴州423000 郴州市第一人民医院病理诊断中心湖南郴州423000 南华大学生物化学与分子生物学教研室湖南衡阳421001

目的:探讨载脂蛋白A5(apolipoprotein A5,apoA5)水平对HDL亚类分布的影响。方法:采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和双向电泳免疫印迹检测法分别检测310例受试者的血浆apoA5浓度和HDL亚类相对含量。受试者... 详细信息

目的:探讨载脂蛋白A5(apolipoprotein A5,apoA5)水平对HDL亚类分布的影响。方法:采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和双向电泳免疫印迹检测法分别检测310例受试者的血浆apoA5浓度和HDL亚类相对含量。受试者按apoA5浓度均值加或减去一个标准差作为分割点,分为高apoA5组(apoA5≥286.83 mg/L),中apoA5组(139.99 mg/L≤apoA5<286.83 mg/L)和低apoA5组(apoA5<139.99 mg/L)。结果:与高apoA5组相比,apoA5低浓度组preβ1-HDL和HDL3a含量显著升高(P<0.01),HDL2a和HDL2b显著降低(P<0.01)。结论:随着血浆apoA5浓度降低,HDL亚类有变小的趋势,apoA5浓度降低可能阻碍了HDL亚类的成熟。

关键词： HDL亚类载脂蛋白A5 双向电泳-免疫印迹检测法

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神经肽三叶因子3增强可卡因的奖赏效应

神经肽三叶因子3增强可卡因的奖赏效应

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第十三届全国药物依赖性学术会议暨国际精神疾病研讨会

作者：尹希史海水王杰超河北医科大学第四医院功能科石家庄050011 河北医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室石家庄050017 河北省老年病医院心内科石家庄050011

目的：探讨神经肽三叶因子3(trefoil factor 3 TFF3)对可卡因奖赏效应的影响及其可能的机制。方法：采用大鼠自发活动测试和条件性位置偏爱实验模型，评价TFF3系统给药对可卡因奖赏效应行为学的影响，采用高效液相色谱法测定伏隔核脑区... 详细信息

目的：探讨神经肽三叶因子3(trefoil factor 3 TFF3)对可卡因奖赏效应的影响及其可能的机制。方法：采用大鼠自发活动测试和条件性位置偏爱实验模型，评价TFF3系统给药对可卡因奖赏效应行为学的影响，采用高效液相色谱法测定伏隔核脑区神经递质含量。

关键词：神经肽三叶因子3 药物成瘾奖赏效应可卡因多巴胺

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新生IUGR大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白表达的变化

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基础医学与临床 2013年第10期33卷 1275-1279页

作者：王宏娟徐世明李中秋王蓓盛树力陈瑞首都医科大学燕京医学院生化与分子生物学教研室北京101300 首都医科大学宣武医院中心实验室北京100053 首都医科大学基础医学院生化与分子生物学系北京100069

目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白及突触后致密区蛋白(PSD95)表达的变化,探讨神经变性病可能的发育起源机制。方法应用热量限制法建立IUGR大鼠模型,通过RT-PCR和Western blot方法检测新生IUGR仔鼠脑内胰岛素受... 详细信息

目的研究宫内发育迟缓(IUGR)大鼠脑内胰岛素信号通路相关蛋白及突触后致密区蛋白(PSD95)表达的变化,探讨神经变性病可能的发育起源机制。方法应用热量限制法建立IUGR大鼠模型,通过RT-PCR和Western blot方法检测新生IUGR仔鼠脑内胰岛素受体(InsR)、磷酸化InsR,胰岛素受体底物-1(IRS-1)及PSD95的表达水平。采用SPSS11.5软件进行统计分析。结果与对照组相比,IUGR新生仔鼠体质量和脑质量均显著降低(P<0.01),但脑质量/体质量比值却明显增加(P<0.01);脑内InsR在mRNA水平表达减少(P<0.05);在蛋白质水平InsRα和β亚基表达减少(P<0.05,P<0.01);InsRβ的磷酸化水平降低(P<0.05);IRS-1表达减少(P<0.05);PSD95表达减少(P<0.01)。结论新生IUGR大鼠脑内存在胰岛素信号通路障碍并发生了神经元可塑性的变化,这些变化可能增加成年后对神经变性病的易感性。

关键词：宫内发育迟缓胰岛素抵抗胰岛素受体神经变性

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酵母双杂交筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第1期31卷 18-22页

作者：都建安然程里陈滢沈继龙安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学药学院合肥230032 安徽医科大学省部级基因研究重点实验室病原生物学教研室合肥230032

目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自... 详细信息

目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自激活作用,利用酵母双杂交系统从人胚胎脑cDNA文库中筛选与ROP18相互作用的宿主蛋白。结果构建了诱饵载体pGBKT7-ROP18,ROP18具有自激活功能。用ROP18^(25-25lan)为诱饵,筛选获得一系列与ROP18相互作用的宿主蛋白:DNA损伤特异性结合蛋白1(DDB1)、torsin A相互作用蛋白1(TOR1AIP1)、整联蛋白β1(integrinβ1)、溶质运载蛋白3(SLC3A2)、酪氨酸硫化转移酶2(TPST2)、Derl样域家族成员2(DERL2)和OCIA结构域蛋白1(OCIAD1)。结论通过酵母双杂交技术筛选出与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的多种宿主蛋白。

关键词：弓形虫 ROP18^25-251aa 酵母双杂交相互作用宿主蛋白

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热休克预处理对对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤的保护作用

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中国药理学与毒理学杂志 2013年第3期27卷 391-397页

作者：李三强杜景霞朱沙河南科技大学肝损伤与修复分子医学重点实验室河南郑州450001 河南科技大学医学院生化与分子生物学教研室河南郑州450001 河南科技大学医学院药理学教研室河南洛阳471003 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南郑州450001

目的探讨热休克预处理对对乙酰氨基酚(AAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法40℃分别热休克(HS)处理小鼠10min(HS10组)、20min(HS20组)和30min(HS30组),室温恢复8h后,小鼠ip给予AAP 550mg·kg-1诱导急性肝损伤,分别于AAP后0,6,... 详细信息

目的探讨热休克预处理对对乙酰氨基酚(AAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法40℃分别热休克(HS)处理小鼠10min(HS10组)、20min(HS20组)和30min(HS30组),室温恢复8h后,小鼠ip给予AAP 550mg·kg-1诱导急性肝损伤,分别于AAP后0,6,24,42和72h进行相关指标检测。赖氏法检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,HE染色进行病理学分析,免疫组化法检测给予AAP后0 h,小鼠肝热休克蛋白70(HSP70),细胞色素P4501A2(CYP1A2)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,Western印迹法检测给予AAP后0,6,24,42和72h时小鼠PCNA的表达。结果与AAP对照组相比,HS20组小鼠血清中AST和ALT酶活水平显著降低(P<0.05),而HS10组和HS30组小鼠无显著差异。与AAP对照组相比,HS20显著降低了AAP诱导的小鼠肝损伤程度(P<0.05),而HS10和HS30未显著降低肝损伤的程度。HS20显著诱导了小鼠肝HSP70(P<0.01),CYP1A2(P<0.01)和PCNA(P<0.05)的表达,而HS10和HS30显著诱导了小鼠肝HSP70和CYP1A2(P<0.05)的表达,但未明显诱导PCNA的表达。与HS10和HS30相比,HS20更加显著地诱导了HSP70和CYP1A2的表达(P<0.05)。HS20组小鼠在注射AAP后0,6,24,42和72h,小鼠肝PCNA的表达均显著高于AAP对照组(P<0.05)、HS10和HS30组(P<0.05)。结论 40℃热休克预处理20min可以有效降低AAP诱导的小鼠急性肝损伤程度,加速肝损伤后的修复。

关键词：热休克对乙酰氨基酚急性肝损伤保护作用

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TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测

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中国医科大学学报 2013年第1期42卷 45-48页

作者：刘雪梅崔剑侯伟健李其久贲松彬辽宁大学生命科学院生化与分子生物学教研室沈阳110036 中国医科大学基础医学院组织工程教研室沈阳110001

目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的... 详细信息

目的构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺。方法人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用。结果重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95%。结论成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性。

关键词：反式激活蛋白凋亡素分泌表达凋亡

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干扰素λ1在CHO细胞中的表达

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中华实验和临床病毒学杂志 2013年第3期27卷 190-192页

作者：袁武梅麻粉莲张骞郑文芝郑丽舒新疆医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室 830011 中国疾病预防控制中心卫生部医学病毒和病毒病重点实验室

目的构建干扰素λ1表达载体PCI-dhfr-λ1和连接增强子SP163的表达载体PCI-dhfr-SP163-λ1,并在CHO（dhfr-）细胞中表达.方法在合成的干扰素λ1基因中引入相应酶切位点,并通过融合PCR获得连接增强子SP163-λ1基因,测序正确后将该基因... 详细信息

目的构建干扰素λ1表达载体PCI-dhfr-λ1和连接增强子SP163的表达载体PCI-dhfr-SP163-λ1,并在CHO（dhfr-）细胞中表达.方法在合成的干扰素λ1基因中引入相应酶切位点,并通过融合PCR获得连接增强子SP163-λ1基因,测序正确后将该基因插入表达载体PCI-dhfr,构建重组表达载体PCI-dhfr-λ1和PCI-dhfr-SP163-λ1.将所构建的重组表达载体用脂质体法转入CHO（dhfr-）细胞,通过间接免疫荧光法和Western Blot鉴定了λ1蛋白的表达,应用细胞病变抑制法初步鉴定了λ1蛋白的抗病毒活性.结果成功构建了干扰素λ1真核表达载体PCI-dhff-λ1和PCI-dhfr-SP163-λ1.免疫荧光结果显示分别转染了两种表达载体的CHO（dhfr-）细胞均能表达干扰素λ1蛋白,SP163增强子明显增强了干扰素λ1蛋白的表达,Western Blot结果显示转染SP163的CHO（dhfr-）细胞表达干扰素λ1蛋白.通过细胞病变抑制实验,在转染细胞48h后的细胞培养液中检测到了干扰素λ1的抗病毒活性.结论本研究成功的在CHO（dhfr-）细胞中表达了干扰素λ1,表达的蛋白具有抗病毒活性,为进一步建立稳定表达干扰素λ1的细胞系提供了条件.

关键词：干扰素类细胞,培训的增强子元件(遗传学)

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牛磺酸对缺血-再灌注大鼠血浆心肌肌钙蛋白T及心肌GRP78、Caspase-12表达的影响

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南昌大学学报（医学版） 2013年第3期53卷 5-10页

作者：余乐涵万慧芳朱伟锋涂硕李华胡炜华曾昭建万福生南昌大学基础医学院生化与分子生物学教研室南昌330006 南昌大学期刊社南昌330006

目的探讨牛磺酸(taurine,Tau)对心肌缺血-再灌注损伤时血浆心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cT-nT)及心肌葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、胱天蛋白酶(Caspases)-12表达的影响及其意义。方法将50只大鼠按随机数字表法分为5组:假手术组(对照组,Sham组)、缺血-再灌注组(I/R组)和Tau保护1组(Tau 1组)、Tau保护2组(Tau 2组)、Tau保护3组(Tau 3组),每组10只。采用结扎大鼠冠状动脉左前降支1h,随后再灌注24h以建立心肌缺血-再灌注损伤动物模型;Tau 1组、Tau 2组、Tau 3组分别在结扎冠状动脉前1h腹腔注射Tau 100、200、300mg·kg-1,余操作同I/R组;Sham组大鼠冠状动脉左前降支仅穿线,不结扎。采用酶联免疫法测定血浆cTnT水平,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,RT-PCR法和免疫组织化学法分析心肌细胞GRP78、Caspase-12基因表达,荧光分析法测定Caspase-3活性。结果与Sham组比较,I/R组大鼠血浆cTnT、心肌组织中GRP78、Caspase-12mRNA和蛋白表达、细胞凋亡指数及Caspase-3活性均显著升高(均P<0.01);与I/R组比较,Tau 1组、Tau 2组、Tau 3组大鼠血浆cTnT水平、心肌组织中GRP78mRNA、Caspase-12mRNA和蛋白表达、细胞凋亡指数及Caspase-3活性均呈显著降低(均P<0.05)。结论 Tau可显著减轻心肌缺血-再灌注损伤,其作用机制可能是Tau能下调缺血-再灌注心肌中GRP78和Caspase-12过表达。

关键词：牛磺酸缺血-再灌注损伤葡萄糖调节蛋白胱天蛋白酶心肌动物,实验大鼠

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血浆晚期氧化蛋白产物与HDL亚类组成的关系

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中国动脉硬化杂志 2013年第2期21卷 125-128页

作者：陈志军龙石银丁岚韩瑛陈浩张彩平王小鸥杨滢田英南华大学生物化学与分子生物学教研室湖南省衡阳市421001 湘南学院基础医学课部湖南省郴州市423000 南华大学附属第一医院检验科湖南省衡阳市421001 南华大学附属第一医院急诊科湖南省衡阳市421001

目的探讨血浆晚期氧化蛋白产物(AOPPs)对血浆高密度脂蛋白(HDL)亚类组成及含量的影响。方法采用氯胺-T法和双向电泳免疫印迹检测法对346例受试者分别测定血浆AOPPs的相对含量和血浆HDL亚类的组成及含量。按AOPPs浓度均值加或减去一个标... 详细信息

目的探讨血浆晚期氧化蛋白产物(AOPPs)对血浆高密度脂蛋白(HDL)亚类组成及含量的影响。方法采用氯胺-T法和双向电泳免疫印迹检测法对346例受试者分别测定血浆AOPPs的相对含量和血浆HDL亚类的组成及含量。按AOPPs浓度均值加或减去一个标准差作为分割点,将受试者分为3组,即低AOPPs(AOPPs≤60μmol/L)组、中AOPPs(60μmol/L

关键词：高密度脂蛋白亚类晚期氧化蛋白产物双向电泳-免疫印迹检测法氯胺-T法

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热休克预处理对对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤的保护作用

热休克预处理对对乙酰氨基酚所致小鼠急性肝损伤的保护作用

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作者：李三强杜景霞朱沙郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室河南科技大学医学院生化与分子生物学教研室河南科技大学医学院药理学教研室河南科技大学肝损伤与修复分子医学重点实验室

目的探讨热休克预处理对对乙酰氨基酚(AAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 40℃分别热休克(HS)处理小鼠10 min(HS10组)、20 min(HS20组)和30 min(HS30组),室温恢复8 h后,小鼠ip给予AAP 550 mg·kg~(-1)诱导急性肝损伤,分别于... 详细信息

目的探讨热休克预处理对对乙酰氨基酚(AAP)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 40℃分别热休克(HS)处理小鼠10 min(HS10组)、20 min(HS20组)和30 min(HS30组),室温恢复8 h后,小鼠ip给予AAP 550 mg·kg~(-1)诱导急性肝损伤,分别于AAP后0,6,24,42和72 h进行相关指标检测。赖氏法检测小鼠血清中天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,HE染色进行病理学分析,免疫组化法检测给予AAP后0 h,小鼠肝热休克蛋白70(HSP70),细胞色素P4501A2(CYP1A2)和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,Western印迹法检测给予AAP后0,6,24,42和72 h时小鼠PCNA的表达。结果与AAP对照组相比,HS20组小鼠血清中AST和ALT酶活水平显著降低(P<0.05),而HS10组和HS30组小鼠无显著差异。与AAP对照组相比,HS20显著降低了AAP诱导的小鼠肝损伤程度(P<0.05),而HS10和HS30未显著降低肝损伤的程度。HS20显著诱导了小鼠肝HSP70(P<0.01),CYP1A2(P<0.01)和PCNA(P<0.05)的表达,而HS10和HS30显著诱导了小鼠肝HSP70和CYP1A2(P<0.05)的表达,但未明显诱导PCNA的表达。与HS10和HS30相比,HS20更加显著地诱导了HSP70和CYP1A2的表达(P<0.05)。HS20组小鼠在注射AAP后0,6,24,42和72 h,小鼠肝PCNA的表达均显著高于AAP对照组(P<0.05)、HS10和HS30组(P<0.05)。结论 40℃热休克预处理20 min可以有效降低AAP诱导的小鼠急性肝损伤程度,加速肝损伤后的修复。

关键词：热休克对乙酰氨基酚急性肝损伤保护作用

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